第章微生物的遺傳與變異

1、遺傳與變異原理（DNA、基因及其轉(zhuǎn)錄、翻譯） 遺傳變異現(xiàn)象（形態(tài)、抗原、菌落、毒力、耐藥）變異相關(guān)物質(zhì)（染色體-致病島、質(zhì)粒、噬菌體、轉(zhuǎn)座子）變異機(jī)制（基因突變、轉(zhuǎn)移、重組）微生物的遺傳和變異遺傳（heredity ）: 上一代生物將自身的一整套遺傳基因穩(wěn)定地傳遞給下一代的特性 。變異（variation）： 生物體在某種外因或內(nèi)因的作用下，發(fā)生遺傳物質(zhì)結(jié)構(gòu)或數(shù)量的改變，而且這種改變穩(wěn)定，具有可遺傳性 。引言1. 遺傳與變異遺傳保證了微生物種的相對(duì)穩(wěn)定性、種的存在和延續(xù)，而變異則推動(dòng)了種的進(jìn)化和發(fā)展。2. 遺傳型和表型遺傳型（genotype）表型( phenotype )某一生物體個(gè)體所含有

2、的全部遺傳因子，即基因的總和 ，又稱為基因型。某一生物體所具有的一切外表特征及內(nèi)在特性的總和。 表型的實(shí)現(xiàn)是由生物體的遺傳型和環(huán)境條件共同作用的結(jié)果。二.細(xì)菌的遺傳與變異 （一）細(xì)菌的變異現(xiàn)象 形態(tài)結(jié)構(gòu)變異 抗原性變異 菌落變異 毒力變異 耐藥性變異正常形態(tài)細(xì)菌 L型變異 形態(tài)結(jié)構(gòu)變異兩端平齊炭疽芽胞桿菌炭疽芽胞桿菌L型（串珠狀）青霉素、溶菌酶 抗體或補(bǔ)體 (部分或完全失去胞壁)含1%石炭酸培養(yǎng)基普通培養(yǎng)基細(xì)菌鞭毛變異隨著鞭毛變異，細(xì)菌抗原性發(fā)生變異毒力變異 無(wú)毒白喉棒狀桿菌 產(chǎn)毒白喉?xiàng)U菌 膽汁、甘油、馬鈴薯培養(yǎng)基牛型結(jié)核桿菌 卡介苗 13年(230代) （1908）棒狀噬菌體耐藥性變異 細(xì)菌

3、對(duì)某種抗菌藥物由敏感變?yōu)椴幻舾校茨退帲┑淖儺惙Q為耐藥性變異（獲得R質(zhì)粒）。 有些細(xì)菌還表現(xiàn)為同時(shí)耐受多種抗菌藥物，即多重耐藥性，甚至產(chǎn)生藥物依賴性。 痢疾桿菌 依鏈株(耐藥菌株) 含鏈霉素培基 長(zhǎng)期培養(yǎng)菌落變異 光滑型菌落 粗糙型菌落 S R菌落（S型）菌落（R型）在陳舊培養(yǎng)基中長(zhǎng)期培養(yǎng) 或在有免疫力的人體內(nèi)有莢膜肺炎鏈球菌無(wú)莢膜肺炎鏈球菌 遺傳物質(zhì) 核酸 蛋白？試驗(yàn)核酸！結(jié)論：性狀是由基因（遺傳因子）決定，基因存在于染色體 （染色體是核酸或其與蛋白質(zhì)的結(jié)合物）。核酸分子是遺傳物質(zhì)，基因是其信息單位，染色體是其存在形式。一、證明核酸是遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)的三個(gè)經(jīng)典實(shí)驗(yàn) （一）經(jīng)典轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn) （二

