生物發(fā)酵工程2（含答案解析）

生物發(fā)酵工程2

試卷副標題

考試范圍：XXX：考試時間：100分鐘；命題人：xxx

注意事項：

1.答題前填寫好自己的姓名、班級、考號等信息

2.請將答案正確填寫在答題卡上

第I卷（選擇題）

請點擊修改第I卷的文字說明

第H卷（非選擇題）

請點擊修改第II卷的文字說明

一、綜合題

1.（2018?湖南衡陽市?）下圖為某微生物發(fā)酵自動化裝置示意圖。請回答下列相關問題:

提嘔組匕產品

⑴培養(yǎng)做生物所用的培養(yǎng)基,常采用法進行滅菌。

（2）若利用該裝置制備果醋，則“生物催化劑”指的是__________菌,若發(fā)酵液中無糖類，但

有乙醇，則該發(fā)酵菌發(fā)酵獲得醋酸的途徑是:乙醇一-醋酸。整個過程中需不間

斷地通入除菌空氣,原因是o

（3）在涂布平板時，滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量不宜過多的原因是

（4）純化菌種時,向試管內分裝含瓊脂的培養(yǎng)基，若試管口粘附有培養(yǎng)基,需要用酒精棉球

擦凈的原因是。

【答案】高壓蒸汽滅菌醋酸乙醛醋酸菌進行的是有氧發(fā)酵培養(yǎng)基表面

過多的菌懸液，導致菌體堆積，影響實驗效果避免培養(yǎng)基污染棉塞（防止雜菌污染

菌種等）

【解析】

試題分析：實驗室常用的消毒方法：煮沸消毒、化學藥物消毒、紫外線消毒；實驗室常

用的滅菌方法：灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。與果酒制作的微生物是酵母菌，

其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型；果酒制作的原理：在有氧條件下，反應式如下：

C6Hl2O6+6H2O+6O2T6co2+12乂0+能量：在無氧條件下，反應式如下：

C6Hl206T2co2+2C2H50H+能量。與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異

養(yǎng)需氧型；果醋制作的原理：當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成

醋酸；當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿帷?/p>

（1）微生物培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌進行滅菌。

（2）果醋的制作利用的醋酸菌的有氧呼吸，即該裝置中的“生物催化劑”指的是醋酸菌：

由于醋酸菌進行的是有氧發(fā)酵，因此整個過程中需不間斷地通入除菌空氣；若發(fā)酵液中

無糖類但有乙醇，則該發(fā)酵菌發(fā)酵獲得醋酸的途徑是：乙醇一乙醛一醋酸。

（3）培養(yǎng)基表面過多的菌懸液，導致菌體堆積，會影響實驗效果，所以在涂布平板時,

滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量不宜過多。

（4）用棉球擦凈試管口的培養(yǎng)基，目的是防止培養(yǎng)基污染棉塞，進而污染管內的培養(yǎng)

物。

2.（2021?寧波市北侖中學高二期中）回答下列（一）、（-）小題：

（-）回答與柑橘加工與再利用有關的問題：

（1）柑橘果實經擠壓獲得果汁后,需用果膠酶處理,主要目的是提高果汁的.

為確定果膠酶的處理效果，對分別加入不同濃度果膠酶的果汁樣品，可采用3種方法進

行實驗:①取各處理樣品，添加相同體積的，沉淀生成量較少的處理效果好。

②對不同處理進行離心，用比色計對上清液進行測定，OD值_________的處理效果好。

③對不同處理進行，記錄相同體積果汁通過的時間，時間較短的處理效果好。

（2）加工后的柑橘殘渣含有抑菌作用的香精油及較多的果膠等。為篩選生長不被香精

油抑制且能高效利用果膠的細菌，從腐爛殘渣中分離得到若干菌株，分別用無菌水配制

成,再均勻涂布在LB固體培養(yǎng)基上。配制適宜濃度的香精油，浸潤大小適

宜并已_________的圓形濾紙片若干，再貼在上述培養(yǎng)基上。培養(yǎng)一段時間后，測量濾

紙片周圍抑制菌體生長形成的透明圈的直徑大小。從直徑__________的菌株中取菌接種

到含有適量果膠的液體培養(yǎng)基試管中培養(yǎng)，若有果膠酶產生，搖晃試管并觀察，與接種

前相比，液體培養(yǎng)基的下降。

（二）回答與基因工程和植物克隆有關的問題：

（1）天然農桿菌的Ti質粒上存在著一段DNA片段（T-DNA）,該片段可轉移并整合

到植物細胞染色體上。為便于轉基因植物在組織培養(yǎng)階段的篩選,設計重組Ti質粒時，

應考慮T-DNA中要有可表達的目的基因，還需要有可表達的.

（2）結合植物克隆技術進行轉基因實驗，為獲得轉基因植株，農桿菌侵染的宿主一般

要選用具有優(yōu)良性狀、較高的遺傳穩(wěn)定性-----------及易被農桿菌侵染等特點的植物

材料。若植物材料對農桿菌不敏感，則可用的轉基因方法。

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（3）利用帶側芽的莖段獲得叢狀苗的過程與利用莖段誘導產生愈傷組織再獲得叢狀苗

