一輪復(fù)習(xí)課件-微生物的培養(yǎng)及應(yīng)用

考綱原生態(tài)1.微生物的別離和培養(yǎng)2.某種微生物數(shù)量的測(cè)定3.培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用1考點(diǎn)一微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)1．培養(yǎng)基(1)概念：人們按照微生物對(duì)_________的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的_________。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽pH氧氣固體培養(yǎng)基2分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基種類(lèi)特點(diǎn)用途根據(jù)物理性質(zhì)液體培養(yǎng)基不加凝固劑工業(yè)生產(chǎn)半固體培養(yǎng)基加凝固劑，如瓊脂觀(guān)察微生物的運(yùn)動(dòng)、分類(lèi)、鑒定固體培養(yǎng)基加凝固劑，如瓊脂微生物分離、鑒定、活菌計(jì)數(shù)根據(jù)用途選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物的生長(zhǎng)，促進(jìn)所需要的微生物的生長(zhǎng)培養(yǎng)、分離出特定微生物鑒別培養(yǎng)基根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品鑒別不同種類(lèi)的微生物微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)根底知識(shí)1．培養(yǎng)基3【練習(xí)穩(wěn)固】(2010·全國(guó)卷Ⅰ改造)某細(xì)菌固體培養(yǎng)基的組成成分是KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、瓊脂和蒸餾水，其中凝固劑是__________，碳源是________，氮源是_________。只有能合成脲酶的細(xì)菌才能在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，故該培養(yǎng)基屬于______培養(yǎng)基。從同化作用類(lèi)型的角度看，用該培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)菌屬于_________。異養(yǎng)型瓊脂葡萄糖尿素選擇4煮沸消毒法灼燒滅菌條件結(jié)果常用的方法消毒滅菌較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體外表或內(nèi)部的對(duì)人體有害的局部微生物(不包括芽孢和孢子)煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外線(xiàn)或化學(xué)藥物消毒法強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌2．無(wú)菌技術(shù)5考點(diǎn)一微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)6考點(diǎn)一微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)3．純化大腸桿菌的原理與方法(1)原理：在培養(yǎng)基上將細(xì)菌稀釋或分散成單個(gè)細(xì)胞，使其長(zhǎng)成單個(gè)的菌落，這個(gè)菌落就是純化的細(xì)菌菌落。7比較平板劃線(xiàn)法稀釋涂布平板法原理優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)適用范圍考點(diǎn)一微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基外表連續(xù)劃線(xiàn)的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基上。在數(shù)次劃線(xiàn)后培養(yǎng)，可以別離到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的肉眼可見(jiàn)的子細(xì)胞群體，即菌落將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋?zhuān)缓髮⒉煌♂尪鹊木悍謩e涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的外表，進(jìn)行培養(yǎng)。