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1、生理學(xué)實(shí)驗(yàn)2009.12.09實(shí)驗(yàn)名稱(chēng):蛙類(lèi)離體心臟灌流課程名稱(chēng):生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)教師:龍?zhí)斐螐埍挑~(yú)陳笑霞實(shí) 驗(yàn) 人:葉永鋒08344031學(xué)院 :海洋學(xué)院實(shí)驗(yàn)時(shí)間:2009年 12月 09日1生理學(xué)實(shí)驗(yàn)2009.12.09一、【目的要求】1、學(xué)習(xí)斯氏離體蛙心灌流法。2、了解心肌的生理特性。3、觀察 Na + ,K +,Ca 2+及腎上腺素 ( Adr) , 乙酰膽堿 ( ACh) 等對(duì)離體心臟活動(dòng)的影響。二、【原理】將離體蛙心 (失去神經(jīng)支配的蛙心) 保持在適宜的環(huán)境中,在一定的時(shí)間內(nèi)仍然能夠保持節(jié)律性收縮, 心臟正常的節(jié)律性活動(dòng)需要一個(gè)適宜的理化環(huán)境,離體心臟也是如此, 離體心臟脫離了機(jī)體的
2、神經(jīng)支配和全身體液因素的直接影響,可以通過(guò)改變灌流液的某些成分,觀察其對(duì)心臟活動(dòng)的作用。心肌細(xì)胞的自律性、興奮性、傳導(dǎo)性及收縮性,都與鈉、鉀及鈣等離子有關(guān)。血鉀濃度過(guò)高時(shí)(高于7.9mmol/L ),心臟興奮性、自律性、傳導(dǎo)性及收縮性都下降,表現(xiàn)為收縮力減弱、心動(dòng)過(guò)緩和傳導(dǎo)阻滯,嚴(yán)重時(shí)心臟可停搏于舒張期。血鈣濃度升高時(shí),心臟收縮力增強(qiáng),過(guò)高可使心室停搏于收縮期。血鈣濃度降低,心肌收縮力減弱。血中鈉離子濃度的輕微變化, 對(duì)心肌影響不明顯, 只有發(fā)生明顯變化時(shí), 才會(huì)影響心肌的生理特性。 腎上腺素可使心率加快、 傳導(dǎo)加快及心肌收縮力增強(qiáng), 乙酰膽堿則與腎上腺素的作用相反。三、【實(shí)驗(yàn)儀器】青蛙、常用
3、手術(shù)器械、蛙板(或蠟盤(pán) )、蛙心夾、計(jì)算機(jī)采集系統(tǒng)、張力傳感器、支架、雙凹夾、雙針形露絲刺激電極、滴管、培養(yǎng)皿(或小燒杯 )、紗布、棉線、橡皮泥、任氏液。蛙心套管 (斯氏套管或八木氏套管)、套管夾、 065 NaCl 、5 NaCI 、2 CaCl2、1 KCl 、1:5 000 腎上腺素、 1:10 000 乙酰肌堿、 300U mL 肝素。四、【方法與步驟】1、斯氏蛙心插管法1)一只青蛙,雙毀髓后背位置于蠟盤(pán)中,按前面的方法暴露心臟。 仔細(xì)識(shí)別心臟周?chē)拇笱?(見(jiàn)右圖 ) 。在左主動(dòng)脈下方穿一線,于動(dòng)脈圓錐處結(jié)扎 (動(dòng)物個(gè)體小時(shí), 結(jié)扎位置可靠上些 )。再?gòu)淖笥覂芍鲃?dòng)脈下方穿一線,并打一
4、活結(jié)備用。左手提起主動(dòng)脈上的結(jié)扎線,右手用眼科剪在結(jié)扎線下方、沿向心方向?qū)?dòng)脈上壁剪一斜口。選擇大小適宜的蛙心套管,然后將盛有少量(套管內(nèi) 2 3 cm 高度 )任氏液 (內(nèi)加入一滴肝素溶液) 的斯氏蛙心套管, 山開(kāi)口處插入動(dòng)脈圓錐 (見(jiàn)右圖 )。當(dāng)套管尖端到達(dá)動(dòng)脈圓錐基部時(shí),應(yīng)將套管稍稍后退, 使尖端向動(dòng)脈圓錐的背部后下方及心尖方向推進(jìn),經(jīng)主動(dòng)脈瓣插入心室腔內(nèi)( 于心室收縮時(shí)插入,但不可插得過(guò)深,以免心室壁堵住套管下口)。此時(shí)可見(jiàn)套管中血液沖人套管,并使液面隨心臟搏動(dòng)而亡下移動(dòng),表明操作成功(否則需退回并重新插入)。用滴管吸去套管中的血液,更換新鮮任氏液。穩(wěn)定住套管后,輕輕提起備用線,將左、
