浙江鴨2025版高考生物一輪復(fù)習(xí)第30講微生物的利用夯基提能作業(yè)本含解析

PAGEPAGE1微生物的利用A組基礎(chǔ)過關(guān)1.依據(jù)分別以尿素為氮源的微生物試驗,回答下列問題:(1)寫出脲酶降解尿素的反應(yīng)式:。

(2)該試驗分別細菌時用濃度為10-4和10-5土壤稀釋液接種,更簡潔形成單菌落的是。

(3)A同學(xué)篩選出的菌落為150個,其他同學(xué)只篩選出50個,并且他在設(shè)計試驗時并沒有設(shè)置比照。你認為A同學(xué)結(jié)果產(chǎn)生的緣由可能有哪些?。如何設(shè)計比照試驗解除可能影響試驗結(jié)果的因素:。

(4)涂布平板的全部操作怎樣保證無菌?

。

(5)有脲酶的細菌在生態(tài)穩(wěn)態(tài)上起什么作用?

。

答案(1)CO(NH2)2+H2O2NH3+CO2(2)10-5土壤稀釋液(3)可能是土樣不同,也可能是培育基污染或操作失誤方案有二:一是由其他同學(xué)用與A同學(xué)一樣的土壤進行試驗,假如結(jié)果與A同學(xué)一樣,則證明無誤,假如結(jié)果不同,則證明A同學(xué)存在操作失誤或培育基配制有問題;另一種方案是將A同學(xué)配制的培育基在不加土樣的狀況下進行培育,作為空白比照,以證明培育基是否受到污染(4)應(yīng)從操作的各個細微環(huán)節(jié)保證“無菌”,都應(yīng)在火焰旁邊進行。例如,酒精燈與培育皿的距離要合適、移液管頭不要接觸任何其他物質(zhì)、移液管要在酒精燈火焰四周等(5)假如土壤中有很多尿素,在自然界較高溫度下會被水解,水解后的氨使土壤堿化,氨還與其他陰離子物質(zhì)如SQUOTE、CQUOTE、NQUOTE等形成化合物,則會使土壤板結(jié)。有脲酶的細菌使植物廢棄物和動物尸體降解,并利用了所形成的氨,有利于自然界中氮的循環(huán)解析脲即尿素,是蛋白質(zhì)降解的產(chǎn)物。有一些細菌含有脲酶可以分解尿素,利用尿素作為其生長的氮源。本試驗運用涂布分別法分別以尿素為氮源的微生物,用濃度為10-4和10-5土壤稀釋液接種,更簡潔形成單菌落的是10-5土壤稀釋液。A同學(xué)結(jié)果產(chǎn)生的緣由可能是土樣不同,也可能是培育基污染或操作失誤,解除方案有二:一是由其他同學(xué)用與A同學(xué)一樣的土壤進行試驗,結(jié)果與A同學(xué)一樣,則證明無誤,假如結(jié)果不同,則證明A同學(xué)存在操作失誤或培育基配制有問題;另一種方案是將A同學(xué)配制的培育基在不加土樣的狀況下進行培育,作為空白比照,以證明培育基是否受到污染。2.關(guān)于分別以尿素為氮源的微生物試驗,請分析回答以下問題:(1)脲酶可以催化尿素分解為,其中堿性物質(zhì)可以能使酚紅指示劑變?yōu)椤?/p>

(2)分別以尿素為氮源的微生物,培育基配制必需加凝固劑,培育基在g/cm2壓力下滅菌30分鐘,冷卻至60℃,加入通過的尿素溶液,混合勻稱待用。

(3)為了從土壤中分別得到以尿素為氮源的微生物,分別效果比較好的操作方法是釆用,釆用該方法分別,土壤溶液必需經(jīng)過處理。

答案(1)NH3和CO2(依次可對換,錯答或漏答不得分)紅色(2)瓊脂糖500、G6玻璃(砂)漏斗過濾(3)涂布分別法稀釋解析(1)脲酶可以催化尿素分解為NH3和CO2,其中堿性物質(zhì)能使酚紅指示劑變?yōu)榧t色。(2)分別以尿素為氮源的微生物,培育基配制必需加凝固劑瓊脂糖。培育基在500g/cm2壓力下滅菌30分鐘,冷卻至600℃,加入通過G6玻璃(砂)漏斗過濾的尿素溶液,混合勻稱待用。(3)涂布分別法是從土壤中分別得到以尿素為氮源的微生物的最簡便的方法,采納該方法分別,土壤溶液必需經(jīng)過稀釋處理。3.回答與微生物的培育和利用有關(guān)的問題:(1)微生物在試管中培育時通常加棉塞,四周沒有皺褶和縫隙,簡潔拔出,但用手提著棉塞時,試管又不能落下。棉塞的作用有兩個:一是;二是保證通氣良好。制作棉塞所用的棉花不能用脫脂棉,緣由是。

