2025年粵人版選擇性必修3生物下冊月考試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年粵人版選擇性必修3生物下冊月考試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共5題，共10分)1、下列有關(guān)DNA連接酶的說法，正確的是（）A.DNA連接酶和限制酶的作用恰好相反，DNA連接酶可以將限制酶切開的雙鏈DNA片段“縫合”起來B.DNA連接酶和DNA聚合酶一樣能連接單鏈DNA片段C.EcoliDNA連接酶可以連接有平末端的DNA片段，也能連接有黏性末端的DNA片段D.T4DNA連接酶只能連接有平末端的DNA片段2、有關(guān)生物技術(shù)的安全性的敘述，不合理的是（）A.轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物對于解決糧食、能源等問題起到了積極作用，同時也存在一定風(fēng)險B.轉(zhuǎn)基因耐儲藏番茄延長了番茄的貨架期，對環(huán)境不存在任何安全性問題C.有關(guān)農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全法規(guī)的制定既維護(hù)了消費者的權(quán)益，又最大程度地保證了轉(zhuǎn)基因技術(shù)的安全性D.生物技術(shù)雖然推動了社會的發(fā)展，但應(yīng)科學(xué)控制、合理使用3、在做“分離分解尿素的細(xì)菌”實驗時，A同學(xué)從對應(yīng)培養(yǎng)基中篩選出大約150個菌落，而其他同學(xué)只選擇出大約50個菌落。下列有關(guān)敘述不正確的是（）A.A同學(xué)出現(xiàn)這種結(jié)果的原因是土樣不同B.可以將A同學(xué)配制的培養(yǎng)基在不加土樣的情況下進(jìn)行培養(yǎng)作為空白對照，以證明培養(yǎng)基是否受到污染C.讓其他同學(xué)用與A同學(xué)一樣的土壤進(jìn)行實驗，如果結(jié)果與A同學(xué)一樣，則可證明A同學(xué)無誤D.B選項的實驗思路遵循了實驗的對照原則，C選項也有對照實驗4、CD47是一種跨膜糖蛋白；它可與巨噬細(xì)胞表面的信號調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合，從而抑制巨噬細(xì)胞的吞噬作用。肺癌；結(jié)腸癌等多種腫瘤細(xì)胞表面的CD47含量比正常細(xì)胞高1．6~5倍，導(dǎo)致吞噬細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞的清除效果減弱?？茖W(xué)家推測，抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對巨噬細(xì)胞的抑制作用，為此他們按照如下流程進(jìn)行了實驗。下列說法錯誤的是（）

A.多次進(jìn)行步驟①的目的是獲得更多分泌抗CD47抗體的漿細(xì)胞B.步驟②后可篩選出既能產(chǎn)生抗CD47抗體又能大量增殖的細(xì)胞C.實驗組中巨噬細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的共培養(yǎng)體系需放入CO2培養(yǎng)箱D.對照組中吞噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)顯著高于實驗組可驗證上述推測5、在實驗室培養(yǎng)微生物需要人工為微生物提供各種營養(yǎng)和適宜的環(huán)境條件。下列關(guān)于培養(yǎng)基配制的說法正確的是（）A.培養(yǎng)基中必須要添加瓊脂B.培養(yǎng)基中需要碳源、氮源、水和無機鹽齊全C.培養(yǎng)基需要進(jìn)行滅菌處理D.配制培養(yǎng)細(xì)菌的培養(yǎng)基，需要將pH調(diào)至酸性評卷人得分二、多選題(共7題，共14分)6、在紀(jì)錄片《舌尖上的中國》中多次講到了利用不同微生物發(fā)酵來制作美味食品。桑葚果實富含多種營養(yǎng)成分及黃酮類化合物（一般難溶或不溶于水，易溶于乙醇等有機溶劑），目前以桑葚為原料開發(fā)的桑葚酒深受大眾歡迎。醬豆是人們利用大豆制作的一道地方美食，具體做法如下：大豆煮熟→霉菌發(fā)酵→加入蔬菜→加鹽、加調(diào)味酒和香辛料→乳酸發(fā)酵。下列相關(guān)內(nèi)容的敘述，錯誤的是（）A.桑葚酒制作時榨出的果汁需經(jīng)過高壓蒸汽滅菌后，才能裝進(jìn)發(fā)酵瓶密閉發(fā)酵B.若要提取桑葚中的黃酮苷，可以采用萃取的方法C.醬豆最后在環(huán)境溫暖、氧氣充足的條件下發(fā)酵形成D.醬豆中有機物的種類和含量均減少7、生物興趣小組的三位同學(xué)吃冰激凌后有兩人嚴(yán)重腹瀉，他們懷疑冰激凌中大腸桿菌超標(biāo)。衛(wèi)生部門規(guī)定1000mL自來水37℃培養(yǎng)48h后大桿菌菌落數(shù)不能超過3個，于是他們設(shè)計實驗對此冰激凌進(jìn)行檢測。下列實驗操作，不合理的是（）A.再去小店買一個同樣品牌的同種冰激凌，然后配制伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基（該培養(yǎng)基可用來鑒別大腸桿菌），滅菌、倒平板B.取10mL剛?cè)诨谋ち枳鳛樵哼M(jìn)行梯度稀釋、稀釋倍數(shù)為1×10～1×105C.取各個稀釋濃度的冰激凌液各0.lmL，用涂布平板法進(jìn)行接種，每個濃度涂3個平板，共培養(yǎng)18個平板，在適宜溫度下培養(yǎng)48hD.統(tǒng)計菌落數(shù)目，以菌落數(shù)代表大腸桿菌數(shù)會導(dǎo)致統(tǒng)計結(jié)果比實際值偏小8、下圖表示動物細(xì)胞培養(yǎng)的基本流程。有關(guān)敘述正確的是（）

A.在C瓶中進(jìn)行的細(xì)胞培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)B.培養(yǎng)瓶D可以通過松蓋處理滿足細(xì)胞培養(yǎng)的氣體環(huán)境需要C.培養(yǎng)瓶D無需放置在CO2培養(yǎng)箱中，但需要保持恒溫D.D瓶細(xì)胞出現(xiàn)接觸抑制時，用胰蛋白酶處理，再用離心法收集細(xì)胞分瓶培養(yǎng)9、某實驗小組利用下圖所示質(zhì)粒和目的基因來構(gòu)建基因表達(dá)載體，將目的基因?qū)氪竽c桿菌細(xì)胞并表達(dá)。下列敘述正確的是（）

