營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座VIP

第四節(jié)培養(yǎng)基FoodsofMicroorganisms1887獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第1頁培養(yǎng)基概念人工配制、適合于不一樣微生物生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物混合營養(yǎng)基質(zhì)。培養(yǎng)基條件任何培養(yǎng)基都應(yīng)該具備微生物生長所需六大營養(yǎng)要素適當(dāng)營養(yǎng)素種類適當(dāng)營養(yǎng)素百分比培養(yǎng)基幾乎是一切對微生物進(jìn)行研究和利用工作基礎(chǔ)。碳源、氮源、能源、生長因子、無機(jī)鹽和水獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第2頁培養(yǎng)基中應(yīng)含滿足微生物生長發(fā)育：水分、碳源、氮源、生長因子以及基本離子，磷、硫、鈉、鈣、鎂、鉀和鐵及各種微量元素。另外，培養(yǎng)基還應(yīng)含有適宜酸堿度(pH值)和一定緩沖能力及一定氧化還原電位和適當(dāng)滲透壓。獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第3頁一、選取和設(shè)計(jì)培養(yǎng)基標(biāo)準(zhǔn)和方法（一）選取和設(shè)計(jì)培養(yǎng)基標(biāo)準(zhǔn)1、目標(biāo)明確2、營養(yǎng)協(xié)調(diào)3、理化條件適宜4、經(jīng)濟(jì)節(jié)約在微生物學(xué)研究和生產(chǎn)實(shí)踐中，配制適當(dāng)培養(yǎng)基是一項(xiàng)最基本要求。獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第4頁1、目標(biāo)明確培養(yǎng)對象及產(chǎn)物培養(yǎng)目標(biāo)不一樣，原料選擇和配比不一樣。培養(yǎng)不一樣微生物應(yīng)依據(jù)其特點(diǎn)采取不一樣培養(yǎng)條件。營養(yǎng)類型及種類不一樣微生物需要不一樣培養(yǎng)基。自養(yǎng)型微生物培養(yǎng)基：不能含有機(jī)物，由簡單無機(jī)物組成。異養(yǎng)型微生物需要在培養(yǎng)基中添加有機(jī)物，如異養(yǎng)型細(xì)菌慣用牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基。光能營養(yǎng)型需要提供光照。獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第5頁細(xì)菌、放線菌、酵母菌和霉菌營養(yǎng)要求現(xiàn)有共性也有特征，應(yīng)選取不一樣培養(yǎng)基。放線菌：麥芽汁培養(yǎng)基；酵母菌：高氏培養(yǎng)基；霉菌：察氏培養(yǎng)基或豆芽汁等培養(yǎng)基。主要幾類微生物所需培養(yǎng)基各不相同。獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第6頁2、營養(yǎng)協(xié)調(diào)微生物細(xì)胞組成元素調(diào)查分析，是培養(yǎng)基設(shè)計(jì)主要參考依據(jù)。培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)濃度適當(dāng)時(shí)，微生物才能生長良好。濃度過低，不能滿足需要；濃度過高，對其生長有抑制作用，如高滲溶液抑菌作用。營養(yǎng)物質(zhì)之間濃度配比，直接影響微生物生長繁殖或代謝產(chǎn)物積累。不一樣營養(yǎng)物質(zhì)之間百分比：大致十倍遞減。獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第7頁營養(yǎng)協(xié)調(diào)標(biāo)準(zhǔn)中需要注意幾點(diǎn)其中碳氮比（C/N）影響較大。碳氮比（C/NRatio）指在微生物培養(yǎng)基中所含碳源中碳原子摩爾數(shù)與氮源中氮原子摩爾數(shù)之比指培養(yǎng)基中碳源物質(zhì)與氮源物質(zhì)質(zhì)量比值，也指培養(yǎng)基中還原糖含量與粗蛋白含量比值獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第8頁碳氮比主要性碳源不足，菌體易早衰；氮源過量，菌體生長過旺，代謝產(chǎn)物積累少；氮源不足，菌體生長過慢。真菌：高C/N比細(xì)菌：低C/N比我們能夠經(jīng)過控制培養(yǎng)基碳氮比，來調(diào)控菌體生長或代謝產(chǎn)物積累。獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第9頁培養(yǎng)基中各礦質(zhì)元素間百分比要適當(dāng)，預(yù)防單鹽毒害作用。某種氨基酸過多，發(fā)生氨基酸不平衡，將會(huì)影響對其它氨基酸吸收。微量元素除尤其需要外，普通不另外供給。因?yàn)榕囵B(yǎng)基中所加牛肉膏、蛋白胨、糖及其它無機(jī)鹽中均含有一定量微量元素。用自來水配制培養(yǎng)基時(shí)，微量元素更不成問題。獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第10頁3、理化條件適宜培養(yǎng)基理化條件pH水分活度（Aw）和滲透壓氧化還原電位（Eh）獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第11頁(1)pH各類微生物生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物最適pH條件各不相同，各大類微生物都有適當(dāng)生長pH范圍。通常培養(yǎng)條件細(xì)菌和放線菌：pH7.0～7.5酵母菌和霉菌：pH4.5～6.0范圍內(nèi)生長獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第12頁在微生物生長繁殖和代謝過程中，常因營養(yǎng)物質(zhì)消耗和代謝產(chǎn)物積累，引發(fā)pH改變，造成微生物生長遲緩、代謝產(chǎn)物產(chǎn)量下降。