在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基外表形成單個(gè)的菌落可以觀(guān)察菌落特征，對(duì)混合菌進(jìn)行別離可以計(jì)數(shù)，可以觀(guān)察菌落特征不能計(jì)數(shù)吸收量較少，較麻煩，平板不枯燥效果不好，容易蔓延適用于好氧菌適用于厭氧菌和兼性厭氧菌(2)純化微生物的接種方法：8考點(diǎn)一微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)平板劃線(xiàn)法純化大腸桿菌時(shí)不同階段灼燒接種環(huán)的目的不同(1)第一次操作：殺死接種環(huán)上原有的微生物。(2)每次劃線(xiàn)之前：殺死上次劃線(xiàn)后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃線(xiàn)的菌種直接來(lái)源于上次劃線(xiàn)的末端。(3)劃線(xiàn)結(jié)束后：殺死接種環(huán)上殘存的菌種，防止細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。9考點(diǎn)一微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)(1)培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進(jìn)行滅菌。(2013·江蘇)()(2)轉(zhuǎn)換劃線(xiàn)角度后需灼燒接種環(huán)再進(jìn)行劃線(xiàn)。 (2013·江蘇)()(3)接種后的培養(yǎng)皿須放在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 (2013·江蘇)()(4)培養(yǎng)過(guò)程中每隔一周觀(guān)察一次。(2013·江蘇)()(5)在瓊脂固體培養(yǎng)基上長(zhǎng)出的單個(gè)菌落含有多種細(xì)菌。 (2011·重慶)()(6)在培養(yǎng)基中參加青霉素可抑制真菌而促進(jìn)細(xì)菌生長(zhǎng)，向液體培養(yǎng)基中通入氧氣能促進(jìn)破傷風(fēng)桿菌的生長(zhǎng)。 (2011·重慶)()(7)對(duì)新配制的培養(yǎng)基滅菌時(shí)所用的設(shè)備是高壓蒸汽滅菌鍋。實(shí)驗(yàn)前需對(duì)超凈工作臺(tái)進(jìn)行消毒處理。(2010·山東)()(8)用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板。 (2009·安徽)()×√××××√√10D題組一微生物的培養(yǎng)1．(2015·北京市東城區(qū)聯(lián)考)細(xì)菌需要從外界吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)并通過(guò)代謝來(lái)維持正常的生長(zhǎng)和繁殖。以下與此有關(guān)的說(shuō)法正確的選項(xiàng)是 ()A．乳酸菌與硝化細(xì)菌所利用的碳源是相同的B．氮源不可能作為細(xì)菌的能源物質(zhì)C．瓊脂是細(xì)菌生長(zhǎng)和繁殖中不可缺少的一種物質(zhì)D．以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上長(zhǎng)出的不都是尿素分解菌11題組一微生物的培養(yǎng)2．隨著科技的開(kāi)展，微生物在生產(chǎn)活動(dòng)中得到了廣泛應(yīng)用。以下關(guān)于微生物培養(yǎng)的表達(dá)，正確的選項(xiàng)是()A．青霉素就是抗生素，在青霉菌的培養(yǎng)過(guò)程中不用嚴(yán)格滅菌B．培養(yǎng)基中參加的瓊脂可以作為微生物的碳源C．為了防止污染，在微生物培養(yǎng)過(guò)程中，操作人員的手必須經(jīng)過(guò)嚴(yán)格滅菌D．在菌種選育過(guò)程中可以利用人工誘變等手段D12成分含量成分含量NaNO33gFeSO40.01gK2HPO41g(CH2O)30g瓊脂15gH2O1000mLMgSO4·7H2O0.5g青霉素0.1萬(wàn)單位題組一微生物的培養(yǎng)3．下表所示為某微生物培養(yǎng)基的配方，有關(guān)表達(dá)錯(cuò)誤的選項(xiàng)是ＣA.依物理性質(zhì)劃分，該培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基；依用途劃分，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基B．由培養(yǎng)基的原料可知，所培養(yǎng)微生物的同化作用類(lèi)型是異養(yǎng)型，培養(yǎng)的微生物可以是酵母菌或毛霉C．本培養(yǎng)基中青霉素的添加滿(mǎn)足了微生 物生長(zhǎng)對(duì)特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的要求D．假設(shè)用該培養(yǎng)基別離能分解尿素的細(xì)菌，應(yīng)除去青霉素和NaNO3，并應(yīng)參加尿素13題組一微生物的培養(yǎng)1．篩選微生物的原理人為提供有利于目的菌株生長(zhǎng)的條件(包括營(yíng)養(yǎng)、溫度、pH等)，同時(shí)抑制或阻止其他微生物的生長(zhǎng)。