A.圖中的質(zhì)粒用酶A切割后，會產(chǎn)生4個游離的磷酸基團(tuán)B.在構(gòu)建重組質(zhì)粒時，可用酶A和酶C切割質(zhì)粒和目的基因C.成功導(dǎo)入目的基因的大腸桿菌可在含四環(huán)素的培養(yǎng)基中生長D.若用酶B和酶C切割，可以避免質(zhì)粒的自身環(huán)化10、大腸桿菌能在基本培養(yǎng)基上生長；X射線照射后產(chǎn)生的代謝缺陷型大腸桿菌不能在基本培養(yǎng)基上生長，但可以在完全培養(yǎng)基上生長。利用夾層培養(yǎng)法可篩選代謝缺陷型大腸桿菌，具體的操作是：在培養(yǎng)皿底部倒一層基本培養(yǎng)基，冷凝后倒一層含經(jīng)X射線處理過的菌液的基本培養(yǎng)基，冷凝后再倒一層基本培養(yǎng)基。培養(yǎng)一段時間后，對首次出現(xiàn)的菌落做好標(biāo)記。然后再向皿內(nèi)倒一層完全培養(yǎng)基，再培養(yǎng)一段時間后，會長出形態(tài)較小的新菌落。下列說法正確的是（）A.X射線誘發(fā)染色體變異進(jìn)而導(dǎo)致大腸桿菌代謝缺陷B.首次出現(xiàn)的菌落做標(biāo)記時應(yīng)標(biāo)記在皿蓋上C.夾層培養(yǎng)法可避免細(xì)菌移動或菌落被完全培養(yǎng)基沖散D.形態(tài)較小的新菌落可能是代謝缺陷型大腸桿菌11、玉米秸稈轉(zhuǎn)化為綠色能源酒精是解決能源危機的措施之一，具體的工藝流程如圖所示。下列敘述正確的是（）

A.用酸或堿預(yù)處理有利于酶與底物充分接觸，提高催化效率B.步驟③中，酵母菌在發(fā)酵初期更多分布在發(fā)酵液的上層C.隨培養(yǎng)次數(shù)的增加，分離出的菌落類型越少表示純度越高，其遺傳基因型越穩(wěn)定D.發(fā)酵過程中酒精濃度升高會抑制酵母菌代謝活動，同時使發(fā)酵液pH降低，發(fā)酵停止12、發(fā)酵工程與農(nóng)業(yè)、食品工業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)及其他工業(yè)生產(chǎn)有著密切的聯(lián)系。下列對發(fā)酵工程及其應(yīng)用的敘述，正確的是（）A.啤酒的工業(yè)化生產(chǎn)過程中，酒精的產(chǎn)生積累主要在后發(fā)酵階段完成B.食品添加劑雖能改善食品的口味、色澤和品質(zhì)，但會降低食品的營養(yǎng)C.將乙肝病毒的抗原基因轉(zhuǎn)入酵母菌，再結(jié)合發(fā)酵工程可生產(chǎn)乙肝疫苗D.利用放線菌產(chǎn)生的井岡霉素防止水稻枯紋病是生物防治的有效手段評卷人得分三、填空題(共9題，共18分)13、一般包括______、______等技術(shù)14、體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問題：

克隆動物存在著健康問題、表現(xiàn)出______缺陷等。15、平板劃線法是通過____________在_______________培養(yǎng)基表面______________的操作，將__________的菌種______________分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離到由____________繁殖而來的肉眼可見的_______________，這就是_______________________。稀釋涂布平板法則是將菌液進(jìn)行一系列的______________，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到_____________培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成____________，從而能在培養(yǎng)基表面形成___________________。16、1.基因檢測引發(fā)的倫理問題。

（1）基因身份證：基因身份證指把個人的_____和_____檢測出來；記錄在磁卡上，而做成的個人基因身份證。

（2）基因檢測引發(fā)的爭論①_____②_____③_____④_____⑤_____⑥_____

。項目。

反對。

支持。

技術(shù)方面。

目前人類對①及基因間的相互作用尚缺乏足夠的認(rèn)識；通過基因檢測達(dá)到②的目的是很困難的；基因檢測結(jié)果會給受檢者帶來巨大的③。

通過基因檢測可以對遺傳性疾病及早采?、?；適時進(jìn)行治療，達(dá)到挽救患者生命的目的。

道德方面。

基因資訊的泄露造成⑤；如個人婚姻困難；人際關(guān)系疏遠(yuǎn)，更明顯的是造成一支遺傳性失業(yè)大軍。

對于基因歧視現(xiàn)象；可以通過正確的科學(xué)知識傳播；⑥教育和立法得以解決。

2.試管嬰兒與設(shè)計試管嬰兒的比較①_____②_____③_____④_____

。項目。

設(shè)計試管嬰兒。

試管嬰兒。

技術(shù)手段。

胚胎移植前①（填“需要”或“不需要”）進(jìn)行遺傳學(xué)診斷這一環(huán)節(jié)。

②（填“需要”或‘不需要”）進(jìn)行遺傳學(xué)診斷。

實踐應(yīng)用。

用于白血??；貧血病等遺傳性疾病的預(yù)測。

解決不孕不育問題。

聯(lián)系。

二者都是③受精；體外進(jìn)行早期胚胎發(fā)育，再進(jìn)行胚胎移植，從生殖方式上都為④

17、統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目_____________。這是因為______________________。因此，統(tǒng)計結(jié)果一般用而不是用活菌數(shù)來表示。除了上述的活菌計數(shù)法外，______________也是測定微生物數(shù)量的常用方法。18、最常用的載體是______，它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單的、獨立于細(xì)菌染色體之外，并具有______能力的_____。19、醋酸菌的最適生長溫度為____________________℃。20、常用的轉(zhuǎn)化方法：

將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞：采用最多的方法是_______，其次還有______和______等。

將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞：最常用的方法是_______。此方法的受體細(xì)胞多是_______。

將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞：原核生物作為受體細(xì)胞的原因是_______，最常用的原核細(xì)胞是_____，其轉(zhuǎn)化方法是：先用______處理細(xì)胞，使其成為______，再將______溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合，在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子，完成轉(zhuǎn)化過程。21、_______mol/L濃度下，DNA溶解度最大。評卷人得分四、判斷題(共3題，共18分)22、胚胎發(fā)育早期，細(xì)胞的數(shù)量不斷增加，胚胎的總體積也增加。()A.正確B.錯誤23、我國政府一再重申四不原則：不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實驗。（選擇性必修3P108）()A.正確B.錯誤24、生殖性克隆是指通過克隆技術(shù)產(chǎn)生獨立生存的新個體。（選擇性必修3P106）()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共4題，共12分)25、下圖是泡菜的制作及測定亞硝酸鹽含量的實驗流程示意圖；請據(jù)圖回答：

（1）泡菜是乳酸菌發(fā)酵的產(chǎn)物，乳酸菌的代謝類型是___________________。制作泡菜宜選用新鮮的蔬菜，原因是____________________________。

（2）將鹽與清水按照一定的比例配制鹽水，待鹽水煮沸冷卻后，注入裝好原料的泡菜壇中，同時加入一定量的“老汁”(陳泡菜水)。將鹽水煮沸冷卻的目的是____________________；加入“老汁”的作用是____________________________。

（3）測定亞硝酸鹽含量的方法是_________________。即在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與____________________________發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N－1－萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合后形成_______________色的染料，然后將顯色反應(yīng)后的樣品與已知濃度的____________進(jìn)行目測比較，大致估算出亞硝酸鹽的含量。26、【生物技術(shù)實踐】