的過程相比，前者總培養(yǎng)時間,且不經歷__________過程，因而其遺傳性狀

穩(wěn)定，是大多數(shù)植物快速繁殖的常用方法。

（4）與發(fā)芽培養(yǎng)基相比，配制轉基因叢狀苗生根培養(yǎng)基時，可根據(jù)實際情況適當添加

,促進叢狀苗基部細胞分裂形成愈傷組織并進一步分化形成,最

終形成根。還可通過改變MS培養(yǎng)基促進生根，如（A.提高蔗糖濃度B.降低

培養(yǎng)基濃度C.提高大量元素濃度D.不添加瓊脂）。

【答案】澄清度95%乙醇較小抽濾細菌懸液滅菌較小粘

性抗性基因全能性表達充分顯微注射短脫分化生長素

根的分生組織B

【分析】

發(fā)芽培養(yǎng)基：3000mLMS培養(yǎng)基+含1.5mgBA的溶液+含0.02mgNAA的溶液+30g蔗糖

+40g瓊脂，再加蒸儲水至4000mL,混合均勻加熱至瓊脂融化后，通過三角漏斗分裝至

100mL,三角瓶中每瓶40mL,共100瓶三角瓶，加上封口膜后1kg壓力下在滅菌鍋內

滅菌20分鐘。

生根培養(yǎng)基：lOOOmLMS培養(yǎng)基+含0.38mgNAA的溶液+30g蔗糖+20g瓊脂，再加蒸儲

水至2000mL,混合均勻加熱至瓊脂融化后，通過三角漏斗分裝至100mL,三角瓶中每

瓶40mL,共50瓶三角瓶，加上封口膜后1kg壓力下在滅菌鍋內滅菌20分鐘。

【詳解】

（一）（1）由于植物細胞壁和植物細胞間果膠的存在時，果汁的澄清度受到一定的影響，

因此可以加入果膠酶使果膠降解為可溶性的半乳糖醛酸，提高果汁的澄清度。判斷果膠

酶的處理效果，可采用三種方法，①看果膠的剩余量，果膠不溶于乙醇，加入95%的乙

醇，沉淀量少的即果膠的剩余量少，處理效果好，②進行離心處理，取上清液測OD值，

OD值越小，說明降解越充分，果膠酶的處理效果越好，③對不同處理進行抽濾，記錄

相同體積果汁的通過時間，固形物含量越少，時間越短，處理效果越好。

（2）為篩選不被香精油抑制且能高效利用果膠的細菌，需從腐爛殘渣中分離菌株，用

無菌水配制成細菌懸液，再涂布在LB固體培養(yǎng)基上待篩選。由于目標是篩選不被香精

油抑制的細菌，因此還需準備香精油，并將其制作成濾紙片貼在培養(yǎng)基上，香精油需滅

菌處理。觀察濾紙片周圍的抑菌圈，直徑越小說明該菌株越不易被香精油抑制，因而成

為初步待選的菌株。再進一步接種到含果膠的液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，果膠使植物細胞粘連,

若果膠被降解，則液體培養(yǎng)基的粘性下降。

（二）（1）設計重組質粒時，除了要含有可表達的目的基因，還需要有可表達的抗性基

因（如抗生素抗性基因），在添加抗生素的培養(yǎng)基上，含重組質粒的宿主細胞能夠生長，

因而被篩選出來。

（2）轉基因實驗要求宿主細胞性狀優(yōu)良、遺傳穩(wěn)定性較高、全能性（細胞發(fā)育成個體

的潛能）較高及易被農桿菌侵染等特點。若植物材料對農桿菌不敏感，可采用顯微注射

的方法。

（3）利用帶側芽的莖段獲得叢狀苗的過程，比利用莖段誘導產生愈傷組織獲得叢狀苗

的過程時間更短，因為不需要經歷脫分化的過程，而且遺傳性狀穩(wěn)定。植物器官的分化

需要一定的營養(yǎng)物質及適宜的激素配比，配制叢狀苗生根培養(yǎng)基需根據(jù)實際情況添加生

長素，促進基部細胞形成愈傷組織，并進一步分化形成根的分生組織，最終形成根。比

較發(fā)芽培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基可知MS培養(yǎng)基的濃度下降，因此可降低培養(yǎng)基的濃度促進

生根。故選B。

【點睛】

本題主要考查果膠的降解、基因工程及植物克隆知識，要求學生熟悉教材，并能將理論

知識與實際應用相結合。

3.（2017?上海）回答下列關于遺傳信息的傳遞與表達的問題

如圖是利用基因工程方法生產人生長激素的示意圖.

圖1

1.如圖1方框內代表的基因工程過程是,構建重組質粒要用到的“化學漿糊”是

2.據(jù)圖所示推斷EcoRI酶識別的核昔酸序列是

A.AGGAATTCGTB.TCCAATTGCAC.GAATTCD.CTTAAG

3.圖1中,質粒經EcoRI和HindHI聯(lián)合酶切后形成L0kb、0.8kb和3.2kb三個片段,

重組質粒經EcoRI酶單切后，形成LOkb、4.8kb兩個片段，目的基因的長度是

kb.（lkb=10（）（）堿基）

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4.關于制備圖1中大腸桿菌培養(yǎng)基的敘述，正確的是

A.制作固體培養(yǎng)基時可以加入瓊脂

B.操作的順序為計算、稱量、溶化、滅菌、倒置培養(yǎng)

C.倒好培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿，要立即將平板倒過來放置

D.制備待用的培養(yǎng)基可用紫外線照射進行滅菌

5.在目的基因增殖過程中，圖2表示一個具有四個核昔酸對的DNA片段經硫酸二乙酯

（EMS）處理后，在正常溶液中經過2次復制后的產物之一.則說明EMS能將G改

變?yōu)?

A.胞喀咤B.腺嚓吟C.胸腺喀咤D.鳥嚓吟

圖3為大腸桿菌的遺傳信息傳遞和表達過程.

6.據(jù)圖3下列說法正確的有.

①a、b過程所需的原料在細胞中有8種

②a、b過程發(fā)生的場所主要在細胞核

③b、c中均會發(fā)生堿基配對情況，但配對方式不完全相同

④在細胞增殖過程中，只會發(fā)生a過程，不會發(fā)生b和c過程.

【答案】獲取目的基因DNA連接酶C0.8ABB①③

【分析】

試題分析：據(jù)圖分析，基因工程的步驟包括獲取目的基因（生長激素基因）、將目的基

因與質粒連接為重組質粒、將重組質粒導入大腸桿菌、目的基因的檢測與表達。

【小題1】圖1方框內表示通過人工方法合成目的基因的過程；構建重組質粒需要限制

酶和DNA連接酶的催化，其中DNA連接酶被形象的比喻為“化學漿糊”。

【小題2］圖1虛線內顯示，EcoRI前識別的序列是GAATTC,并在G與A之間進行

切割。

【小題3】目的基因的長度=1.0+4.8-1.0-0.8-3.2=0.8kb。

【小題4】大腸桿菌培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，需要加入瓊脂作為凝固劑，A正確；操作的

順序為計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板，B正確；滅菌后的培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時

