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文檔簡(jiǎn)介

第2節(jié)動(dòng)物細(xì)胞工程

第1課時(shí)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)

[學(xué)習(xí)目標(biāo)]1.闡明動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件和過(guò)程。2.簡(jiǎn)述干細(xì)胞在生物醫(yī)學(xué)工程中有廣泛的應(yīng)

用價(jià)值。

一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件和過(guò)程

■梳3教材新知

1.動(dòng)物細(xì)胞工程

(1)常用技術(shù):動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞核移植等。

⑵基礎(chǔ):動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。

2.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)

(1)概念:從動(dòng)物體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個(gè)細(xì)胞,然后在適宜的培養(yǎng)條件下,讓

這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖的技術(shù)。

(2)培養(yǎng)條件

①營(yíng)養(yǎng)

a.合成培養(yǎng)基:將細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(糖類、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素等)按種類和所需量

嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基。

b.天然成分:使用合成培養(yǎng)基時(shí),通常需要加入血清等一些天然成分,原因是血清中含有尚

未全部研究清楚的細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。

c.培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞一般使用液體培養(yǎng)基,也稱為培養(yǎng)液。

②無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境

a.對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行滅菌處理。

b.在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行操作。

c.培養(yǎng)液需定期更換,以便清除代謝物,防止細(xì)胞代謝物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。

③溫度、pH和滲透壓

a.溫度:以36.5℃±0.5℃為宜。

b.pH:以r>H為7.2?7.4為宜。

c.適宜的滲透壓。

④氣體環(huán)境

a.組成:動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需氣體主要有運(yùn)和里2。

b.不同氣體的作用

02:是細(xì)胞代謝所必需的。

C02:維持培養(yǎng)液的pH。

c.培養(yǎng)容器:通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶。

d.培養(yǎng)儀器:含有95%空氣和5%CC)2的混合氣體的CO2培養(yǎng)箱。

(3)培養(yǎng)過(guò)程

林從應(yīng)類小,廠懸浮在培養(yǎng)液中生長(zhǎng)增殖的細(xì)胞

體外培養(yǎng)的_----

動(dòng)物細(xì)胞類型L幽于某些基質(zhì)表面生長(zhǎng)增殖的

①細(xì)胞

②過(guò)程

(4)相關(guān)概念

①細(xì)胞貼壁:懸液中分散的細(xì)胞往往貼附在培養(yǎng)瓶的瓶壁上。

②接觸抑制:當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí),細(xì)胞通常停止分裂增殖的現(xiàn)象。

③原代培養(yǎng):指動(dòng)物組織經(jīng)處理后的初次培養(yǎng)。

④傳代培養(yǎng):分瓶后的細(xì)胞培養(yǎng)。

【特別提醒】區(qū)分兩種“培養(yǎng)”的關(guān)鍵是看用胰蛋白酶處理的對(duì)象。用胰蛋白酶對(duì)剪碎的動(dòng)物

組織進(jìn)行處理,使其分散成單個(gè)細(xì)胞后進(jìn)行培養(yǎng),為原代培養(yǎng);細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中出現(xiàn)接觸抑

制,用胰蛋白酶處理使其從瓶壁上脫離下來(lái)分散成單個(gè)細(xì)胞,然后再用離心法收集,之后,

將收集的細(xì)胞制成細(xì)胞懸浸,分瓶培養(yǎng),為傳代培養(yǎng)。

【判斷正誤】

(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞的全能性()

(2)培養(yǎng)保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細(xì)胞()

(3)懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞直接用離心法收集,貼壁細(xì)胞需要用胰蛋白酶等處理后再用離心法收集

()

(4)培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞的第一代(即第一次細(xì)胞增殖)被稱為原代培養(yǎng)()

答案(1)X(2)X(3)V(4)X

提示(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)未體現(xiàn)動(dòng)物細(xì)胞的全能性,其原理是細(xì)胞增殖。(2)培養(yǎng)保留接觸抑制

的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成單層細(xì)胞。(4)原代培養(yǎng)指動(dòng)物組織經(jīng)處理后的初次培養(yǎng),不一定

是第一次細(xì)胞增殖。

■探究

任務(wù)一:動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)

1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是細(xì)胞增殖。

2.幼齡動(dòng)物的細(xì)胞與老齡動(dòng)物的細(xì)胞比較,分化程度低的細(xì)胞與分化程度高的細(xì)胞比較,哪

些細(xì)胞更易于培養(yǎng)?為什么?