4、）噬菌體感染實(shí)驗(yàn) （三）植物病毒的重建實(shí)驗(yàn)二、微生物遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)病毒的核酸原核細(xì)胞型微生物染色體真核核細(xì)胞型微生物染色體染色體外的遺傳物質(zhì) 質(zhì)粒 噬菌體 轉(zhuǎn)座子（轉(zhuǎn)位因子）基因（gene）是什么? 是實(shí)體，其物質(zhì)基礎(chǔ)是DNA （或RNA）； 是一個(gè)含有特定遺傳信息的DNA分子區(qū)段； 是遺傳信息傳遞和性狀分化發(fā)育的依據(jù)； 基因是可分的，根據(jù)功能不同，分為： 編碼蛋白質(zhì)的基因 結(jié)構(gòu)基因（結(jié)構(gòu)蛋白，酶） 調(diào)節(jié)基因（阻遏蛋白或激活蛋白） 無(wú)翻譯產(chǎn)物的基因 tRNA基因（簡(jiǎn)稱 tDNA ） rRNA基因（簡(jiǎn)稱rDNA ） 不轉(zhuǎn)錄的DNA區(qū)段 啟動(dòng)子（promotor） 操縱基因（operator）

5、 基因是一個(gè)含有特定遺傳信息的核苷酸序列，它是遺傳的功能單位。基因組是存在于生物體遺傳物質(zhì)中全部基因的總稱一、病毒的核酸病毒的遺傳物質(zhì)是DNA或RNA，核酸類型多樣。E. coli 染色體DNA大小為4.710 6 bp，長(zhǎng)度為1333m，是菌體長(zhǎng)度的1000倍。二、原核生物染色體的結(jié)構(gòu)遺傳因子存在形式（1）一般沒有間隔基因（內(nèi)含子）細(xì)菌的基因一般是連續(xù)排列的。結(jié)構(gòu)基因的表達(dá)由調(diào)節(jié)基因調(diào)控，一個(gè)或幾個(gè)相關(guān)的基因組成操縱子。在細(xì)菌的基因組中，基本上未發(fā)現(xiàn)與真核生物的內(nèi)含子或連接DNA相似的“無(wú)”功能序列。（2）一般沒有重復(fù)序列 細(xì)菌的基因一般都是單拷貝的。唯一可以發(fā)現(xiàn)的重復(fù)DNA序列，也只有核糖

6、體rRNA基因、插入序列、轉(zhuǎn)座子和短重復(fù)序列等。原核生物基因的結(jié)構(gòu)三、真核生物染色體結(jié)構(gòu)真核生物染色體組成的基本單位是核小體，其核心顆粒由四種蛋白形成的8聚體和DNA組成。由H1組蛋白和DNA相連一串核小體稱為染色質(zhì)（chromatin）。在細(xì)胞分裂中期，染色質(zhì)濃縮、反復(fù)折疊成為一定形狀的染色體。真核生物基因的結(jié)構(gòu)一個(gè)完整的真核基因，不僅包括編碼區(qū)，也包括編碼區(qū)兩側(cè)的調(diào)控序列。與原核基因相比，最大的差別在于編碼區(qū)被許多非編碼序列所間斷，這種非編碼序列稱為內(nèi)含子（intron），被間隔的編碼區(qū)稱外顯子（exon）。 真核細(xì)胞和原核細(xì)胞的最大差別之一是遺傳物質(zhì)的分布和存在狀態(tài)。原核細(xì)胞的染色體是以

7、裸露DNA存在于細(xì)胞中，而真核細(xì)胞的DNA則與組蛋白和非組蛋白相結(jié)合并纏繞成多條染色體存在于細(xì)胞核中。 在真核生物染色體中，DNA約占30-40%，組蛋白和非組蛋白占60%以上，RNA約占10%以下。質(zhì)粒(plasmid)：是細(xì)菌染色體以外的遺傳物質(zhì)，是閉合環(huán)狀的雙鏈DNA。 （二） 質(zhì)粒質(zhì)粒的三種構(gòu)型 質(zhì)粒具有自我復(fù)制的能力。質(zhì)粒DNA所編碼的基因產(chǎn)物賦予細(xì)菌某些性狀特征。質(zhì)?？勺孕衼G失與消除。質(zhì)粒的轉(zhuǎn)移性。質(zhì)?？煞譃橄嗳菪耘c不相容性兩種。質(zhì)粒DNA的特征質(zhì)粒的分類：根據(jù)質(zhì)粒能否通過細(xì)菌的接合作用進(jìn)行傳遞 1接合性質(zhì)粒 2非接合性質(zhì)粒根據(jù)相容性 1相容性幾種質(zhì)粒同時(shí)共存于同一菌體內(nèi) 2不相容