因此，可以通過(guò)配制選擇培養(yǎng)基、控制培養(yǎng)條件等選擇目的微生物。2．選擇培養(yǎng)基的設(shè)計(jì)原理和功能 根據(jù)某種微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某些物理、化學(xué)因素(如溫度、pH等)的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基。此類(lèi)培養(yǎng)基能使混合菌株中的目的菌株變?yōu)閮?yōu)勢(shì)菌，從而提高該菌的篩選效率。14題組一微生物的培養(yǎng)3．選擇培養(yǎng)基應(yīng)用實(shí)例序號(hào)改變的條件分離的目的菌12345參加青霉素參加高濃度的食鹽缺乏氮源石油作為唯一碳源高溫環(huán)境酵母菌和霉菌金黃色葡萄球菌固氮微生物分解石油的微生物耐高溫微生物15題組二微生物純化的方法分析4．有關(guān)平板劃線(xiàn)操作正確的選項(xiàng)是()A．使用已滅菌的接種環(huán)、培養(yǎng)皿，操作過(guò)程中不再滅菌B．翻開(kāi)含菌種的試管后要通過(guò)火焰滅菌，取出菌種后要馬上塞上棉塞C．將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線(xiàn)即可D．最后將平板倒置，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)D16題組二微生物純化的方法分析5．苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì)，自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工廠(chǎng)產(chǎn)生的廢水中含有苯酚，為了降解廢水中的苯酚，研究人員從土壤中篩選獲得了能降解利用苯酚的細(xì)菌菌株篩選的主要步驟如以下圖所示，①為土壤樣品。以下相關(guān)表達(dá)錯(cuò)誤的選項(xiàng)是 ()ＣA．圖中②培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)參加苯酚作為碳源B．如果要測(cè)定②中活細(xì)菌數(shù)量，常采用稀釋涂布平板法C．假設(shè)圖中④為對(duì)照實(shí)驗(yàn)，那么其中應(yīng)以苯酚作為唯一的碳源D．使用平板劃線(xiàn)法可以在⑥上獲得 單菌落17題組二微生物純化的方法分析微生物純化的三種途徑(1)單菌落挑取法：利用平板劃線(xiàn)法或稀釋涂布平板法接種到固體平板培養(yǎng)基外表，直接根據(jù)微生物菌落的特征利用單菌落挑取的方法獲得目的微生物。(2)選擇培養(yǎng)法：利用選擇培養(yǎng)基對(duì)微生物進(jìn)行選擇培養(yǎng)，直接獲得目的微生物。(3)鑒定培養(yǎng)法：利用鑒別培養(yǎng)基使目的微生物菌落呈現(xiàn)特有的特征，然后篩選目的微生物。18考點(diǎn)二微生物的別離與數(shù)量測(cè)定1．土壤中分解尿素的細(xì)菌的別離與計(jì)數(shù)(1)別離原理 土壤中細(xì)菌之所以能分解尿素，是因?yàn)樗鼈兡芎铣蒧____，這種物質(zhì)在把尿素分解成無(wú)機(jī)物的過(guò)程中起到_____作用。(2)統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目 統(tǒng)計(jì)樣品中的活菌一般用_____________法。(3)實(shí)驗(yàn)流程 土壤取樣→___________→微生物的培養(yǎng)與觀(guān)察→細(xì)菌的_____。脲酶催化稀釋涂布平板樣品的稀釋計(jì)數(shù)19考點(diǎn)二微生物的別離與數(shù)量測(cè)定2．分解纖維素的微生物的別離 (1)纖維素酶 ①組成：纖維素酶是一種______，一般認(rèn)為它至少包括三種組分，即________________________。 ②作用：葡萄糖復(fù)合酶C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶20 (2)纖維素分解菌的篩選 ①原理：纖維素分解菌

↓ ②篩選方法：_______染色法，即通過(guò)是否產(chǎn)生_______來(lái)篩選纖維素分解菌。 ③培養(yǎng)基：以_______為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基。紅色復(fù)合物透明圈剛果紅透明圈纖維素考點(diǎn)二微生物的別離與數(shù)量測(cè)定21 ④實(shí)驗(yàn)流程： 土壤取樣：富含_______的環(huán)境 ↓ 選擇培養(yǎng)：用__________培養(yǎng)，以增加纖維素分解菌的濃度 ↓ _________：制備系列稀釋液 ↓ 涂布平板：將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上 ↓ 挑選產(chǎn)生_______的菌落纖維素選擇培養(yǎng)基梯度稀釋透明圈考點(diǎn)二微生物的別離與數(shù)量測(cè)定22考點(diǎn)二微生物的別離與數(shù)量測(cè)定(1)別離微生物所用的選擇培養(yǎng)基一定是固體培養(yǎng)基，因?yàn)榫渲荒茉诠腆w培養(yǎng)基上形成。