提示幼齡動(dòng)物的細(xì)胞和分化程度低的細(xì)胞更易培養(yǎng)。原因是這些細(xì)胞分裂能力強(qiáng)。

3.進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞傳代培養(yǎng)時(shí)用胰蛋白酶分散細(xì)胞,說(shuō)明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是蛋白質(zhì)。不可以

(填“可以”或“不可以”)使用胃蛋白酶,原因是多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞生存的適宜PH為7.2?7.4,

胃蛋白酶(適宜pH為1.5左右)在此環(huán)境中沒(méi)有活性。

4.“細(xì)胞增殖到互相接觸的時(shí)候,糖蛋白識(shí)別了這種信息,就會(huì)使細(xì)胞停止分裂增殖,出現(xiàn)

接觸抑制的現(xiàn)象”。試結(jié)合上述解釋,舉例說(shuō)明哪種細(xì)胞無(wú)接觸抑制現(xiàn)象,并闡述原因。

提示癌細(xì)胞;癌細(xì)胞的細(xì)胞膜上的糖蛋白等物質(zhì)減少。

「核心歸納」

1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)處理

⑴使細(xì)胞分散開的原因:一是能保證細(xì)胞所需要的營(yíng)養(yǎng)供應(yīng);二是能保證細(xì)胞內(nèi)有害代謝物

的及時(shí)排出。

⑵使用胰蛋白酶時(shí),要控制好作用時(shí)間,因?yàn)橐鹊鞍酌覆粌H能分解細(xì)胞間的蛋白質(zhì),長(zhǎng)時(shí)間

作用還會(huì)分解細(xì)胞膜蛋白等,對(duì)細(xì)胞造成損傷。

(3)動(dòng)物細(xì)胞的整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程中可能多次用到胰蛋白酶或膠原蛋白酶,第一次使用的目的是使

組織細(xì)胞分散開;貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)時(shí)使用的目的是使細(xì)胞從瓶壁上脫離下來(lái),分散成單個(gè)

細(xì)胞,便于分瓶后繼續(xù)培養(yǎng)。

(4)在進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí),懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞直接用離心法收集,貼壁細(xì)胞需要用胰蛋白酶處理,

使之分散成單個(gè)細(xì)胞,再用離心法收集。

2.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的比較

項(xiàng)目動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)

理論基礎(chǔ)細(xì)胞增殖植物細(xì)胞的全能性

無(wú)菌;用機(jī)械的方法或用胰蛋白

培養(yǎng)前處理酶、膠原蛋白酶等處理,將組織無(wú)菌、離體

分散成單個(gè)細(xì)胞

動(dòng)物胚胎或出生不久的幼齡動(dòng)

取材植物幼嫩的部位或花藥等

物的器官或組織

培養(yǎng)基性質(zhì)液體固體

糖類、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素水、礦質(zhì)元素、蔗糖、維生素、植物

培養(yǎng)基成分

和動(dòng)物血清等激素和瓊脂等

細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)生大量細(xì)胞,不形成

結(jié)果可產(chǎn)生新個(gè)體

新個(gè)體

人造皮膚的構(gòu)建、動(dòng)物分泌蛋白快速繁殖、作物脫毒、細(xì)胞產(chǎn)物的工

應(yīng)用

的規(guī)模化生產(chǎn)廠化生產(chǎn)和單倍體育種等

①都需人工條件下的無(wú)菌操作;②都需要適宜的溫度、pH等條件;③都

相同點(diǎn)

進(jìn)行有絲分裂,都不涉及減數(shù)分裂

■落實(shí)

1.某興趣小組開展小鼠原代神經(jīng)元培養(yǎng)的研究,結(jié)果發(fā)現(xiàn)其培養(yǎng)的原代神經(jīng)元生長(zhǎng)緩慢,其

原因不可能是()