科學(xué)家發(fā)現(xiàn)家蠅體內(nèi)存在一種抗菌活性蛋白；這種蛋白質(zhì)具有極強的抗菌能力，受到研究者重視。

（1）分離該抗菌蛋白可用電泳法，其原理是根據(jù)蛋白質(zhì)分子的______________、大小及形狀不同，在電場中的________不同而實現(xiàn)分離。

（2）可用金黃色葡萄球菌來檢驗該蛋白的抗菌特性?？咕鷮嶒炛兴门囵B(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨主要為細(xì)菌生長提供_________和_______________。

（3）分別在加入和未加入該抗菌蛋白的培養(yǎng)基中接種等量菌液。培養(yǎng)一定時間后，比較兩種培養(yǎng)基中菌落的_____________；確定該蛋白質(zhì)的抗菌效果。

（4）細(xì)菌培養(yǎng)常用的接種方法有_______和___________。實驗結(jié)束后，對使用過的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行_____________處理。27、干燥綜合征（SS）是臨床常見的一種自身免疫?。换颊哐逯写嬖诙喾N抗體，其中以SSB抗體特異性最強。下圖表示科研人員利用基因工程技術(shù)獲得SSB蛋白及利用SSB蛋白對小鼠進(jìn)行免疫的過程。回答下列問題：

(1)利用RNA通過①過程獲得cDNA需要________酶。已知真核生物mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保護(hù)尾部不被降解。為了針對性獲得cDNA，應(yīng)如何設(shè)計逆轉(zhuǎn)錄第一步時的DNA引物______，設(shè)計引物的目的是______。

(2)為確保與pET41a質(zhì)粒定向連接，對逆轉(zhuǎn)錄得到的cDNA擴增時，應(yīng)在相應(yīng)引物的_______（填“5'”或“3'”）端加上______酶切位點。

(3)③過程用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染大腸桿菌時，需要用Ca2+處理大腸桿菌，目的是______，然后將處理后的大腸桿菌先接種在添加_______的培養(yǎng)基（A）上培養(yǎng)，待長出菌落后再利用無菌膜同位置轉(zhuǎn)移到添加______的培養(yǎng)基（B）上培養(yǎng)，收集_______菌落進(jìn)一步純化后將菌體破碎處理；篩選得到SSB蛋白。

(4)將改造后的大腸桿菌生產(chǎn)的SSB蛋白注入到小鼠體內(nèi)是為了檢測該蛋白是否具有抗原性，則后續(xù)實驗內(nèi)容應(yīng)為抽取小鼠血液_______。28、研究者改造與腸道共生的大腸桿菌；口服該工程菌后激活機體特異性免疫，實現(xiàn)腫瘤的預(yù)防和治療。

(1)部分腸道細(xì)菌能夠分泌外膜囊泡（OMV）；如圖1．OMV能穿越腸道上皮屏障活化腸黏膜內(nèi)豐富的免疫細(xì)胞。細(xì)菌溶素A（ClyA）是外膜囊泡上含量較高的特異蛋白。

研究者利用含圖2所示元件的表達(dá)載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌制備工程菌，ClyA基因的作用是_____；Fc表達(dá)產(chǎn)物能夠與樹突狀細(xì)胞表面的特異性受體結(jié)合，提高樹突狀細(xì)胞_____OMV的能力。

(2)為研究上述工程菌在人為可控條件下引發(fā)特異性免疫反應(yīng)的效果，研究者用健康小鼠進(jìn)行如下實驗：。組別第0、3、8天口服工程菌每次服用工程菌12小時后，飲用含阿拉伯糖的水結(jié)果檢測第1組空載體+第12天，每組隨機取5只小鼠等量的脾臟細(xì)胞與黑色素瘤細(xì)胞共培養(yǎng)，檢測殺傷率，結(jié)果如圖3．第2組ClyA-Fc+第3組ClyA-OVA+第4組第5組

注：“+”；“-”代表是否飲用；

口服工程菌12小時后其在腸道內(nèi)存在數(shù)量較多。

①第4、5組的操作是_____。圖3結(jié)果說明工程菌在人為可控條件下引發(fā)特異性免疫反應(yīng)，理由是_____。

②為進(jìn)一步驗證上述結(jié)論，研究者進(jìn)行如下實驗：先加入_____（填選項前字母）保溫后漂洗，再加入_____（填選項前字母）保溫后漂洗，檢測熒光細(xì)胞的數(shù)目，若第5組_____為最大值；則上述結(jié)論成立。

A．帶有紅色熒光標(biāo)記的OVA抗原肽復(fù)合物。

B．帶有綠色熒光標(biāo)記的細(xì)胞毒性T細(xì)胞特異性抗體。

C．第1-5組小鼠脾臟細(xì)胞。

③腫瘤患者術(shù)后極易復(fù)發(fā)，研究者重復(fù)上表實驗，并在第3次口服工程菌后第50天給小鼠注射黑色素瘤細(xì)胞。目的是_____。

(3)該工程菌的研發(fā)為不同腫瘤的精準(zhǔn)治療和預(yù)防提供了可能。依據(jù)本研究，設(shè)計針對肺癌治療的工程菌表達(dá)載體元件：_____。評卷人得分六、綜合題(共4題，共32分)29、自然界中某些細(xì)菌可通過代謝將原油轉(zhuǎn)化為穩(wěn)定無害的終產(chǎn)物；科學(xué)家為獲得能有效修復(fù)原油污染土壤的工程菌展開相關(guān)研究。

（1）獲得能降解原油的目標(biāo)菌可從_______取樣，樣品經(jīng)____________（無菌水/蒸餾水）稀釋后涂布于以原油為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)；分離純化后獲得目標(biāo)菌A。

（2）目標(biāo)菌A成膜性差，不能有效控制原油向深層土壤滲透。研究人員將假單胞菌的bdlA基因（約1300bp）導(dǎo)入目標(biāo)菌A體內(nèi)；嘗試構(gòu)建成膜性好的工程菌。

①假單胞菌遭受環(huán)境壓力時，會分泌大量胞外復(fù)合物將自身包裹于其中形成細(xì)菌聚集膜樣物（生物被膜），體現(xiàn)了生物對環(huán)境的___________。

②圖1為bdlA基因與pX系列質(zhì)粒連接構(gòu)建的重組質(zhì)粒模式圖，為初步檢測構(gòu)建是否成功，可選用限制酶____________對其切割，并對酶切產(chǎn)物及重組質(zhì)粒進(jìn)行凝膠電泳檢測，結(jié)果如圖2。據(jù)圖可初步判斷重組質(zhì)粒構(gòu)建成功，依據(jù)是____________。

（3）上述方法獲得的兩種工程菌命名為KT2和KT5，在不同時間測定實驗組中工程菌及對照組中___________的生物被膜總量相對值，結(jié)果如圖3所示。該結(jié)果表明__________。

（4）若要將以上工程菌用于原油污染土壤的修復(fù)，舉一例說明下一步還應(yīng)進(jìn)行哪些方面的研究__________?30、自新冠疫情發(fā)生以來；人類消耗了大量的一次性口罩，這些口罩不及時處理會對環(huán)境造成一定的污染。某科研人員欲篩選出能高效降解一次性口罩(主要成分是由C；H兩種元素組成的聚丙烯纖維)的細(xì)菌，設(shè)計了如下圖所示的流程?；卮鹣铝袉栴}：

