GB/T 31801-2015丁香疫霉菌檢疫鑒定方法

ICS6502001

B16..

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T31801—2015

丁香疫霉菌檢疫鑒定方法

DetectionandidentificationofPhytophthorasyringaeKleb.

2015-07-03發(fā)布2015-11-27實(shí)施

中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

中華人民共和國(guó)

國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

丁香疫霉菌檢疫鑒定方法

GB/T31801—2015

*

中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社出版發(fā)行

北京市朝陽區(qū)和平里西街甲號(hào)

2(100029)

北京市西城區(qū)三里河北街號(hào)

16(100045)

網(wǎng)址

:

服務(wù)熱線

:400-168-0010

年月第一版

20159

*

書號(hào)

:155066·1-49875

版權(quán)專有侵權(quán)必究

GB/T31801—2015

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別這些專利的責(zé)任

。。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)植物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口

(SAC/TC271)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中國(guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院中華人民共和國(guó)天津出入境檢驗(yàn)檢疫局

:、。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人杜洪忠羅加鳳吳品珊嚴(yán)進(jìn)

:、、、。

Ⅰ

GB/T31801—2015

丁香疫霉菌檢疫鑒定方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了丁香疫霉菌的檢疫鑒定方法

。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于針對(duì)丁香疫霉菌寄主的苗木枝條枝葉果實(shí)及其夾帶土壤和介質(zhì)中丁香疫霉菌的

、、、

鑒定

。

2儀器和用具

21儀器

.

生物顯微鏡超凈工作臺(tái)光照培養(yǎng)箱電子天平高壓滅菌鍋冰箱擴(kuò)增儀熒光

,,,(1/1000g),,,PCR,

擴(kuò)增儀電泳儀凝膠成像儀高速冷凍離心機(jī)恒溫水浴鍋

PCR,,,,。

22用具

.

燒杯三角瓶量筒試管培養(yǎng)皿酒精燈鑷子剪刀解剖刀接種針載玻片蓋玻片塑料研杵

,,,,,,,,,,,,,

移液器移液器吸頭離心管液氮罐

,,,。

3試劑材料和培養(yǎng)基

、

31試劑

.

β谷甾醇匹馬霉素氨芐青霉素鈉鹽利福平鈉鹽五氯硝基

-,(pimaricin),(ampicillin),(rifampicin),

苯惡霉靈瓊脂糖乙二胺四乙

(pentachloronitrobenzene),(hymexazol),CaCO3,,Tris-HCl,MgCl2,HCl,

酸四鈉鹽十六烷基三甲基溴化銨無水乙醇

(EDTA),NaOH,NaOAc,KCl,Tris,(CTAB),TAE,(etha-

三氯甲烷異丙醇異戊醇核酸染料

nol),(chloroform),(isopropanol),(isoamylalcohol),SYBRGreenI,

蛋白酶Taq聚合酶通用引物和實(shí)時(shí)熒光引物和及

K,DNA,dNTP,ITS5ITS4,PCRPS-FPS-RTaq-

探針

Man-MGBPS-Pr。

32材料

.

瓊脂粉汁夏櫟葉片或蘋果或梨鮮橙皮或杜鵑葉片

,V8,,。

33培養(yǎng)基

.

培養(yǎng)基培養(yǎng)基鮮橙皮培養(yǎng)基杜鵑葉片培養(yǎng)基選擇性培養(yǎng)基具

PDA,V8,V8,V8,PARPH-V8。

體配方參見附錄

A。

4檢疫鑒定方法

41癥狀檢查

.

檢查寄主植物的根莖葉果實(shí)等部位對(duì)有枯萎