A.實(shí)驗(yàn)材料取自小鼠胚胎的腦組織

B.為了防止污染將培養(yǎng)瓶瓶口密封

C.血清經(jīng)過(guò)高溫處理后加入培養(yǎng)基

D.所使用的培養(yǎng)基呈弱酸性

答案A

解析小鼠胚胎的腦組織中含有豐富的原代神經(jīng)元,細(xì)胞增殖能力強(qiáng),不會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞生長(zhǎng)緩

慢的現(xiàn)象,A符合題意;密封培養(yǎng)瓶瓶口會(huì)使培養(yǎng)液中缺氧,影響細(xì)胞的有氧呼吸,造成供

能不足,可能導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢,B不符合題意;血清經(jīng)過(guò)高溫處理后,其中的活性成分變

性,失去原有功能,細(xì)胞的生存環(huán)境嚴(yán)重惡化,可能導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢,C不符合題意;小

鼠細(xì)胞生活的內(nèi)環(huán)境為弱堿性,所使用的培養(yǎng)基呈弱酸性,導(dǎo)致細(xì)胞生存的環(huán)境惡劣,可能

導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢,D不符合題意。

2.(2024?黑吉遼,14)從小鼠胚胎中分離獲取胚胎成纖維細(xì)胞進(jìn)行貼壁培養(yǎng),在傳代后的不同

時(shí)間點(diǎn)檢測(cè)細(xì)胞數(shù)目,結(jié)果如圖。下列敘述正確的是()

(

?o5

§?1

<)-

/

Q4

gO

?

012345

時(shí)間/d

A.傳代培養(yǎng)時(shí),培養(yǎng)皿需密封防止污染

B.選取①的細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)比②更合理

C.直接用離心法收集細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)

D.細(xì)胞增長(zhǎng)進(jìn)入平臺(tái)期可能與細(xì)胞密度過(guò)大有關(guān)

答案D

解析傳代培養(yǎng)時(shí)需要營(yíng)造無(wú)菌、無(wú)毒以及95%空氣+5%CCh的氣體環(huán)境,而非密封,A錯(cuò)

誤;①的細(xì)胞還未快速增長(zhǎng),此時(shí)進(jìn)行傳代培養(yǎng)沒(méi)有意義,應(yīng)選②的細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng),B

錯(cuò)誤;對(duì)于貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí),先需要用胰蛋白酶等處理,使之分散為單個(gè)細(xì)

胞,然后再用離心法收集,之后,將收集的細(xì)胞制成細(xì)胞懸液,分瓶培養(yǎng),C錯(cuò)誤。

二、干細(xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用

■梳3也?教材新知

1.來(lái)源:早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中。

2.類型:胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞等。

3.胚胎干細(xì)胞(簡(jiǎn)稱ES細(xì)胞)

(1)概念:存在于早期胚胎中,具有分化為成年動(dòng)物體內(nèi)的任何一種類型的細(xì)胞,并進(jìn)一步形

成機(jī)體的所有組織和器官甚至個(gè)體的潛能。

(2)局限:胚胎干細(xì)胞必須從胚胎中獲取,這涉及倫理問(wèn)題,因而限制了它在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用。

(3)成果:目前科學(xué)家已經(jīng)分離了兔、牛、猴和人等的ES細(xì)胞,并證明了ES細(xì)胞可以在體外

分化成心肌細(xì)胞、神經(jīng)元和造血干細(xì)胞等細(xì)胞。

4.成體干細(xì)胞

(1)概念:成體組織或器官內(nèi)的干細(xì)胞。

一骨髓中的造血干細(xì)胞

(2)類型I神經(jīng)系統(tǒng)中的神經(jīng)干細(xì)胞

〔睪丸中的精原干細(xì)胞

(3)特點(diǎn):具有組織特異性,只能分化成特定的細(xì)胞或組織,不具有發(fā)育成完整個(gè)體的能力。

(4)作用:有著自我更新能力及分化潛能的干細(xì)胞,與組織、器官的發(fā)育、再生和修復(fù)等密切

相關(guān)。

(5)應(yīng)用

①造血干細(xì)胞:治療目血病及一些惡性腫瘤放療或化療后引起的造血系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)功能障

