2025年微生物實(shí)驗(yàn)技能考核題庫與權(quán)威解答匯編

微生物試驗(yàn)課試題庫及原則答案

試題類型

試題數(shù)量

備注

名詞解釋

29

試題涵蓋了《微生物學(xué)》各章節(jié)有關(guān)試驗(yàn)技術(shù)的內(nèi)容，以及沈萍、范秀容等編《微生物學(xué)試

驗(yàn)》第三版試驗(yàn)指導(dǎo)書的內(nèi)容。

選擇題40判斷題59填空題70思索題13總數(shù)211

微生物試驗(yàn)技術(shù)名詞解釋

01.電子顯微鏡：電子顯微鏡是運(yùn)用甩子波波長短,辨別力高的特點(diǎn)以電子流替代光學(xué)顯微鏡

的光束使物體放大成象的超顯微鏡檢裝置。

02.一般光學(xué)顯微鏡：用自然光或者燈光作光源鏡檢物體的顯微鏡。

03.合成培養(yǎng)基：由化學(xué)成分已知的營養(yǎng)物質(zhì)配制而成的培養(yǎng)基。

04.人工培養(yǎng)基：人工配制的供微生物生長繁殖并積累代謝產(chǎn)物的一種營養(yǎng)基質(zhì)。

05.天然培養(yǎng)基：由化學(xué)成分不完全清晰的天然物質(zhì)如馬鈴薯,秋皮等配制而成的培養(yǎng)基。

06.半合成培養(yǎng)基：由化學(xué)成分已知的化學(xué)物質(zhì)和化學(xué)成分不完全清晰的天然物質(zhì)配制而成

的培養(yǎng)基。

07.革蘭氏染色法。：革蘭氏染色是細(xì)菌的?種鑒別染色法，細(xì)菌首先用結(jié)晶紫染色，再用碘液

固定,然后用95%的酒精脫色，最終用蕃紅復(fù)染。但凡菌體初染的結(jié)晶紫被酒精脫去了紫色后,

又被蕃紅復(fù)染成紅色的細(xì)菌稱為革蘭氏負(fù)反應(yīng)細(xì)菌；但凡菌體初染的紫色不能被酒精脫色,

也不能被蕃紅復(fù)染成紅色的細(xì)菌稱為革蘭氏正反應(yīng)細(xì)菌.

08.簡樸染色：用單一染料使微生物細(xì)胞染上所用染料顏色的染色措施。

09.稀釋平板計(jì)數(shù)法：將一定量的樣品經(jīng)十倍稀釋后，用平板培養(yǎng)最終三個(gè)稀釋度的樣品稀釋

液。待菌落長出后，計(jì)數(shù)出某一稀樣度的菌落數(shù)后再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品中的含菌數(shù)。

10.顯微直接計(jì)：運(yùn)用血球計(jì)數(shù)板或細(xì)菌計(jì)數(shù)板在顯微鏡下測計(jì)出每小格的微生物細(xì)胞數(shù)量

后，再換算出單位體積中微生物細(xì)胞總數(shù)的測數(shù)措施。

11.巴氏消毒：巴氏消毒是法國微生物學(xué)家巴斯德發(fā)明的一種消毒措施。是在62-63℃的條件

下，保溫半小時(shí)殺死微生物的營養(yǎng)體（重要是病原菌）的措施。

12.間歇滅菌：運(yùn)用100C的溫度殺死微生物的營養(yǎng)體.每次1小時(shí)持續(xù)三天，中間的空隙時(shí)間

讓未殺死的芽胞萌發(fā)成營養(yǎng)體，在下一次100C的溫度下被殺死。如此反復(fù)兩次可將培養(yǎng)基的

微生物（包括芽胞）所有殺死。該措施合用于沒有高壓滅菌器的地方進(jìn)行滅菌處理。1

13.消毒:只殺死微生物的營養(yǎng)體（重要是病原菌），而不能殺死微生物的芽胞的除菌措施。

14.滅菌:運(yùn)用物理或化學(xué)措施殺死所有微生物包括細(xì)菌的芽胞的除菌措施稱為滅菌。

15.過濾除菌:運(yùn)用一定孔徑的濾膜制止微生物的通過而除去溶液中或者空氣中微生物的除菌

措施。

16.濕熱滅菌:運(yùn)用熱的蒸汽殺死微生物的滅菌措施。濕熱滅菌又分常壓蒸汽滅菌和加壓蒸汽

滅菌

17.干熱滅菌:運(yùn)用干熱空氣殺死微生物的措施。其滅菌工藝條件一般為160-170℃〃h。

18.選擇培養(yǎng)基:根據(jù)使用的目的，控制培養(yǎng)基的構(gòu)成成分,使之有助于某種微生物的生長而限

制其他微生物的生長，從而能從自然界混雜的群體中分離出某一種單一的微生物。如無氮培

養(yǎng)基用來分離土壤中的自生固氮菌。

19加富培養(yǎng)基:在基本培養(yǎng)基中加入血清,動(dòng)植物組織液或者其他生長因子而配制出來的營

養(yǎng)尤其豐富的培養(yǎng)基。

20.鑒別培養(yǎng)基:根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)，通過指示劑的顯色反應(yīng),用以鑒別不一樣微生物的培

養(yǎng)