(2)測定微生物生長曲線的方法有很多,有血細胞計數(shù)板法、平板計數(shù)法、法等。制作生長曲線時,以作縱坐標(biāo),作橫坐標(biāo)。

(3)牛肉膏蛋白胨培育基是一種應(yīng)用最廣泛和最一般的細菌基礎(chǔ)培育基,一般要將pH調(diào)至,以利于細菌的生長繁殖。

答案(1)防止雜菌污染脫脂棉易吸水,吸水后簡潔引起污染(2)菌落比濁菌數(shù)的對數(shù)生長時間(3)中性偏堿解析(1)微生物培育過程中棉塞既可以防止雜菌的污染,又可以保證通氣良好。因為脫脂棉易吸水,吸水后簡潔引起污染,所以制作棉塞所用的棉花不能用脫脂棉。(2)測定微生物生長曲線的方法有很多,有血細胞計數(shù)板法、平板菌落計數(shù)法、比濁法等。制作生長曲線時,應(yīng)以菌數(shù)的對數(shù)為縱坐標(biāo),生長時間為橫坐標(biāo)。(3)培育一般細菌時,須要將培育基的pH調(diào)至中性偏堿。4.某工廠為了生產(chǎn)耐高溫植酸酶飼料添加劑,開展了產(chǎn)該酶菌株的篩選、酶的固定化及其特性分析探討,其流程如圖所示:請回答:(1)土壤懸液首先經(jīng)80℃處理15分鐘,其目的是篩選出①。

(2)在無菌條件下,將經(jīng)過處理的土壤懸液進行②,然后涂布于含有植酸鈉的固體培育基上。培育后視察到③,其四周出現(xiàn)透亮水解圈,圈的直徑大小與④強弱有關(guān)。

(3)篩選獲得的菌株經(jīng)鑒定后,將優(yōu)良菌株進行液體擴大培育。培育時須要振蕩,其主要目的是⑤。液體培育基與固體培育基相比,不含有的成分是⑥。

(4)在合適條件下,將提純的植酸酶與海藻酸鈉混合后,滴加到肯定濃度的鈣離子溶液中,使液滴形成凝膠固體小球。該過程是對酶進行⑦。

A.吸附 B.包埋 C.裝柱 D.洗滌(5)溫度與植酸酶相對酶活性的關(guān)系如圖所示。下列敘述錯誤的是⑧。

A.測試溫度中,固定化與非固定化植酸酶的最適溫度分別為60℃和45℃B.測試溫度范圍內(nèi),固定化植酸酶的相對酶活性波動低于非固定化植酸酶C.固定化與非固定化植酸酶相比,相對酶活性在80%以上時的溫度范圍較寬D.65℃時固定化與非固定化植酸酶的相對酶活性因蛋白質(zhì)變性而位于最低點答案(1)①耐高溫菌株(2)②稀釋③單菌落④植酸酶的活性(3)⑤供氧⑥瓊脂(4)⑦B(5)⑧D解析(1)用80℃高溫處理土壤懸液可以篩選出耐高溫菌株。(2)無菌條件下經(jīng)處理的土壤懸液利用涂布分別法進行接種;培育后可視察到有的單菌落四周出現(xiàn)透亮圈,這是由耐高溫菌株產(chǎn)生的植酸酶水解形成的,透亮圈越大,說明植酸酶的活性越高。(3)將液體培育基振蕩可提高培育液中氧的含量,固體培育基具有固體狀態(tài)是因為制備培育基時加入了瓊脂。(4)將植酸酶與海藻酸鈉混合,然后制成凝膠珠,這是利用包埋法制備固定化酶。(5)對比曲線可知,65℃時固定化植酸酶的相對活性并非位于最低點,故選D。5.(2024課標(biāo)全國Ⅲ,37,15分)回答下列與酵母菌有關(guān)的問題:(1)分別培育酵母菌通常運用(填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麥芽汁瓊脂”)培育基,該培育基應(yīng)采納滅菌法滅菌。若將酵母菌劃線接種在平板上,培育一段時間后可視察到菌落,菌落的含義是。

(2)酵母菌液體培育時,若通入氧氣,可促進(填“菌體快速增殖”“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”);若進行厭氧培育,可促進(填“菌體快速增殖”“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”)。