8、性不能同時(shí)共存 可借此對(duì)質(zhì)粒進(jìn)行分組、分群常見的質(zhì)粒類型致育質(zhì)粒（fertility plasmid、F質(zhì)粒） 編碼性菌毛，介導(dǎo)細(xì)菌之間的接合傳遞；耐藥性質(zhì)粒（resistance plasmid、R質(zhì)粒） 編碼細(xì)菌對(duì)抗菌藥物或重金屬鹽類的耐藥性。分兩類，一 是接合性耐藥質(zhì)粒（R質(zhì)粒），另一是非接合耐藥性質(zhì)粒 （r質(zhì)粒)；毒力質(zhì)粒（Virulence plasmid, Vi質(zhì)粒） 編碼與該菌致病性有關(guān)的毒力因子,S.aureus的表皮剝脫素；細(xì)菌素質(zhì)粒 ( Col plasmid) 編碼細(xì)菌產(chǎn)生的細(xì)菌素；代謝質(zhì)粒( metabolic plasmid) 編碼產(chǎn)生相關(guān)的代謝酶。 (1) 致育質(zhì)粒

9、(Fertility plasmid，F(xiàn)質(zhì)粒) 又稱F質(zhì)粒，其大小約100kb，這是最早發(fā)現(xiàn)的一種與大腸桿菌的有性生殖現(xiàn)象（接合作用）有關(guān)的質(zhì)粒。攜帶F質(zhì)粒的菌株稱為F+菌株（相當(dāng)于雄性），無(wú)F質(zhì)粒的菌株稱為F-菌株（相當(dāng)于雌性）。F因子能以游離狀態(tài)(F+)和以與染色體相結(jié)合的狀態(tài)(Hfr)存在于細(xì)胞中，所以又稱之為附加體(episome)。在志賀氏菌屬（Shigella）、沙門氏菌屬（Salmonella）和鏈球菌屬（Streptococcus）等其他細(xì)菌中也發(fā)現(xiàn)了與大腸桿菌類似的致育因子。在放線菌中，天藍(lán)色鏈霉菌含有SCP1和SCP2兩種致育質(zhì)粒，這兩種質(zhì)粒在天藍(lán)色鏈霉菌的接合過程中起重要

10、作用，帶動(dòng)染色體從供體細(xì)胞向受體細(xì)胞轉(zhuǎn)移。(2)抗性質(zhì)粒（Resistance plasmid，R質(zhì)粒）包括抗藥性和抗重金屬二大類，簡(jiǎn)稱R質(zhì)粒。R100質(zhì)粒(89kb)可使宿主對(duì)下列藥物及重金屬具有抗性：汞（mercuric ion ，mer）四環(huán)素（tetracycline，tet ）鏈霉素(Streptomycin, str)、磺胺(Sulfonamide, sul)、氯霉素(Chlorampenicol, cml)夫西地酸（fusidic acid，fus）負(fù)責(zé)這些抗性的基因是成簇地存在于抗性質(zhì)粒上?？剐再|(zhì)粒在細(xì)菌間的傳遞是細(xì)菌產(chǎn)生抗藥性的重要原因之一。(3)Col 質(zhì)粒：產(chǎn)細(xì)菌素的質(zhì)粒