5、右主動(dòng)脈連同插入的套管用雙結(jié)扎緊(不得漏液 ),再將結(jié)線固定在套管的小玻璃鉤上,然后剪斷結(jié)扎線上方的血管。 輕輕提起套管和心臟, 看清靜脈竇的位置, 于靜脈竇下方剪斷有牽連的組織,僅保留靜脈竇與心臟的聯(lián)系, 使心臟離體 (切勿損傷靜脈竇 )。用任氏液反復(fù)沖洗心室內(nèi)余血,2生理學(xué)實(shí)驗(yàn)2009.12.09使套管內(nèi)灌流液不再有殘留血液。保持套管內(nèi)液面高度一致 (1.5 2 cm),即可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。( 2)將插好離體心臟的套管固定在支架上,用蛙心夾夾住少許心尖部肌肉(不可夾得過(guò)多,以免因夾破心室而漏液)。再將蛙心夾上的系線繞過(guò)一個(gè)滑輪與張力傳感器相連(如右圖)。注意:勿使灌流液滴到傳感器上。調(diào)節(jié)顯示器上
6、心臟收縮曲線的幅度適中。2、 實(shí)驗(yàn)觀察(1)記錄正常心搏曲線(2)改用 065 NaCI 溶液灌流,并作好加藥標(biāo)記,觀察心搏變化。待曲線氏插管裝置出現(xiàn)明顯變化時(shí),立即吸去套管中的灌流液,同時(shí)做好沖洗標(biāo)記,并用新鮮任氏液清洗2次,待心搏恢復(fù)正常。注意:換液時(shí)切勿碰套管,以免影響描記曲線的基線,同時(shí)保持灌流液面一致 (以下同 )。觀察可得, NaCI 溶液會(huì)阻遏心臟搏動(dòng)。(3)向套管內(nèi)加26 滴 5 NaCI( 較細(xì)的套管需少加)溶液,作好加藥記號(hào),觀察心搏曲線的頻率及振幅變化。當(dāng)曲線出現(xiàn)明顯變化時(shí),應(yīng)立即吸去套管中的灌流液,并做好沖洗標(biāo)記,迅速用新鮮任氏液清洗2 3 次,待心搏恢復(fù)正常。(4)同
7、法向套管內(nèi)加入1 3 滴 2 CaCI :溶液,觀察并記錄心搏曲線的變化。當(dāng)出現(xiàn)明顯變化時(shí),立即更換任氏液,待心搏恢復(fù)正常(如果恢復(fù)遲緩,可多次沖洗)。(5)向套管中加 1 2 滴 1KCl 溶液,記錄心搏曲線的變化。當(dāng)心搏曲線變化時(shí),同法更換灌流液,待心搏恢復(fù)正常。(6)同法記錄套管中加入l 2 滴的腎上腺素溶液(1: 10 000) 后心搏曲線的變化。(7)同法記錄套管中加入1 2 滴乙酰膽堿溶液(1: 10 000)后心搏曲線的變化。3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析將記錄到的各段心搏曲線附在實(shí)驗(yàn)報(bào)告中,計(jì)算給藥前后曲線的頻率、振幅和基線變化。測(cè)量結(jié)果填入表中。五、【實(shí)驗(yàn)結(jié)果】1、正常博擊曲線圖3生理學(xué)
8、實(shí)驗(yàn)2009.12.092、滴加 0.65%NaCl 溶液圖分析: 滴加 0.65%NaCl 溶液后, 心跳減弱,這是由于用 0.65%NaCl 溶液灌注蛙心時(shí),由于灌注液中缺乏 Ca2+,以致心肌細(xì)胞動(dòng)作電位 2 期內(nèi)流 Ca2+減少,細(xì)胞質(zhì) Ca2+濃度減少,心肌的收縮活動(dòng)也隨之減弱。3、 滴加 5%NaCl 溶液4生理學(xué)實(shí)驗(yàn)2009.12.09分析:由于細(xì)胞外液中鈉濃度差梯度的變化一般對(duì)心肌活動(dòng)影響不明顯。因此上圖的心率變化與圖2 滴加 0.65%NaCl 溶液里變化并不是很大,兩個(gè)不同濃度的相同溶液作用機(jī)理是一樣的,在此一不作過(guò)多相同分析。但如果實(shí)驗(yàn)中滴加溶液順序不一樣,若先滴加5%N
9、aCl.再滴加 0.65%NaCl 溶液,所得的心搏變化就不如圖3 那樣明顯了, 收縮力僅出現(xiàn)很微弱的變化。4、 滴加 2%CaCl溶液2在細(xì)胞膜上對(duì)內(nèi)流有競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用,稱(chēng)為膜屏障作用。Ca2分析 :細(xì)胞外 CaNa0 增高時(shí), Na內(nèi)流受抑制,細(xì)胞0 期除極速度與幅度減小,使興奮性及傳導(dǎo)性均降低。Ca2 0 增高使 Ca2 內(nèi)流增多,因此慢反應(yīng)細(xì)胞 0 期去極化加快加強(qiáng),傳導(dǎo)性增高,而快反應(yīng)細(xì)胞平臺(tái)期縮短,有效不應(yīng)期縮短,復(fù)極加速。2內(nèi)流增多,使心肌收縮能力增強(qiáng)。Ca2Ca0 降低時(shí),所引起的變化與高鈣時(shí)相反。因此加入CaCl 2 后,心率減少、振幅減少,基線上移。5、 滴加 1%KCl溶