為防止此現(xiàn)象，維持培養(yǎng)基pH相對恒定，通常加入pH緩沖劑，進(jìn)行調(diào)整。pH內(nèi)源調(diào)整磷酸鹽緩沖液（KH2PO4、K2HPO4）不溶性碳酸鹽CaCO3或碳酸氫鈉pH外源調(diào)整指在培養(yǎng)過程中不?；蜷g斷向液體培養(yǎng)基中流加酸液或堿液調(diào)整方法。獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第13頁(2)水分活度（Aw）和滲透壓微生物在等滲環(huán)境中良好生長

高滲環(huán)境生長受抑：質(zhì)壁分離

低滲環(huán)境脆弱菌體易破裂死亡：吸水膨脹微生物有一定適應(yīng)滲透壓改變能力

細(xì)胞內(nèi)滲透壓調(diào)整機(jī)制滲透壓大小由溶液中所含分子或離子質(zhì)點(diǎn)數(shù)決定幾個(gè)數(shù)據(jù)

G+細(xì)菌：20atm

G-細(xì)菌：5～10atm獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第14頁獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第15頁水分活度水分活度Aw

相同溫度和壓力下，體系中溶液水蒸汽壓與純水蒸汽壓之比。亦等于該溶液百分相對濕度。表示微生物可實(shí)際利用游離水含量Aw=p/p0微生物生長最低Aw普通細(xì)菌：0.91（嗜鹽細(xì)菌0.75,葡萄球菌0.85）普通酵母：0.88（耐高滲酵母：0.60）普通霉菌：0.80（干性霉菌：0.65）獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第16頁常見食品水分活度物品名稱Aw純水1.000人血0.995新鮮水果0.97～0.98海水0.98家畜鮮肉0.97面包0.95糖醬、火腿0.90物品名稱Aw香腸0.85果醬0.80飽和蔗糖液0.76咸魚0.75糖果、干果0.70谷物、面粉0.65奶粉0.20獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第17頁度量某氧化還原系統(tǒng)中還原劑釋放電子或氧化劑接收電子趨勢一個(gè)指標(biāo)。（3）氧化還原電位（Eh）普通好氧菌：0.1伏以上可生長，0.3-0.4伏適宜兼性厭氧菌：0.1伏以上有氧呼吸；0.1伏以下進(jìn)行發(fā)酵厭氧菌：低于0.1伏條件下生長不一樣類型微生物生長對氧化還原電位要求不一樣。獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第18頁影響Eh原因與氧分壓相關(guān)受pH影響。pH↓或[O2]↑，Eh↑

增加通氣量（如振蕩培養(yǎng)、攪拌）提升培養(yǎng)基氧分壓，或加入氧化劑，可增加Eh；煮沸驅(qū)氧后將培養(yǎng)基與空氣隔絕，以及在培養(yǎng)基中加入抗壞血酸（0.1%）、硫化氫（0.025%）、半胱氨酸（<0.05%）、鐵屑等可降低Eh。獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第19頁4、經(jīng)濟(jì)節(jié)約配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)盡可能選取廉價(jià)且易取得原料做培養(yǎng)基成份。尤其是在發(fā)酵工業(yè)中，以降低生產(chǎn)成本。以粗代精：糖蜜V蔗糖以野代家：粗木薯粉V優(yōu)質(zhì)淀粉以廢代好

黃豆?jié){水

造紙廠亞硫酸廢液（含戊糖）以簡代繁以無機(jī)氮代蛋白以纖代糖以烴代糧以國代進(jìn)獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第20頁選取粗原料--對微生物而言，純度較高精原料(如蔗糖)其營養(yǎng)成份倒不如純度低粗原料(如紅糖)完全。粗原料中所謂“雜質(zhì)”能提供微生物各種營養(yǎng)要素，且價(jià)格較低。設(shè)計(jì)培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)盡可能利用粗原料。