(3)制作面包時,為使面包松軟通常要在面粉中添加肯定量的酵母菌,酵母菌引起面包松軟的緣由是。

答案(1)麥芽汁瓊脂高壓蒸汽由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體(2)菌體快速增殖乙醇產(chǎn)生(3)酵母菌分解葡萄糖會產(chǎn)生CO2,CO2使面包松軟解析(1)常用含葡萄糖較多的麥芽汁瓊脂培育基分別培育酵母菌。培育基常采納高壓蒸汽滅菌法滅菌。菌落是由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體。(2)有氧氣存在時,酵母菌有氧呼吸產(chǎn)生的大量能量可用于快速增殖;無氧氣存在時,酵母菌進行無氧呼吸產(chǎn)生乙醇和CO2。(3)酵母菌進行細胞呼吸可產(chǎn)生CO2,故用酵母菌制作的面包會變得松軟。6.(2024課標(biāo)全國Ⅰ,37,15分)某些土壤細菌可將尿素分解成CO2和NH3,供植物汲取和利用?；卮鹣铝袉栴}:(1)有些細菌能分解尿素,有些細菌則不能,緣由是前者能產(chǎn)生。能分解尿素的細菌不能以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源,緣由是。但可用葡萄糖作為碳源,進入細菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是(答出兩點即可)。

(2)為了篩選可分解尿素的細菌,在配制培育基時,應(yīng)選擇(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”)作為氮源,不選擇其他兩組的緣由是。

(3)用來篩選分解尿素細菌的培育基含有KH2PO4和Na2HPO4,其作用有(答出兩點即可)。

答案(1)脲酶分解尿素的細菌是異養(yǎng)生物,不能利用CO2來合成有機物為細胞生命活動供應(yīng)能量,為其他有機物的合成供應(yīng)原料(2)尿素其他兩組都含有NH4NO3,能分解尿素的細菌和不能分解尿素的細菌都能利用NH4NO3,不能起到篩選作用(3)為細菌生長供應(yīng)無機養(yǎng)分,作為緩沖劑保持細胞生長過程中pH穩(wěn)定解析(1)能分解尿素的細菌體內(nèi)應(yīng)含有脲酶;能分解尿素的細菌是異養(yǎng)型生物,不能利用CO2來合成有機物,可用葡萄糖等有機物作為碳源。進入細菌體內(nèi)的葡萄糖既能為細胞生命活動供應(yīng)能量,又可為其他有機物的合成供應(yīng)原料。(2)篩選可分解尿素的細菌,應(yīng)選擇以尿素為唯一氮源的培育基,而能分解尿素的細菌和不能分解尿素的細菌都能利用NH4NO3,其他兩組不能起到篩選作用。(3)用來篩選分解尿素細菌的培育基含有KH2PO4和Na2HPO4,這兩種物質(zhì)既可為細菌生長供應(yīng)無機養(yǎng)分,又可作為緩沖劑保持細胞生長過程中pH相對穩(wěn)定。7.如圖為“大腸桿菌的培育和分別”試驗的基本流程,請回答下列問題:A.配制培育基→B.滅菌→C.培育(液體培育基)→D.劃線分別和培育(固體培育基)→E.菌種短期保存(1)A過程配制的是通用的細菌培育基,稱為培育基。配制時除了加入特定的養(yǎng)分物質(zhì)以外,還要加入肯定量的氯化鈉,以維持。對培育基酸堿度的調(diào)整,應(yīng)當(dāng)在B過程的(填“前面”或“后面”)。

(2)E過程所需的溫度是。

(3)D過程后,一個菌體便會形成一個,這種分別方法是的通用方法,也是篩選特定菌株的最簡便方法之一。

(4)C過程培育的目的是。

答案(1)LB液體滲透壓前面(2)4℃(3)(單)菌落消退污染雜菌(純化菌種)(4)菌種擴大培育解析(1)LB液體培育基是通用的細菌培育基,LB固體平面培育基則用于劃線分別,氯化鈉充當(dāng)溶質(zhì)的作用是維持培育基的滲透壓,調(diào)整好酸堿度后才能進行滅菌,若滅菌后再調(diào)整酸堿度,又會產(chǎn)生新的污染。(2)在液體培育基的基礎(chǔ)上加入肯定量的瓊脂就成了固體培育基,將培育好的菌種置于4℃冰箱中保存。(3)通過劃線分別后一個菌體就會繁殖出一個菌落。(4)為保證菌體的數(shù)量,劃線分別前一般用液體培育基進行菌種的擴大培育。8.為了從土壤中分別出以尿素為氮源的微生物,某小組做了相關(guān)試驗,其基本流程如下。請據(jù)圖回答下列問題:(1)試驗流程中,物質(zhì)甲是。為了體現(xiàn)尿素培育基的分別效果,需設(shè)置比照組,比照組的培育基是培育基,該培育基常用的滅菌方法是。