礙等疾病。

②神經(jīng)干細(xì)胞:治療神經(jīng)組織損傷和神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病(如帕金森病、阿爾茨海默病等)。

5.誘導(dǎo)多能干細(xì)胞

(1)概念:通過(guò)體外誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞等,獲得類似胚胎干細(xì)胞的一種細(xì)胞,被稱為誘導(dǎo)多能干

細(xì)胞(簡(jiǎn)稱iPS細(xì)胞)。

(2)應(yīng)用:治療小鼠的鐮狀細(xì)胞貧血;用iPS細(xì)胞治療阿爾茨海默病、心血管疾病等領(lǐng)域的研

究也取得了新進(jìn)展。

(3)優(yōu)點(diǎn):誘導(dǎo)過(guò)程無(wú)須破壞胚胎;iPS細(xì)胞可以來(lái)源于病人自身的體細(xì)胞,將它移植回病人

體內(nèi)后,理論上可以避免免疫排斥反應(yīng)。

(4)制備方法:借助載體將特定基因?qū)爰?xì)胞中,直接將特定蛋白導(dǎo)入細(xì)胞中或者用小分子化

合物等來(lái)誘導(dǎo)形成iPS細(xì)胞。

(5)來(lái)源:成纖維細(xì)胞、已分化的T細(xì)胞、B細(xì)胞等。

【判斷正誤】

(1)干細(xì)胞都來(lái)源于早期胚胎()

(2)iPS細(xì)胞可以來(lái)源于病人自身的體細(xì)胞,將它移植回病人體內(nèi)后,可以避免免疫排斥反應(yīng)

()

(3)不同類型的干細(xì)胞,它們的分化潛能完全相同()

答案(1)X(2)V(3)X

提示(1)干細(xì)胞存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中,包括胚胎干細(xì)胞和成

體干細(xì)胞等。(3)不同類型的干細(xì)胞,它們的分化潛能是有差別的,如胚胎干細(xì)胞的分化潛能

大于成體干細(xì)胞。

■探究核心知識(shí)

任務(wù)二:誘導(dǎo)多能干細(xì)胞

如圖為iPS細(xì)胞的培養(yǎng)和利用過(guò)程,請(qǐng)據(jù)圖回答問(wèn)題:

細(xì)胞發(fā)

、生轉(zhuǎn)化

取成纖維細(xì)胞等關(guān)因子

病氣經(jīng)

iPS細(xì)胞

胰島細(xì)胞21/

過(guò)五>ffi腸上皮細(xì)胞

肝細(xì)胞心肌細(xì)胞

(1)1-2過(guò)程的實(shí)質(zhì)是什么?

提示基因的選擇性表達(dá)。

(2)誘導(dǎo)多能干細(xì)胞用于治療人類的某些頑癥的原理是什么?

提示誘導(dǎo)多能干細(xì)胞可以被誘導(dǎo)分化形成新的組織細(xì)胞,經(jīng)移植可使壞死或退化部位得以

修復(fù)并恢復(fù)正常功能。

(3)誘導(dǎo)多能干細(xì)胞通過(guò)體外誘導(dǎo)分化,可以培育出人造器官,從而解決供體器官不足的問(wèn)題。

又由于人造器官是病人自身體細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)分化形成的,所以可以避免免疫排斥反應(yīng)。

■落實(shí)思維方法

3.研究人員研究肥胖機(jī)理時(shí)發(fā)現(xiàn)了一種與脂肪細(xì)胞的分化形成有關(guān)的蛋白質(zhì)M,其細(xì)胞分

化過(guò)程如圖所示。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()

自廖述紅肌肉細(xì)胞

間充質(zhì)細(xì)胞受二

干細(xì)胞-一

磁福新脂肪細(xì)胞

A.已分化的細(xì)胞不可能繼續(xù)分化為其他類型的細(xì)胞

B.肌肉細(xì)胞與脂肪細(xì)胞中均含控制蛋白質(zhì)M合成的基因

C.促進(jìn)蛋白質(zhì)M的合成是解決肥胖問(wèn)題的一條途徑

D.間充質(zhì)細(xì)胞是一種成體干細(xì)胞,其分化過(guò)程具有組織特異性

答案A

解析已分化的細(xì)胞也可能繼續(xù)分化為其他類型的細(xì)胞,如人體的干細(xì)胞可分化為間充質(zhì)細(xì)