21.數(shù)值孔徑:數(shù)值孔徑是判斷物鏡和聚光鏡性能的重要指標(biāo),一般用N.A表達(dá)：

N.A=n.sin(n為介質(zhì)折光率,a為鏡口角)。

22.辨別力:辨別力是指顯微鏡可以辨別出的物體兩點(diǎn)間最小距離的能力。它與波長及物鏡的

數(shù)值孔徑有關(guān)。

23.超凈工作臺(tái):運(yùn)用過濾除菌的原理而設(shè)計(jì)出來的一種無菌操作工作臺(tái)，鼓風(fēng)機(jī)鼓出的空氣

通過孔徑很小的薄膜將空氣中的微生物過濾后變成無菌空氣吹向操作臺(tái)，可防止周圍有菌空

氣流入，能保證操作臺(tái)一直保持無菌狀態(tài)，便于無菌操作。

24.純培養(yǎng)技術(shù):純培養(yǎng)技術(shù)是培養(yǎng)某個(gè)單一微生物的措施。包括培養(yǎng)基的制作與滅菌。單一

微生物的分離與純化，和無菌操作接種技術(shù)。

25.焦深；焦深是指清晰的目的象的上面和下面所看見的物象之間的距離。它與放大倍數(shù)成

反比，即放大倍數(shù)越大，焦深越小。

26.暗視野顯微術(shù):運(yùn)用暗視野聚光器能制止光線直接照射標(biāo)本，而使光線斜射在標(biāo)本上。在顯

微鏡中見到黑暗視野中明亮物象的鏡檢技術(shù)。

27.熒光顯微術(shù):紫外光作光源的顯微鏡檢技術(shù)。

28.負(fù)相差:在黑暗視野中看到明亮物體的相差鏡檢技術(shù)。

29.正相差:在明亮視野中看到黑暗物體的相差鏡檢技術(shù)。

試驗(yàn)技術(shù)選擇題

01.革蘭氏染色的關(guān)鍵操作環(huán)節(jié)是：

A.結(jié)晶紫染色。B.碘液固定。C.酒精脫色。D.復(fù)染。答:(C)

02.放線菌印片染色的關(guān)鍵操作是：

A.印片時(shí)不能移動(dòng)。B.染色。C.染色后不能吸干。D.A-Co答:(A)。

03.高氏培養(yǎng)基用來培養(yǎng)：

A.細(xì)菌。B.真菌。C.放線菌。答乂Q。

04.肉湯培養(yǎng)基用來培養(yǎng)：

A.酵母菌。B.霉菌。C.細(xì)菌。答:(0。

05.無氮培養(yǎng)基用來培養(yǎng)：

A.自生固氮菌。B.硅酸鹽細(xì)菌。C.根瘤菌。D.A,B均可培養(yǎng)。E.A,B,C均可培養(yǎng)。答:①)。

06.在使用顯微鏡油鏡時(shí)，為/提高辨別力，一般在鏡頭和蓋玻片之間滴加：

A.二甲苯。B.水。C.香柏油。答:(C)。

07.常用的消毒酒精濃度為：

A.75%oB.50%oC.90%o答:(A)。

08.用甲醛進(jìn)行空氣熏蒸消毒的用量是：

A.20ml/M3oB.6ml/M3oC.lml/M3o答:(B)。

09.高壓蒸汽滅菌的工藝條件是：

A.121℃/30minoB.115℃歸Omin。C.130℃/50min<,答:(A)。

10.巴氏消毒的工藝條件是：

A.62-63℃^0minoB.71-72℃/15min<>CAB.均可。答:(C)。

11.半固體培養(yǎng)基的重要用途是：

A.檢查細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)性。B.檢查細(xì)菌的好氧性。C.AB兩項(xiàng)。答:(C)。

12.半固體培養(yǎng)基的瓊脂加入量一般是：

A.l%。B.0.5%。C.0.1%o答:⑻。

13.使用手提式滅菌鍋滅菌的關(guān)鍵操作是：

A.排冷氣徹底。B.保溫時(shí)間合適。C.滅菌完后排氣不能太快。D.A-Co答乂A)。

14.目鏡頭上的,K'字母表達(dá)：

A.廣視野目鏡。B.惠更斯目鏡。C.賠償目鏡。答:(C).

15.目鏡頭上的叩”字母表達(dá)：

A.平場目鏡。B.廣視野目鏡。C.平場賠償目鏡。答MA)。

16.物鏡頭上的叩L”字母表達(dá)：

A.正低相差物鏡。B.正高相差物鏡。C.負(fù)高相差物鏡。答:(A)。

”.物鏡頭上的"UVL”字母表達(dá)。

A.無熒光物鏡。B.攝影物鏡。C.相差物鏡。答:(C).

18.鏡頭上標(biāo)有“對(duì)C”字母的鏡頭是：

A.相差調(diào)整望遠(yuǎn)鏡。B.攝影目鏡。C.相差目鏡。答:(A)。

19.”PA"表達(dá):

A.馬鈴薯培養(yǎng)基。B.高氏培養(yǎng)基。C.肉湯培養(yǎng)基。答:(A)。

20.無菌室空氣滅菌常用措施是：

A.甲醛熏蒸。B.紫外燈照射。C.噴石炭酸。D.AB并用。答:①)。

21.干熱滅菌的關(guān)鍵操作是：

A.滅菌物不能有水。B.保溫過程中不能開箱門。C.降溫不能太快。答:(A).

22.霉菌水浸制片的關(guān)鍵操作足：

A.菌絲要分散。B.菌絲首先要用50%的乙醉浸潤。C.蓋蓋玻片不能有氣泡。D.A-Co答公)

