2025年浙教版選擇性必修3生物下冊階段測試試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年浙教版選擇性必修3生物下冊階段測試試卷109考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共8題，共16分)1、一對美國夫婦將用他們精、卵做的胚胎冷藏在澳大利亞墨爾本一所不孕癥治療中心(防止胚胎移植不能一次成功時，以備下次再用)。在一次外出時，他們因飛機失事而去世。于是有人就提出，是不是應(yīng)該把胚胎植入代孕母親子宮，生下一個孩子繼承遺產(chǎn)？還有人認(rèn)為沒有這個必要，可以把財產(chǎn)交給他們的親戚，或交給國家處理。這件事反映了“胚胎冷藏”技術(shù)（）A.是對人類生育權(quán)的保護B.可能帶來倫理問題C.是一種成熟的可推廣的技術(shù)D.是一種國家法律所禁止的技術(shù)2、下列關(guān)于微生物培養(yǎng)、利用及其代謝的相關(guān)敘述，正確的是（）A.利用尿素固體培養(yǎng)基可迅速殺死其他微生物，而保留利用尿素的微生物B.牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨都能提供碳源和氮源，但不含無機鹽C.工業(yè)化生產(chǎn)中，酵母菌直接利用大麥淀粉發(fā)酵得到啤酒D.適宜濃度的酒精可使醋酸桿菌活化3、下列關(guān)于生物技術(shù)與倫理問題的觀點正確是（）A.反對設(shè)計試管嬰兒的原因之一是有人濫用此技術(shù)設(shè)計嬰兒性別B.通過基因篩查禁止重大疾病基因攜帶者就業(yè)C.大量引入國外轉(zhuǎn)基因作物與本地近緣作物品種雜交D.生物武器包括致病菌物、病毒、干擾素及基因重組的重組致病菌等4、下列關(guān)于基因工程技術(shù)的敘述，正確的是（）A.切割質(zhì)粒的限制性內(nèi)切核酸酶均特異性地識別6個核苷酸序列B.PCR反應(yīng)中溫度的周期性改變是為了DNA聚合酶催化不同的反應(yīng)C.檢測目的基因是否已經(jīng)成功表達可采用抗原-抗體雜交技術(shù)D.抗蟲基因只要成功地插入到植物細胞染色體上就一定能正常表達5、下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖1、圖2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點。下列說法正確的是（）。限制酶BamHIHindⅢEcoRISmaI識別序列及切割位點G↓GATCC

CCTAG↑GA↓AGCTT

TTCGA↑AG↓AATTC

CTTAA↑GCCC↓GGG

GGG↑CCC

A.重組DNA技術(shù)所用的工具酶是限制酶、DNA連接酶和運載體B.只有用同種限制酶切割DNA產(chǎn)生的粘性末端才能互補C.用圖中質(zhì)粒和外源基因DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，可使用SmaⅠ切割D.使用EcoRⅠ同時處理質(zhì)粒和外源DNA，可能會發(fā)生質(zhì)粒或者目的基因的自身環(huán)化6、用平板劃線法或稀釋涂布平板法都可以純化大腸桿菌，二者得共同點有（）

①可以用相同得培養(yǎng)基②都需要使用接種針進行接種③都需要在火焰旁進行接種④都可以用來計數(shù)活菌A.①②B.③④C.①③D.②④7、紫草寧是從紫草細胞中提取的一種藥物和色素，具有抗菌、消炎和抗腫瘤等活性。若通過植物細胞培養(yǎng)，進行工業(yè)化生產(chǎn)紫草寧，下列操作流程最符合要求的是（）A.紫草種子紫草紫草寧B.紫草花粉愈傷組織單倍體紫草紫草寧C.紫草外植體愈傷組織紫草紫草寧D.紫草外植體愈傷組織細胞懸液紫草寧8、科學(xué)家利用擬南芥的愈傷組織進行實驗，探究植物組織培養(yǎng)過程中誘導(dǎo)愈傷組織生根的機理，結(jié)果如圖所示。誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基（RIM）的配方中含有生長素（IAA），wei8是擬南芥生長素合成基因。下列說法正確的是（）

A.誘導(dǎo)形成愈傷組織和誘導(dǎo)生根、生芽過程均需避光處理B.增加培養(yǎng)基中IAA的濃度，1組的生根效果會更好C.2、4組比較，沒有遵循實驗設(shè)計中的單一變量原則D.培養(yǎng)基中的IAA和自身產(chǎn)生的生長素有利于愈傷組織生根評卷人得分二、多選題(共9題，共18分)9、嵌合體是指由兩個或兩個以上具有不同遺傳物質(zhì)的細胞系形成的聚合胚胎發(fā)育而成的個體嵌合體的制備是研究干細胞體內(nèi)分化能力的有效方法之一，有望在未來為解決器官移植供體短缺等醫(yī)學(xué)難題開辟新的方向。研究人員將小鼠誘導(dǎo)性胚胎干細胞（ES）注入到豬的囊胚期胚胎后獲得豬一鼠嵌合體。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.培育嵌合體與克隆動物的生物學(xué)原理不相同，前者運用的是細胞的增殖與分化后者是動物細胞核的全能性B.胚胎干細胞具有分化為成年動物體內(nèi)的任何一種類型的細胞的潛能C.將胚胎干細胞注入豬囊胚的滋養(yǎng)層處才能獲得豬—鼠嵌合體D.若培育出“人—獸嵌合體”將會面臨與克隆人一樣的倫理問題10、微衛(wèi)星DNA是廣泛分布于真核生物基因組中的簡單重復(fù)序列。由于重復(fù)單位的重復(fù)次數(shù)在個體間呈高度特異性并且數(shù)量豐富，因此，微衛(wèi)星DNA可以作為分子標(biāo)記，并有著廣泛應(yīng)用。根據(jù)“微衛(wèi)星DNA”的特點判斷，這種分子標(biāo)記可應(yīng)用于（）A.人類親子鑒定B.種群遺傳多樣性研究C.誘導(dǎo)基因突變D.冠狀病毒遺傳物質(zhì)測序11、下列說法錯誤的是（）A.因為土壤中各類微生物的數(shù)量不同，所以為獲得不同類型的微生物，要按不同的稀釋倍數(shù)進行分離B.測定土壤中細菌的總量和測定土壤中能分解尿素的細菌的數(shù)量，選用的稀釋范圍相同C.只有得到了3個或3個以上菌落數(shù)目在30～300的平板，才說明稀釋操作比較成功，并能夠進行菌落的計數(shù)D.牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的菌落數(shù)明顯大于選擇培養(yǎng)基的數(shù)目，說明選擇培養(yǎng)基已篩選出一些細菌菌落12、野生型大腸桿菌菌株能在基本培養(yǎng)基上生長，氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株無法合成某種氨基酸，只能在完全培養(yǎng)基上生長，下圖為純化某氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株的部分流程圖，①②③④代表培養(yǎng)基，A、B、C表示操作步驟，D、E為菌落。下列敘述正確的是（）