11、（Bacteriocin production plasmid）細(xì)菌素結(jié)構(gòu)基因、 涉及細(xì)菌素運(yùn)輸及發(fā)揮作用（processing）的蛋白質(zhì)的基因、 賦予宿主對(duì)該細(xì)菌素具有“免疫力”的相關(guān)產(chǎn)物的基因一般都位于質(zhì)?；蜣D(zhuǎn)座子上，因此，細(xì)菌素可以殺死同種但不攜帶該質(zhì)粒的菌株。細(xì)菌素：許多細(xì)菌都能產(chǎn)生某些代謝產(chǎn)物，抑制或殺死其他近緣細(xì)菌或同種不同菌株，因?yàn)檫@些代謝產(chǎn)物是由質(zhì)粒編碼的蛋白質(zhì)，不象抗生素那樣具有很廣的殺菌譜，所以稱為細(xì)菌素（bacteriiocin）(4) 代謝質(zhì)粒（Metabolic plasmid） 質(zhì)粒上攜帶有有利于微生物生存的基因，如能降解某些基質(zhì)的酶，進(jìn)行共生固氮，或產(chǎn)生抗生素（某

12、些放線菌）等。將復(fù)雜的有機(jī)化合物降解成能被其作為碳源和能源利用的簡(jiǎn)單形式，環(huán)境保護(hù)方面具有重要的意義。假單胞菌： 具有降解一些有毒化合物，如芳香簇化合物(苯)、農(nóng)藥(2,4dichlorophenoxyacetic acid)、辛烷和樟腦等的能力。降解質(zhì)粒TOL質(zhì)粒：含分解甲苯的基因；CAM-OCT質(zhì)粒：含分解樟腦辛烷的基因 轉(zhuǎn)座（transposon)：是指轉(zhuǎn)座因子從染色體的一個(gè)位置轉(zhuǎn)移到另一位置，或者在質(zhì)粒與染色體之間轉(zhuǎn)移的過程。轉(zhuǎn)座子有二類： 插入序列(insertion sequence , IS)：最小，不超過2kb, 只攜帶與轉(zhuǎn)座功能有關(guān)的基因。 轉(zhuǎn)座子(transposon ,

13、Tn)：長(zhǎng)度一般超過2kb，除攜帶與轉(zhuǎn)位有關(guān)的基因外還攜帶其他基因（如耐藥性、毒素基因等）. 噬 菌 體bacteriophagebacteriophagebacteriophagebacteriophagebacteriophagebacteriophage 概念：是一類感染細(xì)菌、真菌、放線菌或螺旋體等微生物的病毒，因?yàn)槭删w能引起宿主菌的裂解，故稱噬菌體。 具有病毒的基本特性.噬菌體（bacteriophage, phage）噬菌體的生物學(xué)性狀噬菌體的大小與形態(tài)噬菌體的結(jié)構(gòu)噬菌體的化學(xué)組成噬菌體的寄生性噬菌體的抵抗力噬菌體的分類 噬菌體與其他微生物大小的比較葡萄球菌（1 m）支原體、立克次

14、體、衣原體（0.3 0.6 m）口蹄疫病毒（20nm）痘病毒（300nm）卵蛋白分子（10nm）噬菌體（6595nm）個(gè)體微小，以nm為測(cè)量單位，需用電子顯微鏡觀察噬 菌 體 的 形 態(tài)微球形蝌蚪形細(xì)桿形尾鞘尾絲核酸（線狀雙股DNA)有尾型噬菌體結(jié)構(gòu)尾刺頭部尾部尾領(lǐng)尾髓尾板噬 菌 體 的 化 學(xué) 組 成核 酸蛋白質(zhì)DNA 或 RNA頭部衣殼尾部結(jié)構(gòu)噬 菌 體 的 分 類根據(jù)噬菌體的核酸組成DNA噬菌體RNA噬菌體根據(jù)噬菌體與宿主的關(guān)系毒性噬菌體（virulent phage) 溫和噬菌體（temperate phage）又稱 為溶源性噬菌體 毒性噬菌體（virulent phage）能在宿主菌