10、液分析:滴加 1 KCl 后的心搏曲線發(fā)現(xiàn),曲線的頻率逐漸減小,愈來(lái)愈疏, 幅度逐漸下降,最后停止在基線處,即心臟停博于舒張狀態(tài)。因?yàn)楫?dāng)細(xì)胞K+濃度增高時(shí),K+與 Ca2+有5生理學(xué)實(shí)驗(yàn)2009.12.09競(jìng)爭(zhēng)性拮抗作用, K+抑制細(xì)胞膜對(duì) Ca2+的轉(zhuǎn)運(yùn),使進(jìn)入細(xì)胞內(nèi) Ca2+減少,心肌的興奮收縮偶聯(lián)過(guò)程減弱,心肌收縮力降低。所以心搏曲線振幅減小。6、 滴加 1: 10000 腎上腺素溶液分析:滴加腎上腺素后, 蛙心收縮增強(qiáng), 心臟舒張完全, 描記的心搏曲線幅度明顯增大。其作用機(jī)理是,腎上腺素可與心肌細(xì)胞膜上的B 受體結(jié)合,提高心肌細(xì)胞和肌漿網(wǎng)膜Ca2+通透性,導(dǎo)致肌漿中Ca2+濃度增高,使
11、心肌收縮增強(qiáng)。另外,腎上腺素還有降低肌鈣蛋白與 Ca2+親和力,促使肌鈣蛋白對(duì)Ca2+的釋放速率增加,提高肌漿網(wǎng)膜攝取Ca2+的速度,刺激 Na+與 Ca2+交換,使復(fù)極期向細(xì)胞外排出Ca2+的作用加速,這樣,將使心肌舒張速度增快,整個(gè)舒張過(guò)程明顯增強(qiáng)。7、 滴加 1: 10000 乙酰膽堿溶液分析:上圖可示,蛙心收縮減弱,心率減慢,最后出現(xiàn)蛙心停止舒張階段。其機(jī)理為:乙酰膽堿與心肌細(xì)胞膜M受體結(jié)合, 一方面提高心肌細(xì)胞膜K+通道的通透性, 促使 K+外流,6生理學(xué)實(shí)驗(yàn)2009.12.09將引起: 1)竇房強(qiáng)細(xì)胞復(fù)極時(shí) K+外流增多,最大復(fù)極電位絕對(duì)值增大;Ik 衰減過(guò)程減弱,自動(dòng)除極速度減慢
12、。這兩方面因素導(dǎo)致竇房自律性降低,心率減慢。2)復(fù)極過(guò)程中 K+外流增加,動(dòng)作電位2、 3 期縮短, Ca2+進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)減少,使心肌收縮減弱;另一方面乙酰膽堿可直接抑制 Ca2+通道,減少 Ca2+內(nèi)流,進(jìn)而使心肌收縮減弱。表一:各測(cè)量結(jié)果比較表1 改變灌流成分對(duì)蛙離體心臟活動(dòng)的影響實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目心率/(次振幅 /g基線變化其他/min )(上移或下移)0.65 對(duì)照521.47給藥511.47心收縮力減弱NaCl恢復(fù)521.8對(duì)照521.85 NaCl給藥512.82上移心收縮力減弱恢復(fù)622.62對(duì)照491.65收縮力沒(méi)有明顯增給藥492.16上移CaCl 2大,但基線上移明顯恢復(fù)501.94上
13、移對(duì)照522.271 KCl給藥591.91稍上移心收縮力減弱恢復(fù)582.051 10000對(duì)照511.83給藥512.64心收縮力增強(qiáng)腎上腺素恢復(fù)552.671 10000對(duì)照461.06給藥01.06心收縮力減弱乙酰膽堿恢復(fù)520.77上移六、【注意事項(xiàng)】制備蛙心標(biāo)本時(shí),勿傷及靜脈竇。2 .上述各實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目,一旦出現(xiàn)作用應(yīng)立即用正常任氏液換洗,以免心肌受損, 而且必須待心搏恢復(fù)正常后方能進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。復(fù)習(xí)心肌生物電的產(chǎn)生機(jī)制及各種離子對(duì)心臟活動(dòng)的影響。盡量選用健壯、體大的雄性蟾蜍,手術(shù)過(guò)程中注意保護(hù)心臟,避免損傷。實(shí)驗(yàn)中及時(shí)用任氏液沖洗心臟,待曲線恢復(fù)平穩(wěn)后再進(jìn)行下一步操作。每次更換任氏液
