3.精子畸形試驗(yàn)_第1頁
3.精子畸形試驗(yàn)_第2頁
3.精子畸形試驗(yàn)_第3頁
3.精子畸形試驗(yàn)_第4頁
3.精子畸形試驗(yàn)_第5頁
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精子畸形試驗(yàn)原理精子畸形是指精子形狀改變,導(dǎo)致畸形精子數(shù)量增多。（婦女自發(fā)流產(chǎn)與丈夫精子數(shù)目減少或畸形精子數(shù)量增多與有關(guān)。）精子畸形是環(huán)境理化因素對(duì)精原細(xì)胞遺傳物質(zhì)損傷的結(jié)果。小鼠精子畸形實(shí)驗(yàn)是一種檢測(cè)環(huán)境理化因素對(duì)雄性生殖細(xì)胞遺傳損傷的遺傳毒理學(xué)方法。試劑和材料(1)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物一般采用雜交雄性小鼠，鼠齡8-10周。

(2)試劑生理鹽水、甲醇(化學(xué)純)、伊紅染色液、環(huán)磷酰胺(30mg/kg或甲基磺酸甲醋(50mg/kg)或絲裂霉素C(l.0mg/kg)。

步驟(1)給藥方法

按各種受試物實(shí)際侵入途徑，選擇適當(dāng)?shù)慕o藥途徑，可1次(急性)或連續(xù)5次(亞急性)給藥。步驟(2)頸椎脫臼法處死小鼠，剪開腹腔，取出睪丸分離出雙側(cè)附睪，放入盛有4mL生理鹽水的小平皿中，用眼科剪剪碎組織。(3)將懸液通過四層擦鏡紙濾入離心管中。(4)濾液以1000r/min離心5min。

步驟(5)吸去上清液，視沉淀物多少，加入適量的生理鹽水，混勻后，涂片。(6)空氣干燥后，用甲醇固定5min，干后用2%伊紅水溶液染色40min，沖洗，吹干后鏡檢。步驟(7)鏡檢，在低倍鏡下找到背景清晰、精子重疊較少的部位，用高倍鏡按順序檢查精子的形態(tài)。每只動(dòng)物檢查完整的精子1000個(gè)。精子畸形主要表現(xiàn)在頭部，畸形的類型可分為無鉤、香蕉形、無定形、胖頭、雙頭以及雙尾等。無尾精子、頭部重疊的或精子整個(gè)與另一個(gè)重疊的均不計(jì)數(shù)。分別記錄各種類型畸形的精子，進(jìn)行精子畸形類

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