15、細(xì)胞內(nèi)，利用宿主菌的酶、能量進(jìn)行復(fù)制增殖，產(chǎn)生子代噬菌體并使宿主菌裂解的噬菌體為毒性噬菌體。 毒 性 噬 菌 體 的 復(fù) 制 增 殖 1、吸 附 是噬菌體與細(xì)菌表面相應(yīng)受體特異性結(jié)合的過程 2、穿 入有尾噬菌體將頭部的DNA注入宿主菌內(nèi)無(wú)尾噬菌體經(jīng)脫殼進(jìn)入宿主菌內(nèi)，類似于動(dòng)物病毒的穿入過程 3、生物合成利用宿主菌的酶和能量復(fù)制 核酸及合成蛋白質(zhì) 4、 成熟與釋放程序組裝菌細(xì)胞裂解，噬菌體釋放毒 性 噬 菌 體 的 復(fù) 制 增 殖1、吸附2、穿入3、生物合成4、成熟與釋放噬菌體在固體培養(yǎng)基中與細(xì)菌共同培養(yǎng)后形成的噬斑 噬菌現(xiàn)象均勻混濁澄清痢疾桿菌大腸桿菌痢疾桿菌噬菌體痢疾桿菌噬菌體痢疾桿菌培養(yǎng)液

16、噬斑肉湯結(jié)論：噬菌體可以裂解細(xì)菌并具有高度特異性溫 和 噬 菌 體某些噬菌體感染宿主菌后，將其基因整合到宿主菌基因組并隨宿主基因的復(fù)制而復(fù)制，當(dāng)宿主菌分裂時(shí)，噬菌體的基因亦隨之分配到兩個(gè)子代宿主菌基因組中；在某些因素作用下，可裂解其感染宿主菌的噬菌體稱之。前噬菌體-整合在細(xì)菌染色體上的噬菌體基因組溶原性細(xì)菌-帶有前噬菌體基因組的細(xì)菌溫 和 噬 菌 體 的 復(fù) 制 繁 殖1、吸附2、穿入3、前噬菌體形成4、溶原性周期5、一定條件下，前噬菌體脫離細(xì)菌染色體6、溶菌性周期溶原性細(xì)菌誘導(dǎo)前噬菌體溶菌性周期溶原性周期噬菌體的應(yīng)用細(xì)菌的鑒定分子生物學(xué)研究的重要工具細(xì)菌感染的診斷與治療第三節(jié) 微生物變異的常

17、見類型野生型: -從自然界分離到的菌株一般稱野生型菌株（wild type strain），簡(jiǎn)稱野生型。 突變株: -野生型經(jīng)突變后形成的帶有新性狀的菌株，稱為突變株（mutant）。 （1）營(yíng)養(yǎng)缺陷型（auxotroph） 一種缺乏合成其生存所必須的營(yíng)養(yǎng)物（包括氨基酸、維生素、堿基等）的突變型，只有從周圍環(huán)境或培養(yǎng)基中獲得這些營(yíng)養(yǎng)或其前體物（precursor）才能生長(zhǎng)。營(yíng)養(yǎng)缺陷型是微生物遺傳學(xué)研究中重要的選擇標(biāo)記和育種的重要手段表型判斷的標(biāo)準(zhǔn)：在基本培養(yǎng)基上能否生長(zhǎng)（2）抗藥性突變型（resistant mutant）基因突變使菌株對(duì)某種或某幾種藥物，特別是抗生素，產(chǎn)生抗性。特點(diǎn)：正選擇標(biāo)