胞,間充質(zhì)細(xì)胞又分化為肌肉細(xì)胞或脂肪細(xì)胞,A錯(cuò)誤。

4.(多選)肌萎縮側(cè)索硬化癥即“漸凍癥”,該病病因之一是突變的基因?qū)е掠卸疚镔|(zhì)積累,

使運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元損傷。最新研究結(jié)果表明,利用誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS細(xì)胞)制作前驅(qū)細(xì)胞,然后

移植給漸凍癥實(shí)驗(yàn)鼠,能延長(zhǎng)其壽命。下列關(guān)于誘導(dǎo)多能干細(xì)胞的敘述,正確的是()

A.iPS細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá),細(xì)胞種類增多

B.iPS細(xì)胞分化成的多種細(xì)胞中所有核酸均相同,蛋白質(zhì)卻不完全相同

C.若將突變的相關(guān)基因替換,或許可以起到治療該病的作用

D.經(jīng)體外誘導(dǎo)產(chǎn)生造血干細(xì)胞,在小鼠骨髓中能夠增殖分化出B細(xì)胞

答案ACD

解析細(xì)胞分化形成的多種細(xì)胞中DNA相同,但mRNA不完全相同,蛋白質(zhì)也不完全相同,

B錯(cuò)誤;B細(xì)胞是由造血干細(xì)胞增殖分化形成的,經(jīng)體外誘導(dǎo)產(chǎn)生的造血干細(xì)胞,在小鼠骨

髓中能夠增殖分化出B細(xì)胞,D正確。

-網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

概念

細(xì)

--一

動(dòng)

胚胎干細(xì)胞物

原理

麻F

時(shí)

一.適宜的營(yíng)養(yǎng)

成體干細(xì)胞『

過(guò)程

養(yǎng)

其無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境

條件

誘導(dǎo)多能培

應(yīng)

干細(xì)胞用適宜的溫度、pH和

應(yīng)用一滲透壓

適宜的氣體環(huán)境

課時(shí)對(duì)點(diǎn)練[分值:100分]

第1?3題,每題5分;第4?12題,每題6分,共69分。

10對(duì)點(diǎn)訓(xùn)練

題組一動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件

1.下列哪項(xiàng)條件不是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需要的()

A.無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境

B.充足的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)

C.適宜的溫度和pH

D.95%的空氣和5%的氧氣

答案D

解析動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要一定的氣體環(huán)境,95%的空氣和5%的CO?。

2.下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述,錯(cuò)誤的是()

A.培養(yǎng)過(guò)程中,應(yīng)定期更換培養(yǎng)液,以便清除細(xì)胞代謝物

B.為了防止培養(yǎng)過(guò)程中雜菌的污染,可向培養(yǎng)液中加入適量的干擾素

C.培養(yǎng)過(guò)程中,添加CO2的目的是維持培養(yǎng)液的pH

D.通常需要在合成培養(yǎng)基中加入血清等天然成分

答案B

解析為了防止培養(yǎng)過(guò)程中雜菌的污染,可向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素,B錯(cuò)誤。

3.(2024?無(wú)錫高二期中)關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件,下列敘述正確的是()

A.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基中加入血清的主要目的是補(bǔ)充細(xì)胞所需的未知成分

B.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可以在液體培養(yǎng)基或固體培養(yǎng)基中進(jìn)行

C.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要在無(wú)菌、無(wú)毒環(huán)境中進(jìn)行,該條件只受環(huán)境因素的影響

D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)無(wú)需考慮滲透壓?jiǎn)栴}

答案A

解析動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)一般使用液體培養(yǎng)基,B錯(cuò)誤;動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),培養(yǎng)環(huán)境必須保證無(wú)

