項(xiàng)目4生化技術(shù)生產(chǎn)生物藥物任務(wù)1生化

項(xiàng)目4：生化技術(shù)生產(chǎn)生物藥物任務(wù)1：生化提取法生產(chǎn)木瓜蛋白酶

教學(xué)安排：

1.員工培訓(xùn)由老師講解木瓜蛋白酶生產(chǎn)的理論基礎(chǔ)及應(yīng)用范圍。分配實(shí)操任務(wù)：木瓜蛋白酶的生產(chǎn)。2.學(xué)生模擬組建運(yùn)營一個木瓜蛋白酶生產(chǎn)企業(yè)，撰寫計(jì)劃書(在理論教學(xué)期間完成)。

市場部：木瓜蛋白酶的結(jié)構(gòu)、功能、用途，木瓜蛋白酶市場狀況與銷售預(yù)測，原料來源狀況，競爭對手狀況與分析。技術(shù)部：確定木瓜蛋白酶生產(chǎn)的工藝流程及工藝參數(shù)，編制生產(chǎn)操作規(guī)程，確定生產(chǎn)車間的布局。品控部：制定木瓜蛋白酶的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，生產(chǎn)取樣分析操作規(guī)程，質(zhì)量檢測標(biāo)準(zhǔn)和操作規(guī)程?？偨?jīng)理：協(xié)調(diào)監(jiān)督各部工作，最后拿出完整的計(jì)劃書。3.計(jì)劃書實(shí)施。計(jì)劃書要先經(jīng)過老師的審核，然后實(shí)施。實(shí)施過程中考核操作技能。實(shí)施后及時(shí)進(jìn)行實(shí)訓(xùn)報(bào)告的撰寫也總結(jié)。第一節(jié)生化提取技術(shù)基礎(chǔ)

一藥用酶的生產(chǎn)來源（一）藥用酶的來源動植物提取法；微生物發(fā)酵法。（二）生化制備法1原料選擇應(yīng)注意的問題（1）酶在生物材料中的分布；

（2）考慮生物的發(fā)育階段及營養(yǎng)狀況；（3）動物組織宰殺后立即取材；（4）生化制備的綜合成本。2生物材料的預(yù)處理（1）機(jī)械處理（2）反復(fù)凍融處理

（3）制備丙酮粉（4）微生物細(xì)胞的預(yù)處理3酶的提?。?）水溶液法應(yīng)考慮的因素：①酶穩(wěn)定性；②酶的溶解度；③酶與其它物質(zhì)結(jié)合的性質(zhì)；（2）有機(jī)溶劑法；（3）表面活性劑法。4酶的純化（1）雜質(zhì)的去除雜質(zhì)：雜蛋白、多糖、脂類和核酸。①調(diào)pH和加熱沉淀法；②蛋白質(zhì)表面變性法；③選擇性變性法；④降解或沉淀核酸法；⑤利用結(jié)合底物保護(hù)法除去雜蛋白。（2）脫鹽①透析

②離子交換法；（3）濃縮①冷凍干燥法；②離子交換法；③超濾法；④凝膠吸水法；（4）酶的結(jié)晶①酶的結(jié)晶方法a鹽析法；b有機(jī)溶劑沉淀法；c復(fù)合結(jié)晶法；d透析平衡法；e等電點(diǎn)法。②結(jié)晶條件的選擇a酶液的純度越純越容易形成結(jié)晶；有純化作用；b酶的濃度濃度越高越容易結(jié)晶；c溫度低溫有利；d時(shí)間好的結(jié)晶是在生長慢的條件下形成的；epH值選擇等電點(diǎn)附近；f金屬離子許多金屬離子有促進(jìn)作用；g晶種h結(jié)晶器皿處理充分清洗、烘干。（5）酶分離和純化過程應(yīng)注意的問題①防止酶蛋白變性避免高溫，避免pH值過高或過低，避免劇烈攪拌，避免與重金屬接觸。②防止輔助因子流失③防止酶被蛋白水解酶降解；（三）微生物發(fā)酵法1高產(chǎn)菌株的選育；2發(fā)酵工藝的優(yōu)化；3培養(yǎng)方法；4影響酶產(chǎn)量的因素；（1）溫度；（2）pH值；（3）通氣和攪拌；（4）泡沫和消泡劑；（5）添加誘導(dǎo)劑和抑制劑。第二節(jié)木瓜蛋白酶生產(chǎn)技術(shù)一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)木瓜蛋白酶為白色、淡褐色無定形粉末或顆粒。略溶于水、甘油，不溶于乙醚、乙醇和氯仿。最適溫度65℃，易變性失活；木瓜蛋白酶等電點(diǎn)pI=9.6。半胱氨酸、硫化物、亞硫酸鹽和EDTA是木瓜