進行倒平板，待平板冷卻凝固約5-10min后將平板倒過來放置，C錯誤；制備待用的培

養(yǎng)基可用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌，D錯誤。

【小題5】圖2中第二對堿基由G//C變成了A//T,說明EMS能將G改變?yōu)锳（腺喋吟）。

【小題6】圖3中a表示DNA的復制，需要4種脫氧核甘酸，b表示轉錄，需要4種核

糖核甘酸，①正確；大腸桿菌是原核生物，沒有細胞核，DNA主要存在于擬核，所以

DNA的復制和轉錄也主要發(fā)生在擬核，②錯誤；DNA的復制和轉錄過程都遵循基因的

堿基互補配對原則，但是配對方式不完全相同，③正確；在細胞增殖過程中，既要進行

DNA的復制，還要進行蛋白質的合成，即abc過程都會發(fā)生，④錯誤。

【點睛】

本題考查基因工程、微生物的分離和培養(yǎng)、遺傳信息傳遞和表達的相關知識點，意在考

查考生的識圖能力和能理解所學知識的要點，把握知識間的內在聯(lián)系的能力：能運用所

學知識與觀點，通過比較、分析與綜合等方法對某些生物學問題進行解釋、推理，做出

合理的判斷或得出正確的結論。

4.（2015?上海長寧區(qū)?高三一模）下表中甲、乙分別是分離兩種土壤中微生物的培養(yǎng)基

的配方。

KH2P041.4g纖維素粉5.0g

Na2HPO42.1gNaNO31.0g

MgSO4*7H2O0.2gNa2HPO412g

葡萄糖10.0gKH2PO40.9g

尿素

1.0gMgSO4*7H2O0.5g

瓊脂15.0gKC10.5g

酵母膏0.5g

水解酪素0.5g

將上述物質溶解后，用蒸譙水定容將上述物質溶解后，用蒸儲水定容

到100mL到1000mL

甲乙

（注：水解酪素即水解酪蛋白，由酪蛋白水解得到）

1.配置培養(yǎng)基必須經過滅菌過程，即將培養(yǎng)基置于條件下維持15-30分

鐘，目的是為了殺死培養(yǎng)基中的。

2.從培養(yǎng)基功能上看，甲培養(yǎng)基屬于,其中能提供氮源的物質是

3.為了判斷甲培養(yǎng)基是否具有篩選作用，還應在牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基上接種

土壤稀釋液，并在相同且適宜條件下培養(yǎng)。如果,則證明該培養(yǎng)

基具有篩選作用。

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4.如果將乙配制成固體培養(yǎng)基，則在培養(yǎng)基上長出的菌落(是/否)都能分解

纖維素，理由是0

5.為得到單個菌落，常采用的兩種接種方法是.

【答案】1.05kg/cm2121℃細菌芽抱選擇培養(yǎng)基尿素等量的、相應濃

度的該培養(yǎng)基上長出的菌落數(shù)量明顯少于牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基上的菌落否

因培養(yǎng)基中還有水解酪素等能提供碳源，纖維素被分解后產生的糖類等也可為其它微生

物生長提供碳源涂布法劃線法

【分析】

【小題1】將培養(yǎng)基置于1.05kg/cm2、121℃條件下維持15-30分鐘，可殺死培養(yǎng)基中的

菌體及細菌芽抱。

【小題2】甲、乙分別是分離兩種土壤中微生物的培養(yǎng)基，其中甲培養(yǎng)基中尿素是作為

唯一氮源，能生長的菌落說明能利用尿素中的氮源，所以甲從用途上屬于選擇培養(yǎng)基。

其中含氮物質是尿素，以尿素為唯一氮源且含酚紅的培養(yǎng)基可以選擇和鑒別尿素分解菌。

【小題3】牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基屬于基礎培養(yǎng)基，在牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基上接種等量的、

相應濃度的土壤稀釋液，如果培養(yǎng)基上長出的菌落數(shù)量明顯少于牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基上

的菌落，說明有的微生物適合在牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基上生長，不適合在甲培養(yǎng)基上生長，

所以證明該培養(yǎng)基具有篩選作用。

【小題4】因培養(yǎng)基中還有水解酪素等能提供碳源，纖維素被分解后產生的糖類等也可

為其它微生物生長提供碳源，在乙配制的固體培養(yǎng)基上生長的菌落不一定都能分解纖維

素，有可能利用水解酪素等能提供碳源，也有可能纖維素被分解后產生的糖類等也可為

其它微生物生長提供碳源等。

【小題5】用稀釋涂布法和平板劃線法進行接種，可得到單個菌落。

5.(2019?全國高三專題練習)我國水果生產發(fā)展迅速，每年上市的新鮮水果品種多，

數(shù)量大。隨著水果加工技術的發(fā)展，可滿足人們不同層次的需求。水果的加工包括制作

果汁、果酒、果醋、果干等。請回答下列問題

(1)日常生活中可直接用法生產蘋果汁，加入能夠提高水果的出汁率

并使果汁變得澄清。

(2)新鮮的蘋果汁可發(fā)酵制成蘋果酒，酵母菌常用于蘋果酒的制作，其異化作用類型為

—,其產生CO2的場所是?

(3)若想對酵母菌進行計數(shù)，則應用—法在培養(yǎng)基上進行接種。平板劃線法一般不用

于活菌計數(shù)的原因是。

(4)利用固定化細胞技術發(fā)酵葡萄糖溶液，與固定化酶技術相比，技術對酶活

性影響更小，原因是?

【答案】壓榨果膠酶兼性厭氧型細胞質基質和線粒體基質稀釋涂布平

板得到的菌落多數(shù)不是由單個細胞繁殖而來的菌落，菌落數(shù)遠小于活菌數(shù)固定

化細胞技術固定化細胞由于保證了細胞的完整性，酶的環(huán)境改變小，所以對酶的活

性影響較小

【分析】

1、有氧呼吸分為三個階段(各階段均需酶催化)：

第一階段：細胞質的基質，c6Hl2O6T2c3H4。3(丙酮酸)+4[H]+少量能量(2ATP)；

第二階段：線粒體基質，2c3HQM丙酮酸)+6比0-20[H]+6CO2+少量能量(2ATP)；

第三階段：線粒體的內膜，24間+602-12氏0+大量能量(34ATP)。

2、微生物常用的接種方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法。

【詳解】

(1)日常生活中可直接用壓榨法生產蘋果汁，植物細胞壁的主要成分是纖維素和果膠，

果膠酶作用：a、瓦解植物的細胞壁及胞間層，使榨取果汁更容易；b、把果膠分解為可

溶性的半乳糖醛酸，使渾濁的果汁變得澄清，故加入果膠酶能夠提高水果的出汁率并使

果汁變得澄清。

(2)新鮮的蘋果汁可發(fā)酵制成蘋果酒，酵母菌常用于蘋果酒的制作，由于酵母菌既能

進行有氧呼吸，又能進行無氧呼吸，故其異化作用類型為兼性厭氧型，當酵母菌進行無

氧呼吸時，產生CO?的場所為細胞質基質，當其進行有氧呼吸時產生CO?的場所為線

粒體基質，綜上所述，其產生C02的場所是細胞質基質和線粒體基質。

(3)若想對酵母菌進行計數(shù)，則應用稀釋涂布平板法在培養(yǎng)基上進行接種。平板劃線

法一般不用于活菌計數(shù)的原因是得到的菌落多數(shù)不是由單個細胞繁殖而來的菌落，菌落

數(shù)遠小于活菌數(shù)。

(4)利用固定化細胞技術發(fā)酵葡萄糖溶液，與固定化酶技術相比，固定化細胞技術對

酶活性影響更小，原因是固定化細胞由于保證了細胞的完整性，酶的環(huán)境改變小，所以

對酶的活性影響較小。

【點睛】

易錯點：酵母菌的新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型，根據(jù)題干信息準確判斷其細胞呼吸