14、都必須保持灌流液液面高度恒定,以免因灌流量變化而影響結(jié)果。嚴(yán)格控制每次藥品加入量,先加一滴,效果不明顯再加一滴。滴加藥品和換取正常任氏液,須及時(shí)標(biāo)記,以便觀察分析。吸滴瓶中的任氏液和吸蛙心套管內(nèi)溶液的吸管應(yīng)區(qū)分專(zhuān)用,不可混淆使用,以免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。7生理學(xué)實(shí)驗(yàn)2009.12.09【思考題】離體蛙心制備好后,有時(shí)候館內(nèi)的液面上下移動(dòng)很不明顯,是何原因?如何處理?答:離體蛙心制備好后,蛙心插管內(nèi)的液體應(yīng)隨蛙心室的收縮和舒張活動(dòng)而上下移動(dòng)。其實(shí)質(zhì)是:在心室收縮時(shí),心室容積減少,室內(nèi)壓升高,將心室內(nèi)的液體壓入插管內(nèi),管內(nèi)液面上升;在心室舒張的時(shí)候,心室容積增大,心室內(nèi)壓減少,將插管內(nèi)液體吸入心室,管內(nèi)
15、液面下降。但是有時(shí)候蛙心插管內(nèi)液面波動(dòng)不明顯,其主要原因是: 插管內(nèi)尖端出現(xiàn)血凝塊。插管內(nèi)液體不能順暢的進(jìn)出心室腔內(nèi)。解決方法為用長(zhǎng)吸管將血凝塊吸出, 在吸出血凝塊后, 應(yīng)立即用新鮮任氏液換洗插管內(nèi)液體幾次, 直至蛙心顏色變淡,插管內(nèi)無(wú)血液和小血塊為止。 插管尖端不在心室腔內(nèi),而是在心房或者脈間結(jié)締組織等地方。解決方法為將插管重新插入心室,確定無(wú)誤后,再結(jié)扎固定。 插管進(jìn)入心室腔內(nèi)過(guò)深,以致尖端抵住了心室壁。解決方法為將插管稍稍外提,使插管口正好處于心室腔內(nèi),且開(kāi)口正對(duì)著液體噴射的軸流方向。 蛙心由于長(zhǎng)期心肌失血,導(dǎo)致活力下降。解決方法為向插管內(nèi)滴加少許腎上腺素或者對(duì)其進(jìn)行外加力使其起搏,使其
16、活動(dòng)增強(qiáng)。 房室傳導(dǎo)阻滯。在插管的操作中,由于操作失誤,對(duì)心臟造成的損害過(guò)大,最后導(dǎo)致房室傳導(dǎo)阻滯。由于這種傷害是不可逆轉(zhuǎn)的,所以必須改換蛙心重做實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,為什么必須保持蛙心插管內(nèi)液面高度的恒定?液面過(guò)高或過(guò)低會(huì)產(chǎn)生怎樣的影響?答:在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中, 蛙心插管內(nèi)液面高度發(fā)生變化,心臟收縮曲線會(huì)相應(yīng)發(fā)生變化。心肌縮短幅度和速度受到前負(fù)荷和后負(fù)荷的影響。插管液面高度所產(chǎn)生的壓力,在心室舒張期末期相當(dāng)于心肌的前負(fù)荷,心室開(kāi)始收縮的時(shí)候,此液體所產(chǎn)生的壓力又成為心肌收縮時(shí)的后負(fù)荷。故高度的改變,進(jìn)而引起的前后負(fù)荷的改變將改變心肌收縮的幅度和頻率。當(dāng)液面過(guò)高時(shí)。 心縮曲線幅度將降低。因?yàn)檫^(guò)高的液面,
17、將使心室前負(fù)荷超過(guò)了最適前負(fù)荷, 將導(dǎo)致粗細(xì)肌絲過(guò)于疏遠(yuǎn),而導(dǎo)致收縮的潛力減少,心肌收縮不再增加或下降。而類(lèi)似的, 過(guò)高的后負(fù)荷,也使心肌收縮的幅度和速度大大下降。而當(dāng)液面過(guò)低時(shí),心室收縮的幅度也會(huì)減少。 因?yàn)榍柏?fù)荷過(guò)小,將導(dǎo)致粗細(xì)肌絲過(guò)于接近,而導(dǎo)致收縮的潛力減少,實(shí)際上,此時(shí)由于前負(fù)荷的減少導(dǎo)致心室收縮的效力的減少比前負(fù)荷增加而導(dǎo)致的還有明顯。類(lèi)似的,后負(fù)荷相應(yīng)的減少也會(huì)導(dǎo)致心室收縮的減弱。所以,在實(shí)驗(yàn)中保持最適的液面高度。是取得較好實(shí)驗(yàn)結(jié)果的前提。3 各種離子成分改變蛙心收縮的原理是什么?答:由于心肌細(xì)胞生物電活動(dòng)和收縮過(guò)程與離子密切相關(guān),因此,細(xì)胞外液中離子濃度升高或降低均會(huì)影響到心肌