(2)下表中有四種培育基,為了分別出以尿素為氮源的微生物,應(yīng)采納的培育基是。

培育基蛋白胨葡萄糖NaClK2HPO4酚紅瓊脂糖瓊脂水尿素A-+++++-++B-+++++-+-C+-++++-++D-++++-+++(3)制備菌液時,步驟乙的操作是。

A.滅菌B.稀釋C.過濾D.擴大培育(4)為了統(tǒng)計每克土壤樣品中以尿素為氮源的微生物的數(shù)目,接種時宜采納法。將相同濃度的土壤稀釋液分別接種在試驗組和比照組培育基上,在℃的恒溫培育箱中培育24~48h,視察、比較菌落數(shù),發(fā)覺比照組培育基中菌落的數(shù)目比試驗組。

答案(1)無菌水LB(全養(yǎng)分)固體高壓蒸汽滅菌(2)A(3)B(4)涂布分別37多解析(1)題圖為從土壤中分別出以尿素為氮源的微生物的過程。土壤需用無菌水(物質(zhì)甲)進行溶解。分別以尿素為氮源的微生物時,需設(shè)置比照組,該組所采納的培育基為LB全養(yǎng)分固體培育基,運用之前需采納高壓蒸汽滅菌。(2)分別以尿素為氮源的微生物,需在培育基中添加尿素,并以尿素為唯一氮源;尿素培育基除以尿素作為氮源外,不能含有其他含氮化合物,蛋白胨和瓊脂中都含有含氮化合物。(3)獲得土壤懸液后進行梯度稀釋,以便進行涂布分別。(4)劃線分別和涂布分別均能分別微生物,但是若要統(tǒng)計微生物的數(shù)目,應(yīng)采納涂布分別法。通過涂布分別,將菌種接種到培育基表面,然后將培育基倒置于37℃恒溫培育箱中培育24~48h后進行視察,由于自然界中能夠分解尿素的微生物數(shù)量較少,因此,對比后會發(fā)覺比照組(LB全養(yǎng)分培育基)的菌落數(shù)遠多于試驗組(尿素培育基)的。9.人工瘤胃仿照了牛羊等反芻動物的胃,可用來發(fā)酵處理秸稈,提高秸稈的養(yǎng)分價值。為了增加發(fā)酵效果,探討人員從牛胃中篩選纖維素酶高產(chǎn)菌株,并對其降解纖維素實力進行了探討。請回答下列問題:(1)在樣品稀釋和涂布平板步驟中,下列選項不須要的是(填序號)。

①酒精燈②培育皿③顯微鏡④無菌水(2)在涂布平板時,滴加到培育基表面的菌懸液量不宜過多的緣由是。

(3)向試管內(nèi)分裝含瓊脂的培育基時,若試管口粘附有培育基,須要用酒精棉球擦凈的緣由是。

(4)剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物,但并不與纖維素降解產(chǎn)物纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。探討人員在剛果紅培育基平板上,篩到了幾株有透亮降解圈的菌落(見圖)。圖中降解圈大小與纖維素酶的有關(guān)。圖中降解纖維素實力最強的菌株是(填圖中序號)。

(5)探討人員用篩選到的纖維素酶高產(chǎn)菌株J1和J4,在不同溫度和pH條件下進行發(fā)酵,測得發(fā)酵液中酶活性的結(jié)果見下圖,推想菌株更適合用于人工瘤胃發(fā)酵,理由是

。

答案(1)③(2)培育基表面的菌懸液會出現(xiàn)積液,導(dǎo)致菌體積累,影響分別效果(3)避開培育基污染棉塞(4)量與活性①(5)J4發(fā)酵過程會產(chǎn)熱和產(chǎn)酸,J4菌株在較高溫度和酸性環(huán)境下酶的活性更高解析本題考查微生物培育與分別的相關(guān)學(xué)問。(1)樣品稀釋需用無菌水,在培育基中涂布接種時需在酒精燈的火焰旁進行。(2)涂布平板時,滴加到培育基表面的菌液一般為0.1mL,量過大將導(dǎo)致菌體密度過大而影響分別效果。(3)分裝含瓊脂的培育基時,試管口粘有培育基易造成雜菌滋生,故應(yīng)用酒精棉球擦凈。(4)纖維素酶活性越大,菌落四周被分解的纖維素量也越大,菌落四周的透亮圈也就越大。故圖中降解纖維素實力最強的菌株為①。(5)發(fā)酵過程中由于呼吸作用產(chǎn)生較多的熱量和有機酸,故應(yīng)選擇較高溫度和酸性環(huán)境中活性較高的J4酶。B組實力提升1.(2024江蘇單科,31,8分)酵母的蛋白質(zhì)含量可達自身干重的一半,可作為飼料蛋白的來源。有些酵母可以利用工業(yè)廢甲醇作為碳源進行培育,這樣既可削減污染又可降低生產(chǎn)成本。探討人員擬從土壤樣品中分別該類酵母,并進行大量培育。如圖所示為操作流程,請回答下列問題:(1)配制培育基時,依據(jù)培育基配方精確稱量各組分,將其溶解、定容后,調(diào)整培育基的,剛好對培育基進行分裝,并進行滅菌。