A.圖中①②④為完全培養(yǎng)基，③為基本培養(yǎng)基B.A操作的目的是提高突變率，增加突變株的數(shù)量C.B的正確操作是用涂布器蘸取菌液后均勻地涂布在②表面D.經(jīng)C過程原位影印及培養(yǎng)后，可從④中挑取D進行純化培養(yǎng)13、MIC是指藥敏試驗中某種抗生素對測試菌的最低抑制濃度。某研究小組將含有相同濃度抗生素I~IV的四個大小相同的紙片分別貼在長滿測試菌的瓊脂平板上，進行藥敏試驗以了解病原微生物對四種抗生素的敏感程度，用于指導(dǎo)臨床合理選用抗生素。圖1為實驗器材，圖2為實驗結(jié)果。下列敘述正確的是（）

A.為獲得長滿測試菌的瓊脂平板，需要使用圖1中工具①②③B.據(jù)圖2可知抗生素I的MIC大于抗生素皿的MICC.圖2抑菌圈中出現(xiàn)菌落的原因可能是病原菌中出現(xiàn)了能抗抗生素IV的突變株D.圖2抑菌圈中離紙片越近的菌落對抗生素IV的抗性越強14、研究發(fā)現(xiàn)，跨膜糖蛋白CD47與巨噬細胞表面的信號調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合，能抑制巨噬細胞的吞噬作用。腫瘤細胞表面的CD47含量比正常細胞表面的高，導(dǎo)致巨噬細胞對腫瘤細胞的清除效果減弱。為驗證抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對巨噬細胞的抑制作用，科學(xué)家按照如下流程進行了實驗組實驗。下列敘述正確的是（）

A.①過程注射CD47相當(dāng)于給小鼠注射抗原B.②過程依據(jù)的原理是細胞膜具有流動性C.③過程需要進行抗體檢測D.與對照組相比，圖中巨噬細胞的吞噬指數(shù)會下降15、楊梅果實風(fēng)味獨特，酸甜適中，具有很高的營養(yǎng)價值，關(guān)于楊梅發(fā)酵敘述錯誤的是（）A.傳統(tǒng)制作楊梅酒時應(yīng)將原料楊梅果汁進行高壓蒸汽滅菌B.缺少糖源和氧氣時，醋酸菌可直接將乙醇轉(zhuǎn)化成乙酸C.楊梅酒以楊梅為主要原料在酵母菌線粒體中發(fā)酵生成D.果酒發(fā)酵時酸性和缺氧環(huán)境會抑制雜菌生長16、凋亡誘導(dǎo)因子（AIF）位于線粒體膜間隙中，它既是對細胞凋亡起重要作用的蛋白質(zhì)，又具有氧化還原酶活性。有研究表明，AIF在胃癌細胞中的表達量高于在正常胃細胞中的。某醫(yī)學(xué)實驗室人員從胃癌患者的胃癌組織中提取AIF基因進行PCR擴增，并進行鑒定，相關(guān)過程如圖所示。下列敘述錯誤的是（）

A.檢測AIF在胃細胞中的表達量，可能成為預(yù)防胃癌的手段B.AIF引起的細胞凋亡是基因所決定的細胞死亡，不受環(huán)境條件的影響C.圖中逆轉(zhuǎn)錄和PCR均可獲取DNA產(chǎn)物，兩個過程所需要的原料和酶是相同的D.電泳鑒定AIF基因時，DNA分子的遷移速率與凝膠濃度和DNA分子的大小等有關(guān)17、發(fā)酵工程與農(nóng)業(yè)、食品工業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)及其他工業(yè)生產(chǎn)有著密切的聯(lián)系。下列對發(fā)酵工程及其應(yīng)用的敘述，正確的是（）A.啤酒的工業(yè)化生產(chǎn)過程中，酒精的產(chǎn)生積累主要在后發(fā)酵階段完成B.食品添加劑雖能改善食品的口味、色澤和品質(zhì)，但會降低食品的營養(yǎng)C.將乙肝病毒的抗原基因轉(zhuǎn)入酵母菌，再結(jié)合發(fā)酵工程可生產(chǎn)乙肝疫苗D.利用放線菌產(chǎn)生的井岡霉素防止水稻枯紋病是生物防治的有效手段評卷人得分三、填空題(共6題，共12分)18、DNA連接酶與DNA聚合酶作用的異同:

DNA聚合酶只能將______加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶是連接_____的末端，形成磷酸二酯鍵。19、功能：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中______部位的兩個核苷酸之間的______斷開，因此具有______。20、基因工程操作一般經(jīng)歷如下四個步驟：_____。21、在____________的溫度范圍內(nèi)，DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)解體，雙鏈分開，這過程成為__________。22、純化DNA，去除雜質(zhì)有________________個方案。23、我國政府同樣禁止進行治療性克隆實驗。（選擇性必修3P108）()評卷人得分四、判斷題(共3題，共24分)24、培養(yǎng)動物細胞一般使用液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基通常需要加入血清等一些天然成分。()A.正確B.錯誤25、制備單克隆抗體時，2次篩選的目的不同。()____A.正確B.錯誤26、蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上，延伸出來的第二代基因工程。()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共2題，共8分)27、β-苯乙醇是具有令人愉悅的玫瑰香味的高級芳香醇；廣泛用于食品和日化用品等生產(chǎn)領(lǐng)域。化學(xué)合成β-苯乙醇會產(chǎn)生多種雜質(zhì)，而植物萃取則周期長；成本高，因此采用微生物合成天然β-苯乙醇是工業(yè)化新趨勢。研究小組從玉米胚芽粕和玉米皮等淀粉加工下腳料及其肥料堆放的土壤中篩選可耐受高濃度β-苯乙醇的酵母菌株（YDF-1），實驗過程如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：