18、記（突變株可直接從抗性平板上獲得-在加有相應(yīng)抗生素的平板上，只有抗性突變能生長(zhǎng)。所以很容易分離得到。）（3）條件致死突變型（conditional lethal mutant） 在某一條件下具有致死效應(yīng)，而在另一條件下沒有致死效應(yīng)的突變型。常用的條件致死突變是溫度敏感突變，用ts（temperaturesensitive）表示，這類突變?cè)诟邷叵拢ㄈ?2）是致死的，但可以在低溫（如25-30）下得到這種突變。特點(diǎn)：負(fù)選擇標(biāo)記這類突變型常被用來(lái)分離生長(zhǎng)繁殖必需的突變基因（4）毒力變異株 微生物長(zhǎng)期培養(yǎng)于加有特殊化學(xué)成分的培養(yǎng)基或長(zhǎng)期通過不同的動(dòng)物穿戴，其毒力能夠降低。 膽汁、甘油、馬鈴薯培養(yǎng)基牛型

19、結(jié)核桿菌 卡介苗 13年(230代) （1908）第四節(jié) 微生物變異的機(jī)制細(xì) 菌 變 異 的 機(jī) 制 表型變異（非遺傳性變異） 基因型變異（遺傳性變異）突變（mutation)與損傷后修復(fù)轉(zhuǎn)移與重組轉(zhuǎn)化 (transformation)接合 (conjugation)轉(zhuǎn)導(dǎo) (transduction)溶原性轉(zhuǎn)換 (lysogenic conversion)原生質(zhì)體融合（protoplast fusion)一 、基因突變1.自發(fā)性和不對(duì)應(yīng)性基因突變的共同特征2.稀少性3.可誘發(fā)性4.獨(dú)立性5.可逆性6.穩(wěn)定性一、基因突變的分子基礎(chǔ)(一)自發(fā)突變 (二)誘發(fā)突變引起自發(fā)突變的原因主要有以下幾方面：

20、 背景輻射和環(huán)境因素引起； 有害代謝產(chǎn)物引起； 互變異構(gòu)效應(yīng)引起的堿基配對(duì)錯(cuò)誤； DNA復(fù)制過程中堿基配對(duì)錯(cuò)誤 ； 轉(zhuǎn)座因子的作用。通過人為的方法，利用物理、化學(xué)或生物因素顯著提高自發(fā)突變頻率的手段 。生物體在無(wú)人工干預(yù)下自然發(fā)生的低頻率突變（10-6-10-9 ）。它是生物進(jìn)化的根源。(二)、誘發(fā)突變誘變劑（mutagen）：凡能提高基因突變頻率的因素統(tǒng)稱為誘變劑誘變劑的種類物理誘變劑化學(xué)誘變劑生物誘變劑堿基類似物誘變劑； 與堿基起化學(xué)反應(yīng)的誘變劑；嵌入誘變劑； ：輻射和熱：轉(zhuǎn)座因子基 因 突 變堿基置換氨基酸改變半胱氨酸酪氨酸堿基丟失堿基顛換二、基因的轉(zhuǎn)移和重組一、轉(zhuǎn)化（Transform

21、ation）受體菌直接攝取供體菌游離的DNA片斷并重組使其獲得新的性狀的過程。自然遺傳轉(zhuǎn)化（natural genetic transformation）人工轉(zhuǎn)化（artificial transformation）感受態(tài)細(xì)胞：具有攝取外源DNA能力的細(xì)胞（competent cell）自然遺傳轉(zhuǎn)化的進(jìn)行涉及到細(xì)菌染色體上幾十個(gè)基因的功能及彼此間的相互協(xié)調(diào)，因此被認(rèn)為是名副其實(shí) 的細(xì)菌水平基因轉(zhuǎn)移途徑。自然感受態(tài)與人工感受態(tài)的不同自然感受態(tài)的出現(xiàn)是細(xì)胞一定生長(zhǎng)階段的生理特性。 人工感受態(tài)則是通過人為誘導(dǎo)的方法，使細(xì)胞具有攝取DNA的能力， 或人為地將DNA導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)。 與細(xì)菌自身的遺傳控制無(wú)關(guān)

