革蘭陰性需氧和兼性厭氧性桿菌鑒定-假單胞菌屬（微生物檢驗課件）

一、假單胞菌屬假單胞菌科細(xì)菌根據(jù)rRNA-DNA同源性分為5群，其中Ⅰ群屬于假單胞菌屬，共7種細(xì)菌，代表菌種為銅綠假單胞菌。多為條件致病菌，是醫(yī)院感染的主要病原菌假單胞菌屬共同點革蘭陰性桿菌，無芽孢、無莢膜，單或叢鞭毛專性需氧營養(yǎng)要求不高氧化酶：＋O/F：OMac生長：＋觸酶陽性，有的產(chǎn)生水溶性色素銅綠假單胞菌－－形態(tài)染色革蘭陰性桿菌，無芽孢、無莢膜，單或叢鞭毛銅綠假單胞菌－－培養(yǎng)特性專性需氧、營養(yǎng)要求不高最適溫度35℃，20-42℃生長，4℃不生長產(chǎn)生熒光素和藍(lán)綠色水溶性的綠膿素，培養(yǎng)物呈藍(lán)綠色。培養(yǎng)物有生姜氣味。

銅綠假單胞菌菌落特征（普通瓊脂平板）

銅綠假單胞菌菌落特征（MAC）銅綠假單胞菌－－菌落特征典型菌落：扁平濕潤，邊緣不規(guī)則，常呈融合狀態(tài)，培養(yǎng)基綠色黏液型菌落：菌落凸起，呈粘液狀在血平板上形成透明溶血環(huán)在SS、Mac上形成不發(fā)酵乳糖菌落銅綠假單胞菌－－生化反應(yīng)氧化酶＋O/F：O枸櫞酸鹽利用＋，還原硝酸鹽精氨酸雙水解＋明膠液化＋氧化酶試驗（＋）銅綠假單胞菌－－抗原結(jié)構(gòu)和抵抗力抗原結(jié)構(gòu)

O抗原：包括外膜蛋白和脂多糖

H抗原抵抗力：對外界環(huán)境抵抗力強(qiáng)對多種抗生素不敏感銅綠假單胞菌－－臨床意義致病物質(zhì)：內(nèi)毒素、外毒素、胞外酶、菌毛、多糖莢膜、綠膿菌素所致疾病

條件致病菌，經(jīng)多種途徑傳播，抵抗力低下時易感

醫(yī)院感染的重要病原菌

大面積燒傷創(chuàng)面感染的重要病原菌細(xì)菌耐藥機(jī)制外膜通透性降低產(chǎn)生滅活酶或鈍化酶主動外排系統(tǒng)將抗生素泵出胞外抗菌藥物作用靶位改變本菌對氨芐西林、安美汀、四環(huán)素、優(yōu)力新、一、二代頭孢菌素、頭霉素、大環(huán)內(nèi)酯類、磺胺等天然耐藥。各種抗生素治療銅綠假單胞菌所致感染過程中都可能發(fā)生耐藥。銅綠假單胞菌－－檢驗程序標(biāo)本增菌分離培養(yǎng)（血平板）最后鑒定可疑菌落（性狀、色素）初步鑒定涂片染色鏡檢血標(biāo)本涂片鏡檢氧化酶菌落特征綠膿素氣味色素鑒定生化反應(yīng)42℃生長分型O/F：O枸櫞酸鹽利用＋精氨酸雙水解＋明膠液化＋銅綠假單胞菌－－檢驗方法顯微鏡檢查：標(biāo)本直接涂片革蘭染色鏡檢；鞭毛染色鏡檢培養(yǎng)：標(biāo)本接種血平板、Mac平板分離培養(yǎng)，血標(biāo)本先增菌，再轉(zhuǎn)種鑒定：

初步鑒定：菌落特征、水溶性綠色色素、生姜氣味、氧化酶、O/F

全面鑒定：色素不典型者需全面鑒定銅綠假單胞菌－－分型檢查血清學(xué)分型噬菌體分型質(zhì)粒指紋圖譜分析脈沖場凝膠電泳分型檢查意義：對醫(yī)院感染的流行病學(xué)調(diào)查有重要意義銅綠假單胞菌的鑒定要點及與其他假單胞菌的區(qū)別

試驗銅綠假單胞菌熒光假單胞菌惡臭假單胞菌斯氏假單胞菌嗜麥芽假單胞鼻疽假單胞菌類鼻疽假單胞氧化酶＋＋＋＋＿＋/＿＋熒光素＋/＿＋＋/＿＿＿＿＿青膿素＋/＿＋/＿＋/＿＿＿＿＿動力＋＋＋＋＋＿＋葡糖氧化＋＋＋＋＋＋＋乳糖氧化＿＋＿＿＋＋＋蔗糖氧化＿＋＿＿＋＋＋木糖氧化＋＋＋＋＋＿＋賴氨酸脫羧酶＿＿＿＿＋＿＿精氨酸水解酶＋＋＋＿＿＋＋硝酸鹽還原＋/＿＿/＋＿＋＿＿＋明膠液化＿/＋＋＿＿＋＿