(2)取步驟②中不同梯度的稀釋液加入標(biāo)記好的無菌培育皿中,在步驟③中將溫度約(在25℃、50℃或80℃中選擇)的培育基倒入培育皿混勻,冷凝后倒置培育。

(3)挑取分別平板中長出的單菌落,按步驟④所示進行劃線。下列敘述合理的有。

a.為保證無菌操作,接種針、接種環(huán)運用前都必需滅菌b.劃線時應(yīng)避開劃破培育基表面,以免不能形成正常菌落c.挑取菌落時,應(yīng)挑取多個菌落,分別測定酵母細胞中甲醇的含量d.可以通過逐步提高培育基中甲醇的濃度,獲得甲醇高耐受株(4)步驟⑤中,為使酵母數(shù)量快速增加,培育過程中需保證足夠的養(yǎng)分和供應(yīng)。為監(jiān)測酵母的活細胞密度,將發(fā)酵液稀釋1000倍后,經(jīng)等體積臺盼藍染液染色,用25×16型血細胞計數(shù)板計數(shù)5個中格中的細胞數(shù),理論上色細胞的個數(shù)應(yīng)不少于,才能達到每毫升3×109個活細胞的預(yù)期密度。

答案(1)pH高壓蒸汽(濕熱)(2)50℃(3)a、b、d(4)氧氣無30解析本題主要考查微生物的培育與計數(shù)的相關(guān)學(xué)問。(1)培育基在定容后、分裝前須要調(diào)整pH;分裝后還須要進行高壓蒸汽(濕熱)滅菌。(2)倒平板時溫度不宜過高,以防燙傷;同時溫度也不能太低,以防培育基凝固而無法形成平板,因此倒平板時溫度應(yīng)選擇50℃左右。(3)平板劃線時,需保證無菌操作,以防混入雜菌而影響分別結(jié)果。因此操作過程中所用的接種針、接種環(huán)在運用之前都必需滅菌;劃線時不能劃破培育基表面,以免影響菌落的正常形態(tài)進而影響后期視察;挑取菌落時,應(yīng)挑取單個菌落;通過逐步提高培育基中甲醇的濃度,可獲得利用甲醇實力強的菌株,即甲醇高耐受株。(4)⑤為擴大培育過程,欲使酵母數(shù)量快速增加,應(yīng)為酵母菌供應(yīng)足夠的養(yǎng)分和O2。臺盼藍染液能將死的酵母菌染成藍色,而活的酵母菌不能被染色。假設(shè)5個中方格中有x個活酵母菌,由題意可知:[(x×5)÷10-4]×1000×2=3×109,由此解得x=30。2.(2024課標(biāo)全國Ⅰ,37,15分)將馬鈴薯去皮切塊,加水煮沸肯定時間,過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入肯定量蔗糖和瓊脂,用水定容后滅菌,得到M培育基?；卮鹣铝袉栴}:(1)M培育基若用于真菌的篩選,則培育基中應(yīng)加入鏈霉素以抑制的生長,加入了鏈霉素的培育基屬于培育基。

(2)M培育基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長供應(yīng)了多種養(yǎng)分物質(zhì),養(yǎng)分物質(zhì)類型除氮源外還有(答出兩點即可)。氮源進入細胞后,可參加合成的生物大分子有(答出兩點即可)。

(3)若在M培育基中用淀粉取代蔗糖,接種土壤濾液并培育,平板上長出菌落后可通過加入顯色劑篩選出能產(chǎn)淀粉酶的微生物。加入的顯色劑是,該方法能篩選出產(chǎn)淀粉酶微生物的原理是

。

(4)甲、乙兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣品中微生物的數(shù)量,在同一稀釋倍數(shù)下得到以下結(jié)果:甲同學(xué)涂布了3個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是110、140和149,取平均值133;乙同學(xué)涂布了3個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是27、169和176,取平均值124。有人認為這兩位同學(xué)的結(jié)果中,乙同學(xué)的結(jié)果可信度低,其緣由是