(1)該實驗需制作多種培養(yǎng)基，這些培養(yǎng)基的配方不同，但一般都含有水、無機鹽、__________等物質(zhì)，培養(yǎng)基制作后需使用__________法進行滅菌，滅菌后的培養(yǎng)基再添加相應(yīng)濃度的β-苯乙醇。由實驗?zāi)康目芍鹾Y、復(fù)篩及再次復(fù)篩的培養(yǎng)基中，添加的β-苯乙醇的濃度應(yīng)__________（填“保持不變”或“逐漸增大”或“逐漸降低”），理由是__________。

(2)若取稀釋倍數(shù)為104的0．1mL稀釋液涂布到含2g/L的YEPD培養(yǎng)基后培養(yǎng)至菌落穩(wěn)定，計算得出每毫升菌懸液中含4．5×106個菌體，則在該稀釋倍數(shù)下平板上的平均菌落數(shù)是__________個。將初篩獲得的菌株進行液體培養(yǎng)，其目的是________。

(3)若選用葡萄糖作為碳源，為確定YDF-1增殖的最佳濃度，請設(shè)計一個較為簡便的實驗進行探究，實驗設(shè)計思路是__________。28、四尾柵藻是一種淡水藻類；繁殖快；適應(yīng)性強，可作為制備生物柴油的重要原料之一。為提高四尾柵藻油脂含量，研究人員將從含油量高的紫蘇中獲得的二酰甘油?；D(zhuǎn)移酶基因（DGAT1）與pBI121質(zhì)粒構(gòu)建表達載體，經(jīng)轉(zhuǎn)化成功獲得高產(chǎn)油脂四尾柵藻，主要研究過程如下圖，其中DGAT1-F（5'-GCATCTAGAATGGCGATCTTGGACTC-3'）和DGAT1-R（5'-CGGATCCCTACCTTGCACTAGCTTTTC-3'）是以DGAT1基因為依據(jù)設(shè)計的一對引物，1acZ基因編碼產(chǎn)物在X-ga1和IPTG存在下，可以產(chǎn)生藍色沉淀，使菌落呈現(xiàn)藍色，否則菌落呈現(xiàn)白色。請回答下列問題。

(1)過程①中需要的酶有____________，過程②應(yīng)選用的限制酶是____________和____________。

(2)研究中，在保存DGAT1基因時，將克隆載體導(dǎo)入大腸桿菌的優(yōu)點有____________。

①穩(wěn)定保存②準(zhǔn)確復(fù)制③快速表達④方便取用。

(3)過程③經(jīng)轉(zhuǎn)化的大腸桿菌通過____________（方法）接種到培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)。為篩選獲得目標(biāo)菌株，培養(yǎng)基應(yīng)加入的成分有____________。

(4)為檢測表達載體轉(zhuǎn)化四尾柵藻的情況及確定目的基因是否表達，研究人員進行了如下實驗，請完成下表。實驗步驟簡要操作過程初篩培養(yǎng)經(jīng)轉(zhuǎn)化后的四尾柵藻接種于含①____________的BG11固體培養(yǎng)基并放置于人工氣候箱培養(yǎng)，一段時間后觀察其生長情況②____________在BG11固體培養(yǎng)基上分別挑取數(shù)個單藻落接種至BG11液體培養(yǎng)基中光照搖床培養(yǎng)，編號備用PCR驗證收集四尾柵藻藻體，提取基因組DNA，以DGAT1-F和DGAT1-R為引物，進行PCR驗證，未轉(zhuǎn)化的四尾柵藻作對照油脂含量測定利用索氏抽提法分別測定③____________的油脂含量結(jié)果處理統(tǒng)計并比較PCR驗證結(jié)果及藻體中油脂的含量評卷人得分六、綜合題(共3題，共30分)29、自生固氮菌是土壤中能獨立固定空氣中N2的細菌；將玉米種子用自生固氮菌拌種后播種，可顯著提高產(chǎn)量并降低化肥的使用量。科研人員進行了土壤中自生固氮菌的分離和固氮能力測定的研究，部分實驗流程如下圖。請回答下列問題：

(1)步驟①土樣應(yīng)取自當(dāng)?shù)豞____（填“表層”或“深層”）土壤；步驟②需充分振蕩20min，主要目的是_____；步驟③將土壤懸浮液稀釋了_____倍。

(2)下列為兩種培養(yǎng)基的配方，步驟④應(yīng)選其中的_____培養(yǎng)基，并加入瓊脂后進行高壓蒸汽滅菌、倒平板。純化培養(yǎng)時，需同時進行未接種培養(yǎng)基的培養(yǎng)，目的是_____。

Ashby培養(yǎng)基：甘露醇（C6H14O6）10g，KH2PO40．2g，MgSO4·7H2O0．2g，NaCl0．2g，K2SO40．3g，CaCO35g；蒸餾水1000mL。

LB培養(yǎng)基：蛋白胨10g；酵母膏5g，NaCl10g，蒸餾水1000mL，pH7．0～7．2．

(3)將純化的固氮菌置于完全培養(yǎng)液中擴大培養(yǎng)48h；經(jīng)離心后收集下層細胞并轉(zhuǎn)移至箱定培養(yǎng)基中進行固氮能力的測定，篩選出固氮能力最強的菌種CM12，為進一步鑒定其固氮能力，科研人員選用發(fā)芽一致的玉米種子進行3組盆栽實驗，30d后測定土壤微生物有機氮含量，結(jié)果如下圖。

N：尿素處理組[每盆土壤中澆灌50mL有氮全營養(yǎng)液（在1000mL無氮植物營養(yǎng)液中加入0．12g尿素）]；CM12：自生固氮菌CM12處理組（每盆土壤澆灌50mL接種自身固氮菌的無氮植物營養(yǎng)液）。

①對照組（CK）的處理為_____。

②實驗結(jié)果表明，用尿素處理和接種固氮菌CM12處理均能顯著增加土壤微生物有機氮含量。與尿素處理組相比，CM12處理組土壤微生物有機氮含量增加了約_____（保留l位小數(shù)）%。

③自生固氮菌較共生固氮菌（如根瘤菌）的應(yīng)用范圍更廣，原因是_____。30、利用轉(zhuǎn)基因的工程菌生產(chǎn)藥用蛋白；近些年在我國制藥行業(yè)中異軍突起。圖1是基因工程常用的一種質(zhì)粒；圖2是利用該質(zhì)粒構(gòu)建的一種基因表達載體。各限制酶質(zhì)粒上分別只有一處識別序列，將質(zhì)粒和重組質(zhì)粒用相應(yīng)的限制酶酶切后，得到的DNA片段長度如表中數(shù)據(jù)。請回答下列問題：