----選取工農(nóng)業(yè)副產(chǎn)品--微生物發(fā)酵所需標(biāo)準(zhǔn)原料(如碳源中糖、淀粉及氮源中蛋白胨等)價(jià)格昂貴，農(nóng)副產(chǎn)品及其它工業(yè)下腳料等價(jià)格低廉。故在碳源選擇上，應(yīng)選取富含淀粉薯類、廢糖蜜、麩皮、酒糟、醬渣及紙廠含有戊糖等成份亞硫酸廢液等代替純淀粉和糖類；在氮源上，用棉子餅粉、蠶蛹粉、豆餅粉及花生餅粉等副產(chǎn)物代替黃豆粉等蛋白質(zhì)原料。

----選取無機(jī)氮源--“無機(jī)氮”指硝酸鹽、銨鹽和尿素等。在培養(yǎng)基中用無機(jī)氮作氮源，讓微行物將其轉(zhuǎn)化為氨基酸、蛋白質(zhì)等含氮有機(jī)物，生產(chǎn)菌體蛋白。微生物蛋白生產(chǎn)效率遠(yuǎn)高于植物和動(dòng)物蛋白，可補(bǔ)充當(dāng)前人類食物及動(dòng)物飼料中蛋白質(zhì)嚴(yán)重不足。

----選取低濃度培養(yǎng)基--普通認(rèn)為培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)種類愈多、含量愈高其營養(yǎng)愈豐富，發(fā)酵效果愈好。但營養(yǎng)物質(zhì)過多，會(huì)造成溶氧量下降，滲透壓增大等副效應(yīng)，對微生物生長不利。故培養(yǎng)基設(shè)計(jì)應(yīng)充分考慮營養(yǎng)物種類和含量，用“稀薄”培養(yǎng)基代替營養(yǎng)物過“濃”豐富培養(yǎng)基，節(jié)約原料，提升發(fā)酵產(chǎn)物產(chǎn)量獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第21頁（二）選取和設(shè)計(jì)培養(yǎng)基方法生態(tài)模擬

自然基質(zhì)或模擬：初級天然培養(yǎng)基肉湯、魚汁果汁濕潤麩皮米糠、米飯、面包查閱文件精心設(shè)計(jì)：優(yōu)選法或正交試驗(yàn)試驗(yàn)比較培養(yǎng)皿瓊脂平板搖瓶培養(yǎng)臺式發(fā)酵罐獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第22頁二、培養(yǎng)基種類對培養(yǎng)基成份了解培養(yǎng)基物理狀態(tài)培養(yǎng)基對微生物功效獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第23頁按對培養(yǎng)基成份了解來分天然培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基半合成培養(yǎng)基獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第24頁天然培養(yǎng)基利用化學(xué)成份還不清楚或不恒定天然有機(jī)物制成培養(yǎng)基牛肉膏、酵母膏、蛋白胨、玉米粉、馬鈴薯、麩皮、動(dòng)物組織器官浸出液、麥芽汁培養(yǎng)基特點(diǎn)營養(yǎng)豐富重復(fù)性差:成份復(fù)雜，每批成份不穩(wěn)定適于試驗(yàn)室制備基礎(chǔ)培養(yǎng)基及大生產(chǎn)種子培養(yǎng)基獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第25頁合成培養(yǎng)基用化學(xué)成份和量都確切知道高純化學(xué)試劑配成培養(yǎng)基高氏一號（淀粉硝酸鹽培養(yǎng)基）檸檬酸鹽培養(yǎng)基葡萄糖銨鹽培養(yǎng)基蔗糖硝酸鹽培養(yǎng)基（察氏培養(yǎng)基）特點(diǎn)

重現(xiàn)性好、價(jià)格高、配制繁慣用于研究,不宜于大規(guī)模生產(chǎn)。獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第26頁半合成培養(yǎng)基由部分天然有機(jī)物和部分化學(xué)藥品配成培養(yǎng)基。馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基特點(diǎn)

成本低、配制方便，用于生產(chǎn)、試驗(yàn)

獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第27頁液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基脫水培養(yǎng)基按物理狀態(tài)分獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第28頁液體培養(yǎng)基（LiquidMedium）未加任何凝固劑。在用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物時(shí)，能夠經(jīng)過振蕩或攪拌增加培養(yǎng)基通氣量，同時(shí)使?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)分布均勻。應(yīng)用微生物生理、代謝研究取得大量菌體：營養(yǎng)物質(zhì)以溶質(zhì)狀或高度分散態(tài)存在，微生物能充分與養(yǎng)料接觸，微生物生長快發(fā)酵工業(yè)大規(guī)模生產(chǎn)：工業(yè)上常采取液體深層發(fā)酵法生產(chǎn)抗生素等各種微生物產(chǎn)品。獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第29頁固體培養(yǎng)基（SolidMedium）外觀呈固態(tài)培養(yǎng)基，可在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑成固體胨狀凝固劑：對大多數(shù)微生物來說，瓊脂是最理想凝固劑。1.5－2%瓊脂：聚半乳糖硫酸酯5－12%明膠：蛋白質(zhì)獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第30頁理想凝固劑應(yīng)具備條件1、不被所培養(yǎng)微生物分解利用；2、在微生物生長范圍內(nèi)保持固體狀態(tài)。在培養(yǎng)嗜熱細(xì)菌時(shí)，為預(yù)防因?yàn)楦邷匾l(fā)培養(yǎng)基液化，通常在培養(yǎng)基中適當(dāng)增加凝固劑。3、凝固點(diǎn)溫度不能太低，不然不利于微生物生長。4、對所培養(yǎng)微生物無毒害作用。5、在滅菌過程中不被破壞。6、透明度好、黏著力強(qiáng)。7、配制方便且價(jià)格低廉。獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第31頁慣用凝固劑有瓊脂、明膠、硅膠等，對大多數(shù)微生物來說，瓊脂是最理想凝固劑。獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第32頁獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第33頁固體培養(yǎng)基類型固化培養(yǎng)基

凝固劑：瓊脂、明膠、海藻酸膠、脫乙酰吉蘭糖膠、多聚醇非可逆固化培養(yǎng)基

血清培養(yǎng)基

無機(jī)硅膠培養(yǎng)基天然固態(tài)培養(yǎng)基

麩皮、米糠、木屑、纖維、稻草粉

馬鈴薯片、胡蘿卜條、大米、麥粒、大豆、面包

動(dòng)植物組織培養(yǎng)基濾膜：醋酸纖維薄膜獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第34頁固體培養(yǎng)基應(yīng)用應(yīng)用廣泛菌種分離計(jì)數(shù)選種育種檢驗(yàn)雜菌菌種保藏生物活性物質(zhì)生物測定真菌孢子微生物固體培養(yǎng)和大規(guī)模生產(chǎn)獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第35頁天然固體培養(yǎng)基如小米、大米、麩皮及馬鈴薯等可直接用作培養(yǎng)基培養(yǎng)霉菌、放線菌。小米麩皮等物質(zhì)含有一定量碳源和能源物質(zhì)，又含有大量礦質(zhì)元素、微量元素和生長素，而且質(zhì)地疏松透氣，比表面大，是培養(yǎng)孢子和制備粗酶制劑良好培養(yǎng)基。如用麩皮培養(yǎng)黑曲霉生產(chǎn)糖化酶，培養(yǎng)米曲霉生產(chǎn)米曲霉孢子，用蒸煮大豆接種米曲霉進(jìn)行固體培養(yǎng)，利用分泌蛋白酶制作豆醬等。獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第36頁液體培養(yǎng)基中加0.2-0.5%瓊脂，表觀呈固態(tài)，猛烈震蕩后則破散。應(yīng)用菌運(yùn)動(dòng)性、趨化性研究細(xì)菌、酵母菌菌種保藏厭氧菌培養(yǎng)分離和計(jì)數(shù)半固體培養(yǎng)基獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第37頁脫水培養(yǎng)基預(yù)制干燥培養(yǎng)基

含有除水以外一切成份商品培養(yǎng)基。使用時(shí)加適量水并加以滅菌即可生產(chǎn)商品化培養(yǎng)基企業(yè)