(1)土壤是微生物的天然培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基能為微生物的生長提供的四大營養(yǎng)物質(zhì)分別是碳源、_____________。

(2)通過相關(guān)實驗來選擇較合適的土壤樣品，該實驗的自變量是_____________，因變量是_____________。

(3)圖中“甲”指的是_____________，將分離純化得到的不同菌種分別接種到鑒別培養(yǎng)基上，鑒別培養(yǎng)基以_____________為唯一碳源；并加入了能與之結(jié)合的顯色染色劑，從而方便挑選菌群。

(4)分離純化聚丙烯纖維降解菌時，為了使培養(yǎng)皿上出現(xiàn)的菌落盡可能都是單菌落，應(yīng)采用的方法是_____________。采用該方法的原因是_____________。31、如圖是利用發(fā)酵技術(shù)獲得產(chǎn)品的過程圖；①；②都表示這一過程中的步驟或者操作，根據(jù)該圖以及學(xué)過的相關(guān)知識回答問題：

(1)寫出數(shù)字標(biāo)號處的操作：①________________；②________。其中②的目的是防止發(fā)酵過程中混入________；進(jìn)而影響生產(chǎn)的效率，甚至導(dǎo)致發(fā)酵失敗。

(2)配制培養(yǎng)基時，一般要保證培養(yǎng)基中具有幾類基本成分，分別是碳源、氮源、__________、________。

(3)在發(fā)酵過程中，我們要不間斷地監(jiān)測發(fā)酵罐中的情況，了解發(fā)酵進(jìn)程，必要時要添加營養(yǎng)物質(zhì)，同時要嚴(yán)格控制發(fā)酵條件，如溫度、________、________等，因為環(huán)境條件的改變，不僅影響菌種的生長繁殖，而且可能會影響____________的形成。

(4)為了進(jìn)一步保持發(fā)酵液的無菌環(huán)境，我們在培養(yǎng)基中加入了青霉素，則該培養(yǎng)基不能用來培養(yǎng)________（填“細(xì)菌”或“真菌”）類微生物，而且要注意在最后處理發(fā)酵液的時候，不能將發(fā)酵液直接排到自然水體，其原因是：①發(fā)酵液中富含________，可能會導(dǎo)致水體富營養(yǎng)化而出現(xiàn)水華等；②發(fā)酵液中加入的青霉素可能會導(dǎo)致自然界的細(xì)菌出現(xiàn)________種群，對人類的健康不利。32、新型冠狀病毒可通過表面的刺突蛋白（S蛋白）與人呼吸道黏膜上皮細(xì)胞的ACE2受體結(jié)合；侵入人體，引起肺炎。圖1為病毒侵入后，人體內(nèi)發(fā)生的部分免疫反應(yīng)示意圖。單克隆抗體可阻斷病毒的黏附或入侵，故抗體藥物的研發(fā)已成為治療新冠肺炎的研究熱點之一。圖2為篩選；制備抗S蛋白單克隆抗體的示意圖。請據(jù)圖回答下列問題。

(1)圖1中人體內(nèi)抗原呈遞細(xì)胞吞噬病毒，并將病毒的抗原暴露在細(xì)胞表面，被____細(xì)胞表面的受體識別后激活該細(xì)胞。

(2)B細(xì)胞識別入侵的病毒后，在細(xì)胞因子作用下，經(jīng)過細(xì)胞的___，形成__細(xì)胞。

(3)為判斷疑似患者是否為新型冠狀病毒感染者，采集鼻咽拭子主要用于病原學(xué)檢查，檢測病毒的__；采集血液樣本主要用于血清學(xué)檢查，檢測__。

(4)據(jù)圖2所示，研制抗S蛋白單克隆抗體，需先注射___免疫小鼠以激活小鼠的免疫細(xì)胞；再提取激活的B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，用HAT培養(yǎng)基篩選獲得。

___細(xì)胞。因為同一種抗原可能激活__細(xì)胞，還需繼續(xù)篩選才能獲得分泌單克隆抗體的細(xì)胞株。參考答案一、選擇題(共5題，共10分)1、A【分析】【分析】

DNA連接酶：（1）根據(jù)酶的來源不同分為兩類：EcoliDNA連接酶、T4DNA連接酶。這二者都能連接黏性末端，此外T4DNA連接酶還可以連接平末端；但連接平末端時的效率比較低。（2）DNA連接酶連接的是兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵。（3）DNA連接酶和DNA聚合酶的區(qū)別：①DNA連接酶是在兩個DNA片段之間形成磷酸二酯鍵，而DNA聚合酶只能將單個脫氧核苷酸加到已有的核苷酸片段上，形成磷酸二酯鍵；②DNA連接酶是同時連接雙鏈的切口，而DNA聚合酶只是在單鏈上將一個個脫氧核苷酸連接起來；③DNA連接酶不需要模板，而DNA聚合酶需要模板。

【詳解】

A；DNA連接酶和限制酶的作用恰好相反；限制酶可將DNA雙鏈片段切斷，而DNA連接酶可以將限制酶切開的雙鏈DNA片段“縫合”起來，A正確；

B；DNA連接酶不能連接單鏈DNA片段；DNA聚合酶是將單個脫氧核苷酸加到已有的核苷酸片段上，B錯誤；

C；EcoliDNA連接酶只能連接有黏性末端的DNA片段；C錯誤；

D、T4DNA連接酶既可以連接有黏性末端的DNA片段；也可以連接有平末端的DNA片段，D錯誤。

故選A。2、B【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題包括：（1）食物安全：滯后效應(yīng)；出現(xiàn)過敏源、食物的營養(yǎng)成分改變等；（2）生物安全：基因擴散導(dǎo)致對生物多樣性的威脅；（3）環(huán)境安全：對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性及環(huán)境的影響。

【詳解】

A；轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物對于解決糧食、能源等問題起到了積極作用；同時也存在一定風(fēng)險，如在食品安全方面可能會出現(xiàn)營養(yǎng)成分改變等現(xiàn)象，A正確；

B；轉(zhuǎn)基因耐儲藏番茄延長了番茄的貨架期；但其對環(huán)境也可能存在安全性問題，如造成基因污染，B錯誤；

C；有關(guān)農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全法規(guī)的制定既維護(hù)了消費者的權(quán)益；又最大程度地保證了轉(zhuǎn)基因技術(shù)的安全性，消費者對轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品有知情權(quán)和選擇權(quán)，C正確；

D；生物技術(shù)雖然推動了社會的發(fā)展；但應(yīng)科學(xué)控制、合理使用，故我國出臺了一系列相關(guān)法規(guī)和政策，D正確。

故選B。3、A【分析】【分析】

1；生物實驗應(yīng)遵循對照原則、等量原則、單一變量原則和控制無關(guān)變量原則。

2；A同學(xué)的實驗結(jié)果可能是培養(yǎng)基污染造成的；還可能是A同學(xué)實驗操作過程中污染造成的，也可能是與其他同學(xué)所取土壤樣品不同造成的，關(guān)鍵是設(shè)法排除影響結(jié)果的因素。

