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職業(yè)教育醫(yī)學(xué)生物技術(shù)專業(yè)教學(xué)資源庫(kù)重組DNA技術(shù)的基本步驟載體的選擇與構(gòu)建職業(yè)教育醫(yī)學(xué)生物技術(shù)專業(yè)教學(xué)資源庫(kù)1.目的基因的制備
2.載體的選擇與構(gòu)建
3.目的基因與載體的連接4.重組DNA導(dǎo)入宿主細(xì)胞
5.重組DNA的篩選與鑒定
6.外源基因的表達(dá)、分離與純化重組DNA技術(shù)的基本步驟職業(yè)教育醫(yī)學(xué)生物技術(shù)專業(yè)教學(xué)資源庫(kù)
載體的選擇是構(gòu)建過(guò)程中的首要任務(wù),它直接影響到后續(xù)實(shí)驗(yàn)的成敗。載體的選擇職業(yè)教育醫(yī)學(xué)生物技術(shù)專業(yè)教學(xué)資源庫(kù)1.根據(jù)獲得的產(chǎn)物不同(目的基因或蛋白質(zhì))選擇不同的載體(克隆載體、表達(dá)載體);2.根據(jù)導(dǎo)入目的基因片段的大小不同選擇不同類型的載體(質(zhì)粒、噬菌體、柯斯質(zhì)粒);載體選擇的影響因素職業(yè)教育醫(yī)學(xué)生物技術(shù)專業(yè)教學(xué)資源庫(kù)3.載體的復(fù)制能力:選擇能夠在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定復(fù)制并維持高拷貝數(shù)的載體;4.載體的安全性:確保載體不會(huì)對(duì)宿主細(xì)胞或?qū)嶒?yàn)環(huán)境造成危害。載體選擇的影響因素職業(yè)教育醫(yī)學(xué)生物技術(shù)專業(yè)教學(xué)資源庫(kù)載體的構(gòu)建是將目的基因片段插入到選定載體中的過(guò)
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