產生C02的場所。

6.(2021?江蘇)營養(yǎng)缺陷型菌株就是在人工誘變或自發(fā)突變后，微生物細胞代謝調節(jié)

機制中的某些酶被破壞，使代謝過程中的某些合成反應不能進行的菌株。這種菌株能積

累正常菌株不能積累的某些代謝中間產物，為工業(yè)生產提供大量的原料產物。以下是實

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驗人員利用影印法初檢氨基酸缺陷型菌株的過程。

滅菌的絲絨布

□》揭起絲絨布

經誘變處待測絲絨布

理的菌液培養(yǎng)皿吸附菌體菌落B

28℃

12d-

②

基本培養(yǎng)基

28℃

2d

菌落A完全培養(yǎng)基

（1）微生物生長需要的營養(yǎng)物質有水、碳源、等。過程①的接種方法為

o圖中基本培養(yǎng)基與完全培養(yǎng)基存在差異的成分是。根據(jù)用途分

類，圖中基本培養(yǎng)基屬于（填“選擇”或“鑒別”）培養(yǎng)基。

（2）進行過程②培養(yǎng)時，應先將絲絨布轉印至__________（填“基本”或“完全”）培養(yǎng)

基上，原因是。

（3）利用影印法培養(yǎng)的優(yōu)點是不同培養(yǎng)基中同種菌株的接種位置相同，所以，挑取

（填“菌落A”或“菌落B”）即為所需的氨基酸缺陷型菌株。統(tǒng)計菌落

種類和數(shù)量時要每隔24h觀察統(tǒng)計一次，直到各類菌落數(shù)目穩(wěn)定，鑒定菌落種類的重

要依據(jù)是。常用的測定微生物數(shù)量的方法是

（4）賴氨酸在人體內屬于必需氨基酸，在醫(yī)藥和食品業(yè)上有大量的需求，但是由圖可

知，當_______________的積累過量時，會抑制天冬氨酸激酶的活性，則使細胞難以積

累過多的賴氨酸，這種現(xiàn)象在微生物代謝中屬于調節(jié)，但賴氨酸單獨過

量積累時卻不會抑制上述酶活性?？茖W家對黃色短桿菌進行了誘變處理，選育了不能合

成酶的新菌種，使其代謝過程中能大量積累賴氨酸。

天冬氨酸團一

I天冬氨酸激酶W-2

中間產物I

中間產物U

高絲氨酸

脫氫酶

/高絲氨

甲硫氨酸蘇氨酸賴氨酸

【答案】氨源和無機鹽稀釋涂布平板法氨基酸選擇基本防止將特

定營養(yǎng)成分從完全培養(yǎng)基帶入基本培養(yǎng)基菌落A菌落的大小、形狀、顏色和表

面情況等稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計數(shù)法蘇氨酸和賴氨酸負反饋

高絲氨酸脫氫

【分析】

分析題圖：圖中首先利用稀釋涂布平板法分離細菌，然后運用"影印法''將菌種接種到兩

種培養(yǎng)基中：基本培養(yǎng)基、完全培養(yǎng)基，在基本培養(yǎng)基中，氨基酸缺陷型菌株不能生長，

而在完全培養(yǎng)基中能夠生長，據(jù)此可以選擇出氨基酸缺陷型菌株。

【詳解】

（1）微生物生長需要的營養(yǎng)物質有水、碳源、氮源和無機鹽等。過程①的接種方法為

稀釋涂布平板法。由于實驗選擇的是氨基酸缺陷型的菌株，所以圖1中基本培養(yǎng)基與完

全培養(yǎng)基存在差異的成分是氨基酸。不能合成特定氨基酸的微生物將不能生存，因此根

據(jù)用途分類，圖1中基本培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。

（2）由于完全培養(yǎng)基含有氨基酸等特定的營養(yǎng)物質，進行過程②培養(yǎng)時，應先將絲絨

布轉印至基本養(yǎng)基上，原因是防止將特定營養(yǎng)成分從完全培養(yǎng)基帶入基本培養(yǎng)基?

（3）在基本培養(yǎng)基中，氨基酸缺陷型菌株不能生長，而在完全培養(yǎng)基中能夠生長，因

此圖中菌落A（在基本培養(yǎng)基上不能生長，而在完全培養(yǎng)基上可以生長），因此應該為

氨基酸缺陷型菌株。統(tǒng)計菌落種類和數(shù)量時要每隔24h觀察統(tǒng)計一次，直到各類菌落數(shù)

目穩(wěn)定，鑒定菌落種類的重要依據(jù)是菌落的大小、形狀、顏色和表面情況等。常用的測

定微生物數(shù)量的方法是稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計數(shù)法。

（4）由圖可知，當蘇氨酸和賴氨酸的積累過量時，會抑制天冬氨酸激酶的活性，則使

細胞難以積累過多的賴氨酸，這種現(xiàn)象在微生物代謝中屬于負反饋調節(jié)，但賴氨酸單獨

過量積累時卻不會抑制上述酶活性?？茖W家對黃色短桿菌進行了誘變處理，選育了不能

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合成高絲氨酸脫氫能的新菌種，則中間產物n不能合成高絲氨酸，只能轉化成賴氨酸,

從而使其代謝過程中能大量積累賴氨酸。

【點睛】

本題以圖文結合的形式綜合考查學生對微生物的實驗室培養(yǎng)、微生物的分離與計數(shù)等相

關知識的識記和理解能力。解答本題需熟記并理解相應的基礎知識并形成清晰的知識網

絡。在此基礎上，結合問題情境，從題圖中提取有效信息進行相關問題的解答。

7.（2020?進賢縣第一中學高二月考）截止2020年5月，新冠病毒（2019-nCoV）已在

全球210多個國家和地區(qū)蔓延傳播，引發(fā)了全球性的“防疫大戰(zhàn)”。在防疫戰(zhàn)中，盡早確

診并及時隔離是防止新冠病毒過度傳播的有效手段。在現(xiàn)有的檢測新冠病毒的方法中,

最常用的是“熒光PCR法”。其基本原理是：將新冠病毒RNA逆轉錄為DNA,通過采

用多重熒光RT一PCR技術，以2019—nCOV的兩個獨立基因ORFlab基因和N基因

的保守區(qū)為靶位點設計特異性的引物和一定量的熒光標記的DNA探針，單管雙檢同時

測定新型冠狀病毒兩個獨立基因，消除由于病毒變異帶來的漏檢風險。

請回答下列問題：

（1）“熒光PCR法”所用的試劑盒中通常都應該含有：、、引

物、四種脫氧核昔酸、緩沖體系。

（2）如果要成功將上述兩個獨立基因分別擴增出來，則在試劑盒中的引物應該有

種，下圖為“基因ORFlab”對應的cDNA片段結構示意圖，則與之對應的

引物結合的部位應該是圖中的（用圖中數(shù)學作答）。

2

34

（3）在檢測過程中，隨著PCR的進行，反應產物不斷累積，“雜交雙鏈”熒光信號的

強度也等比例增加。可通過熒光強度變化監(jiān)測產物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲

線圖（如圖）。

以

成

興

怒

=

￡

①“平臺期”出現(xiàn)的最可能原因是：.