23.用來染芽胞的染料一般是：

A.孔雀綠。B.結(jié)晶紫。C.復(fù)紅。D.番紅。答:(A)。

24.復(fù)紅法染鞭毛的關(guān)鍵操作是：

A玻片潔凈。B.染料新鮮。C.菌體活化合適。D.A.B.Co答:(B)。

25.鍍銀法染鞭毛的關(guān)鍵操作是：

A.玻片潔凈。B.染料無沉淀。C.加熱合適。D.菌體活化合適。E.A-Do答:(A)。

26.進(jìn)行簡樸染色使用的柒色液一般是：

A.復(fù)紅。B.蕃紅。C.結(jié)晶紫。D.孔雀綠。E.A-D均可。答:網(wǎng)。

27物鏡頭上的“APO”字母代表：

A.消色差物鏡。B.復(fù)消色差物鏡。C.半消色差物鏡。答:(B)。

28.物鏡頭上的“Ach”字母表達(dá)：

A.平場物鏡。B.超平場物鏡。C.消色差物鏡。答XA)。

29.物鏡頭上的“NH”字母表達(dá)：

A.正相差物鏡。B.負(fù)相差物鏡。C.負(fù)高相差物鏡。答:(C)。

30.物鏡頭上的“0.17”表達(dá)：

A.規(guī)定的蓋玻片厚度。B.規(guī)定的載玻片厚度。C.鏡頭浸油的深度。答:(A)。

31.鏡頭上標(biāo)有“NK”字母的鏡頭是：

A.攝影目鏡。B.熒光目鏡。C.相差目鏡。答:(A)。

32.目鏡頭上的“PK”字母表達(dá)：

A.平場目鏡。B.賠償目鏡。C.平場賠償目鏡。答:(C)。

33.物鏡頭上的“Splan”字母表達(dá)：

A.超平場物鏡。B.平場物鏡。C.消色差物鏡。答:(A)

34.物鏡頭上的“SplanApo”表達(dá)：

A.超平場復(fù)消色差物鏡。B.超平場半消色差物鏡。C.超平場物鏡。答:(A)。

35.物鏡頭上的"Planap?！北磉_(dá)：

A.超平場物鏡。B.平場物鏡。C.平場復(fù)消色差物鏡。答:⑹。

36.物鏡頭上的,'Plan”字母表達(dá)：

A.平場物鏡。B.消色差物鏡。C.超平場物鏡。答:（A）。

37.目鏡頭上的字母表達(dá)：

A.廣視野高眼點(diǎn)賠償目鏡，B.高眼點(diǎn)目鏡。C.廣視野目鏡。答:（C）。

38.目鏡頭上的“SWK”字母表達(dá)：

A.超廣視野目鏡。B.高眼點(diǎn)賠償目鏡。C.平場賠償目鏡。答?。?。

39.@鏡頭上的"WHK”字母表達(dá)：

A.超廣視野目鏡。B.廣視野高眼點(diǎn)目鏡。C.平場賠償目鏡。答:（B）.

40.物鏡頭上的“錯(cuò).L”字母表達(dá)：

A.消色差物鏡。B.半消色差物鏡。C.復(fù)消色差物鏡。答:（B）。

試驗(yàn)技術(shù)判斷題

01.無菌吸管上端塞入棉花是為了過濾口中的有菌空氣。答:（對(duì)）。

02.無菌吸管上端塞入棉花的目的是為了防止菌液吸入口中。答:（錯(cuò)）。

03.稀釋平板測數(shù)時(shí),放線菌計(jì)數(shù)的原則是選擇每皿中菌落數(shù)在30-300個(gè)之間的稀釋度進(jìn)行

計(jì)數(shù)。答乂對(duì)）。

04.稀釋平板測數(shù)時(shí)，細(xì)菌計(jì)數(shù)的原則是選擇每皿中菌落數(shù)在30-300個(gè)之間的稀釋度進(jìn)行計(jì)

數(shù)。答：（對(duì)）。

05.稀釋平板測數(shù)時(shí)，細(xì)菌，放線菌滇菌的計(jì)數(shù)原則是選擇每皿中菌落數(shù)在30-300個(gè)的稚釋度

進(jìn)行計(jì)數(shù)。答:（錯(cuò)）。

06.稀釋平板測數(shù)時(shí)，真菌的計(jì)數(shù)原則是選擇每皿中菌落數(shù)在10-100個(gè)的稀釋度進(jìn)行計(jì)數(shù)。