22、受細(xì)菌自身的基因控制一般出現(xiàn)在細(xì)菌生長(zhǎng)的中、后期1928年，Griffith發(fā)現(xiàn)肺炎鏈球菌（Streptococcus pneumoniae） 的轉(zhuǎn)化現(xiàn)象目前已知有二十多個(gè)種的細(xì)菌具有自然轉(zhuǎn)化的能力進(jìn)行自然轉(zhuǎn)化的條件：建立了自然感受態(tài)的受體細(xì)胞外源游離DNA分子 DNA是遺傳物質(zhì)的確證； 基因工程技術(shù)的建立； 重要的微生物遺傳學(xué)方法；轉(zhuǎn) 化 transformationABCD結(jié)合蛋白枯草芽孢桿菌的自然轉(zhuǎn)化過程（革蘭氏陽(yáng)性菌的轉(zhuǎn)化模型）轉(zhuǎn)化后的結(jié)果 轉(zhuǎn)化子和非轉(zhuǎn)化子1、只有少數(shù)菌屬可發(fā)生轉(zhuǎn)化。2、受菌處于感受態(tài)，才可攝取外源DNA3、供菌DNA必須與受菌DNA同源性4、供菌DNA只有單股與受菌

23、染色體發(fā)生整合,故只有一個(gè)子代細(xì)菌帶供菌的DNA。 特點(diǎn) 細(xì)菌通過性菌毛的接觸溝通將 DNA從供菌 轉(zhuǎn)移到受菌中的方式。 概念： 方式：接 合 conjugationF質(zhì)粒接合 Hfr菌接合R質(zhì)粒接合F 質(zhì) 粒 接 合通過性菌毛的接觸溝通將接合性質(zhì)粒從供菌轉(zhuǎn)移到受菌。 接合時(shí)F因子的轉(zhuǎn)移與復(fù)制F因子的四種細(xì)胞形式b）F+ ；（ F因子獨(dú)立存在，有性菌毛）。c）Hfr；F因子插入到染色體DNA上，有性菌毛。d）F；F因子因不正常切割而脫離染色體時(shí)， 形成游離的但攜帶一小段染色體基因的F因子。 細(xì)胞表面同樣有性菌毛。a） F- ； （“雌性”菌株，無(wú)性菌毛）“雄性”菌株（1） F+F-雜交雜交的結(jié)

24、果：給體細(xì)胞和受體細(xì)胞均成為F+細(xì)胞理化因子的處理可將F因子消除而使F+菌株變成F-菌株F+菌株的F因子向F-細(xì)胞轉(zhuǎn)移，但含F(xiàn)因子的宿主細(xì)胞的染色體DNA一般不被轉(zhuǎn)移。Hfr菌株的F因子插入到染色體DNA上，因此只要發(fā)生接合轉(zhuǎn)移轉(zhuǎn)移過程，就可以把部分甚至全部細(xì)菌染色體傳遞給F-細(xì)胞并發(fā)生重組，由此而得名為高頻重組菌株（2）Hfr F-雜交Hfr菌株仍然保持著F+細(xì)胞的特征，具有F性菌毛，并象F+一樣與F-細(xì)胞進(jìn)行接合。所不同的是，當(dāng)OriT序列被缺刻螺旋酶識(shí)別而產(chǎn)生缺口后，F(xiàn)因子的先導(dǎo)區(qū)(leading region)結(jié)合著染色體DNA向受體細(xì)胞轉(zhuǎn)移，F(xiàn)因子除先導(dǎo)區(qū)以外，其余絕大部分是處于轉(zhuǎn)移

25、染色體的末端，由于轉(zhuǎn)移過程常被中斷，因此F因子不易轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞中，故HfrF-雜交后的受體細(xì)胞(或接合子)大多數(shù)仍然是F-染色體上越靠近F因子的先導(dǎo)區(qū)的基因，進(jìn)入的機(jī)會(huì)就越多，在F-中出現(xiàn)重組子的的時(shí)間就越早，頻率也高。F因子不易轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞中，故HfrF-雜交后的受體細(xì)胞（或稱接合子）大多數(shù)仍然是F-。Hfr菌株內(nèi)的F因子因不正常切割而脫離染色體時(shí)，形成游離的但攜帶一小段染色體基因的F因子，特稱為F因子。FF-與F+F-的不同：給體的部分染色體基因隨F一起轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞a）與染色體發(fā)生重組；b）繼續(xù)存在于F因子上，形成一種部分二倍體；（3）FF-雜交Hfr：F質(zhì)粒進(jìn)入受體菌后，少數(shù)F質(zhì)粒插入到