【詳解】

A；A同學(xué)出現(xiàn)這種結(jié)果的原因可能是土樣不同；也可能是操作中污染造成的，A錯誤；

B；A同學(xué)的實驗結(jié)果可能是培養(yǎng)基污染造成的；可以將A同學(xué)配制的培養(yǎng)基在不加土樣的情況下進(jìn)行培養(yǎng)作為空白對照，以證明培養(yǎng)基是否受到污染，B正確；

C；讓其他同學(xué)用與A同學(xué)一樣的土壤進(jìn)行實驗；如果結(jié)果與A同學(xué)一樣，則可證明A同學(xué)無誤，C正確；

D；B、C選項的實驗思路都遵循了實驗的對照原則；D正確。

故選A。

【點睛】4、D【分析】【分析】

單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；多次向免疫動物注射抗原（CD47）的目的是使刺激小鼠特異性免疫；使動物小鼠產(chǎn)生大量的效應(yīng)B淋巴細(xì)胞即漿細(xì)胞，A正確；

B；經(jīng)步驟②將脾臟中的B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合；經(jīng)選擇后可以獲得既能產(chǎn)生抗CD47抗體又能大量增殖的細(xì)胞，B正確；

C；動物細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)放在二氧化碳培養(yǎng)箱；C正確；

D；根據(jù)單一變量原則可知應(yīng)設(shè)置不加單克隆抗體的巨噬細(xì)胞+腫瘤細(xì)胞的共培養(yǎng)體系為對照；抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對巨噬細(xì)胞的抑制作用，沒有抗體抑制，CD47對巨噬細(xì)胞有抑制作用，對照組中吞噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)顯著低于實驗組可驗證上述推測，D錯誤。

故選D。5、C【分析】【分析】

培養(yǎng)基一般含有水；碳源、氮源、無機鹽。培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。如培養(yǎng)乳酸桿菌時需添加維生素；培養(yǎng)霉菌時需將pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細(xì)菌時需將pH調(diào)至中性或微堿性。液體狀態(tài)的培養(yǎng)基稱為液體培養(yǎng)基，配制成的固體狀態(tài)的稱為固體培養(yǎng)基，在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑瓊脂后，就制成固體培養(yǎng)基。獲得純凈的培養(yǎng)物關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵。

【詳解】

A；固體培養(yǎng)基需加入瓊脂；液體培養(yǎng)基不用加入，A錯誤；

B、培養(yǎng)基一般含有水、碳源、氮源、無機鹽。培養(yǎng)某些微生物時，可以缺少部分物質(zhì)，如培養(yǎng)自養(yǎng)微生物，可以不加碳源，其利用空氣中CO2；培養(yǎng)固氮微生物；可以不加氮源，其利用空氣中氮氣，B錯誤；

C；獲得純凈的培養(yǎng)物關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵。培養(yǎng)基需要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌；C正確；

D；配制培養(yǎng)細(xì)菌的培養(yǎng)基；需要將pH調(diào)至中性或微堿性，D錯誤。

故選C。二、多選題(共7題，共14分)6、A:C:D【分析】【分析】

根據(jù)題意可知；醬豆制作時，首先要利用霉菌進(jìn)行發(fā)酵，霉菌等微生物產(chǎn)生的酶可以將大分子物質(zhì)分解成小分子物質(zhì)，最后進(jìn)行乳酸發(fā)酵時所需的乳酸菌是厭氧生物，需要在無氧條件下進(jìn)行。

【詳解】

A；桑葚酒制作時榨出的桑葚汁不能進(jìn)行高壓蒸汽滅菌；否則會殺死桑葚表皮上的酵母菌菌種，A錯誤；

B；因桑葚中的黃酮苷一般難溶或不溶于水；易溶于乙醇等有機溶劑，所以提取桑葚中的黃酮苷可采用萃取的方法，B正確；

C；醬豆制作最后是進(jìn)行乳酸發(fā)酵；乳酸發(fā)酵中的乳酸菌為厭氧型生物，故乳酸發(fā)酵應(yīng)在無氧條件下進(jìn)行，C錯誤；

D；在微生物的作用下；大豆所含的蛋白質(zhì)、脂肪等大分子物質(zhì)被分解成易于吸收的小分子物質(zhì)，同時微生物的呼吸要消耗大豆中的營養(yǎng)物質(zhì)，并形成多種中間產(chǎn)物，所以醬豆中有機物的種類增加，含量減少，營養(yǎng)價值增加，D錯誤。

故選ACD。

【點睛】7、A:B:C【分析】【分析】

1；微生物常見的接種的方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法；稀釋涂布平板法可用于微生物的計數(shù)。

2；稀釋涂布平板法統(tǒng)計菌落數(shù)目的原理：①當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時；培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌；②通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)來推測樣品中大約含有的活菌數(shù)。

【詳解】

A；若只對一個冰激凌進(jìn)行檢測；樣品太少則不能確定是某個冰激凌的質(zhì)量問題還是這個品牌冰激凌的質(zhì)量問題，正確的做法是再去小店隨機買多個同樣品牌的同種冰激凌，A錯誤；

B、測定細(xì)菌的數(shù)量，一般選用104、105、106倍的稀釋液進(jìn)行培養(yǎng)，應(yīng)取10mL剛?cè)诨谋ち枳鳛樵哼M(jìn)行梯度稀釋、稀釋倍數(shù)為1×10～1×106；B錯誤；

C；實驗應(yīng)該設(shè)置對照；取各個稀釋濃度的冰激凌液各0.lmL，用涂布平板法進(jìn)行接種，每個濃度涂3個平板，再取一個平板接種等量無菌水（作為對照），共培養(yǎng)19個平板，在適宜溫度下培養(yǎng)48h，當(dāng)對照組無菌落生長時，選擇菌落數(shù)在30-300的平板進(jìn)行計數(shù)，C錯誤；

D；因為當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時；平板上觀察到的只是一個菌落，故統(tǒng)計菌落數(shù)目，以菌落數(shù)代表大腸桿菌數(shù)會導(dǎo)致統(tǒng)計結(jié)果比實際值偏小，該說法合理，D正確。

故選ABC。8、A:B:D【分析】【分析】

動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程：取動物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個細(xì)胞；制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

【詳解】

A；將動物組織分散為單個細(xì)胞制成細(xì)胞懸液中進(jìn)行的第一次培養(yǎng)為原代培養(yǎng)；因此在C瓶中進(jìn)行的細(xì)胞培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)，A正確；

BC、進(jìn)行動物細(xì)胞培養(yǎng)時，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣和5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，以滿足細(xì)胞培養(yǎng)的氣體環(huán)境需要，其中氧氣是細(xì)胞呼吸必需的，CO2是為了維持培養(yǎng)液的pH；B正確；C錯誤；

D；D瓶細(xì)胞出現(xiàn)接觸抑制時；應(yīng)用胰蛋白酶處理使其分散為單個細(xì)胞，再用離心法收集細(xì)胞分瓶以進(jìn)行傳代培養(yǎng)，D正確。