答：（對(duì)）。

07.稀釋平板測數(shù)時(shí),細(xì)菌、放線菌、真菌的計(jì)數(shù)原則是選擇每皿中菌落數(shù)在10-100個(gè)的稀釋

度進(jìn)行計(jì)數(shù)。答：（錯(cuò)）。

08.用混菌法測微生物活菌數(shù)時(shí),每個(gè)平皿中的菌液加入量是1ml。答:（對(duì)）。

09.用涂抹法測微生物活菌數(shù)時(shí),每個(gè)平皿中的菌液加入量是0.1ml。答:（對(duì)）。

10.用油鏡鏡檢時(shí)應(yīng)將聚光器升至最高。答乂對(duì)）。

11.使用高倍鏡時(shí)，可將聚光器升至最高。答：（錯(cuò)）。

12.為了滿足微生物對(duì)微量元素的需要，配制培養(yǎng)基所用的水最佳使用自來水。答乂對(duì)）。

13.稀釋測數(shù)用的無菌水一般是由自來水滅菌而成。答:（對(duì)）。

14.觀測根霉，青霉只需用低倍鏡觀測即可。答乂錯(cuò)）。

15.試驗(yàn)室一般使用血球計(jì)數(shù)板測微生物的總菌數(shù)。答:（錯(cuò)）。

16.浸油的油鏡頭可用軟的衛(wèi)生紙擦凈。答:（錯(cuò)）。

17.為了節(jié)省時(shí)間,可直接在染色涂片上滴加香柏油后，直接用油鏡觀測。答:（錯(cuò)）。

18.使用油鏡的對(duì)的操作環(huán)節(jié)是：

1.低倍鏡觀測。2.高倍鏡觀測。3.轉(zhuǎn)出高倍鏡頭，滴加香柏油后用油鏡觀測.答:（對(duì)）。

19.在擦拭顯微鏡鏡頭時(shí),應(yīng)向一種方向擦拭。答乂對(duì)）。

20.顯微鏡鏡頭的放大倍數(shù)越大,它的數(shù)值孔徑值越大，其鏡口角也越大。答:（對(duì)）。

21.稀糅平板測數(shù)一般是采用十倍稀釋法。答:（對(duì)）。

22.稀釋平板測數(shù)?般采用的是二倍稀釋法。答:（錯(cuò)）。

23.做稀釋平板測數(shù)時(shí)，只需一支吸管從頭稀釋到尾即可。答:（錯(cuò)）。

24.做稀釋平板測數(shù)時(shí)，每做一種稀釋度都必須更換一支無菌吸管。答乂對(duì)）。

25.稀釋平板測數(shù)時(shí)，無論是用混菌法,還是用涂抹法，每個(gè)平皿中的菌液加入量都是lmlo

答:（錯(cuò)）。

26.稀釋平板測數(shù)時(shí)，無論是用混菌法,還是用涂抹法，每個(gè)平皿中的菌液加入量都是0.1ml。

答：（錯(cuò)）。

27.試驗(yàn)室做固體培養(yǎng)基時(shí)，常加1.8%的瓊脂作凝固劑，做半固體培養(yǎng)基時(shí)，瓊脂加入量一般是

05%。答:（對(duì)）。

28.試驗(yàn)室做固體培養(yǎng)基，常加2%的瓊脂作凝固劑，做半固體培養(yǎng)基時(shí)，瓊脂加入量一般是1%。

答乂錯(cuò)）。

29,E.coli經(jīng)革蘭氏染色后，菌體呈紅色，它是革蘭氏正反應(yīng)細(xì)菌。答:（錯(cuò)）。

30.在光學(xué)顯微鏡下，根霉的泡子囊是透明的。答乂錯(cuò)）。

3L使用手提滅菌鍋滅菌后，為了盡快排除鍋內(nèi)蒸汽，可直接打開排氣閥排氣.答乂錯(cuò)）。

32.蘇云金桿菌的芽胞在菌體的中央。答:（錯(cuò)）。

33.所有真菌菌落的表面干燥，呈絨毛狀。答:（錯(cuò)）。

34.所有放線菌菌落表面干燥，呈粉粒狀。答:（錯(cuò)）。

35.所有細(xì)菌菌落的表面都是光滑濕潤狀。答:（錯(cuò)）。（芽胞菌菌落表面粗糙。）。

36.鏡臺(tái)測微尺每小格的實(shí)際長度是10微米。答乂對(duì)）。

37.目鏡測微尺每小格的實(shí)際長度是10um。答:（錯(cuò)）。

38.鏡臺(tái)測微尺每小格的實(shí)際長度是10nm（納米）。答:（錯(cuò)）。

39.血球計(jì)數(shù)板兩邊的平臺(tái)比計(jì)數(shù)區(qū)高0.1cm。答:（錯(cuò)）。

40.血球計(jì)數(shù)板兩邊的平臺(tái)比計(jì)數(shù)區(qū)高0.1mm。答:（對(duì)）。

41.棉花塞塞入試管的長度應(yīng)為棉塞全長的羽。答:（對(duì)）。

42.棉花塞塞入試管的長度應(yīng)為棉塞全長的g答乂錯(cuò)）。

43.挖斜面的長度應(yīng)不超過試管長度的明。答:（錯(cuò)）。

44.擺斜面的長度應(yīng)不超過試管長度的皿。答:（對(duì)）。

45.血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)區(qū)的面積是lmm2。答乂對(duì)）。

46用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)時(shí)，仁數(shù)5個(gè)大方格（80個(gè)小格）的菌數(shù)即可。答乂錯(cuò)）。

47.在使用細(xì)菌計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)時(shí)，為了防止計(jì)數(shù)偏大，計(jì)數(shù)M四面壓線的菌只能數(shù)兩邊。答:（對(duì)）。

48.目鏡測微尺每格的實(shí)際長度是未知的,需用長度已知的鏡臺(tái)測微尺校正。答:（對(duì)）。

49.測微生物的細(xì)胞大小時(shí)，需要校正的是鏡臺(tái)測微尺每格的實(shí)際長度。答:（錯(cuò)）.

50.測微生物細(xì)胞大小時(shí)，需要校正的是目鏡測微尺每格的實(shí)際長度。答:（對(duì)）。

5L血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)區(qū)每小格的體積是1/I000mm3o答乂對(duì)）。

52.血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)區(qū)共有400個(gè)小格，每小格的面積是1^00cm2o答乂錯(cuò)）。

53.用分裝器將培養(yǎng)基分裝試管時(shí)，應(yīng)謹(jǐn)防培養(yǎng)基沾染試管口。答:（對(duì)）。

54.瓊脂的熔化溫度是90℃以上，凝固溫度是45c如下。答:（錯(cuò)）。

55.瓊脂的熔化溫度是95℃以上，凝固溫度是45℃如下。答乂對(duì)）。

56.玻璃器材洗凈后在急需時(shí)可采用高壓蒸汽滅菌，而不能用干熱滅菌。答:（對(duì)）。

57.細(xì)菌計(jì)數(shù)板每小格的體積是Wmm3o答:（對(duì)）。

58.血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)區(qū)每小格的體積是l/4000cm3o答:（錯(cuò)）。

59.無菌室用甲醛熏蒸消毒后可噴氨水以減少甲醛的刺激。答:（對(duì)）。

試驗(yàn)技術(shù)填空題

01.霉菌水浸片的制片程序是加?滴水于載玻片中央，用解剖針挑取菌絲少許，將菌絲用50%

的酒精浸潤,將菌絲用蒸館水水洗，將菌絲放入載玻片水滴中并小心分散,蓋上蓋玻片。

02.放線菌印片染色的操作程序是印片，干爆固定，復(fù)紅染色2-3分鐘，水洗，晾干。

03.固體培養(yǎng)基常用洋菜（瓊脂）作凝固劑，一般固體培養(yǎng)基的用量一般為1.5-2.0%一半固體培養(yǎng)

基的用量一般為0.5%_。

04.簡樸染色的操作程序是涂片，干燥，固定，復(fù)紅染色1-2分鐘，水洗，晾干。

05.使用手提式滅菌鍋進(jìn)行滅菌的操作程序是一鍋內(nèi)加水，滅菌物體裝鍋，對(duì)稱上緊密封螺帽

將鍋密封上，加熱升溫，排盡鍋內(nèi)冷空氣,升溫至滅菌工藝條件（--般為98kpa）,在工藝條件下保

壓計(jì)時(shí)（一般為30分鐘），屆時(shí)間后切斷熱源，降溫，出鍋。

06.試驗(yàn)室配制固體培養(yǎng)基的操作程序是照配方稱取藥物，將藥物溶解在一定量的水中后加

熱煮沸，將瓊脂按量稱取后用水浸濕,將浸濕的瓊脂加入煮沸的營養(yǎng)液中，待瓊脂所有融化后

調(diào)整pH值，補(bǔ)充損失的水分，分裝培養(yǎng)基入不一樣的容器中。

07.有莢膜的細(xì)菌用負(fù)染色法染色后，莢膜為無色，菌體為_紅色.