。

答案(1)細菌選擇(2)碳源、無機鹽蛋白質(zhì)、核酸(3)碘液淀粉遇碘液顯藍色,產(chǎn)淀粉酶的菌落四周淀粉被水解,形成透亮圈(4)乙同學(xué)的結(jié)果中,1個平板的計數(shù)結(jié)果與另2個相差懸殊,結(jié)果的重復(fù)性差解析本題主要考查微生物的培育與應(yīng)用。(1)鏈霉素可抑制細菌生長,從功能上看,添加鏈霉素的培育基屬于選擇培育基。(2)微生物正常生長須要的養(yǎng)分物質(zhì)有無機鹽、氮源、碳源等。氮源進入細胞后,可以用于合成含氮大分子物質(zhì),如核酸、蛋白質(zhì)等。(3)淀粉遇碘液顯藍色,若淀粉被水解,則產(chǎn)淀粉酶的菌落四周的淀粉被水解,形成以菌落為中心的透亮圈。(4)用稀釋涂布平板法統(tǒng)計菌落數(shù)目時,為保證統(tǒng)計結(jié)果的精確性,一般選擇菌落數(shù)在30~300的平板進行計數(shù),取結(jié)果差別不大組別的平均值,進而得出計數(shù)結(jié)果。而乙同學(xué)的結(jié)果中,1個平板的計數(shù)結(jié)果與另2個相差懸殊,即乙同學(xué)的結(jié)果可信度低。3.農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上有一種廣泛運用的除草劑在土壤中不易被降解,長期運用會污染土壤。為修復(fù)被污染的土壤,可按圖示程序選育出能降解該除草劑的細菌。已知該除草劑(含氮有機物)在水中溶解度低,含肯定量該除草劑的培育基不透亮。請分析回答:(1)微生物接種是微生物學(xué)探討中最常用的基本操作技術(shù),該技術(shù)的核心是。

(2)在選育過程中,應(yīng)將土壤浸出液接種于以該除草劑為唯一的培育基上。通過比較單菌落四周的大小,可篩選出高效的目的菌。試驗結(jié)果如上圖顯示的A~E五種菌株中,是最志向菌株。

(3)若想對初步篩選得到的目的菌進行純化并計數(shù),可采納的接種方法是。將1mL土壤溶液分別稀釋10倍和100倍,每種稀釋度各在3個平板上分別接入0.1mL稀釋液,經(jīng)過適當(dāng)培育后,6個平板上的菌落數(shù)分別為59、57、58和2、7、5,空白比照組的平板上沒有菌落,則每升土壤溶液中活菌數(shù)的理論值為個。事實上每升土壤溶液中的活菌數(shù)比通過統(tǒng)計所得的這一數(shù)值要大,因為。

(4)科研人員用放射線處理該細菌,獲得突變株A和B,然后對突變株A和B進行試驗,結(jié)果如下表所示:接種的菌種一般培育基試驗處理及結(jié)果A不生長添加養(yǎng)分物質(zhì)甲,能生長B不生長添加養(yǎng)分物質(zhì)乙,能生長A+B能生長不添加養(yǎng)分物質(zhì)甲、乙,能生長請分析突變株A和B混合在一起接種于一般培育基中能生長的最可能緣由。。

答案(1)防止雜菌污染(無菌操作)(2)氮源透亮圈E(3)稀釋涂布平板法5.8×106統(tǒng)計結(jié)果是用菌落數(shù)來表示的,當(dāng)兩個或多個細菌連在一起時,平板上視察到的只是一個菌落(4)突變株A生長須要養(yǎng)分物質(zhì)甲,突變株B可以供應(yīng);突變株B生長須要養(yǎng)分物質(zhì)乙,突變株A可以供應(yīng)解析(1)微生物接種技術(shù)的核心是防止雜菌污染。(2)已知該除草劑為含氮有機物,在水中溶解度低,含肯定量該除草劑的培育基不透亮;降解該除草劑的細菌能分解培育基中的該除草劑,使培育基中出現(xiàn)透亮圈。可見,在選育能降解該除草劑的細菌的過程中,應(yīng)將土壤浸出液接種于以該除草劑為唯一氮源的培育基上。通過比較單菌落四周透亮圈的大小,可篩選出高效的目的菌。試驗結(jié)果圖顯示的A~E五種菌株中,E菌落四周的透亮圈最大,因此E是最志向菌株。(3)對初步篩選得到的目的菌進行純化并計數(shù),可采納稀釋涂布平板法進行接種。統(tǒng)計菌落數(shù)目時,一般選擇菌落數(shù)在30~300的平板進行計數(shù),因此應(yīng)選擇稀釋度為10倍的、分別接入0.1mL稀釋液的3個平板上的菌落數(shù)(分別為59、57、58)進行統(tǒng)計,則每升土壤溶液中活菌數(shù)的理論值為[(59+57+58)÷3]×10÷(0.1×10-3)=5.8×106個。由于統(tǒng)計結(jié)果是用菌落數(shù)來表示的,當(dāng)兩個或多個細菌連在一起時,平板上視察到的只是一個菌落,所以事實上每升土壤溶液中的活菌數(shù)比通過統(tǒng)計所得的這一數(shù)值要大。(4)分析表中信息可知:突變株A生長須要養(yǎng)分物質(zhì)甲,突變株B生長須要養(yǎng)分物質(zhì)乙,據(jù)此可推知,突變株A和B混合在一起接種于一般培育基中能生長的最可能緣由是:突變株A生長須要養(yǎng)分物質(zhì)甲,突變株B可以供應(yīng);突變株B生長須要養(yǎng)分物質(zhì)乙,突變株A可以供應(yīng)。4.為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況,某探討小組測定了該河流水樣中的細菌含量,并進行了細菌分別和培育等工作。回答下列問題:(1)該小組采納稀釋涂布平板法檢測水樣中細菌含量。為了檢測培育基平板滅菌是否合格,可在涂布接種前,;然后,將1mL水樣稀釋1000倍,在3個平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液;經(jīng)適當(dāng)培育后,3個平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37,據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為。