②理論上，在檢測過程中，有熒光標記的“雜交雙鏈”出現(xiàn)，則說明檢測結果呈

（填“陰”或“陽”）性，但為了保證檢測結果的準確性，一般會設定“雙鏈熒

光強度”的閾值（如圖虛線），即達到或超過閾值時才確診?，F(xiàn)有甲、乙兩個待檢樣本,

在檢測過程中都出現(xiàn)了上述形態(tài)的曲線，但甲的a點比乙的a點明顯左移。請給這種結

果做出科學合理的解釋（試劑盒合格且正常，操作過程規(guī)范且準確）：

（4）某些“陰謀論者”認為新冠病毒是“生物武器”，但這顯然是不攻自破的，因為任何

熱愛和平的國家、組織和個人都不可能去研究這類“人類公敵”。早在1998年，中美兩

國元首在關于《禁止生物武器公約》議定書的聯(lián)合聲明中，重申：

【答案】逆轉錄酶熱穩(wěn)定性DNA聚合酶（Taq酶）41和4試劑盒中

的原料和探針數(shù)量一定，超出一定的循環(huán)數(shù)后，熒光標記的“雜交雙鏈''不再增加陽

甲樣本中的新冠病毒含量更高，達到閾值所需的循環(huán)數(shù)更少在任何情況下不發(fā)展、

不生產、不儲存生物武器，并反對生物武器及其技術和設備的擴散

【分析】

PCR原理：在引物作用下，耐熱DNA聚合酶從引物3,端開始延伸DNA鏈，即DNA的

合成方向是從子鏈的5,端自3,端延伸的。實際上就是在體外模擬細胞內DNA的復制過

程。DNA的復制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3,端延伸DNA鏈。PCR

反應過程是：變性一復性一延伸。

【詳解】

（1）根據(jù)題目信息：“熒光PCR法”基本原理是：將新冠病毒RNA逆轉錄為DNA,通

過采用多重熒光RT—PCR技術，因此，“熒光PCR法”所用的試劑盒中通常都應該含

有：逆轉錄酶、熱穩(wěn)定性DNA聚合酶（Taq前）、引物、四種脫氧核甘酸、緩沖體系。

（2）根據(jù)PCR技術的原理，在擴增DNA分子時，每一條鏈均需與相應的引物結合才

能進行擴增，因此如果要成功將上述兩個獨立基因分別擴增出來，則在試劑盒中的引物

應該有4種；在利用PCR技術擴增DNA分子過程中，DNA聚合酶只能從引物的3'

端開始連接脫氧核甘酸，又由于DNA的兩條鏈是反向平行的，所以引物與DNA分子

單鏈的3'端（一OH）相結合即圖示中的1和4所示部位。

（3）①分析熒光擴增曲線圖，圖中曲線通過熒光強度變化反映產物量的變化，因此曲

線中，，平臺期，，出現(xiàn)的最可能原因是：試劑盒中的原料和探針數(shù)量一定，超出一定的循環(huán)

數(shù)后，熒光標記的“雜交雙鏈”不再增加。

②理論上，在檢測過程中，有熒光標記的“雜交雙鏈”出現(xiàn)，則說明檢測結果呈陽性；為

了保證檢測結果的準確性，一般會設定“雙鏈熒光強度'’的閾值，即達到或超過閾值時才

試卷第12頁，總187頁

確診。現(xiàn)檢測結果甲的a點比乙的a點明顯左移，說明甲樣本中的新冠病毒含量更高，

達到II值所需的循環(huán)數(shù)更少。

(4)在1998年，中美兩國元首在關于《禁止生物武器公約》議定書的聯(lián)合聲明中，重

申：在任何情況下不發(fā)展、不生產、不儲存生物武器，并反對生物武器及其技術和設備

的擴散。

【點睛】

本題考查了PCR技術的相關知識，對于RNA逆轉錄、PCR技術擴增DNA片段的理解

和操作流程，意在考查考生理解所學知識的要點，把握知識間的內在聯(lián)系的能力。

8.(2019?全國高一課時練習)利用滅菌技術，將某種細苗接種到培養(yǎng)皿內.以不同的

方式處理培養(yǎng)皿并加蓋(下圖表內陰影部分表示有細菌，白色清晰區(qū)表示無細菌)

12345

圖片紙浸在

抗生素P抗生素Q抗生素P+蒸儲水

實驗處理

)Jeo

溫度37c37c37℃37coc

實驗結果0)O0o

(1)描述圖表中1和2結果的不同；描述圖表中4和5結果的不同

(2)根據(jù)3的結果判斷，抗生素P和Q同時用于治療由這種細菌引起的疾病，療效如

何?為什么?_________________________________________________________

(3)請結合生活實際及所學知識，說明濫用抗生素治療細菌感染的危害性：

【答案】抗生素Q的殺菌能力比P強由于4的溫度適宜，細菌能生長，而5處于

低溫，細菌不能生長，全呈白色療效大大降低、Q和P同時使用，會相互抑制，細

菌存活區(qū)擴大由于藥物的選擇作用，濫用抗生素會導致抗藥性強的細菌出現(xiàn)，而使

原來的抗生素失去殺菌效果

【解析】

【分析】

據(jù)題干”下圖表內陰影部分表示有細菌，白色清晰區(qū)表示無細菌”可知，陰影越大，抗生

素的殺菌能力越弱。

【詳解】

（1）兩者都能抑制細菌生長，但抗生素Q的殺菌能力比P強，故2內白色清晰區(qū)面積

較大；由于4的溫度適宜，細菌能生長，而5處于低溫狀態(tài)，細菌不能生長，呈白色清

晰區(qū)。

（2）同時使用P和Q,療效會顯著降低。因為在3的P、Q重疊區(qū)為陰影部分，有細

菌存活，說明P和Q的相互作用使兩者的殺菌能力都降低。

（3）由于藥物的選擇作用，濫用抗生素會導致抗藥性強的細菌出現(xiàn)，而使原來的抗生

素失去殺菌效果。

【點睛】

識記微生物的分離和培養(yǎng)，抗生素的合理使用，依據(jù)題干情境準確作答。

9.（2015?北京）高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產中有很大的實用性。研窕者從熱泉中篩