故選ABD。9、A:D【分析】【分析】

分析題圖：圖中質(zhì)粒和外源DNA都含有限制酶A；B、C的識別序列和切割位點；若用酶A切割會同時破壞質(zhì)粒上的兩個抗性基因。

【詳解】

A；質(zhì)粒中含有2個酶A的酶切位點；所以切割后會產(chǎn)生4個游離的磷酸基團(tuán)，A正確；

B；如果用酶A和酶C同時切割質(zhì)粒；會破壞質(zhì)粒的標(biāo)記基因，B錯誤；

C；根據(jù)B項分析；需要用酶B和酶C切割質(zhì)粒和目的基因，導(dǎo)致四環(huán)素抗性基因被破壞，所以不能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基中生長，C錯誤；

D；若用酶B和酶C切割；產(chǎn)生不同的黏性末端，可避免質(zhì)粒自身環(huán)化，D正確。

故選AD。10、C:D【分析】【分析】

微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)基表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

【詳解】

A；大腸桿菌是原核生物；沒有染色體，A錯誤；

B；首次出現(xiàn)的菌落做標(biāo)記時應(yīng)標(biāo)記在皿底上；B錯誤；

C；夾層培養(yǎng)法不需要對大腸桿菌進(jìn)行再次接種；可避免細(xì)菌移動或菌落被完全培養(yǎng)基沖散，C正確；

D；由于代謝缺陷型大腸桿菌不能在基本培養(yǎng)基上生長；所以形態(tài)較小的新菌落可能是代謝缺陷型大腸桿菌，D正確。

故選CD。11、A:B:C【分析】【分析】

用玉米秸稈生產(chǎn)燃料酒精是利用微生物進(jìn)行生物發(fā)酵的過程；所利用的微生物為酵母菌，通過酒精發(fā)酵將葡萄糖轉(zhuǎn)化為酒精，玉米秸稈中含有的糖類主要是纖維素，因此需要先將纖維素水解成葡萄糖，再進(jìn)行發(fā)酵。

【詳解】

A；由于纖維素組成成分復(fù)雜、結(jié)構(gòu)穩(wěn)定；生物降解時難以迅速進(jìn)行，常用酸或堿進(jìn)行預(yù)處理，初步打斷纖維素內(nèi)部的化學(xué)鍵，降低聚合度，利于酶與底物充分接觸，提高催化效率，A正確；

B；在有氧的條件下酵母菌進(jìn)行出芽生殖；上層培養(yǎng)液與空氣接觸部位氧氣較多，短時間內(nèi)酵母菌更多分布在發(fā)酵液的上層，B正確；

C；在選擇培養(yǎng)基中經(jīng)多次培養(yǎng)；分離出的菌落類型越少表示純度越高，其遺傳基因型越穩(wěn)定，C正確；

D、發(fā)酵液pH下降是因為產(chǎn)生了CO2；D錯誤。

故選ABC。12、C:D【分析】【分析】

發(fā)酵工程的基本環(huán)節(jié)：選育菌種：性狀優(yōu)良的菌種可以從自然界中篩選出來；也可以通過誘變育種或基因工程育種獲得。發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵：這是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)。在發(fā)酵過程中，要隨時檢測培養(yǎng)液中的微生物數(shù)量；產(chǎn)物濃度等，以了解發(fā)酵進(jìn)程。還要及時添加必需的營養(yǎng)組分，要嚴(yán)格控制溫度、pH和溶解氧等發(fā)酵條件。分離、提純產(chǎn)物：如果是發(fā)酵產(chǎn)品是微生物細(xì)胞本身，可在發(fā)酵結(jié)束之后，采用過濾、沉淀等方法將菌體分離和干燥，即可得到產(chǎn)品。如果產(chǎn)品是代謝物，可根據(jù)產(chǎn)物的性質(zhì)采取恰當(dāng)?shù)奶崛　⒎蛛x和純化措施來獲得產(chǎn)品。

【詳解】

A；啤酒發(fā)酵過程分為主發(fā)酵和后發(fā)酵兩個階段。酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代謝物的生成都是在主發(fā)酵階段完成；因此啤酒的工業(yè)化生產(chǎn)過程中，酒精的產(chǎn)生積累主要在主發(fā)酵階段完成，A錯誤；

B；食品添加劑能改善食品的口味、色澤和品質(zhì)；可以增加食品的營養(yǎng)，B錯誤；

C；通過基因工程技術(shù)；將乙肝病毒的抗原基因轉(zhuǎn)入酵母菌，再結(jié)合發(fā)酵工程可生產(chǎn)乙肝疫苗，C正確；

D；利用放線菌產(chǎn)生的井岡霉素防止水稻枯紋?。徊粫Νh(huán)境造成污染，是生物防治的有效手段，D正確。

故選CD。三、填空題(共9題，共18分)13、略

【解析】①.動物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)、②.動物細(xì)胞融合與單克隆抗體14、略

【解析】遺傳和生理15、略

【解析】①.接種環(huán)②.瓊脂固體③.連續(xù)劃線④.聚集⑤.逐步稀釋⑥.一個細(xì)胞⑦.子細(xì)胞群體⑧.菌落⑨.梯度稀釋⑩.瓊脂固體?.單個細(xì)胞?.單個的菌落16、略

【分析】【分析】

1.基因檢測可以把人體內(nèi)的致病基因和易感基因檢測出來；通過采取一定的預(yù)防措施預(yù)防遺傳病的發(fā)生，但同時可能會帶來基因歧視等倫理道德方面的問題。

2.設(shè)計試管嬰兒不同于試管嬰兒；試管嬰兒是為了解決不孕不育的問題，而設(shè)計試管嬰兒是為了解決器官移植方面的醫(yī)療問題。

【詳解】

1.（1）基因身份證是指把每個人的致病基因和易感基因都檢測出來；并記錄在磁卡上，這樣到醫(yī)院看病時，只要帶上這種身份證，醫(yī)生就可以“對證”治療。

（2）反對基因檢測的人認(rèn)為：目前人類對基因結(jié)構(gòu)及基因間相互作用尚缺乏足夠的認(rèn)識；要想通過基因檢測達(dá)到預(yù)防疾病的目的是困難的；況且人類的多基因病，既與基因有關(guān)，又與環(huán)境和生活習(xí)慣有關(guān)，有某種致病基因的人不見得就會患病。但是，基因檢測結(jié)果本身就已經(jīng)足以給受檢者帶來巨大的心理壓力。個人基因資訊的泄露所造成的基因歧視，勢必造成奇特的失業(yè)大軍，即遺傳性失業(yè)大軍。個人基因資訊被暴露之后，還會造成個人婚姻困難；人際關(guān)系疏遠(yuǎn)等嚴(yán)重后果。支持基因檢測的人認(rèn)為：通過基因檢測可以對遺傳性疾病及早采取預(yù)防措施，適時進(jìn)行治療，達(dá)到挽救患者生命的目的。對于基因歧視現(xiàn)象，可以通過正確的科學(xué)知識傳播、倫理道德教育和立法得以解決。