(2)該小組采納平板劃線法分別水樣中的細菌。操作時,接種環(huán)通過滅菌,為了將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落,在其次次及以后的劃線時,肯定要。示意圖A和B中,表示的是用稀釋涂布平板法接種培育后得到的結(jié)果。通常,對獲得的純菌種可以依據(jù)對細菌進行初步的鑒定和分類。

(3)該小組將得到的菌株接種到液體培育基中并混勻,一部分進行靜置培育,另一部分進行振蕩培籌。結(jié)果發(fā)覺:振蕩培育的細菌比靜置培育的細菌生長速度快。分析其緣由是:振蕩培育能提高培育液中的含量,同時可使菌體與培育液充分接觸,提高的利用率。

答案(1)隨機取若干滅菌后的空白平板先行培育一段時間3.8×108(2)灼燒從上一次劃線的末端起先劃線B菌落的形態(tài)、大小等菌落特征(3)溶解氧養(yǎng)分物質(zhì)解析(1)為了確定培育基的滅菌是否合格,可以隨機取若干滅菌后的空白平板培育一段時間,視察培育基上是否有菌落生成。由題意知1mL水樣中的菌落數(shù)是(39+38+37)÷3÷0.1×1000=3.8×105,每升水樣中的活菌數(shù)為3.8×105×103=3.8×108個。(2)接種環(huán)用灼燒法進行滅菌。在其次次及以后劃線時,總是從上一次劃線的末端起先劃線,這樣做的目的是:通過劃線次數(shù)的增加,將聚集的菌體漸漸稀釋分散,使每次劃線時菌體的數(shù)目漸漸削減,以便獲得由單個細胞繁殖而來的單個菌落。圖A是用劃線分別法接種培育后得到的結(jié)果,圖B表示的是用涂布分別法接種培育后得到的結(jié)果?？梢砸罁?jù)菌落的形態(tài)、大小等特征對細菌進行初步的鑒定和分類。(3)振蕩培育可以增加液體培育基的氧氣含量,促進好氧型微生物的生長;同時還能使菌體與培育液充分接觸,提高養(yǎng)分物質(zhì)的利用率。5.大腸桿菌是生活在人和高等動物體內(nèi)的一種常見細菌,在飲用水的檢測中常用它作為水源是否受到污染的指示菌,在遺傳學(xué)上常作為試驗材料,在基因工程中常用它作為受體細胞。請回答下列有關(guān)大腸桿菌的問題:(1)在大腸桿菌培育過程中,除考慮養(yǎng)分條件外,還要考慮和滲透壓等條件。由于該細菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡潔、變異類型簡潔選擇、易培育、等優(yōu)點,因此常作為遺傳學(xué)探討的試驗材料。

(2)在微生物培育操作過程中,為防止雜菌污染,需對培育基和培育皿進行;操作者的雙手須要進行清洗和消毒;空氣中的細菌可用紫外線殺滅,其緣由是紫外線能損傷DNA的結(jié)構(gòu),還能。

(3)培育大腸桿菌時,在接種前須要檢測培育基是否被污染。對于固體培育基應(yīng)采納的檢測方法是將未接種的培育基在相宜的溫度下放置適當(dāng)?shù)臅r間,。

(4)通常對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形態(tài)、大小、硬度和顏色等對細菌進行初步的鑒定(或分類)。