選了高效產生高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過程如下圖所示。

（1）從用途上來說，I號培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基，僅以淀粉作為

源；從物理狀態(tài)上來說，II號培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，配制時一般加入

______________作為凝固劑。

（2）進行①過程的目的是；②過程所使用的接種方法是

法。

（3）I、n號培養(yǎng)基配制和滅菌時，滅菌與調節(jié)pH的先后順序是

;一般對配制的培養(yǎng)基采用法滅菌。

試卷第14頁，總187頁

（4）部分嗜熱菌在I號培養(yǎng)基上生長時可釋放分解培養(yǎng)基中的淀粉，在

菌落周圍形成透明圈；應挑出透明圈_____________的菌落，接種到n號培養(yǎng)基。

【答案】（1）選擇（1分）（唯一）碳（1分）瓊脂（1分）

（2）稀釋稀釋涂布平板

（3）先調節(jié)PH,后滅菌高壓蒸汽滅菌

（4）淀粉酶大

【解析】

試題分析：（1）分析圖示信息可知，I號培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，其目的是篩選出高效

產生高溫淀粉酶的嗜熱菌，所以僅以淀粉作為唯一的碳源。從物理狀態(tài)分析，II號培養(yǎng)

基屬于固體培養(yǎng)基，配置時常加入瓊脂作為凝固劑。

（2）圖中①過程是稀釋嗜熱菌培養(yǎng)液的過程，接種嗜熱菌即②過程常用稀釋涂布平板

法。

（3）培養(yǎng)基配制和滅菌過程中，應注意先調節(jié)pH,后滅菌，一般培養(yǎng)基滅菌常用高壓

蒸汽滅菌法。

（4）部分嗜熱菌在I培養(yǎng)基上生長時可產生淀粉酶，分解培養(yǎng)基中的淀粉后會在菌落

周圍形成透明圈，透明圈越大，說明產生的淀粉酶越多，應挑選透明圈大的菌落接種在

II號培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)。

考點：本題考查微生物選擇、培養(yǎng)、利用等相關知識，意在考查學生從材料中獲取相關

的生物學信息，并能運用這些信息，結合所學知識解決相關的生物學問題的能力。

10.（2022?全國高三專題練習）沉香精油是由沉香木經過水蒸氣蒸儲法或萃取法提煉而

成的，是沉香的精華所在。請回答下列問題：

（1）用水蒸氣蒸儲法提取沉香精油比萃取法的出油率原因可能是

。影響沉香精油萃取效率和質量的因素有很多，為了保證沉香精油

的質量，可以采取的做法是。

（2）樹種、受傷、細菌等微生物都是沉香樹結香的條件。有人想把影響結香的細菌分

離出來并鑒定，對配制的培養(yǎng)基采用高壓蒸汽滅菌，目的是.純化

菌株時劃線的某個平板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長滿了菌落，第二劃

線區(qū)域的第一條線上無菌落，其它劃線上有菌落。分析造成第二劃線區(qū)域的第一條線無

菌落的可能原因是（答一點即可）。

（3）進行梯度稀釋時的一般操作是將1mL菌液移入盛有9mL的無菌水中，常用稀釋

涂布平板法進行細菌計數(shù)，其原理是!但統(tǒng)計的菌落數(shù)往往

（填“多于”或“少于”）稀釋液中的活菌數(shù)，原因是：

【答案】低用水蒸氣蒸儲法提取的沉香精油會失去部分揮發(fā)性小的成分（或萃取法

會溶解出分子結構比較復雜的植物蠟、樹脂和色素等揮發(fā)性小的成分）事先精制有

機溶劑，除去雜質使培養(yǎng)基中所有微生物永遠喪失生長繁殖能力（殺死培養(yǎng)基中所

有微生物，包括芽胞和抱子）接種環(huán)灼燒后未冷卻劃線（未從第一區(qū)域末端開始）

培養(yǎng)基表面的一個菌落來源于一個活菌少于有些活菌在培養(yǎng)過程中死亡（個別

菌落可能是由2個或多個細菌形成）

【分析】

本題綜合考查學生對植物芳香油的提取、培養(yǎng)基的滅菌、微生物的純化與分離以及稀釋

涂布平板法等相關知識的識記和理解能力。熟記并理解相關的方法、原理、注意事項等

基礎知識、形成清晰的知識網絡，在此基礎上結合題意作答。

【詳解】

（1）用水蒸氣蒸儲法提取沉香精油會失去部分揮發(fā)性小的成分，萃取可以彌補該缺陷，

所以水蒸氣蒸儲法提取比萃取法的出油率低。影響沉香精油萃取效率和質量的因素有很

多，如萃取溫度和時間等，為了保證沉香精油的質量，可以采取的做法是事先精制有機

溶劑，除去雜質。

（2）培養(yǎng)基采用高壓蒸汽滅菌是使用強烈的理化因素進行滅菌，目的是殺死培養(yǎng)基中

所有微生物，包括芽抱和泡子。純化菌株時，通常使用的劃線工具是接種環(huán)，采用灼燒

方法對其進行滅菌，劃線的某個平板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長滿了

菌落，第二劃線區(qū)域所劃的第一條線上無菌落，其他劃線上有菌落，造成劃線無菌落可

能的原因是接種環(huán)灼燒后未冷卻，或劃線未從第一區(qū)域末端開始劃線。

（3）稀釋涂布平板法常用來進行微生物的計數(shù)，其原理是培養(yǎng)基表面的一個菌落來源

于稀釋液中的一個活菌，由于菌落可能是由兩個或多個細胞形成，以及有些活菌在培養(yǎng)