18、的電生理特性和收縮性。(1)鉀離子的影響K 與靜息電位的形成有關(guān)。細(xì)胞外液K 濃度 K 0 變化對(duì)心肌生理特性的影響較為復(fù)雜。高鉀:K 0 輕度或中度增高時(shí),膜內(nèi)、外K 濃度差減小,靜息電位絕對(duì)值減小,與閾電位差距縮短,因此,興奮性增高。K 0 顯著升高時(shí),由于靜息電位絕對(duì)值減小過(guò)多(膜內(nèi)達(dá)-55mV 左右),Na通道失活,因而興奮性降低甚至消失。另外,還使0 期去極化速度和幅度減小,傳導(dǎo)性降低, 導(dǎo)致興奮傳導(dǎo)減慢, 甚至傳導(dǎo)阻滯。 此外, K 0增高還可提高膜對(duì)K 的通透性,加速 K 外流,動(dòng)作電位平臺(tái)期縮短,因此,不應(yīng)期縮短。8生理學(xué)實(shí)驗(yàn)2009.12.09此外由于平臺(tái)期縮短, 減少了 C
19、a2的內(nèi)流,加上細(xì)胞外 K 與 Ca2 在膜上有競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用,導(dǎo)致心肌收縮功能減弱;(2)鈣離子的影響 細(xì)胞外 Ca2在細(xì)胞膜上對(duì) Na 內(nèi)流有競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用,稱(chēng)為膜屏障作用。Ca 2 0 增高時(shí), Na 內(nèi)流受抑制,細(xì)胞 0 期除極速度與幅度減小, 使興奮性及傳導(dǎo)性均降低。 Ca2 0 增高使 Ca2 內(nèi)流增多,因此慢反應(yīng)細(xì)胞 0 期去極化加快加強(qiáng),傳導(dǎo)性增高,而快反應(yīng)細(xì)胞平臺(tái)期縮短,有效不應(yīng)期縮短,復(fù)極加速。 Ca2 內(nèi)流增多,使心肌收縮能力增強(qiáng)。 Ca2 0 降低時(shí),所引起的變化與高鈣時(shí)相反。(3)鈉離子的影響細(xì)胞外液中鈉濃度差梯度的變化一般對(duì)心肌活動(dòng)影響不明顯。只有當(dāng)Na 0 明顯增
20、高時(shí),膜內(nèi)外鈉的濃度差梯度增大,因此,快反應(yīng)細(xì)胞Na 內(nèi)流加快, 0 期去極速度和幅度均增加,導(dǎo)致傳導(dǎo)性和自律性增高。同時(shí),Na 內(nèi)流的增多促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)Ca2的外運(yùn)使細(xì)胞內(nèi) Ca2 濃度降低,因此,心肌收縮能力減弱。反之,當(dāng)Na 0 降低,使心肌傳導(dǎo)性和自律性降低,心肌收縮能力增強(qiáng)。八、【參考文獻(xiàn)】1】項(xiàng)輝 ,龍?zhí)斐蔚?. 生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指南 M. 科學(xué)出版社 , 2008 : 21- 38.2】朱大年 .生理學(xué) M. 人民衛(wèi)生出版社, 2008: 6-8.贈(zèng)送資料青花魚(yú)(北京)健康產(chǎn)業(yè)科技有限公司2018 年財(cái)務(wù)分析報(bào)告1 . 主要會(huì)計(jì)數(shù)據(jù)摘要2 .基本財(cái)務(wù)情況分析2-1資產(chǎn)狀況截至 2011 年
21、 3 月 31 日,公司總資產(chǎn)20.82 億元。9生理學(xué)實(shí)驗(yàn)2009.12.092-1-1資產(chǎn)構(gòu)成公司總資產(chǎn)的構(gòu)成為:流動(dòng)資產(chǎn)10.63 億元,長(zhǎng)期投資3.57 億元,固定資產(chǎn)凈值5.16億元,無(wú)形資產(chǎn)及其他資產(chǎn)1.46 億元。主要構(gòu)成內(nèi)容如下:(1)流動(dòng)資產(chǎn):貨幣資金 7.01億元,其他貨幣資金 6140 萬(wàn)元,短期投資凈值1.64 億元,應(yīng)收票據(jù)2220 萬(wàn)元,應(yīng)收賬款3425 萬(wàn)元,工程施工 6617 萬(wàn)元,其他應(yīng)收款1135萬(wàn)元。長(zhǎng)期投資: XXXXX2 億元, XXXXX1.08 億元, XXXX3496 萬(wàn)元。固定資產(chǎn)凈值: XXXX 凈值 4.8 億元, XXXXX 等房屋凈值