2.設(shè)計試管嬰兒需要因而具有特定的性別或遺傳性狀；因此胚胎移植前需要進(jìn)行遺傳學(xué)診斷這一環(huán)節(jié)，而試管嬰兒是為了解決不孕不育問題，不需要考慮嬰兒的性別等問題，不需要進(jìn)行遺傳學(xué)診斷。二者的共同點是：兩者都是體外受精，并進(jìn)行體外早期胚胎培養(yǎng)，都要經(jīng)過胚胎移植，都是有性生殖。

【點睛】

1.基因與疾病的關(guān)系：具有致病基因的個體不一定患遺傳?。灰驗樯锏男誀钸€受到環(huán)境因素的影響；沒有致病基因也可能患病，因為基因表達(dá)的蛋白質(zhì)，在加工或修飾過程中出現(xiàn)錯誤，也會出現(xiàn)癥狀。

2.明確設(shè)計試管嬰兒和試管嬰兒目的的不同是解答本題的關(guān)鍵之一。【解析】致病基因易感基因基因結(jié)構(gòu)預(yù)防疾病心理壓力預(yù)防措施基因歧視倫理道德需要不需要體外有性生殖17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】低當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落菌落數(shù)18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】質(zhì)粒自我復(fù)制雙鏈環(huán)狀DNA分子19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】30～3520、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法基因槍法花粉管通道法顯微注射技術(shù)受精卵繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對較少大腸桿菌Ca2+感受態(tài)細(xì)胞重組表達(dá)載體DNA分子21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】0．14四、判斷題(共3題，共18分)22、B【分析】【詳解】

胚胎發(fā)育早期；細(xì)胞數(shù)量不斷增加，但胚胎總體積不變或略有縮小。

故錯誤。23、A【分析】【詳解】

生殖性克隆存在倫理道德等方面的問題，我國政府一再重申四不原則：不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實驗。本說法正確。24、A【分析】【詳解】

生殖性克隆，即通常所說的克隆人，通過克隆技術(shù)產(chǎn)生獨立生存的新個體，即通常所說的克隆人，該說法正確。五、實驗題(共4題，共12分)25、略

【分析】【分析】

1；泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌；代謝類型是異養(yǎng)厭氧型，在無氧條件下乳酸菌能夠?qū)⑹卟酥械钠咸烟茄趸癁槿樗帷?/p>

2；泡菜的制作過程：按照清水與鹽的質(zhì)量比為4：1的比例配制鹽水；將鹽、水煮沸冷卻。將經(jīng)過預(yù)處理的新鮮蔬菜混合均勻，裝入泡萊壇內(nèi)，裝至半壇時，放入蒜瓣、生姜及其他香辛料，繼續(xù)裝至八成滿，再徐徐注入配制好的鹽水，使鹽水沒過全部菜料，蓋好壇蓋。向壇蓋邊沿的水槽中注滿水，以保證壇內(nèi)乳酸菌發(fā)酵所需的無氧環(huán)境。在發(fā)酵過程中要注意經(jīng)常向水槽中補充水。發(fā)酵時間長短受室內(nèi)溫度的影響。

3；泡菜中的亞硝酸鹽含量可以用比色法測定；即在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)生成重氮鹽，重氮鹽與N1萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料。

（1）

乳酸菌的代謝類型是異養(yǎng)厭氧型；制作泡菜宜選用新鮮的蔬菜或其他原料；這是因為新鮮的蔬菜亞硝酸鹽的含量低。

（2）

將鹽水煮沸冷卻的目的是煮沸的目的是除去鹽水中的空氣和殺菌；冷卻的目的是防止高溫殺死原料中的乳酸菌（乳酸菌的生命活動不受影響）；加入“老汁”的作用是“老汁”中含有大量的乳酸菌；可使其在短時間內(nèi)成為優(yōu)勢菌。

（3）

測定亞硝酸鹽含量的方法是比色法。即在鹽酸酸化條件下；亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N－1－萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合后形成玫瑰紅色的染料，然后將顯色反應(yīng)后的樣品與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)顯色液進(jìn)行目測比較，大致估算出亞硝酸鹽的含量。

【點睛】

本題考查制作泡菜，要求考生識記制作泡菜的原理和過程，理解用比色法測定亞硝酸鹽的含量，意在考查考生的識記能力和分析能力?！窘馕觥浚?）異養(yǎng)厭氧型亞硝酸鹽的含量低。

（2）煮沸的目的是除去鹽水中的空氣和殺菌；冷卻的目的是防止高溫殺死原料中的乳酸菌（乳酸菌的生命活動不受影響）“老汁”中含有大量的乳酸菌；可使其在短時間內(nèi)成為優(yōu)勢菌。

（3）比色法對氨基苯磺酸玫瑰紅標(biāo)準(zhǔn)顯色液26、略

【分析】【詳解】

（1）電泳法分離蛋白質(zhì)；是根據(jù)蛋白質(zhì)分子的電荷；大小及形狀不同，在電場中的遷移速度不同而實現(xiàn)分離。

（2）牛肉膏和蛋白胨中蛋白質(zhì)較多；可作為碳源和氮源。

（3）加入抗菌蛋白的培養(yǎng)基中；金黃色葡萄球菌應(yīng)該不能生長或生長很少，未加入抗菌蛋白的培養(yǎng)基中金黃色葡萄球菌應(yīng)該能生長，菌落較多。

（4）平板劃線法、稀釋涂布平板法都能使接種的菌種在固體培養(yǎng)上充分分散，對使用過的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行滅菌處理，是為了防止細(xì)菌擴散污染?！窘馕觥竣?電荷（帶電情況）②.遷移速度③.碳源④.氮源⑤.數(shù)量⑥.平板劃線法⑦.稀釋涂布平板法（稀釋混合平板法）⑧.滅菌27、略

【分析】【分析】

1；基因工程的四個步驟：目的基因的篩選與獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測與鑒定。

2、在基因工程操作中，常用原核生物作為受體細(xì)胞，其中以大腸桿菌應(yīng)用最為廣泛。研究人員一般先用Ca2＋處理大腸桿菌細(xì)胞；使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，然后再將重組的基因表達(dá)載體導(dǎo)入其中。

【詳解】

（1）利用RNA通過①過程（逆轉(zhuǎn)錄）獲得cDNA需要逆轉(zhuǎn)錄酶；已知真核生物基因的mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保護(hù)尾部不被降解。逆轉(zhuǎn)錄第一步以mRMA為模板合成DNA單鏈；新鏈與模板鏈反向平行，由于新鏈只能由5'端向3'端延伸，所以逆轉(zhuǎn)錄第一步的引物應(yīng)與mRNA尾部的PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）互補配對，即用多聚胸腺嘧啶脫氧核苷酸序列為引物；設(shè)計引物的目的是使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸。

（2）對逆轉(zhuǎn)錄得到的cDNA擴增時；引物的5'端結(jié)合母鏈的3'端之后DNA聚合酶開始擴增DNA。為確保其與pET41a質(zhì)粒定向連接，應(yīng)使用不同種的限制酶切割質(zhì)粒和目的基因，由圖可知，使用EcoRI酶會破環(huán)SSB基因，故應(yīng)在相應(yīng)引物的5'端加上BamHI和XhoⅠ酶切位點。