過程中死亡，所以統(tǒng)計的菌落數(shù)往往少于稀釋液中的活菌數(shù)。

【點睛】

對植物芳香油的性質及其提取方法（水蒸氣蒸儲法、壓榨法和萃取法）的適用條件、實

驗流程及微生物的純化與分離和稀釋涂布平板法原理等知識的識記和理解是答題的關

鍵。

11.（2020?北京西城?高三二模）為了應對干旱和強降雨等災害性天氣，很多城市增設了

雨水截流儲存和利用的設施，如布設于道路周邊或地勢較低區(qū)域的生物滯留池。生物滯

留池內土壤、植物和微生物等構成了小型生態(tài)系統(tǒng)。某城市道路收集到的雨水含有高濃

度污染物，其中的多環(huán)芳煌（PAHs）,會嚴重危害城市水環(huán)境?？蒲腥藛T基于解決污染

試卷第16頁，總187頁

問題和維護生態(tài)安全兩方面考慮，在從當?shù)丨h(huán)境中篩選耐受菌的基礎上，通過轉基因技

術獲得高效降解污染物的工程菌。

(1)經檢測發(fā)現(xiàn)，生物滯留池內PAHs中的花含量相對較高。研究者嘗試篩選能降解

花的菌種。

①篩選能降解花的菌種基本操作步驟如下。請將下列“方框”內字母后面內容補充完整

配制以a_____將b____________等

為唯一碳源的培養(yǎng)基—*進行滅菌處理

倒平板，用￡_______法接種

土填浸出液；為避免污染，

挑取顏色、大小等有差異的單個在恒溫培養(yǎng)操作應在超凈工作臺中的

e，進一步分離和鑒定種類一箱中培養(yǎng)d附近進行。

②從對照區(qū)域和生物滯留池中分別培養(yǎng)出占比較高的菌屬，結果見圖1、圖2。在兩個

區(qū)域中均能檢測出的菌屬有個，此結果能夠說明滯留池土壤中_______出現(xiàn)了

明顯的變化。

+

％。

眄

卅

夜

驊

圖2箔留池中土壤占比較高的菌屬

③在另一個篩選對花具有耐受性的菌株的實驗中，分離得到四個菌屬中的菌株，其生長

曲線見圖3。研究人員欲從中選擇一個構建工程菌。結合圖1、圖2所示結果，你認為

應選擇,理由是o

0.0-

0102030405060708090100

時間出

圖3四種菌株的生長曲線

(2)研究者將能高效降解花的外源基因重組至所選受體菌的同時，還轉入了含lac啟

動子的核酸酶基因。在半乳糖昔分子的誘導下該啟動子會被激活，表達的核酸酶會將自

身遺傳物質降解進而發(fā)生菌體自毀。轉入該基因在維護生態(tài)安全方面的意義是o

（3）試舉一例說明人類在改造自然的過程中，可能會帶來的生物安全隱患?

【答案】a在b培養(yǎng)基（培養(yǎng)皿、接種環(huán)等）c稀釋涂布平板d酒精燈火焰

（外焰）e菌落3微生物種類及比例PsePse菌株在對照池和滯留

池中均占比較大且對花的耐受性較好防止轉基因微生物逃逸到自然界，將實驗帶來

的生態(tài)風險降到最低將外來物種引入新的環(huán)境，可能會造成生物入侵問題；轉基因

生物可能會影響原有生態(tài)系統(tǒng)中的生物多樣性等

【分析】

1.生物多樣性是指生物圈內的所有的植物、動物和微生物（物種多樣性），它們所擁有

的全部基因（基因多樣性，也稱遺傳多樣性）以及各種各樣的生態(tài)系統(tǒng)（生態(tài)系統(tǒng)多樣

性），包括物種、基因（遺傳）和生態(tài)系統(tǒng)三個層次。

2.不適當引種的危害：澳大利亞原來并沒有仙人掌類植物，當?shù)厝藦拿乐抟N一種仙

人掌作為籬笆，結果仙人掌過度繁殖，侵占大量的農田和耕地，給當?shù)厣鷳B(tài)造成危害。

3.外來物種入侵的危害：外來物種入侵會嚴重破壞生物的多樣性，并加速物種的滅絕；

外來物種入侵會嚴重破壞生態(tài)平衡；外來物種入侵會因其可能攜帶的病原微生物而對其

他生物的生存甚至對人類健康構成直接威脅。

4.基因污染指對原生物種基因庫非預期或不受控制的基因流動，外源基因通過轉基因作

物或家養(yǎng)動物擴散到其他栽培作物或自然野生物種并成為后者基因的一部分，基因污染

主要是由基因重組引起的。

【詳解】

（1）①配制以花（a）為唯一碳源的培養(yǎng)基一為了獲得純凈的培養(yǎng)物需要用高壓蒸汽滅

菌法對培養(yǎng)基進行滅菌，同時對培養(yǎng)皿、接種環(huán)也要進行進行滅菌（b）一對滅菌完成

的培養(yǎng)基進行倒平板操作一然后用稀釋涂布平板法對土壤浸出液進行接種（c）一接種

時，為避免雜菌污染，需要在酒精燈火焰（外焰）旁進行接種（d）T接種完成后需要

將平板放在恒溫培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)一待菌落長出后，挑選顏色、大小等有差異的單個菌

落進行進一步的接種，進而對菌種進行分離的鑒定（e）。

②根據(jù)圖1、圖2的結果可知，在兩個區(qū)域中均能檢測出的菌屬有3個分別為Tha、Pse、

Com,該實驗結果說明滯留池土壤中微生物種類及比例發(fā)生了明顯的變化。

③由圖3的生長曲線可推測四種菌種對花的耐受性均表現(xiàn)較好，但結合圖1、圖2所示

結果，發(fā)現(xiàn)只有Pse菌株在對照池和滯留池中均占比較大且對花的耐受性較好，因此研

究人員需要應選擇Pse來構建工程菌。

（2）研究者將能高效降解他的外源基因重組至所選受體菌的同時;還轉入了含lac啟動

試卷第18頁，總187頁

子的核酸酶基因。在半乳糖普分子的誘導下該啟動子會被激活，表達的核酸酶會將自身

遺傳物質降解進而發(fā)生菌體自毀。據(jù)此可知轉入該基因的意義在于能防止轉基因微生物

逃逸到自然界，從而將實驗帶來的生態(tài)風險降到最低，避免引起生態(tài)危機。

（3）人類在改造自然的過程中，如將外來物種引入新的環(huán)境，可能會造成生物入侵問

題從而使入侵地的生物多樣性銳減；轉基因生物可能會引起基因污染，從而影響原有生

態(tài)系統(tǒng)中的生物多樣性等。

【點睛】

解讀題干中的信息并能進行分析綜合是解答本題的關鍵！掌握微生物培養(yǎng)技術以及相關

的操作時解答本題的另一關鍵！

12.（2021?浙江寧波?高三月考）回答下列（一）、（二）小題

（-）某食品公司得到一種高效釀酒的酵母菌菌株，并設計方案獲得發(fā)酵產物。

（1）對于酵母菌的培養(yǎng)，比較適合它的培養(yǎng)基為（A.馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基B.MS

培養(yǎng)基C.LB培養(yǎng)基D.牛肉湯培養(yǎng)基），除了要選擇合適的培養(yǎng)基成分外，還要考慮

培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質的.