Merck獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第38頁按培養(yǎng)基功效分基礎(chǔ)培養(yǎng)基選擇性培養(yǎng)基判別培養(yǎng)基其它培養(yǎng)基獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第39頁基礎(chǔ)培養(yǎng)基盡管不一樣微生物營養(yǎng)需求不一樣，但大多數(shù)微生物所需基本營養(yǎng)物質(zhì)是相同?；A(chǔ)培養(yǎng)基是含有普通微生物生長繁殖所需基本營養(yǎng)物質(zhì)培養(yǎng)基。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是最慣用基礎(chǔ)培養(yǎng)基。獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第40頁選擇培養(yǎng)基用于將某種或某類微生物從混雜微生物群體中分離出來培養(yǎng)基。依據(jù)不一樣種類微生物特殊營養(yǎng)需求或?qū)δ撤N化學(xué)物質(zhì)敏感性不一樣，在培養(yǎng)基中加入特殊營養(yǎng)物質(zhì)或化學(xué)物質(zhì)，有利于所需微生物生長，抑制或殺死其它微生物。實(shí)例紅曲霉耐高溫耐酸泡菜加富性選擇培養(yǎng)基抑制性選擇培養(yǎng)基獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第41頁也稱為營養(yǎng)培養(yǎng)基，即在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入一些特殊營養(yǎng)物質(zhì)制成一類營養(yǎng)豐富培養(yǎng)基。如加入血、血清、動(dòng)植物組織提取液等，以培養(yǎng)營養(yǎng)要求比較苛刻異養(yǎng)微生物。加富營養(yǎng)物：特殊碳源和氮源、甘露醇、纖維素和濃糖。該培養(yǎng)基中生長微生物并不是一個(gè)純種，而是營養(yǎng)要求相同一類微生物，用于菌種保留或菌種分離篩選。加富性選擇培養(yǎng)基獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第42頁抑制性選擇培養(yǎng)基在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，這種化學(xué)物質(zhì)沒有營養(yǎng)作用，對所需分離微生物無害，但能夠抑制或殺死其它微生物。選擇性抑菌劑：染料、抗生素、脫氧膽酸鈉抗生素—抑制細(xì)菌、放線菌苯酚—抑細(xì)菌、霉菌制霉菌素—抑真菌結(jié)晶紫、牛膽酸鹽—抑G+細(xì)菌亞硫酸鉍—抑制革蘭氏陽性菌和絕大多數(shù)革蘭氏陰性菌獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第43頁判別培養(yǎng)基添加特定試劑或化學(xué)藥品對特定微生物判別、區(qū)分培養(yǎng)基。添加能夠與目標(biāo)菌無色代謝產(chǎn)物發(fā)生顯色反應(yīng)指示劑，從而能夠用肉眼就能輕易地區(qū)分目標(biāo)菌菌落培養(yǎng)基；伊紅美藍(lán)（EMB）平板

用于檢驗(yàn)飲水和乳品中是否含腸道致病菌

E.coli呈紫綠色金屬光澤，沙門氏菌菌落無色透明獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第44頁EMB培養(yǎng)基組成EMB培養(yǎng)基成份/g蛋白胨：10乳糖：5蔗糖：5K2HPO4：2伊紅Y：0.4美藍(lán)：0.065蒸餾水：1000最終pH：7.2獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第45頁獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第46頁獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第47頁培養(yǎng)基中慣用指示劑酸堿指示劑酚紅溴甲酚紫溴蔭香草酚藍(lán)中性紅中國藍(lán)甲基紅酸性復(fù)紅氧化還原指示劑：美藍(lán)和刃天青獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第48頁1．配制：計(jì)算、稱量、溶解2．調(diào)整pH：用3%HCI/NaOH調(diào)整，pH7.0-7.23．溶化瓊脂

4．分裝：分裝過程中注意不要使培養(yǎng)基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引發(fā)污染。固體分裝裝量為管高1/5，半固體分裝試管普通以試管高度1/3為宜分裝三角燒瓶量以不超出三角燒瓶容積二分之一為宜。培養(yǎng)基配制編號成份含量①粉狀硫10g②（NH4）2SO40.4g③K2HPO44.0g④MgSO49.25g⑤FeSO40.5g⑥CaCl20.5g⑦H2O100ml獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第49頁

5．滅菌任何培養(yǎng)基一旦配成，必須馬上滅菌處理。只能滅菌一次。

常規(guī)高溫蒸汽滅菌

（1.05kg/㎝2,

121.3℃,15-30min）一些成份進(jìn)行分別滅菌過濾除菌獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第50頁6．倒平板:

待培養(yǎng)基冷卻到50℃左右時(shí)，在酒精燈附近倒平板平板冷凝后，要將平板倒置。7．檢驗(yàn)培養(yǎng)基制作是否合格：將滅菌培養(yǎng)基放入37℃溫室中培養(yǎng)24—48小時(shí)，以檢驗(yàn)滅菌是否徹底。獸醫(yī)微生物學(xué)及免疫學(xué)課程組營養(yǎng)和培養(yǎng)基專家講座第51頁編號成份含量①粉狀硫10g②（NH4）2SO40.4g③K2HPO44.0g④MgSO49.25g⑤FeSO40.5g⑥CaCl20.5g⑦H2O100m