08.細(xì)菌經(jīng)革蘭氏染色后，革蘭氏正反應(yīng)菌呈_紫色，革蘭氏負(fù)反應(yīng)菌呈_紅色。

09.細(xì)菌經(jīng)簡樸染色后呈—所染染料的顏色

10.顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)由_反光鏡，聚光鏡，物鏡」和目鏡構(gòu)成。

11.顯微鏡的機(jī)械部分包括一鏡座，鏡臂，載物臺(tái),轉(zhuǎn)換器，鏡筒，推進(jìn)器，粗動(dòng)螺旋,微動(dòng)螺旋聚光

鏡升降螺旋。等九部分構(gòu)成。

12.高氏培養(yǎng)基一般用來培養(yǎng)_放線菌，其pH值為_7.5-8.0_。

13.PA培養(yǎng)基一般用來培養(yǎng)真菌_菌，其pH值為5-6_o

14.牛肉膏、蛋白陳培養(yǎng)基一般用來培養(yǎng)一細(xì)菌，其pH值為_、7.0-7.2_。

15.無氮培養(yǎng)基一般用來培養(yǎng)自生固氮菌。其氮源來自一空氣中的N2_o

1GT熱滅菌的工藝條件是lG0-170℃/2h_o

17.使用顯微鏡低倍鏡觀測時(shí)，聚光器應(yīng)當(dāng)減少，使用顯微鏡高倍鏡觀測時(shí)，聚光器應(yīng)當(dāng)合適升

局O

18.革蘭氏染色的關(guān)鍵操作是酒精脫色_。

19.顯微鏡的倍數(shù)越大，焦淡越小，調(diào)焦應(yīng)當(dāng)越小心

20.按培養(yǎng)基的形態(tài)，可將培養(yǎng)基分為液體-固體一半固體一三種類型。

21.配制常規(guī)培養(yǎng)基時(shí)一般用一自來—水。

22.熱滅菌一般用來滅菌玻璃器材，培養(yǎng)基的滅菌一般用—高壓蒸汽滅菌。

23.細(xì)菌稀釋測數(shù)?般采用10倍—稀釋法,稀釋用試管無菌水為9_亳升。

24.配制培養(yǎng)基時(shí)常用」molNaOH、和ImolHCL調(diào)整pH值。

25.按培養(yǎng)基的特殊用途，可將培養(yǎng)基提成—選擇培養(yǎng)基，加富培養(yǎng)基，鑒別培養(yǎng)基等。

26.選擇培養(yǎng)基可用來分離培養(yǎng)我們所需的特殊微生物類群，例如我們要從土壤中分離纖維分

解菌，可以運(yùn)用一纖維素_作唯一碳源來篩選纖維分—解菌要分禽產(chǎn)蛋白酶的微生物可以

運(yùn)用酪蛋白，作唯一氮源分離—蛋白分解菌一

27.革蘭氏染色的操作程序是涂片，干燥，固定，結(jié)晶紫染色1分鐘，水洗，碘液媒染1分鐘，水

洗,95%的乙醇脫色25秒冰洗，蕃紅復(fù)染3-5分鐘冰洗，晾干

28.培養(yǎng)基是人工配制的適合不一樣微生物生長繁殖或積累代謝產(chǎn)物的營養(yǎng)基質(zhì)。按營養(yǎng)物

質(zhì)的不一樣來源可分為一天然培養(yǎng)基，合成培養(yǎng)基，半合成培養(yǎng)基_三大類。

29.高倍鏡頭的數(shù)值孔徑一般為_0.65〃放大倍數(shù)為_40x_<

30.油鏡頭的數(shù)值孔徑一般為」.25,放大倍數(shù)為」00x或90x_o

31.低倍鏡頭的數(shù)值孔徑一般是0.25一放大倍數(shù)為_10x或8x_。

32.穿刺接種使用的接種工具為_接種針，斜面接種使用的接種工具為接種環(huán)

33.進(jìn)行稀釋測數(shù)使用的重要器材有_酒精燈,1ml無菌吸管,9ml試管裝無菌水,9cm的無菌平

板

34.用孔雀綠和復(fù)紅作細(xì)菌芽胞染色時(shí)，可使菌體呈紅色，使芽胞呈一綠色。

35.用日光燈作光源時(shí)，一般用一平面反光鏡，用自然光作光源時(shí)，一般用凹面_反光鏡

36.無菌室殺菌一般采用紫外燈照射，和噴灑化學(xué)藥劑（如酚）相結(jié)合的措施。

37.半固體培養(yǎng)基一般用來檢杳一細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)性。

38.擺試管斜面的基本操作措施是將擺斜面用特制木條放在桌面上，將裝有固體培養(yǎng)基的試管

趁熱放在特制木條上擺成斜面，斜面長度不得超過試管長度的皿，將試管棉塞部分用滅菌報(bào)

紙蓋上，以防空氣中微生物落到棉塞上引起污染。

39不能加熱滅菌的液體培養(yǎng)基應(yīng)采用濾法除菌，一般用的器皿有蔡氏細(xì)菌過濾濾和膜濾一。

40.藍(lán)細(xì)菌的培養(yǎng)可用膜濾一培養(yǎng)基.