(5)若用大腸桿菌進行試驗,運用過的培育基及其培育物必需經(jīng)過處理后才能丟棄,以防止培育物的擴散。

答案(1)溫度、酸堿度(pH)生活周期短(或繁殖快)(2)滅菌使蛋白質(zhì)變性(3)視察培育基上是否有菌落產(chǎn)生(4)菌落特征(5)滅菌解析(1)培育微生物,不但須要相宜的養(yǎng)分物質(zhì),還須要考慮微生物生長所需的溫度、pH和滲透壓等條件。大腸桿菌是體積小、結(jié)構(gòu)簡潔的原核生物,具有繁殖周期短、易培育等特點,通常作為生物遺傳學(xué)探討的材料。(2)消退雜菌的污染是微生物培育的關(guān)鍵,不但須要對培育基和培育皿進行滅菌,還要對試驗者的雙手用70%酒精擦拭消毒,而空氣中的微生物常采納紫外線殺菌(主要原理是紫外線損傷DNA,并使蛋白質(zhì)變性)。(3)對大腸桿菌等微生物培育時,檢測培育基是否滅菌徹底最簡便的方法是將滅菌后未接種的培育基在相宜的溫度下培育一段時間,若出現(xiàn)菌落,說明培育基被污染,滅菌不徹底,反之說明培育基滅菌徹底。(4)不同菌種形成的菌落存在差異,可以通過菌落的形態(tài)、大小、硬度和顏色等菌落特征對細菌進行初步的鑒定。(5)微生物培育結(jié)束后,為防止培育對象對環(huán)境造成污染和擴散,運用過的培育基及其培育物必需經(jīng)過高壓蒸汽滅菌處理后才能丟棄。6.據(jù)報道,一些企業(yè)生產(chǎn)的速凍食品中檢出金黃色葡萄球菌超標(biāo),加上熟鹵制品的大腸桿菌超標(biāo),“細菌門”事務(wù)引起公眾普遍關(guān)注。金黃色葡萄球菌能分解卵黃中的卵磷脂,在含卵黃的固體培育基上形成的菌落四周會出現(xiàn)特有的乳白色的乳濁環(huán)。請回答下列問題:(1)某生物愛好小組欲檢測某果汁類食品中是否含有金黃色葡萄球菌以及該菌的含量。配制培育基:稱取適量的牛肉膏、蛋白胨、NaCl、瓊脂等,加入蒸餾水,攪拌加熱至完全溶解后①,分裝到錐形瓶后利用②進行滅菌,在無菌狀態(tài)下加入卵黃液(100mL10%滅菌NaCl溶液中加一個雞蛋黃,振蕩勻稱)搖勻后馬上倒平板。

接種:該小組采納涂布分別法檢測果汁樣品的細菌含量。在涂布接種前,隨機取若干滅菌后的空白平板先行培育了一段時間,這樣做的目的是③;然后,將1mL果汁樣品稀釋10倍,在3個平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液。

培育及結(jié)果:將培育皿④放入恒溫培育箱中經(jīng)適當(dāng)培育,3個平板上的菌落數(shù)分別為19、18和17。據(jù)此可得出每升果汁樣品中的活菌數(shù)為⑤。

(2)示意圖A和B中⑥表示的是用涂布分別法接種培育后得到的結(jié)果。

(3)下列有關(guān)涂布分別法的操作正確的是⑦。

A.在超凈工作臺中進行接種時應(yīng)關(guān)閉紫外燈B.接種前需先稀釋,然后過濾除去雜菌C.在每個固體培育基表面都可形成單菌落D.玻璃刮刀浸泡在70%的酒精中滅菌,不用灼燒(4)菌種保存:在無菌條件下將單菌落用接種環(huán)取出,再用劃線法接種在⑧上,在37℃下培育24h后,置于4℃冰箱中保存。

答案(1)①調(diào)整pH②高壓蒸汽滅菌鍋③檢測培育基平板滅菌是否合格④倒置⑤1.8×106(2)⑥B(3)⑦A(4)⑧斜面解析(1)培育基配制好后應(yīng)調(diào)整酸堿度(pH),分裝到錐形瓶后利用高壓蒸汽滅菌鍋進行滅菌;涂布接種前,將制好的空白平板先培育一段時間,目的是檢測培育基是否被雜菌污染;接種后,培育皿須要倒置培育,防止皿蓋上凝集的水滴滴落造成污染;0.1mL稀釋液(稀釋10倍)含細菌數(shù)約為18個,得出每升果汁含有活菌數(shù)1.8×106個。(2)圖中A為劃線分別得到的結(jié)果,B為涂布分別得到的結(jié)果。(3)在超凈工作臺進行接種操作時應(yīng)關(guān)閉紫外燈,A正確;涂布分別前需稀釋,但不能過濾除菌,B錯誤;并不是在每個固體培育基表面都可以形成單菌落,C錯誤;玻璃刮刀浸泡后須要灼燒,D錯誤。(4)純化的菌種保存在斜面上。7.燒傷病人簡潔感染綠膿桿菌,引起化膿性感染,比阿培南、美羅培南、頭孢菌素和碳青霉烯類抗生素都是抗