質(zhì)粒重組質(zhì)粒BglⅡ6．0kb7．1kbClaⅠ6．0kb2．3kb，4．8kbPstⅠ6．0kb1．5kb，5．6kb

(1)在基因工程中作為載體的質(zhì)粒應(yīng)具備的基本條件有___，而作為基因表達載體，除滿足上述基本條件外，還需具有__。

(2)為了獲得更多的目的基因，可用PCR擴增，PCR的原理是_____。PCR反應(yīng)體系中加入dNTP后，這些物質(zhì)既可以作為_____，也可以為反應(yīng)提供____。

(3)PCR中通常會得到不同的DNA產(chǎn)物，常采用_____法鑒定，不同DNA片段因_____等不同；在電場中的遷移速率也不同，因而可以形成不同條帶。

(4)已知質(zhì)粒被切除的片段長度為0．5kb，則與質(zhì)粒結(jié)合的目的基因長度為_______kb。質(zhì)粒上ClaⅠ與PstⅠ區(qū)域之間的長度為2．4kb（如圖1所示），結(jié)合圖2分析，目的基因上ClaⅠ、PstⅠ兩種限制酶的切割位點分別為______（在a、b兩點中選填）。

(5)培養(yǎng)受體菌時，在培養(yǎng)基中應(yīng)加入適量的_____，可以將導(dǎo)入重組質(zhì)粒和普通質(zhì)粒的受體菌都篩選出來。31、胰蛋白酶抑制劑（TI）可抑制昆蟲蛋白酶活性；阻礙昆蟲消化蛋白質(zhì)。鹽藻是一種無細胞壁的單細胞真核綠藻，是能在高鹽條件下生長的新型生物反應(yīng)器。研究人員利用基因工程技術(shù)構(gòu)建TI基因的表達載體，并將其導(dǎo)入鹽藻細胞中，進行了一系列實驗?；卮鹣铝袉栴}：

(1)研究人員利用PCR技術(shù)特異性地擴增目的基因的前提是需要___________，以便合成引物。PCR過程中溫度的控制至關(guān)重要，將處理溫度控制在90～95℃，是為了___________。

(2)獲取目的基因后，為了構(gòu)建基因表達載體，還需要使用的酶是___________（答出2種）。構(gòu)建成功的基因表達載體應(yīng)含有的結(jié)構(gòu)有目的基因、啟動子、___________（答出3種）等結(jié)構(gòu)。

(3)研究人員將TI基因?qū)胧荏w細胞后進行了檢測，相關(guān)步驟和實驗結(jié)果如表所示。該檢測方法依據(jù)的原理是___________。據(jù)表分析，該實驗結(jié)果說明___________。組別實驗步驟實驗結(jié)果①②③③轉(zhuǎn)基因鹽藻（A組）離心收集三組細胞制備可溶性蛋白質(zhì)樣品將TI注射到大白兔體內(nèi)，獲取TI抗體讓TI抗體和樣品進行混合檢測有雜交帶非轉(zhuǎn)基因鹽藻（B組）無雜交帶無雜交帶陽性對照組（C組）有雜交帶有雜交帶參考答案一、選擇題(共8題，共16分)1、B【分析】【分析】

建立有關(guān)的生物技術(shù)安全性和倫理問題的法律法規(guī)；能夠規(guī)范相關(guān)科學(xué)家的研究行為，有效防止生物技術(shù)安全性問題和倫理問題。

【詳解】

“胚胎冷藏”技術(shù)所引起的這些爭論；實質(zhì)是冷凍胚胎的道德與法律地位的爭論，即帶來的倫理問題，故選B。

【點睛】

本題主要考查生物技術(shù)的安全性和倫理問題，意在考查考生理解所學(xué)知識的要點，辨別是非的能力。2、D【分析】【分析】

1；培養(yǎng)基選擇分解尿素的微生物的原理：培養(yǎng)基的氮源為尿素；只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作為氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生長發(fā)育繁殖，而受到抑制，所以用此培養(yǎng)基就能夠選擇出分解尿素的微生物。

2；培養(yǎng)基的配制除了基本的營養(yǎng)條件之外；還需要滿足特定微生物對特殊營養(yǎng)的需求。

3；醋酸菌是一種好氧性細菌；只有當(dāng)氧氣充足時，才能進行旺盛的生理活動。若氧氣、糖源充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；若缺少糖源、氧氣充足，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰胰┳優(yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】

A；尿素固體培養(yǎng)基是以尿素為唯一氮源；不能殺死其他微生物，其篩選出尿素分解菌的原因在于只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，獲得氮源，才能在此培養(yǎng)基中存活，其余微生物由于無法分解尿素，最終死亡，A錯誤；

B；牛肉膏與蛋白胨不僅能為微生物提供碳源、氮源、無機鹽；還能為微生物提供生長因子，B錯誤；

C；酵母菌不能直接利用大麥淀粉；需要利用酶將其水解成葡萄糖，利用葡萄糖發(fā)酵得到啤酒，C錯誤；

D；適宜濃度的酒精可使醋化醋桿菌活化；因為在缺少糖源、氧氣充足，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，乙醛變?yōu)榇姿?，D正確。

故選D。3、A【分析】【分析】

1；試管嬰兒技術(shù)是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精；并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。

2；設(shè)計試管嬰兒技術(shù)是通過體外受精獲得許多胚胎；然后從中選擇符合要求的胚胎，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。

3；轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)、過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。

【詳解】

A；反對設(shè)計試管嬰兒的原因之一是有人濫用此技術(shù)設(shè)計嬰兒性別；我國不允許利用體外受精技術(shù)篩選早期胚胎性別，A正確；

B；通過基因篩查禁止重大疾病基因攜帶者就業(yè)；不符合倫理道德，B錯誤；

C；引入外來物種不慎會導(dǎo)致生態(tài)入侵；C錯誤；

D；生物武器種類包括致病微生物、病毒、生化毒劑；以及經(jīng)過基因重組的致病菌等，D錯誤。

故選A。

【點睛】4、C【分析】【分析】

基因工程是指按照人們的愿望；進行嚴(yán)格的設(shè)計，并通過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)賦予生物以新的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。基因工程的工具有限制酶；DNA連接酶、基因的載體?；蚬こ痰幕静僮鞒绦颍海?）目的基因的獲取。（2）基因表達載體的構(gòu)建。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞。（4）目的基因的檢測和鑒定。

