GB/T 34756-2017豬輪狀病毒病病毒RT-PCR檢測(cè)方法

ICS11220

B41.

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T34756—2017

豬輪狀病毒病病毒RT-PCR檢測(cè)方法

Porcinerotavirusdisease—RT-PCRfordetectingvirusacid

2017-11-01發(fā)布2018-05-01實(shí)施

中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

中華人民共和國(guó)

國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

豬輪狀病毒病病毒RT-PCR檢測(cè)方法

GB/T34756—2017

*

中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社出版發(fā)行

北京市朝陽(yáng)區(qū)和平里西街甲號(hào)

2(100029)

北京市西城區(qū)三里河北街號(hào)

16(100045)

網(wǎng)址

:

服務(wù)熱線

:400-168-0010

年月第一版

201711

*

書號(hào)

:155066·1-57537

版權(quán)專有侵權(quán)必究

GB/T34756—2017

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部提出

。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口

(SAT/TC181)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位東北農(nóng)業(yè)大學(xué)中國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心河南牧業(yè)經(jīng)濟(jì)學(xué)院

:、、。

本標(biāo)準(zhǔn)起草人喬薪瑗邵衛(wèi)星魏榮崔文唐麗杰李一經(jīng)姜艷平孫映雪李衛(wèi)華徐耀輝

:、、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T34756—2017

豬輪狀病毒病病毒RT-PCR檢測(cè)方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了豬輪狀病毒檢測(cè)方法的試劑儀器設(shè)備操作程序

RT-PCR、、。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于豬臨床樣品新鮮糞便和小腸及細(xì)胞培養(yǎng)物中豬輪狀病毒核酸的檢測(cè)

()。

2縮略語(yǔ)

下列縮略語(yǔ)適用于本文件

。

鳥(niǎo)類病毒反轉(zhuǎn)錄酶

AMV:RNA(avianmyeloblastosisvirus)

堿基對(duì)

bp:(basepair)

焦碳酸二乙酯

DEPC:(diethypyrocarbonate)

脫氧核糖核酸

DNA:(deoxyribonucleicacid)

脫氧核糖核苷三磷酸

dNTPs:(deoxyribonucleosidetriphosphates)

磷酸鹽緩沖液

PBS:(phosphate-bufferedsalinebuffer)

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)

PCR:(polymerasechainreaction)

核糖核酸

RNA:(ribonucleicacid)

酶抑制劑

RRI:RNA(RNaseribonucleaseinhibitor)

反轉(zhuǎn)錄

RT:(reversetranscriptase)

反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)

RT-PCR:-(reversetranscriptase-polymerasechainreaction)

Taq酶Taq聚合酶Taq

:DNA(DNApolymerase)

3試劑

除另有規(guī)定外所用試劑應(yīng)為分析純提取病毒所用試劑應(yīng)使用無(wú)酶的容器進(jìn)行

,。RNARNA

分裝

。

31氯仿常溫保存

.:。

32異丙醇

.。

33乙醇

.75%。

34二乙基焦磷酰胺

.(DEPC)。

35Taq酶

.。

36

.AMV。

37分子量標(biāo)準(zhǔn)

.DNA(DL2000bp)。

38電泳緩沖液配制見(jiàn)

.(TAE)(A.1)。

39瓊脂糖配制見(jiàn)

.1.5%(A.3)。

310豬輪狀病毒陽(yáng)性樣品及陰性樣品