菌、無(wú)毒,該條件除了受環(huán)境因素的影響外,還會(huì)受到自身因素的影響,如細(xì)胞代謝廢物積

累會(huì)對(duì)細(xì)胞自身造成危害,C錯(cuò)誤;動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要考慮滲透壓?jiǎn)栴},培養(yǎng)液的滲透壓的

高低會(huì)影響細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能,D錯(cuò)誤。

題組二動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程

4.下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述,錯(cuò)誤的是()

A.用于培養(yǎng)的細(xì)胞大都取自胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織

B.選用胰蛋白酶處理細(xì)胞時(shí),可能會(huì)對(duì)動(dòng)物細(xì)胞造成損傷

C.傳代培養(yǎng)時(shí),懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞直接用離心法收集,無(wú)須再用酶處理

D.體外培養(yǎng)的細(xì)胞既能貼壁生長(zhǎng)又能懸浮生長(zhǎng),都會(huì)發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象

答案D

5.實(shí)驗(yàn)小鼠皮膚細(xì)胞培養(yǎng)的基本過(guò)程如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是()

同匐甲一值囤乙.依網(wǎng)丙J培養(yǎng)|丁」培養(yǎng)|

|小鼠)1組織I1細(xì)胞)〔細(xì)胞~1細(xì)胞2)

A.培養(yǎng)液中往往添加一定量抗生素,以防止培養(yǎng)過(guò)程被污染

B.乙過(guò)程對(duì)皮膚組織可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶等處理

C.丙過(guò)程屬于原代培養(yǎng),此過(guò)程的細(xì)胞在培養(yǎng)液中懸浮生長(zhǎng)

D.丁過(guò)程屬于傳代培養(yǎng),培養(yǎng)的皮膚細(xì)胞可能會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象

答案C

6.(2022?江蘇,14)航天員葉光富和王亞平在天宮課堂上展示了培養(yǎng)的心肌細(xì)胞跳動(dòng)的視頻。

下列相關(guān)敘述正確的是()

A.培養(yǎng)心肌細(xì)胞的器具和試劑都要先進(jìn)行高壓蒸汽滅菌

B.培養(yǎng)心肌細(xì)胞的時(shí)候既需要氧氣也需要二氧化碳

C.心肌細(xì)胞在培養(yǎng)容器中通過(guò)有絲分裂不斷增殖

D.心肌細(xì)胞在神經(jīng)細(xì)胞發(fā)出的神經(jīng)沖動(dòng)的支配下跳動(dòng)

答案B

解析培養(yǎng)心肌細(xì)胞的器具要先進(jìn)行高壓蒸汽滅菌,但是試劑并不都需要高壓蒸汽滅菌,如

動(dòng)物血清不能進(jìn)行高壓蒸汽滅菌,否則會(huì)使其中的成分失活,A錯(cuò)誤;培養(yǎng)心肌細(xì)胞的時(shí)候

既需要氧氣(細(xì)胞代謝所必需的),也需要二氧化碳(維持培養(yǎng)液的pH),B正確;心肌細(xì)胞高

度分化,不能進(jìn)行有絲分裂,C錯(cuò)誤。

題組三干細(xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用

7.下列有關(guān)干細(xì)胞的敘述,錯(cuò)誤的是()

A.干細(xì)胞可來(lái)源于早期胚胎、骨髓和臍帶血等

B.胚胎干細(xì)胞在體外培養(yǎng)能增殖但不能被誘導(dǎo)分化

C.造血干細(xì)胞具有分化出多種血細(xì)胞的能力,可用于治療白血病

D.iPS細(xì)胞可用于阿爾茨海默病、心血管疾病治療的研究

答案B

解析若給予適宜的環(huán)境條件,胚胎干細(xì)胞在體外也能被誘導(dǎo)分化,B錯(cuò)誤。

8.如圖為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS細(xì)胞)用于治療糖尿病的示意圖,下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()

糖尿病患者一成纖維細(xì)胞蠹,靠.iPS細(xì)胞

\\

移植^\化

'胰島細(xì)胞/

A.干細(xì)胞存在于多種組織和器官中,包括胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞等

B.誘導(dǎo)iPS細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是動(dòng)物細(xì)胞核具有發(fā)育的全能性