26、受體菌 的染色體中，與染色體一起復(fù)制（整合）。整合后的細(xì)菌有可能提高轉(zhuǎn)移染色體基因的頻率，稱此菌為高頻重組菌（high friquency recombinant，Hfr）。 F質(zhì)粒：Hfr菌中的F質(zhì)?？蓮娜旧w染色體上脫落下來(lái)，并會(huì)帶染色體基因或DNA片段，稱其為 F質(zhì)粒。F+ 、 Hfr、 F質(zhì)粒：三種菌都有性菌毛，均可通過接合方式進(jìn)行基因的轉(zhuǎn)移。通過接合方式轉(zhuǎn)移的質(zhì)粒為接合性質(zhì)粒如F質(zhì)粒、R質(zhì)粒。不能通過接合方式轉(zhuǎn)移的質(zhì)粒為非接合性質(zhì)粒如葡萄球菌的R質(zhì)粒。革蘭陽(yáng)性菌之間的接合是依賴供體菌表面的黏附素，使供受體菌細(xì)胞形成聚集體，完成R質(zhì)粒的轉(zhuǎn)移。R 質(zhì)粒接合R 質(zhì)粒包括：耐藥傳遞因子（RT

27、F）：編碼性菌毛耐藥決定因子（r factor）：編碼耐藥性ACDB R質(zhì)粒結(jié)構(gòu)圖Tn9 帶氯霉素R因子 Tn4 帶氨芐青霉素、鏈霉素和磺胺 R因子 Tn5帶卡那霉素、博來(lái)霉素和鏈霉素 R因子 耐藥傳遞因子編碼菌毛轉(zhuǎn) 導(dǎo) transduction 概 念： 以噬菌體為媒介， 將供菌的一段DNA轉(zhuǎn)移到 受菌中的過程。 普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo) 局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)缺陷噬菌體部分缺陷噬菌體完全缺陷噬菌體普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)-完全缺陷噬菌體可以轉(zhuǎn)導(dǎo)給體染色體的任何部分到受體細(xì)胞中的轉(zhuǎn)導(dǎo)過程。普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)也可轉(zhuǎn)導(dǎo)質(zhì)粒，如金葡菌的質(zhì)粒的獲得葡萄球菌R質(zhì)粒普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)的三種后果：完全轉(zhuǎn)導(dǎo)：進(jìn)入受體的外源DNA通過與細(xì)胞染色體的重組交換而形成穩(wěn)定的轉(zhuǎn)導(dǎo)子流產(chǎn)轉(zhuǎn)導(dǎo)（abortive transduction）轉(zhuǎn)導(dǎo)DNA不能進(jìn)行重組和復(fù)制，但其攜帶的基因可經(jīng)過轉(zhuǎn)錄而得到表達(dá)。外源DNA被降解，轉(zhuǎn)導(dǎo)失敗局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)-進(jìn)入溶原期的溫和噬菌體，以前噬菌體形式整合在細(xì)菌染色體的某一位置，當(dāng)其自發(fā)或經(jīng)誘導(dǎo)中止溶原狀態(tài)，前噬菌體脫離細(xì)菌染色體時(shí)，脫離的前噬菌體基因攜帶出與它緊密連鎖的細(xì)菌的DNA片斷，使受體菌獲得供體菌的某種遺傳性狀的過程。Gal：半乳糖操縱子 bio：生物素操縱子 普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)與局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)的區(qū)別區(qū)別要點(diǎn)普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)基因轉(zhuǎn)導(dǎo)發(fā)生的時(shí)期裂解期