(2)平板劃線(xiàn)法只適合用于微生物的提純，不適合進(jìn)行計(jì)數(shù)，并且在最后一次劃線(xiàn)的末端處的菌種最純。23√√×√考點(diǎn)二微生物的別離與數(shù)量測(cè)定(1)要從土壤中別離獲取纖維素分解菌，應(yīng)選用以纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基。(2013·太原五中月考)()(2)在纖維素分解菌培養(yǎng)過(guò)程中，對(duì)培養(yǎng)基和接種環(huán)常采用的滅菌方法分別是高壓蒸汽滅菌和灼燒滅菌。 (2013·許昌二次調(diào)研)()(3)透明圈是剛果紅與纖維素形成的復(fù)合物，可根據(jù)是否出現(xiàn)透明圈來(lái)判斷有無(wú)纖維素分解菌。(2011·山東改編)()(4)測(cè)定培養(yǎng)液中微生物數(shù)量，可選用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法。 (2010·山東)()(5)在“檢測(cè)土壤中細(xì)菌總數(shù)”的實(shí)驗(yàn)中，確定對(duì)照組無(wú)菌后，選擇菌落數(shù)在300以上的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。 (2009·安徽)()(6)假設(shè)用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)大腸桿菌活菌的個(gè)數(shù)，要想使所得估計(jì)值更接近實(shí)際值，除應(yīng)嚴(yán)格操作、屢次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測(cè)樣品稀釋的比例適宜。(2009·高考寧夏卷)()×√24題組三對(duì)別離分解尿素細(xì)菌及纖維素分解菌的篩選分析1．欲從土壤中別離出能分解尿素的細(xì)菌，以下實(shí)驗(yàn)操作中，不正確的選項(xiàng)是 ()A．將土壤用無(wú)菌水進(jìn)行一系列的梯度稀釋B．同一濃度的土壤稀釋液應(yīng)至少涂布三個(gè)平板C．可將未接種的培養(yǎng)基在相同條件下培養(yǎng)作為對(duì)照D．用參加剛果紅指示劑的培養(yǎng)基可篩選出分解尿素的細(xì)菌D25題組三對(duì)別離分解尿素細(xì)菌及纖維素分解菌的篩選分析2．(2015·泰州質(zhì)檢)利用農(nóng)作物秸稈為原料可生產(chǎn)乙醇，生產(chǎn)過(guò)程中可采用微生物將秸稈水解或用酶水解，其主要技術(shù)流程如以下圖所示，以下相關(guān)說(shuō)法錯(cuò)誤的選項(xiàng)是 A．可用剛果紅染色法篩選過(guò)程①所需的纖維素分解菌B．過(guò)程①參加的纖維素酶是葡萄糖苷酶C．酒精發(fā)酵接種的酵母菌需在無(wú)氧條件下發(fā)酵D．酒精發(fā)酵前需對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌Ｂ26項(xiàng)目土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離分解纖維素的微生物的分離方法使用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)利用富含纖維素的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)原理土壤中不能分解尿素的微生物因缺乏脲酶而不能正常生長(zhǎng)，能夠分解尿素的微生物能利用尿素為氮源正常生長(zhǎng)，從而起到選擇作用因?yàn)榕囵B(yǎng)基中含有豐富的纖維素，因此能夠分解纖維素的微生物具有更多的生存機(jī)會(huì)而大量繁殖特有代謝過(guò)程題組三對(duì)別離分解尿素細(xì)菌及纖維素分解菌的篩選分析篩選微生物的兩種方法比較27題組四微生物的計(jì)數(shù)分析D3．(2015·北京市海淀區(qū)高三期中)以下關(guān)于“檢測(cè)土壤中細(xì)菌總數(shù)”實(shí)驗(yàn)操作的表達(dá)中，不正確的選項(xiàng)是()A．用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高壓蒸汽滅菌后倒平板B．取104、105、106倍土壤稀釋液和無(wú)菌水各0.1ml涂布不同平板C．將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組平板倒置，37℃恒溫培養(yǎng)24～48小時(shí)D．確定對(duì)照組無(wú)菌后，選擇菌落數(shù)在300以上的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)28題組四微生物的計(jì)數(shù)分析