22、2932 萬(wàn)元。無(wú)形資產(chǎn): XXXXXX 攤余凈值 8134 萬(wàn)元, XXXXX 攤余凈值 5062 萬(wàn)元。長(zhǎng)期待攤費(fèi)用: XXXXX 攤余凈值 635 萬(wàn)元, XXXXX 攤余凈值 837 萬(wàn)元。2-1-2資產(chǎn)質(zhì)量(1)貨幣性資產(chǎn):由貨幣資金、其他貨幣資金、短期投資、應(yīng)收票據(jù)構(gòu)成,共計(jì)9.48億元,具備良好的付現(xiàn)能力和償還債務(wù)能力。長(zhǎng)期性經(jīng)營(yíng)資產(chǎn):由 XXXXX 構(gòu)成,共計(jì) 5.61 億元,能提供長(zhǎng)期的穩(wěn)定的現(xiàn)金流。短期性經(jīng)營(yíng)資產(chǎn):由工程施工構(gòu)成,共計(jì) 6617 萬(wàn)元,能在短期內(nèi)轉(zhuǎn)化為貨幣性資產(chǎn)并獲得一定利潤(rùn)。(4)保值增值性好的長(zhǎng)期投資:由XXXX 與 XXXX 的股權(quán)投資構(gòu)成,共計(jì)3.0
23、8 億元,不僅有較好的投資回報(bào),而且XXXX 的股權(quán)對(duì)公司的發(fā)展具有重要作用。以上四類(lèi)資產(chǎn)總計(jì)18.83 億元,占總資產(chǎn)的90% ,說(shuō)明公司現(xiàn)有的資產(chǎn)具有良好的質(zhì)量。2-2負(fù)債狀況截至 2011 年 3 月 31 日,公司負(fù)債總額10.36 億元,主要構(gòu)成為: 短期借款 (含本年到期的長(zhǎng)期借款 )9.6 億元,長(zhǎng)期借款5500 萬(wàn)元,應(yīng)付賬款707 萬(wàn)元,應(yīng)交稅費(fèi)51 萬(wàn)元。10生理學(xué)實(shí)驗(yàn)2009.12.09目前貸款規(guī)模為10.15 億元,短期借款占負(fù)債總額的93% ,說(shuō)明短期內(nèi)公司有較大的償債壓力。結(jié)合公司現(xiàn)有7.62 億元的貨幣資金量來(lái)看,財(cái)務(wù)風(fēng)險(xiǎn)不大。目前公司資產(chǎn)負(fù)債率為49.8% ,自
24、有資金與舉債資金基本平衡。2-3經(jīng)營(yíng)狀況及變動(dòng)原因扣除 XXXX 影響后, 2011 年 1-3 月 (以下簡(jiǎn)稱(chēng)本期)公司凈利潤(rùn)605 萬(wàn)元,與 2010 年同期比較 (以下簡(jiǎn)稱(chēng)同比)減少了 1050 萬(wàn)元,下降幅度為63% 。變動(dòng)原因按利潤(rùn)構(gòu)成的主要項(xiàng)目分析如下:2-3-1主營(yíng)業(yè)務(wù)收入本期主營(yíng)業(yè)務(wù)收入3938 萬(wàn)元,同比減少922 萬(wàn)元,下降幅度為19% 。其主要原因?yàn)椋篨XXX 收入 3662 萬(wàn)元,同比增加 144 萬(wàn)元,增長(zhǎng)幅度為 4.1% ,系 XXXXXXXXXXX增加所致。XXXXX126 萬(wàn)元,同比增加 3 萬(wàn)元,增長(zhǎng)幅度為 2% ,具體分析詳見(jiàn)“重要問(wèn)題綜述 4-1 ”。(3
25、) 工程收入150 萬(wàn)元,同比減少1069 萬(wàn)元,下降幅度為88% ,原因是:一、本期開(kāi)工項(xiàng)目同比減少 ;二、 XXXX 辦理結(jié)算的方式與其他工程項(xiàng)目不同。通過(guò)上述分析可見(jiàn),本期收入同比減少的主要原因是工程收入減少。如果考慮按XXXX項(xiàng)目本期投入量2262 萬(wàn)元作調(diào)整比較,則:本期工程收入同比增加1193 萬(wàn)元,增長(zhǎng)幅度為 98%; 本期收入調(diào)整為6200 萬(wàn)元,同比增加1340 萬(wàn)元,增長(zhǎng)幅度為28% 。2-3-2主營(yíng)業(yè)務(wù)成本本期主營(yíng)業(yè)務(wù)成本1161 萬(wàn)元,同比減少932 萬(wàn)元,下降幅度為45% 。按營(yíng)業(yè)成本構(gòu)成,分析如下:(1)XXXX 營(yíng)業(yè)成本993 萬(wàn)元,同比增加102 萬(wàn)元,增加幅度