41.分離?酵母菌時(shí)為了克制細(xì)菌的生長,一般用—膜培養(yǎng)基。

42.從土壤中分離真菌時(shí)，一般在培養(yǎng)基中加入一孟加拉國國紅和—鏈霉素顯—克制細(xì)菌的生長。

43.測微生物的大小使用的重要工具是微鏡，鏡臺(tái)測微尺和一目鏡測微尺。

44.測微生物的數(shù)量使用的重要工具是—顯微鏡和血球計(jì)數(shù)板一

45.進(jìn)行細(xì)菌的顯微計(jì)數(shù)時(shí)使用的重要工具是顯微鏡和細(xì)菌計(jì)數(shù)板」

46.一般光學(xué)顯微鏡測酵母菌的大小的操作程序是將鏡臺(tái)測微尺置載物臺(tái)匕調(diào)焦找到臺(tái)尺,

在低倍鏡下校正目鏡測微尺每格的長，在高倍鏡下校正目鏡測微尺每格的長，去掉臺(tái)尺換上待

測樣本片，在高倍鏡下測出十個(gè)酵母菌寬和長的格數(shù),將校正值乘入，算出十個(gè)酵母菌的平均

寬和平均長，以平均寬X*平均長Y（Hm）表達(dá)酹母菌的大小。

47.顯微計(jì)數(shù)的操作程序是—將待測菌進(jìn)行合適的稀釋，將計(jì)數(shù)板置于載物臺(tái)上,在低倍鏡下找

到計(jì)數(shù)區(qū)，將菌液加到計(jì)數(shù)區(qū)上,調(diào)焦看到菌體，按五點(diǎn)取樣法計(jì)數(shù)五個(gè)大方格的菌數(shù),計(jì)算每

小格的含菌數(shù)，計(jì)算出單位體積（如每ml）中的含菌數(shù)。

48.莢膜染色法的操作程序是—涂片，風(fēng)干，加復(fù)紅染色3-5分鐘，水洗，晾干，加墨素涂抹，風(fēng)干。

49.芽胞染色的操作程序是片，干燥，固定，

孔雀綠加熱染色15分鐘，水洗，復(fù)紅染色2-3分鐘，

水洗，

晾干。

50.芽胞染色的關(guān)鍵操作是孔雀綠加熱染色一

51.放線菌印片染色的關(guān)鍵操作是一印片時(shí)不能移動(dòng)

52.用負(fù)染色法染莢膜的關(guān)鍵操作是一涂抹墨素要薄。

53.搖床振蕩培養(yǎng)一般用來培養(yǎng)—好氣微生物，亨格特的厭氧操作措施一般用來培養(yǎng)專性厭氧

菌

54.革蘭氏染色反應(yīng)與細(xì)菌細(xì)胞壁的—構(gòu)造_和_構(gòu)成一有關(guān)。在革蘭氏染色過程中，當(dāng)用95%

酒精處理后,就放在顯微鏡下觀測，革蘭氏陽性菌呈_紫_色，而革蘭氏陰性菌呈_無色。

55.血球計(jì)數(shù)板與細(xì)菌計(jì)數(shù)板的重要差異是前者計(jì)數(shù)區(qū)的深度是后者的五倍

56.制霉菌水浸片時(shí)加棉蘭染色液可使菌體呈—淺蘭色。

57.Anabaenaazo對(duì)ica的異型胞?般是_間生在光學(xué)顯微鏡下它是—透明的，細(xì)胞兩端有極節(jié)一

它能控制氧氣的進(jìn)入，保持異型胞內(nèi)一低氧分壓，以利于固定分子氮

58.配制培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)注意多種營養(yǎng)物質(zhì)的配比,尤其是C:N比（碳氮比）。一般而言，當(dāng)CM5:1

時(shí),有助于一菌體生長；當(dāng)C:ND5:1時(shí)，有助于—積累代謝產(chǎn)物。

59.由于多種微生物對(duì)某種化合物如抗生素、染料的敏感性不一樣，可以運(yùn)用這一特性來從土

壤中分離出不一樣類群的微生物。如在培養(yǎng)基中加入青霉素（鏈霉素），會(huì)殺死或克制細(xì)菌和放

線菌的生長而分離出真菌_；在培養(yǎng)基中加入一結(jié)晶紫一，有助于分離到革蘭氏陰性菌.

60.細(xì)菌在革蘭氏染色過程中，最終用蕃紅復(fù)染的原因是G-細(xì)菌經(jīng)結(jié)晶紫染色、碘液媒染、

酒精脫色后菌體紫色脫去，故需用蕃紅復(fù)染，這樣在光鏡下才能見到紅色的菌體。

61.高倍鏡下能看到的物象在油鏡下看不到往往是由于一片置反和—菌體著色太淺引起。

62.微生物在培養(yǎng)基中生長時(shí)，由于其—新陳代謝而使培養(yǎng)基_pH值發(fā)生變化；因此在配制培養(yǎng)

基時(shí)，為維持該條件的相對(duì)恒定，常在培養(yǎng)基中加入緩沖物質(zhì)如—碳酸鹽心83）_或_磷酸鹽

63.一般而言，微生物在含糖基質(zhì)上生長，會(huì)產(chǎn)_酸_，而使_pH下降」微生物分解蛋白質(zhì)或氨基

酸會(huì)產(chǎn)_堿-而使_pH上升.