【詳解】

A；大多數(shù)限制酶的識別序列由6個核苷酸組成；也有少數(shù)限制酶的識別序列由4、5或8個核苷酸組成，A錯誤；

B；PCR過程每輪循環(huán)一般分為變性、復(fù)性、延伸三步。變性：將溫度上升到90℃以上時；雙鏈DNA解聚為單鏈。復(fù)性：溫度下降到50℃左右，兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結(jié)合。延伸：溫度上升到72℃左右，溶液中的四種脫氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下，根據(jù)堿基互補配對原則合成新的DNA鏈，故溫度的周期性改變不是為了DNA聚合酶催化不同的反應(yīng)，B錯誤；

C；目的基因的檢測和表達可以從四個方面進行：（1）首先要檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因；方法是采用DNA分子雜交技術(shù)。（2）其次還要檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA，方法是采用分子雜交技術(shù)。（3）最后檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，方法是采用抗原—抗體雜交技術(shù)。（4）有時還需進行個體生物學(xué)水平的鑒定，如生物抗蟲或抗病的鑒定等，C正確；

D；由于細胞內(nèi)基因是選擇性表達的；抗蟲基因即使成功地插入到植物細胞染色體上，也未必能正常表達，需要進行檢測和鑒定，D錯誤。

故選C。5、D【分析】【分析】

限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）主要是從原核生物中分離純化出來的；自然界中限制酶的天然作用是破環(huán)外來基因；限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端；限制酶本身的合成是受基因控制的；因為限制酶是蛋白質(zhì)，基因指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成。

【詳解】

A；重組DNA技術(shù)所用的工具酶是限制酶、DNA連接酶；運載體不是酶，A錯誤；

B；不同種限制酶切割DNA產(chǎn)生的黏性末端也可能互補；B錯誤；

C；由于目的基因內(nèi)部含有SmaI的切割位點；故不能使用SmaI切割目的基因，C錯誤；

D；使用EcoRI同時處理質(zhì)粒和外源DNA；可能會發(fā)生質(zhì)?；蛘吣康幕虻淖陨憝h(huán)化，故可用兩種限制酶切割質(zhì)粒和外源DNA，防止自身環(huán)化，D正確。

故選D。6、C【分析】【分析】

微生物常見的接種的方法：

1；平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。不能用于計數(shù)。

2；稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落?？捎糜诰溆嫈?shù)。

【詳解】

①平板劃線法或稀釋涂布平板法都是在固體培養(yǎng)基上進行的；①正確；

②平板劃線法接種用接種環(huán)；稀釋涂布平板法接種要用涂布器，②錯誤；

③不論是平板劃線法還是稀釋涂布平板法都需要進行無菌操作；在酒精燈火焰旁進行，③正確；

④平板劃線法不能用于計數(shù)活菌；只能用于純化菌種；稀釋涂布平板法可以用來計數(shù)活菌，④錯誤。

故選C。7、D【分析】【分析】

由題意可知；紫草寧是從紫草細胞中提取的一種藥物和色素，即通過組織培養(yǎng)獲得細胞懸液即可提取紫草寧。

【詳解】

由題意可知；紫草寧是從紫草細胞中提取的一種藥物和色素，即通過取外植體通過脫分化獲得愈傷組織后用纖維素酶處理后使細胞分散為細胞懸液，經(jīng)培養(yǎng)增殖后即可提取紫草寧，ABC錯誤，D正確。

故選D。8、D【分析】【分析】

高度分化的細胞或組織通過脫分化形成愈傷組織；愈傷組織經(jīng)過再分化可形成完整植株，體現(xiàn)了植物細胞的全能性。

【詳解】

A；誘導(dǎo)形成愈傷組織需避光處理；A錯誤；

B；生長素具有低濃度促進、高濃度抑制的作用特點；繼續(xù)增加其濃度，到一定值后會產(chǎn)生抑制作用，B錯誤；

C；2、4組實驗進行比較；除自變量是否含IAA外，其他致量一致，遵循單一變量原則，C錯誤；

D；分析第1組結(jié)果可知；培養(yǎng)基中的IAA和自身產(chǎn)生的生長素有利于愈傷組織生根，D正確。

故選D。二、多選題(共9題，共18分)9、A:B:D【分析】【分析】

1；胚胎移植的基本程序主要包括：①對供、受體的選擇和處理。選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體；有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體，供體和受體是同一物種。并用激素進行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對供體母牛做超數(shù)排卵處理。②配種或人工授精。③對胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存。配種或輸精后第7天，用特制的沖卵裝置，把供體母牛子宮內(nèi)的胚胎沖洗出來（也叫沖卵）。對胚胎進行質(zhì)量檢查，此時的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹胚或囊胚階段。直接向受體移植或放入-196℃的液氮中保存。④對胚胎進行移植。⑤移植后的檢查。對受體母牛進行是否妊娠的檢查。

2；胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ)：①動物發(fā)情排卵后；同種動物的供、受體生殖器官的生理變化是相同的。這就為供體的胚胎移入受體提供了相同的生理環(huán)境。②早期胚胎在一定時間內(nèi)處于游離狀態(tài)。這就為胚胎的收集提供了可能。③受體對移入子宮的外來胚胎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。這為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能。④供體胚胎可與受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系，但供體胚胎的遺傳特性在孕育過程中不受影響。

【詳解】

A；培育嵌合體的生物學(xué)原理是細胞的增殖和分化；克隆動物的生物學(xué)原理是動物細胞核具有全能性，兩者的原理不相同，操作方法有差別，A正確；

B；由題干信息“將小鼠誘導(dǎo)性胚胎干細胞（ES）注入到豬的囊胚期胚胎后獲得豬一鼠嵌合體”可知；胚胎干細胞分化程度低，具有分化為成年動物體內(nèi)的任何一種類型的細胞的潛能，B正確；

C；滋養(yǎng)層細胞將來發(fā)育成胎膜、胎盤；內(nèi)細胞團將來發(fā)育為胚胎的各種組織、器官，故應(yīng)將胚胎干細胞注入豬囊胚的內(nèi)細胞團處才能獲得豬—鼠嵌合體，C錯誤；

D；若培育出“人—獸嵌合體”將會面臨與克隆人一樣的倫理問題；是不道德的，D正確。

故選ABD。

【點睛】10、A:B【分析】【分析】

微衛(wèi)星DNA是真核生物基因組中的簡單重復(fù)序列；由于重復(fù)單位的重復(fù)次數(shù)在個體間呈高度特異性并且數(shù)量豐富，可以作為分子標(biāo)記應(yīng)用于人類親子鑒定；種群遺傳多樣性研究。