26、為11% 。主要原因是11生理學(xué)實(shí)驗(yàn)2009.12.09計(jì)入成本的方式發(fā)生變化,去年同期按攤銷(xiāo)數(shù)計(jì)入成本,而本期按發(fā)生數(shù)計(jì)入成本,此項(xiàng)因素影響數(shù)為 117 萬(wàn)元。工程成本 168 萬(wàn)元 (直接成本 144 萬(wàn)元,間接費(fèi)用 24 萬(wàn)元 ),同比減少 1034 萬(wàn)元,下降幅度為 86% 。主要原因是:開(kāi)工項(xiàng)目同比減少,使工程直接成本減少1002 萬(wàn)元,下降幅度為87%;開(kāi)工項(xiàng)目同比減少,以及機(jī)構(gòu)調(diào)整后項(xiàng)目部人員減少,使工程間接費(fèi)用同比減少32 萬(wàn)元,下降幅度為57% 。已開(kāi)支的工程間接費(fèi)用占計(jì)劃數(shù)的26% 。通過(guò)上述分析可見(jiàn),本期營(yíng)業(yè)成本減少的主要原因是工程成本的減少。2-3-3其他業(yè)務(wù)利潤(rùn)本期其
27、他業(yè)務(wù)利潤(rùn)41 萬(wàn)元,同比增加15 萬(wàn)元,增長(zhǎng)幅度為58% 。其主要原因是:其他業(yè)務(wù)收入 44 萬(wàn)元,同比持平。(2) 其他業(yè)務(wù)支出3 萬(wàn)元,同比減少15 萬(wàn)元,下降幅度為85% 。原因是:撤銷(xiāo)資產(chǎn)經(jīng)營(yíng)分公司后,相關(guān)業(yè)務(wù)由XXXX 部進(jìn)行管理,除稅費(fèi)外沒(méi)有其他直接費(fèi)用。2-3-4管理費(fèi)用本期管理費(fèi)用883 萬(wàn)元,同比增加425 萬(wàn)元,增加幅度為93% 。主要原因是:獎(jiǎng)金 515 萬(wàn)元,同比增加 375 萬(wàn)元,主要原因是:總額差異: 2010年考核獎(jiǎng)515 萬(wàn)元較 2002年考核獎(jiǎng) 457 萬(wàn)元在總額上增加了58 萬(wàn)元;時(shí)間差異: 2009年考核獎(jiǎng)457 萬(wàn)元中的 317 萬(wàn)元計(jì)列入 2009年
28、的成本費(fèi)用,在2010年實(shí)際計(jì)列成本費(fèi)用的考核獎(jiǎng)為140 萬(wàn)元。而2010 年考核獎(jiǎng) 515萬(wàn)元全額計(jì)列在2011年,形成時(shí)間性差異317 萬(wàn)元。工資附加費(fèi) 78 萬(wàn)元,同比增加 70 萬(wàn)元,主要是 2010 年考核獎(jiǎng)形成的時(shí)間性差異。董事會(huì)經(jīng)費(fèi) 21 萬(wàn)元,同比增加 16 萬(wàn)元,原因是:12生理學(xué)實(shí)驗(yàn)2009.12.09總額差異: 2002 年董事領(lǐng)取半年津貼,2010 年董事領(lǐng)取全年津貼。時(shí)間差異: 2002 年董事津貼在2010 年陸續(xù)發(fā)放, 2010 年董事津貼集中在2011 年 1 月發(fā)放。(4)本期轉(zhuǎn)回已計(jì)提的壞賬準(zhǔn)備5 萬(wàn)元,而去年同期是計(jì)提了壞賬準(zhǔn)備56 萬(wàn)元,主要系去年同期對(duì)
29、暫未收到的XXXX 收入 830 萬(wàn),計(jì)提了壞賬準(zhǔn)備50 萬(wàn)元。本期對(duì)暫未收到的收入采用個(gè)別認(rèn)定法,不予計(jì)提壞賬準(zhǔn)備。因此,壞賬準(zhǔn)備對(duì)管理費(fèi)用的影響減少了萬(wàn)元。本期暫未收到的XXXX 收入為 2242 萬(wàn)元,原因是:XXXXXXXXXXXXXXXX。經(jīng)與 XXXX公司協(xié)商, XXXX 公司于 4 月 15 日前將全數(shù)結(jié)清所欠款項(xiàng)。2-3-5財(cái)務(wù)費(fèi)用本期財(cái)務(wù)費(fèi)用1204 萬(wàn)元,同比增加680 萬(wàn)元,增加幅度為130% 。原因是:貸款規(guī)模增大: 本期銀行貸款平均規(guī)模為10.25 億元,去年同期為4.72 億元,增加了 5.53億元,增幅為117% 。貸款利率提高:自2010年 9 月存款準(zhǔn)備金率上
30、調(diào)至7% 以來(lái),各家銀行普遍出現(xiàn)惜貸現(xiàn)象,我公司的新增貸款不再享受按基準(zhǔn)利率下浮10% 的優(yōu)惠利率。2-3-6投資收益扣除 XXXX 影響后,本期投資收益217 萬(wàn)元,同比減少111 萬(wàn)元,下降幅度為34% 。按構(gòu)成內(nèi)容分析如下:(1)國(guó)債收益本期國(guó)債方面取得的收益為56 萬(wàn)元,同比減少213 萬(wàn)元,下降幅度79% 。主要原因是:投入資金的規(guī)模減小:本期投入資金的平均規(guī)模為1.73 億元,同比減少8854 萬(wàn)元,下降幅度為 34% 。13生理學(xué)實(shí)驗(yàn)2009.12.09實(shí)現(xiàn)收益的時(shí)間性差異:投資收益何時(shí)實(shí)現(xiàn),取決于國(guó)債買(mǎi)賣(mài)、兌息時(shí)間和有關(guān)投資協(xié)議約定時(shí)間。股票收益本期股票方面取得的收益為575