64.在微生物培養(yǎng)過程中使用的培養(yǎng)皿首先是被_Petri采用的，因此又稱培養(yǎng)皿為_Petri_dish。

Hesse在其妻子的啟發(fā)下，洛固體培養(yǎng)基使用的凝固劑由明膠改為—瓊脂

65.顯微鏡的微動(dòng)螺旋每轉(zhuǎn)一圈升降距離為_0.1亳米

66.兩個(gè)經(jīng)典的革蘭氏正反應(yīng)細(xì)菌和革蘭氏負(fù)反應(yīng)細(xì)菌經(jīng)革蘭氏染色后都呈陰性反應(yīng)往往是

由于J酉精脫色時(shí)間過長和—菌體培養(yǎng)時(shí)間太長引起。

67.檢查乳品和飲料與否具有—大腸桿菌(E.ColiL等腸道細(xì)菌，可采用—伊紅-美蘭一培養(yǎng)基，在這

種培養(yǎng)基平板上一大腸桿菌(E.Coli)_會(huì)形成具有一金屬—光澤的紫黑色小菌落。

68.細(xì)菌鞭毛經(jīng)鍍銀法染色后呈_褐_色。

69.細(xì)菌鞭毛經(jīng)李夫森法染色后呈一紅色。

70.由于升汞(HgCL2)有腐蝕作用,因此不能用于金屬器皿消毒，尤其是—鋁制品。

試驗(yàn)技術(shù)思索題

01.試述在一般光學(xué)顯微鏡下測定微生物細(xì)胞大小的基本措施。

測定微生物細(xì)胞的大小重要使用目鏡測微尺。其措施如下：

1.先用長度已知的鏡臺(tái)測微尺校正目鏡測微尺。校正的措施是讓臺(tái)尺與目尺重疊，看臺(tái)尺的X

格恰好與日尺的Y格重疊，然后用計(jì)算日尺每格的長.分別校正日鏡測微尺在低倍鏡，高倍鏡及

油鏡下每格所代表的實(shí)際長度。

2.將待測微生物制成水浸片或染色涂片置我物臺(tái)上，調(diào)焦找到微生物后用目鏡測微尺測量其

寬幾格，長幾格，然后乘上對(duì)應(yīng)放大倍數(shù)下的校正值。

3.一般測10個(gè)微生物,然后以平均值表達(dá)。4.若是酵母、細(xì)菌等單細(xì)胞微生物，一般測其寬和

長,然后以平均寬'平均長表達(dá)，單位為口m0

02.以測蘇云金桿菌工業(yè)菌粉中的活菌數(shù)為例，試述稀釋平板計(jì)數(shù)的基本措施。

1.測數(shù)前先準(zhǔn)備好測數(shù)用的1ml無菌吸管,9cm無菌平板,9ml試管無菌水和牛肉青蛋白陳瓊

脂培養(yǎng)基。

2.稱取10克工業(yè)菌粉加入90ml無菌水中置搖床上或用手振蕩20-30分鐘,讓菌體分散。

3.將上述振蕩過的菌液按無菌操作法進(jìn)行十倍稀釋直到10-8。

4.取9cm無菌平板9套用記號(hào)筆在平板底編號(hào),10-8編3套,10-7編3套,10-6編3套。

5.用1支1ml的無菌吸管，取lmllO-8的稀釋菌液放入編號(hào)10-8的平板中，如此將三個(gè)反復(fù)做

完.同法取10-7稀釋菌液放入三個(gè)編號(hào)為10-7平板中.同法取10-6稀釋菌液放入三個(gè)編號(hào)為

10-6平板中.(均要按無菌操作法做).

6.將牛肉膏蛋白陳瓊脂培養(yǎng)基熔化冷至45-50C后，在酒精燈火焰邊按無菌操作法倒入上述9

套平板中，每個(gè)加入量大概15-20ml,邊加邊搖動(dòng)平板,使培養(yǎng)基與菌液充足混勻。

7.待培養(yǎng)基凝固后,將平板倒過來，置28-3CTC下培養(yǎng)48小時(shí)后計(jì)數(shù)。

03.試述劃線分離的操作措施。

1.取9ml無菌平板一套在火焰旁按無菌操作法倒人15-2Cml營養(yǎng)瓊脂，讓其冷凝成平板。

2.左手拿上述平板,右手拿接種環(huán)在火焰上滅菌后沾取原始分離物在平板上平行劃線三條

3.將接種環(huán)在火焰上滅菌，左手平板轉(zhuǎn)動(dòng)大概70度,用滅菌接種環(huán)通過第一次劃線的地方作二

次劃線，亦劃三條。

4.同上法再作第三次，第四次劃線。

5.蓋上平板蓋，將平板倒過來置28-30℃下培養(yǎng)2-4天后觀測成果.劃的好應(yīng)在第四次劃線處出

現(xiàn)單個(gè)菌落。

注:本答案也可畫圖闡明。

04.試述檢查細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)性的操作措施。

檢查細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)性有兩種措施：

1.鏡檢法

將待檢樣品制成菌懸液，滴一點(diǎn)菌液于一蓋玻片上，取一凹窩載玻片，將凹窩對(duì)準(zhǔn)菌懸液蓋在

蓋玻片上，然后將蓋玻片和載玻片一起翻轉(zhuǎn)，讓菌懸液在凹窩上的蓋玻片下.然后在顯微鏡下

觀測，觀測應(yīng)找懸液的邊緣.因細(xì)菌為了更多地接觸空氣，總向水滴的邊緣運(yùn)動(dòng),觀測時(shí)要注意

將細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)與分子的布朗運(yùn)動(dòng)區(qū)別開。

2.半固體穿刺法

將待檢細(xì)菌穿刺接種在半固體試管培養(yǎng)基中，若細(xì)菌僅沿穿刺線生長，闡明細(xì)菌不運(yùn)動(dòng)。若細(xì)

菌沿穿刺線向周圍擴(kuò)散生長，闡明細(xì)菌有運(yùn)動(dòng)性。

05.簡述配制培養(yǎng)基的基本原則:培養(yǎng)基是人工配制的適合不一樣微生物生長繁殖，或用于積

累代謝產(chǎn)物的營養(yǎng)基質(zhì)。因此配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意如下原則：