【詳解】

AB；微衛(wèi)星DNA是真核生物基因組中的簡單重復(fù)序列；且重復(fù)單位的重復(fù)次數(shù)在個體間呈高度特異性，因此可用于人類親子鑒定、物種間親緣關(guān)系鑒定、物質(zhì)和遺傳多樣性的研究等，AB正確；

C；誘導(dǎo)基因突變的因素有物理因素、化學(xué)因素和生物因素；與微衛(wèi)星DNA的特性無關(guān)，C錯誤；

D；冠狀病毒的遺傳物質(zhì)是RNA；其測序與微衛(wèi)星DNA的特性無關(guān)，D錯誤。

故選AB。11、B:C【分析】【分析】

1；從土壤中篩選目的微生物的流程一般為：土壤取樣→樣品的稀釋→將稀釋液涂布到以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上→挑選能生長的菌落→鑒定。當(dāng)樣品的稀釋庋足夠高時；培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)來推測樣品中大約含有的活菌數(shù)。

2、統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法：（1）顯微鏡直接計數(shù)法：①原理：利用特定細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板，在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物數(shù)量；②方法：用計數(shù)板計數(shù)；③缺點：不能區(qū)分死菌與活菌。（2）間接計數(shù)法（活菌計數(shù)法）：①原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌．通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。②操作：a、設(shè)置重復(fù)組，增強實驗的說服力與準(zhǔn)確性；b；為了保證結(jié)果準(zhǔn)確；一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進行計數(shù)。③計算公式：每克樣品中的菌株數(shù)=（c÷V）×M，其中c代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積（mL），M代表稀釋倍數(shù)。

【詳解】

AB；樣品的稀釋度直接影響平板上生長的菌落數(shù)目；土壤中各類微生物數(shù)量不同，所以為獲得不同類型的微生物，要按不同的稀釋倍數(shù)進行分離，A正確；B錯誤；

C；在同一稀釋度下只要得到兩個或兩個以上的菌落數(shù)目在30～300的平板；就說明稀釋操作比較成功，并能夠進行菌落的計數(shù)，C錯誤；

D；驗證選擇培養(yǎng)基是否具有選擇作用；需設(shè)立牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基作為對照，若后者的菌落數(shù)明顯大于前者，說明前者具有篩選作用，D正確。

故選BC。

【點睛】12、A:D【分析】【分析】

由題圖信息分析可知；圖中首先利用培養(yǎng)基擴增菌體，然后在涂布在平板上，再通過影印法將菌種接種到兩種培養(yǎng)基中，分別是基本培養(yǎng)基；完全培養(yǎng)基；野生型大腸桿菌菌株能在基本培養(yǎng)基上生長，而氨基酸營養(yǎng)缺陷型菌株由于發(fā)生基因突變無法合成某種氨基酸只能在完全培養(yǎng)基上生長，據(jù)此利用培養(yǎng)基的種類便可以選擇出氨基酸突變株。

【詳解】

A；野生型大腸桿菌菌株能在基本培養(yǎng)基上生長；氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株無法合成某種氨基酸，只能在完全培養(yǎng)基上生長，根據(jù)題干信息和圖形分析，圖中①②④中含有菌落，①②④為完全培養(yǎng)基，③中影印處無菌落，③為基本培養(yǎng)基，A正確；

B；紫外線可以提高突變的頻率；而A操作即培養(yǎng)的目的是提高已經(jīng)突變菌株的濃度（A操作不能提高突變率），即增加突變株的數(shù)量，B錯誤；

C；B操作是將菌液滴加到培養(yǎng)基表面；再用涂布器將菌液均勻的涂布在②表面，C錯誤；

D；從圖中可看出；D在③基本培養(yǎng)基中無法生長，在完全培養(yǎng)基中可生長，說明D是氨基酸缺陷型菌落，故經(jīng)C過程影印及培養(yǎng)后，可從④培養(yǎng)基中挑取D菌落進行純化培養(yǎng)，D正確。

故選AD。13、A:B:C【分析】【分析】

1；平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

2；稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后形成單個菌落。

【詳解】

A；為獲得長滿測試菌的瓊脂平板；需要用到的接種方法是稀釋涂布平板法。稀釋涂布平板法需要用到酒精燈、涂布器和培養(yǎng)基，A正確；

B；MIC是指藥敏試驗中某種抗生素對測試菌的最低抑制濃度。含有相同濃度抗生素Ⅰ～Ⅳ的四個大小相同的紙片分別貼在長滿測試菌的瓊脂平板上；抗生素Ⅰ的抑菌圈比抗生素Ⅲ的抑菌圈小。說明抗生素Ⅰ的MIC大于抗生素Ⅲ的MIC。即想要達到和抗生素Ⅲ相同的抑菌效果抗生素Ⅰ要增加濃度才行，B正確；

C；圖2抑菌圈中出現(xiàn)菌落的原因可能是病原菌中出現(xiàn)了能抗抗生素Ⅳ的突變株；這些突變株在抗生素的環(huán)境下能夠存活并繁殖形成菌落。細菌是原核生物，發(fā)生變異最可能是基因突變，C正確；

D；在抑菌圈中出現(xiàn)的菌落都是對該種抗生素具有抗性的菌株；它們之間抗性的強弱無法根據(jù)題干信息進行判斷。如果要判斷它們之間抗性的強弱還需進一步實驗才能確定，D錯誤。

故選ABC。

【點睛】

本題考查的知識點包括：微生物接種，微生物培養(yǎng)及微生物的應(yīng)用。14、A:B:C【分析】【分析】

單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細胞；誘導(dǎo)B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；①過程注射CD47相當(dāng)于給小鼠注射抗原；通過多次注射可獲得更多已免疫的B淋巴細胞，A正確；

B；②過程表示誘導(dǎo)細胞融合；依據(jù)的原理是細胞膜具有流動性，B正確；

C；③過程表示雜交瘤細胞多次篩選培養(yǎng)；該過程需要進行抗體檢測，從而獲得能產(chǎn)生我們所需要抗體的雜交瘤細胞，C正確；

D；根據(jù)題干中“抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對巨噬細胞的抑制作用”；因此與對照組相比，圖中巨噬細胞的吞噬指數(shù)會升高，D錯誤。

故選ABC。15、A:B:C【分析】【分析】

果酒制作的原理：在無氧條件下；酵母菌能進行酒精發(fā)酵。果醋制作的原理：當(dāng)氧氣；糖源充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】

