標準解讀
《GB/T 15400-1994 飼料中色氨酸測定方法 分光光度法》是中國國家標準之一,發(fā)布于1994年,旨在規(guī)定一種通過分光光度法來測定飼料中色氨酸含量的標準化方法。下面是對該標準內(nèi)容的詳細說明:
標準適用范圍
本標準適用于各類配合飼料、單一飼料原料及預混料中色氨酸的定量分析。色氨酸是一種必需氨基酸,對動物營養(yǎng)至關(guān)重要。
測定原理
分光光度法基于物質(zhì)吸收光譜的特性進行定量分析。在本方法中,樣品經(jīng)過一系列預處理后,色氨酸會與特定試劑反應生成有色化合物。該有色化合物在特定波長下的吸光度與其濃度成正比,通過測量吸光度即可計算出樣品中色氨酸的含量。
試驗步驟
- 樣品準備:取適量飼料樣品,按照標準規(guī)定的程序進行粉碎、稱重,并用適當溶劑提取色氨酸。
- 凈化與富集:提取液通過過濾、脫脂、柱層析等步驟去除干擾物質(zhì),富集色氨酸。
- 顯色反應:將純化后的溶液與特定顯色劑(如茚三酮)反應,在一定條件下生成具有特定吸收特性的有色產(chǎn)物。
- 測定吸光度:使用分光光度計,在特定波長(通常為570納米)下測定顯色溶液的吸光度。
- 標準曲線制作:事先制備一系列已知濃度的色氨酸標準溶液,同樣進行顯色反應并測定吸光度,繪制標準曲線。
- 結(jié)果計算:根據(jù)待測樣品的吸光度和標準曲線,計算出樣品中色氨酸的濃度。
精密度與準確度
標準中明確了重復性和再現(xiàn)性實驗的要求,確保不同實驗室和操作者之間的測試結(jié)果具有一致性。同時,提供了回收率試驗的方法,以驗證測定方法的準確性。
儀器與試劑要求
詳細列出了執(zhí)行該測定方法所需的分光光度計、玻璃器皿、試劑種類及其規(guī)格,確保實驗條件的統(tǒng)一性和結(jié)果的可靠性。
安全與環(huán)保注意事項
雖然具體安全措施未在此概述中詳述,但實施實驗時應遵循常規(guī)實驗室安全規(guī)程,注意化學品的正確使用與處置,確保人員安全和環(huán)境保護。
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文檔簡介
UDC636.085.3中華人民共和國國家標準GB/T15400-94飼料中色氨酸測定方法分光光度法1DeterminationoftryptophaninfeedstuffsSpectrophotometry1994-12-30發(fā)布1995-07-01實施家技術(shù)監(jiān)督局壓發(fā)布
中華人民共和國國家標準飼料中色氨酸測定方法GB/T15400-94-分光光度法一Determinationortryptophaninfeedstufrs-Spectrophotometry主主題內(nèi)客與適用范圍本標準規(guī)定了測定飼料中色氮酸的原理和方法。本標準適用于配合飼料、混合間料、旅縮飼料和單一何料。2引用標準GB6433飼料粗脂肪測定方法原理何料中蛋白質(zhì)經(jīng)藏水解后,降解成多膚和游離的氮基酸,在酸性介質(zhì)中,氧化劑存在下,色氮酸吲哚環(huán)與對二甲氮基苯甲醛反應生成藍色化合物,在一定范圍內(nèi)顏色深淺與色氮酸含量成正比。試劑除注明者外均為分析純。水為燕水。4.1硫酸(GB625)溶液、c(1/2H.SO,)=21.2mol/L量取589mL碗酸徐徐加入約350mL水中,冷卻后用水稀釋至1L.4.221%對二甲氮基苯甲醛溶液:1.0g對二甲氮基萊甲醛溶于21.2mol/L硫酸(4.1)中并定容100mL.4.330.2%亞硝酸鈉(GB633)溶液(m/V)。AA10%氫氧化鉀(GB2306)溶液(m/V)4.5L-色氮酸,色譜純.4.6L-色氨酸標準溶液:準確稱取25.0mgL-色氨酸于小燒杯中,加少量0.1mol/L氫氧化鉀溶液使之溶解,定量地轉(zhuǎn)移到250mL棕色容量瓶中,用水定容,濃度為100件g/mL。注:本標準語液4℃冰箱中保存,一個月內(nèi)使用,衣度不變。5儀器、設(shè)備5.1分析天平:感量0.1mg.5-2分光光度計。53離心機:轉(zhuǎn)速4000r/min。5.
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