1.根據(jù)微生物的不一樣選用不一樣的培養(yǎng)基，以滿足微生物對(duì)營養(yǎng)物的需要。如自養(yǎng)型微生物

所規(guī)定營養(yǎng)較簡樸,而異養(yǎng)型微生物營養(yǎng)規(guī)定較復(fù)雜。培養(yǎng)細(xì)菌，放線菌,真菌等各有不一樣的

培養(yǎng)基。

2。注意多種營養(yǎng)物質(zhì)的濃度與配比。微生物生長所需要的營養(yǎng)物質(zhì)往往在合適時(shí)才生長良

好。濃度大往往會(huì)克制微生物的生長。如糖類，多種重金屬鹽類假如濃度太高,也會(huì)影響微生

物的生長。同步多種營養(yǎng)物質(zhì)的濃度比也應(yīng)注意,尤其是C/N比。

3.注意將培養(yǎng)基的pH值控制在?定范圍內(nèi)。為了防止因微生物生長繁殖或積累代謝產(chǎn)物后

影響培養(yǎng)基pH值,常在其中加入磷酸鹽，碳酸鹽,以維持培養(yǎng)基pH值的相對(duì)恒定.

4.同步還應(yīng)考慮培養(yǎng)基的氧化還原電位及原材料的經(jīng)濟(jì)、易購和來源廣泛的原則。

06.試述配制培養(yǎng)基的基本過程及應(yīng)當(dāng)注意的問題。

配制培養(yǎng)基的基本過程是：

1.按培養(yǎng)基的配方稱取多種藥物，用量太少的藥物應(yīng)配制成溶液后再取一定量加入。

2.將多種藥物加水溶解，一般是加所需水量的二分之一。

3.若配固體培養(yǎng)基，按2%的用量稱取瓊脂，用水將瓊脂浸濕?下，用手?jǐn)D去瓊脂中過多的水分,

加入2的溶液中。

4.加熱至瓊脂所有溶解，并補(bǔ)足所需的所有水量。

5.用ImolNaOH和ImolHCL調(diào)整pH至規(guī)定值。

6.用分裝器將培養(yǎng)基分裝入試管或三角瓶中，塞上棉塞并包扎,滅菌后備用。

注意事項(xiàng)：

1.配制過程中，在加熱熔化瓊脂時(shí)，要不停攪拌，以防糊底。

2.分裝時(shí)不要讓培養(yǎng)基沾染試管口或瓶口，以防培養(yǎng)過程中輕易污染雜菌。

07.試述顯微計(jì)數(shù)的基本措施。

顯微計(jì)數(shù)一般用來測微生物單細(xì)胞的數(shù)量，大一點(diǎn)的細(xì)胞如酵母菌用血球計(jì)數(shù)板，小一點(diǎn)的細(xì)

胞如細(xì)菌用細(xì)菌計(jì)數(shù)板。該測數(shù)措施不能區(qū)別死活細(xì)胞，測出的是微生物總的細(xì)胞數(shù)量,

血球計(jì)數(shù)板和細(xì)菌計(jì)數(shù)板構(gòu)造相似，計(jì)數(shù)區(qū)的面積都是lmm2,兩者的差異在于血球計(jì)數(shù)板的

深度為0.1mm。細(xì)菌計(jì)數(shù)板的深度為0.02mm。無論是血球計(jì)數(shù)板還是細(xì)菌計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)區(qū)都

劃為25個(gè)大方格，每個(gè)大方格又劃為16個(gè)小格。因此每小格的體積為l74OOOmm3或

計(jì)數(shù)時(shí)，先在顯微鏡下找到計(jì)數(shù)區(qū)，然后將菌液稀釋到合適濃度,取少許菌液滴在計(jì)數(shù)區(qū)上蓋

上特制蓋玻片，亦可先蓋蓋玻片。然后用吸管將菌液從計(jì)數(shù)板上的溝里加入?？烤旱谋砻?/p>

張力充斥計(jì)數(shù)區(qū)。計(jì)數(shù)時(shí)采用五點(diǎn)取樣法數(shù)數(shù)，即四角各取?種大方格，再在中央取?種大方

格。計(jì)數(shù)時(shí)大方格四面壓線的細(xì)胞只數(shù)兩邊，以防增長數(shù)量。將5個(gè)大方格的菌數(shù)加起來除

以80得出每個(gè)小格的菌數(shù)，再乘以4000即為lmm3的菌數(shù)，再乘上1000即為1ml的菌數(shù)，乘

上稀釋倍數(shù)即為樣品含菌數(shù)。

08.標(biāo)本片上的某一物象，第一次看到后怎樣再次找到它？

要做到這一點(diǎn)，首先取決于顯微鏡的好壞，若顯微鏡上的推進(jìn)器帶有縱橫標(biāo)尺,很輕易做到這

一點(diǎn)。首先記住標(biāo)本片放到推進(jìn)器上的方向，然后記下觀測某一物體時(shí)推進(jìn)器上的縱橫標(biāo)尺

的數(shù)字。如縱3,橫4。當(dāng)標(biāo)本片拿下來后，若要反復(fù)觀測本來的物象，只要按原方向?qū)?biāo)本片

莢在推進(jìn)器上，將推進(jìn)器推進(jìn)到第一次觀測該物體的縱，橫標(biāo)尺數(shù)字縱3,橫4,即可看到第一次

觀測過的物體。

09.試述在光學(xué)顯微鏡下所看到的Anabaenaazo對(duì)ica的重要特性。

Anabaenaazo對(duì)ica的重要特性是：

1.菌體為絲狀體，營養(yǎng)細(xì)胞為綠色,藻絲不扭曲。

2.該菌有異型胞，異型胞間生，無色透明,兩端有極點(diǎn)。

3.厚壁電子無色、大、兩端無極點(diǎn)。

10.革蘭氏染色反應(yīng)的成敗關(guān)鍵是什么？為何革蘭氏染色有十分重要的理論與實(shí)踐意義？

因通過革蘭氏染色,可把幾乎所有的細(xì)菌都提成G+和