A；傳統(tǒng)發(fā)酵原料無需嚴(yán)格滅菌；高壓蒸汽會破壞菌種，A錯誤；

B；醋酸菌是好氧菌；氧氣充足，糖源充足時，將糖分解成乙酸，缺少糖源時，醋酸菌可將乙醇轉(zhuǎn)化成乙醛，再將乙醛變?yōu)橐宜?，B錯誤；

C；酒精的生成場所在細胞質(zhì)基質(zhì)；C錯誤；

D；果酒發(fā)酵過程產(chǎn)生的酸性和缺氧環(huán)境抑制了雜菌生長；D正確。

故選ABC。16、B:C【分析】【分析】

DNA分子具有可解離的基團；在一定的pH下，這些基團可以帶上正電荷或負(fù)電荷。在電場的作用下，這些帶電分子會向著與它所帶電荷相反的電極移動，這個過程就是電泳。DNA分子的遷移速率與凝膠濃度和DNA分子的大小和構(gòu)象等有關(guān)。

【詳解】

A；根據(jù)題干信息；有研究表明，AIF在胃癌細胞中的表達量高于在正常胃細胞中的，因此檢測AIF在胃細胞中的表達量，可能成為預(yù)防胃癌的手段，A正確；

B；AIF引起的細胞凋亡是基因所決定的細胞死亡；會受環(huán)境條件的影響，B錯誤；

C；逆轉(zhuǎn)錄和PCR均可獲取DNA產(chǎn)物；兩個過程所需要的原料均是脫氧核苷酸，但逆轉(zhuǎn)錄需要逆轉(zhuǎn)錄酶，而PCR需要耐高溫的DNA聚合酶，C錯誤；

D；電泳鑒定AIF基因時；DNA分子的遷移速率與凝膠濃度和DNA分子的大小等有關(guān)，分子越大，遷移速率越慢，D正確。

故選BC。17、C:D【分析】【分析】

發(fā)酵工程的基本環(huán)節(jié)：選育菌種：性狀優(yōu)良的菌種可以從自然界中篩選出來；也可以通過誘變育種或基因工程育種獲得。發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵：這是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)。在發(fā)酵過程中，要隨時檢測培養(yǎng)液中的微生物數(shù)量；產(chǎn)物濃度等，以了解發(fā)酵進程。還要及時添加必需的營養(yǎng)組分，要嚴(yán)格控制溫度、pH和溶解氧等發(fā)酵條件。分離、提純產(chǎn)物：如果是發(fā)酵產(chǎn)品是微生物細胞本身，可在發(fā)酵結(jié)束之后，采用過濾、沉淀等方法將菌體分離和干燥，即可得到產(chǎn)品。如果產(chǎn)品是代謝物，可根據(jù)產(chǎn)物的性質(zhì)采取恰當(dāng)?shù)奶崛?、分離和純化措施來獲得產(chǎn)品。

【詳解】

A；啤酒發(fā)酵過程分為主發(fā)酵和后發(fā)酵兩個階段。酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代謝物的生成都是在主發(fā)酵階段完成；因此啤酒的工業(yè)化生產(chǎn)過程中，酒精的產(chǎn)生積累主要在主發(fā)酵階段完成，A錯誤；

B；食品添加劑能改善食品的口味、色澤和品質(zhì)；可以增加食品的營養(yǎng)，B錯誤；

C；通過基因工程技術(shù)；將乙肝病毒的抗原基因轉(zhuǎn)入酵母菌，再結(jié)合發(fā)酵工程可生產(chǎn)乙肝疫苗，C正確；

D；利用放線菌產(chǎn)生的井岡霉素防止水稻枯紋?。徊粫Νh(huán)境造成污染，是生物防治的有效手段，D正確。

故選CD。三、填空題(共6題，共12分)18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】單個核苷酸兩個DNA片段19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】特定磷酸二酯鍵特異性20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】提取目的基因、目的基因與運載體結(jié)合、將目的基因?qū)胧荏w細胞、目的基因的檢測與鑒定。21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】80—100℃變性22、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】323、略

【分析】【詳解】

中國政府的態(tài)度：禁止生殖性克隆，不反對治療性克隆，該表述錯誤。【解析】錯誤四、判斷題(共3題，共24分)24、A【分析】【分析】

液體培養(yǎng)基主要是模擬動物體內(nèi)環(huán)境；動物體細胞是生活在組織液當(dāng)中，而且細胞要直接從組織液里獲得營養(yǎng)和排出廢物。所以液體培養(yǎng)基相當(dāng)于組織液的液體環(huán)境。

【詳解】

為了保證細胞培養(yǎng)時營養(yǎng)物質(zhì)和生長因子的供給，培養(yǎng)基中需添加一定量的動物血清等天然成分，可以補充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)，故該表述正確。25、A【分析】【詳解】

制備單克隆抗體時，第一次篩選的目的是獲得雜交瘤細胞，第二次篩選目的是獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞，故正確。26、A【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程是在分子水平上通過基因修飾或基因合成來完成的，是在基因工程的基礎(chǔ)上延伸出來的第二代基因工程。故該說法正確。五、實驗題(共2題，共8分)27、略

【分析】【分析】

培養(yǎng)基是指供給微生物；植物或動物（或組織）生長繁殖的；由不同營養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營養(yǎng)基質(zhì)。一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機鹽（包括微量元素）、維生素和水等幾大類物質(zhì)。培養(yǎng)基既是提供細胞營養(yǎng)和促使細胞增殖的基礎(chǔ)物質(zhì)，也是細胞生長和繁殖的生存環(huán)境。培養(yǎng)基種類很多，根據(jù)配制原料的來源可分為自然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基；根據(jù)物理狀態(tài)可分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基；根據(jù)培養(yǎng)功能可分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、加富培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等；根據(jù)使用范圍可分為細菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基、酵母菌培養(yǎng)基、真菌培養(yǎng)基等。

【詳解】

（1）培養(yǎng)基一般都含有水；無機鹽、碳源和氮源等物質(zhì)；以滿足生物生長的需求；培養(yǎng)基制作后需使用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌；由于本實驗的目的是獲得可耐受高濃度β-苯乙醇的酵母菌株，因此實驗初篩、復(fù)篩和再次復(fù)篩時培養(yǎng)基中添加的β-苯乙醇濃度要逐漸升高。

（2）根據(jù)計算公式：（平均菌落數(shù)）÷涂布體積×稀釋倍數(shù)=每毫升菌液中的菌體數(shù)，可知：（平均菌落數(shù)）÷0．1mL×104=4．5×106個；所以平板上的平均菌落數(shù)是45個；液體培養(yǎng)是指將微生物直接接種于液體培養(yǎng)基中，并不斷振蕩或攪拌，可以迅速得到大量繁殖體。