C.除圖中的成纖維細(xì)胞外,已分化的T細(xì)胞和B細(xì)胞等均能被誘導(dǎo)為iPS細(xì)胞

D.將分化得到的胰島細(xì)胞移植回病人體內(nèi)治療,理論上可避免免疫排斥反應(yīng)

答案B

解析誘導(dǎo)iPS細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá),B錯(cuò)誤。

1日綜合強(qiáng)化

9.常規(guī)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)在平面條件下培養(yǎng)出的單層細(xì)胞不同于人體內(nèi)的組織結(jié)構(gòu),在藥物研究

中有一定局限性。三維細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是在體外為細(xì)胞提供類似體內(nèi)的生長(zhǎng)環(huán)境,使細(xì)胞形成

三維立體結(jié)構(gòu),更有利于藥理學(xué)的研究。下列相關(guān)敘述正確的是()

A.細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,混合氣體中CO2的主要作用是刺激細(xì)胞呼吸

B.定期更換培養(yǎng)液的主要目的是防止培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)胞被雜菌污染

C.與常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)相比,三維細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)不存在接觸抑制現(xiàn)象

D.三維細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可以用于檢測(cè)藥物對(duì)組織內(nèi)部細(xì)胞的作用

答案D

解析細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,氣體環(huán)境中的CO?的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH,A錯(cuò)誤;定期

更換培養(yǎng)液,以便清除代謝物,防止細(xì)胞代謝物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害,B錯(cuò)誤;三維細(xì)

胞培養(yǎng)技術(shù)也存在接觸抑制現(xiàn)象,C錯(cuò)誤。

10.(多選)動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí),通常要在培養(yǎng)基中補(bǔ)充一定濃度的某些物質(zhì)。如圖是血清

對(duì)正常細(xì)胞和癌細(xì)胞培養(yǎng)影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,能從該圖獲得的結(jié)論是()

4細(xì)胞數(shù),癌細(xì)胞(有血清)

癌細(xì)胞(無(wú)血清)

—?正常細(xì)胞(有血清)

------------正常細(xì)胞(無(wú)血清)

°培養(yǎng)時(shí)間

A.正常細(xì)胞與癌細(xì)胞的增殖速率相同

B.有無(wú)血清對(duì)正常細(xì)胞培養(yǎng)的影響較大

C.培養(yǎng)基中補(bǔ)充血清有助于正常細(xì)胞的培養(yǎng)

D.培養(yǎng)基中是否補(bǔ)充血清對(duì)癌細(xì)胞的培養(yǎng)影響不大

答案BCD

解析分析圖中曲線可知,對(duì)癌細(xì)胞來(lái)說(shuō),相同培養(yǎng)時(shí)間內(nèi),培養(yǎng)基中有無(wú)血清,其細(xì)胞數(shù)

目相差不大,說(shuō)明培養(yǎng)基中有無(wú)血清對(duì)癌細(xì)胞的培養(yǎng)影響不大,D符合題意;對(duì)正常細(xì)胞來(lái)

說(shuō),在相同的培養(yǎng)時(shí)間內(nèi),有血清的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)目遠(yuǎn)遠(yuǎn)多于沒(méi)有血清的培養(yǎng)基中

培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)目,說(shuō)明有無(wú)血清對(duì)正常細(xì)胞的培養(yǎng)影響較大,B、C符合題意;在相同條件

和相同的培養(yǎng)時(shí)間內(nèi),癌細(xì)胞和正常細(xì)胞的數(shù)目差距較大,增殖速率不相同,正常細(xì)胞達(dá)到

一定的數(shù)目后不再增加,而癌細(xì)胞卻能不斷增加,A不符合題意。

11.(多選)卡伯為廣譜抗腫瘤藥,通過(guò)抑制DNA復(fù)制而起效??ú⑷苡谒?,其水溶液在光

下不穩(wěn)定,溶液中的cr也會(huì)促進(jìn)其分解。臨床上用5%葡萄糖溶液與卡柏制成卡伯試劑后注

射治療,相關(guān)實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)思路如圖。下列說(shuō)法正確的是()