（2）欲知道這種微生物的繁殖速度，可用涂布分離法或對酵母菌進行計數(shù)。對

培養(yǎng)到某一時期的培養(yǎng)液制備成IO4的稀釋液進行涂布分離，接種量o」mL,三個培養(yǎng)

皿生長的菌落數(shù)依次為25個、32個、18個,則培養(yǎng)液中的酵母菌數(shù)量為個/ml。

（3）在乙醇發(fā)酵中，通常采用以下步驟獲取菌種T菌種T擴大培養(yǎng)T接種一發(fā)

酵。不同微生物或同種微生物在不同環(huán)境條件下進行的代謝活動，所形成的代謝產物不

同，使發(fā)酵食品的風味也不同。有時會因為發(fā)酵液放置過久等原因，導致出現(xiàn)酸味，可

能發(fā)生了（用反應式表示）。

（4）對于發(fā)酵產物的獲取，通常要經過,為了容易分離得到產物常對微生物

細胞進行O

（二）紫杉醇是紅豆杉屬植物產生的一種復雜的次生代謝產物，對多種癌癥都有一定的

療效。最初用于研究和臨床試驗的紫杉醇都是從紅豆杉樹皮中提取。從36株60年生大

樹的樹皮中才能提取到約1g紫杉醇，可治療一個癌癥患者。一些地方通過伐樹生產紫

杉醇，使野生資源遭受到了極大的破壞，保護其野生資源和擴大藥源已成為當前急需解

決的矛盾。

（1）科學家發(fā)現(xiàn)紫杉醇的抗癌機理是：紫杉醇能和微管蛋白聚合體相互作用，促進微

管聚合并使之穩(wěn)定，阻礙紡錘體的形成，從而阻礙?

（2）利用植物組織培養(yǎng)，讓______細胞產生紫杉醇是一條理想的途徑。此培養(yǎng)方法的

原理是o

（3）由于植物細胞壁的存在，植物的有一定的難度，可用處理該細胞，

獲得球形的原生質體，通過對原生質體的培養(yǎng)，獲得能產生紫杉醇的.

（4）在獲得原生質體的過程中，常常在______滲透壓溶液中，目的是?

【答案】A濃度和比例血細胞計數(shù)板（或顯微鏡計數(shù)法）2.5X107活化

C2H5OH+O2用WCH3coOH+EhO分離或純化（虹吸法取出也可）固定化（固

—??

定化細胞）腫瘤細胞的分裂愈傷組織細胞增殖組織培養(yǎng)和克隆纖

維素酶和果膠酶細胞系較高使細胞處于微弱的質壁分離狀態(tài)，這樣有利于

完整的原生質體的釋放，防止原生質體被破壞（提到處于微弱的質壁分離狀態(tài)即可）

【分析】

1、微生物培養(yǎng)，是指借助人工配制的培養(yǎng)基和人為創(chuàng)造的培養(yǎng)條件（如培養(yǎng)溫度等），

使某些（種）微生物快速生長繁殖，稱為微生物培養(yǎng)。微生物培養(yǎng)可分為純培養(yǎng)和混合

培養(yǎng)，前者是指對己純化的單一菌種進行培養(yǎng)和利用；后者是指對混合菌種或自然樣品

（如土壤）中的微生物進行培養(yǎng)，然后根據(jù)培養(yǎng)基上所生長微生物的種類和數(shù)量，可在

一定程度上估算土壤中微生物的多樣性與數(shù)量。

2、植物的組織培養(yǎng)廣義又叫離體培養(yǎng)，指從植物體分離出符合需要的組織、器官或細

胞，原生質體等，通過無菌操作，在無菌條件下接種在含有各種營養(yǎng)物質及植物激素的

培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株或生產具有經濟價值的其他產品的技術。狹義

是指用植物各部分組織，如形成層、薄壁組織、葉肉組織、胚乳等進行培養(yǎng)獲得再生植

株，也指在培養(yǎng)過程中從各器官上產生愈傷組織的培養(yǎng)，愈傷組織再經過再分化形成再

生植物。

【詳解】

一、（1）MS培養(yǎng)基是培養(yǎng)植物的培養(yǎng)基，LB培養(yǎng)基是培養(yǎng)大腸桿菌的培養(yǎng)基，牛肉

湯培養(yǎng)基培養(yǎng)細菌，馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基培養(yǎng)真菌，比較適合培養(yǎng)酵母菌。配置培養(yǎng)基除

了要選擇合適的培養(yǎng)基成分外，還要考慮培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質的濃度和比例。

（2）欲知道這種微生物的繁殖速度，需要對微生物進行計數(shù)，方法有稀釋涂布平板法

和血細胞計數(shù)板法。稀釋涂布平板法計數(shù)時公式為C/VxM=25+0.1xl05=2.5xl07。

（3）在乙醇發(fā)酵中，通常采用以下步驟獲取菌種，然后活化菌種。有時會因為發(fā)酵液

放置過久等原因，導致出現(xiàn)酸味，可能發(fā)生了乙醇轉變形成乙酸，反應式：C2H5OH+O2

怔CH3coOH+HzO。

（4）對于發(fā)酵產物的獲取，通常要經過分離或純化（虹吸法取出也可），獲得較為純凈

的產物，為了容易分離得到產物常對微生物細胞進行固定化。

試卷第20頁，總187頁

二、（1）癌細胞具有無限增殖的特點，紫杉醇的抗癌機理是：紫杉醇能和微管蛋白聚合

體相互作用，促進微管聚合并使之穩(wěn)定，阻礙紡錘體的形成，從而阻礙癌細胞的增殖。

（2）紫杉醇時細胞代謝的產物，生產紫杉醇可以利于植物組織培養(yǎng)的方法，讓愈傷組

織細胞產生紫杉醇，此方法利用細胞增殖產生大量細胞的的原理。

（3）植物細胞壁的成分時纖維素和果膠，培養(yǎng)植物細胞時，由于細胞彼得存在有一定

的難度，可以用纖維素酶和果膠酶處理細胞得到原生質體，培養(yǎng)這個原生質體就能獲

得細胞系。

（4）在獲得原生質體的過程中，常常在較高滲透壓溶液中使細胞處于微弱的質壁分離

狀態(tài)，這樣有利于完整的原生質體的釋放，防止原生質體被破壞。

【點睛】

本題考查微生物培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的知