（3）由實驗?zāi)康目芍搶嶒灥淖宰兞渴瞧咸烟侨芤旱臐舛?，因變量是YDF-1的增殖情況，可通過顯微鏡直接計數(shù)這一簡便的方法來確定其增殖情況，因此實驗的設(shè)計思路是設(shè)置一系列濃度梯度的葡萄糖溶液，再向其中分別接種等量的YDF-1，每天定時用血細胞計數(shù)板統(tǒng)計溶液中的菌體數(shù)量，增殖效果最佳的葡萄糖溶液即為YDF-1增殖的最佳濃度。【解析】(1)碳源；氮源高壓蒸汽滅菌逐漸增大只有將培養(yǎng)基中β-苯乙醇的濃度逐漸增大；才能篩選得到可耐受高濃度β-苯乙醇的酵母菌株。

(2)45增加目的菌株濃度。

(3)設(shè)置一系列濃度梯度的葡萄糖溶液，再向其中分別接種等量的YDF-1，每天定時用血細胞計數(shù)板統(tǒng)計溶液中的菌體數(shù)量，增殖效果最佳的葡萄糖溶液即為YDF-1增殖的最佳濃度28、略

【分析】【分析】

1；基因工程的基本工具：限制性內(nèi)切核酸酶；識別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的磷酸二酯鍵斷開。DNA連接酶，將兩個DNA片段連接起來，恢復(fù)被限制酶切開的磷酸二酯鍵。載體，將外源基因送入受體細胞。

2；基因工程的基本過程：目的基因的篩選與獲?。换虮磉_載體的構(gòu)建，將目的基因?qū)胧荏w細胞，目的基因的檢測和鑒定。

【詳解】

（1）過程①包括逆轉(zhuǎn)錄和PCR，逆轉(zhuǎn)錄需要反轉(zhuǎn)錄酶的參與，PCR過程需要耐高溫的DNA聚合酶。限制酶的作用是識別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的磷酸二酯鍵斷開，對比幾種限制酶的結(jié)合位點和DGAT1-F、DGAT1-R的堿基序列，可知過程②應(yīng)選用的限制酶是BamHI和XbaI。

（2）將克隆載體導(dǎo)入大腸桿菌；可以與外界環(huán)境隔離，能夠穩(wěn)定保存，準(zhǔn)確復(fù)制，大腸桿菌比基因方便取用，故選①②④。

（3）根據(jù)培養(yǎng)基上菌落的分布可知所用接種方法是稀釋涂布平板法?？寺≥d體中含有氨芐青霉素抗性基因；1acZ基因；1acZ基因編碼產(chǎn)物在X-ga1和IPTG存在下，可以產(chǎn)生藍色沉淀，使菌落呈現(xiàn)藍色，否則菌落呈現(xiàn)白色，所以為篩選獲得目標(biāo)菌株，培養(yǎng)基應(yīng)加入的成分有氨芐青霉素、X-gal、IPTG。

（4）pBI121質(zhì)粒中含有卡那霉素抗性基因，所以經(jīng)轉(zhuǎn)化后的四尾柵藻接種于含卡那霉素的BG11固體培養(yǎng)基并放置于人工氣候箱培養(yǎng)，一段時間后觀察其生長情況。在BG11固體培養(yǎng)基上分別挑取數(shù)個單藻落接種至BG11液體培養(yǎng)基中光照搖床培養(yǎng)，液體培養(yǎng)基可以用于擴大培養(yǎng)，增加四尾柵藻種群密度。上一步驟中用未轉(zhuǎn)化的四尾柵藻作對照，所以利用索氏抽提法分別測定（等量的）轉(zhuǎn)化后和未轉(zhuǎn)化的四尾柵藻的油脂含量，從而檢測表達載體轉(zhuǎn)化四尾柵藻的情況及確定目的基因是否表達?！窘馕觥?1)反轉(zhuǎn)錄酶、耐高溫的DNA聚合酶BamHIXbaI

(2)①②④

(3)稀釋涂布平板法氨芐青霉素；X-gal、IPTG

(4)卡那霉素擴大培養(yǎng)（等量的）轉(zhuǎn)化后和未轉(zhuǎn)化的四尾柵藻六、綜合題(共3題，共30分)29、略

【分析】【分析】

1；微生物常見的接種的方法：（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)基表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

2；培養(yǎng)基是人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求；配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)；分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中一般含有水、碳源、氮源和無機鹽，其中碳源和氮源常采用蛋白胨和牛肉膏，因為它們來源于動物原料，含有糖、維生素和有機氮等營養(yǎng)物質(zhì)。在提供上述幾種主要營養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)和氧氣的要求。

(1)

土壤中含有豐富的微生物；同其他生物環(huán)境相比，土壤中的微生物數(shù)量最大；種類最多。在富含有機質(zhì)的土壤表層，有更多的微生物生長，故步驟①土樣應(yīng)取自當(dāng)?shù)乇韺油寥?；步驟②需充分振蕩20min，主要目的是使土壤中的微生物充分釋放到無菌水中；由圖觀察可知，步驟③中的稀釋梯度分別為10、100、1000倍，實驗中取樣進行培養(yǎng)的是稀釋倍數(shù)為1000的試管中的菌懸液。

(2)

由題干信息分析可知，科研人員的目的是分離土壤中的自生固氮菌，故為了模擬類似的生長環(huán)境，培養(yǎng)基中需要添加多種無機鹽來模擬土壤環(huán)境，同時不能有含氮物質(zhì)，因此步驟④應(yīng)選擇其中的Ashby培養(yǎng)基；純化培養(yǎng)時；需同時進行未接種培養(yǎng)基的培養(yǎng)，目的是檢測培養(yǎng)過程中培養(yǎng)基是否被雜菌污染。

(3)

①對照組的目的是排除無關(guān)變量對實驗的影響；故對照組（CK）的處理為每盆土壤澆灌50mL無氮植物營養(yǎng)液。

②由柱狀圖可知；與尿素處理組相比，CM12處理組土壤微生物有機氮含量增加了（22-12）÷12×100%≈83．3%。

③自生固氮菌較共生固氮菌（如根瘤菌）的應(yīng)用范圍更廣；原因是自生固氮菌能在土壤中獨立固氮，不受宿主的限制。

【點睛】

本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識記相關(guān)知識，意在考查考生理解所學(xué)知識并能從題目所給的圖形中獲取有效信息的能力?！窘馕觥?1)表層使土壤中的微生物充分釋放到無