?①組:5%葡萄糖溶液適宜條件

宮頸癌細(xì)網(wǎng)下培養(yǎng)一

?②組:卡鉗試劑

一段時(shí)間,

動(dòng)物細(xì)胞?③組:DNA復(fù)制抑制劑-定期檢查

.培養(yǎng)液|④組:卡鉆試劑+DNA各組癌細(xì)

'復(fù)制抑制劑胞數(shù)量

A.本實(shí)驗(yàn)的自變量是卡粕試劑和DNA復(fù)制抑制劑的有無(wú)

B.本實(shí)驗(yàn)可用生理鹽水代替5%葡萄糖溶液來(lái)配制卡粕試劑

C.本實(shí)驗(yàn)預(yù)期結(jié)果為①與④組數(shù)據(jù)接近,②與③組數(shù)據(jù)接近

D.宮頸癌細(xì)胞無(wú)接觸抑制因而培養(yǎng)時(shí)可形成多層細(xì)胞

答案AD

解析由題意可知,溶液中的C「會(huì)促進(jìn)卡箱分解,因此不可用生理鹽水代替5%葡萄糖溶液

來(lái)配制卡箱試劑,B錯(cuò)誤;①組不會(huì)抑制DNA的復(fù)制,④組會(huì)抑制DNA的復(fù)制,所以①與

④組數(shù)據(jù)不相近,C錯(cuò)誤。

12.(多選)2012年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)獲得者發(fā)現(xiàn),利用逆轉(zhuǎn)錄病毒將。cS/4等4個(gè)關(guān)鍵

基因?qū)胍逊只捏w細(xì)胞中并表達(dá),可使這個(gè)細(xì)胞成為類似干細(xì)胞的誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS細(xì)

胞)。如圖為該技術(shù)在人體細(xì)胞中的實(shí)驗(yàn)示意圖,下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()

4個(gè)關(guān)鍵基因

神經(jīng)細(xì)胞

肝臟細(xì)胞

整灌事心肌細(xì)胞

A.由iPS細(xì)胞產(chǎn)生其他種類細(xì)胞的過(guò)程稱為細(xì)胞增殖

B.利用患者的iPS細(xì)胞對(duì)其自身受損器官進(jìn)行修復(fù),與傳統(tǒng)器官移植相比,成功率更高

C.iPS細(xì)胞的增殖難以控制,具有衰老細(xì)胞的特征

D.與ES細(xì)胞相比,iPS細(xì)胞用于再生醫(yī)學(xué)可回避倫理爭(zhēng)議

答案AC

解析由iPS細(xì)胞產(chǎn)生其他種類細(xì)胞的過(guò)程稱為細(xì)胞分化,A錯(cuò)誤;用該技術(shù)得到的新生器

官替換供體病變器官,屬于自體移植,理論上可以不發(fā)生免疫排斥反應(yīng),可以大大提高器官

移植的成功率,B正確;iPS細(xì)胞具有與干細(xì)胞相似的分化潛力,說(shuō)明iPS細(xì)胞分化程度低,

不易衰老,C錯(cuò)誤;與ES細(xì)胞相比,iPS細(xì)胞的誘導(dǎo)過(guò)程無(wú)須破壞胚胎,因而用于再生醫(yī)學(xué)

可以回避倫理爭(zhēng)議,D正確。

13.(每空3分,共15分)(2024.常熟高二期中)動(dòng)物器官的體外培養(yǎng)技術(shù)對(duì)研究器官的生理、

病理過(guò)程及其機(jī)制的意義重大。如圖是一個(gè)新生小鼠的肝臟小塊培養(yǎng)裝置示意圖,請(qǐng)回答下

列問(wèn)題:

T-玻璃蓋

肝臟

養(yǎng)

⑴體外培養(yǎng)肝臟小塊要滿足的條件:適宜的溫度、pH、滲透壓、氣體環(huán)境、營(yíng)養(yǎng)和

(2)氣室中充入5%CO2的主要作用是。

(3)有機(jī)物X有毒性,可誘發(fā)染色體斷裂。利用如圖所示裝置和下列提供的材料用具,探究肝

臟小塊對(duì)有機(jī)物X是否具有解毒作用。

材料用具:

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