（3）由題圖分析可知：質(zhì)粒上存在卡那霉素和氯霉素抗性基因，由于XhoⅠ酶破壞了氯霉素抗性基因，所以成功組裝的重組質(zhì)粒不能在添加了氯霉素的培養(yǎng)基上生長，③過程用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染大腸桿菌時，需要用Ca2+處理大腸桿菌；目的是使大腸桿菌成為易于吸收外源DNA的狀態(tài)，然后分別將處理后的大腸桿菌先接種在添加卡那霉素的培養(yǎng)基（A）上培養(yǎng)，待長出菌落后再利用無菌膜同位置轉(zhuǎn)移到添加氯霉素的培養(yǎng)基（B）上培養(yǎng)，收集能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上生長而不能在含氯霉素培養(yǎng)基上生長的菌落進(jìn)一步純化后將菌體破碎處理，經(jīng)篩選即可得到SSB蛋白。

（4）將改造后的大腸桿菌生產(chǎn)的SSB蛋白注入到小鼠體內(nèi)是為了檢測該蛋白是否具有抗原性，如果該蛋白有抗原性，會引起機體的免疫反應(yīng)，產(chǎn)生相應(yīng)抗體。則后續(xù)實驗內(nèi)容應(yīng)為抽取小鼠血液提取其中的抗體，利用抗原—抗體雜交的方法檢測其是否含有抗SSB的抗體?！窘馕觥?1)逆轉(zhuǎn)錄用多聚胸腺嘧啶脫氧核苷酸序列為引物

使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸

(2)5’BamHⅠ和XhoI

(3)使大腸桿菌成為易于吸收外源DNA的狀態(tài)卡那霉素氯霉素能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上生長而不能在含氯霉素培養(yǎng)基上生長的。

(4)提取其中的抗體，利用抗原—抗體雜交的方法檢測其是否含有抗SSB的抗體28、略

【分析】【分析】

樹突狀細(xì)胞為抗原呈遞細(xì)胞；可識別；攝取和傳遞抗原信息。

【詳解】

（1）細(xì)菌溶素A（ClyA）是外膜囊泡上含量較高的特異蛋白；而OMV能穿越腸道上皮屏障活化腸黏膜內(nèi)豐富的免疫細(xì)胞。所以，ClyA基因的作用為表達(dá)出細(xì)菌溶素A（ClyA），使OVA和Fc定位至OMV表面，進(jìn)而融合基因可以被免疫細(xì)胞識別。Fc表達(dá)產(chǎn)物能夠與樹突狀細(xì)胞表面的特異性受體結(jié)合，進(jìn)而提高樹突狀細(xì)胞識別；攝取和傳遞抗原信息的能力。

（2）①根據(jù)表格和柱狀圖可知；服用的工程菌采用“加法原理”，逐漸增加部件，且第4組和第5組工程菌都是完整的，即第4組:ClyA-OVA-Fc第5組:ClyA-OVA-Fc，但是第4組飲用含阿拉伯糖的水，進(jìn)而激活融合基因的表達(dá)；第5組不飲用含阿拉伯糖的水，不能激活融合基因的表達(dá)。所以，第3；5組含有OVA，在人為控制口服阿拉伯糖后產(chǎn)生OMV，激活特異性免疫，對腫瘤細(xì)胞的殺傷率較高；1、2組缺乏OVA，第4組無阿拉伯糖誘導(dǎo)，殺傷率均低。

②小鼠脾臟細(xì)胞具有免疫細(xì)胞；可在抗原刺激下引起特異性免疫。帶有紅色熒光標(biāo)記的OVA抗原肽復(fù)合物可引起小鼠脾臟細(xì)胞發(fā)生特異性免疫，故先加入第1-5組小鼠脾臟細(xì)胞和帶有紅色熒光標(biāo)記的OVA抗原肽復(fù)合物進(jìn)行保溫，判斷特異性免疫的強度；

故選AC。

再加入帶有綠色熒光標(biāo)記的細(xì)胞毒性T細(xì)胞特異性抗體；目的是檢測OVA抗原肽復(fù)合物是否能夠產(chǎn)生特異性細(xì)胞毒性T細(xì)胞。

故選B。

若第5組同時被紅色和綠色熒光標(biāo)記的細(xì)胞數(shù)目占比越多；說明工程菌在人為可控條件下引發(fā)特異性免疫反應(yīng)，結(jié)論成立。

③腫瘤患者術(shù)后極易復(fù)發(fā)；說明特異性免疫功能減弱。所以，可多次注射黑色素瘤細(xì)胞，進(jìn)而研究該口服工程菌是否能夠誘發(fā)長期免疫記憶，從而抑制腫瘤復(fù)發(fā)。

（3）本實驗中融合基因里面有OVA（黑色素瘤細(xì)胞特異性抗原），所以只需將OVA替換為肺癌細(xì)胞特異性抗原即可。即將元件中的OVA替換為肺癌細(xì)胞特異性表達(dá)的抗原基因?！窘馕觥?1)表達(dá)ClyA；使OVA和Fc定位至OMV表面識別；攝取。

(2)第4組:ClyA-OVA-Fc和-第5組:ClyA-OVA-Fc和+第3；5組含有OVA；在人為控制口服阿拉伯糖后產(chǎn)生OMV，激活特異性免疫，對腫瘤細(xì)胞的殺傷率較高;1、2組缺乏OVA，第4組無阿拉伯糖誘導(dǎo)，殺傷率均低ACB同時被紅色和綠色熒光標(biāo)記的細(xì)胞數(shù)目占比研究該口服工程菌是否能夠誘發(fā)長期免疫記憶，從而抑制腫瘤復(fù)發(fā)。

(3)將元件中的OVA替換為肺癌細(xì)胞特異性表達(dá)的抗原基因六、綜合題(共4題，共32分)29、略

【分析】【分析】

如圖：圖片右邊M是Marker；標(biāo)記大小的；1；2號泳道是兩個質(zhì)粒全長；3、4號泳道是酶切后目的基因和質(zhì)粒的大小。

【詳解】

（1）能降解原油的目標(biāo)菌存在于原油污染土壤；為避免雜菌污染應(yīng)用無菌水稀釋。

（2）①假單胞菌形成生物被膜；是生物對環(huán)境的適應(yīng)。

②兩種重組質(zhì)粒含有的目的基因應(yīng)該一致，用Csp45I、XbaI對重組質(zhì)粒切割；看切下的目的基因是否一致，初步判斷重組質(zhì)粒構(gòu)建是否成功。

（3）本實驗的對照組應(yīng)該是導(dǎo)入普通質(zhì)粒的目標(biāo)菌A。實驗結(jié)果表明在36t/h時KT2和KT5兩種工程菌的生物被膜量相對值顯著提高。

（4）若要將以上工程菌用于原油污染土壤的修復(fù)；下一步還應(yīng)進(jìn)行許多研究，如：如何擴大培養(yǎng)。

【點睛】

本題主要考查目的菌的篩選、轉(zhuǎn)基因技