31、萬(wàn)元,同比增加 551 萬(wàn)元。原因是:本期公司組織資金5.78億元,申購(gòu)到158 萬(wàn)股 TCL 新股,獲利575 萬(wàn)元。跌價(jià)準(zhǔn)備按 2011 年 3 月 31 日的收盤(pán)價(jià)計(jì)算,公司所持國(guó)債的市價(jià)為1.64 億元,本期計(jì)提了跌價(jià)準(zhǔn)備 414 萬(wàn)元,而去年同期是轉(zhuǎn)回已計(jì)提的跌價(jià)準(zhǔn)備38 萬(wàn)元,因此跌價(jià)準(zhǔn)備對(duì)投資收益的負(fù)影響同比增加452 萬(wàn)元。2-3-7營(yíng)業(yè)外支出凈額本期營(yíng)業(yè)外支出凈額18 萬(wàn)元,同比增加了24 萬(wàn)元,主要因素是:(1) 本期報(bào)廢4 輛汽車(chē),帳面凈值 14 萬(wàn)元 ;(2) 本期發(fā)生辦理已轉(zhuǎn)讓的房屋的產(chǎn)權(quán)證費(fèi)用3 萬(wàn)元,屬于去年同期體現(xiàn)的轉(zhuǎn)讓房屋收益6 萬(wàn)元的滯后費(fèi)用。2-3-8經(jīng)營(yíng)
32、狀況綜述本期凈利潤(rùn)同比下降幅度較大的主要原因是管理費(fèi)用和財(cái)務(wù)費(fèi)用的大幅增加、投資收益減少所致。從具體的分析來(lái)看:一、造成費(fèi)用增加的因素在控制范圍內(nèi);二、投資收益的減少是受?chē)?guó)債市場(chǎng)價(jià)格下跌影響。管理費(fèi)用增加的因素中,最主要的是考核獎(jiǎng)的時(shí)間性差異。在形成原因上是,而采取的一種處理策略。 此因素已考慮在 2011 年預(yù)算中, 對(duì) 2011年經(jīng)營(yíng)目標(biāo)不會(huì)產(chǎn)生影響,只是費(fèi)用的期間性的表現(xiàn)。擴(kuò)大后的貸款規(guī)模, 仍控制在董事會(huì)的授權(quán)范圍內(nèi)。 隨著下半年可轉(zhuǎn)債的發(fā)行, 公司對(duì)貸款規(guī)模的調(diào)整,財(cái)務(wù)費(fèi)用會(huì)相應(yīng)減少。14生理學(xué)實(shí)驗(yàn)2009.12.09(3)國(guó)債市場(chǎng)價(jià)格下跌,屬不可控因素。若國(guó)債價(jià)格不恢復(fù),對(duì)實(shí)現(xiàn)20
33、11 年經(jīng)營(yíng)目標(biāo)有較大影響。. 預(yù)算完成情況及分析3-1收入收益類(lèi)本期收入、收益共計(jì)4195 萬(wàn)元,完成收入總預(yù)算3% ,扣除 XXX 因素和 XXXX 項(xiàng)目的影響,完成收入總預(yù)算6% 。按預(yù)算項(xiàng)目分析如下:XXXXX 收入 3661 萬(wàn)元,完成預(yù)算 25% 。XXXXX 收入 126 萬(wàn)元,完成預(yù)算 24% 。(3)工程收入 150萬(wàn)元,完成預(yù)算 0.3% ,具體分析詳見(jiàn)“重要問(wèn)題綜述3-2 ”。(4)其他業(yè)務(wù)收益41 萬(wàn)元,完成預(yù)算57% ,剔除費(fèi)用支出減少因素,完成預(yù)算36% ,主要原因是收入實(shí)現(xiàn)的期間性。(5)短期投資收益217 萬(wàn)元,完成預(yù)算11% ,主要原因是本期計(jì)提 414萬(wàn)元跌
34、價(jià)準(zhǔn)備,具體分析詳見(jiàn)“重要問(wèn)題綜述4-2 ”。追加短期投資收益本期無(wú), 主要原因是: 計(jì)劃用于追加短期投資的資金是發(fā)行可轉(zhuǎn)債后暫時(shí)閑置的資金,屬于時(shí)間性差異。XXXX 的現(xiàn)金股利目前尚未取得,若本年確能收到,則屬于時(shí)間性差異。否則,將形成本年目標(biāo)利潤(rùn)的缺口。3-2成本費(fèi)用類(lèi)本期成本、 費(fèi)用共計(jì)3484 萬(wàn)元,占支出總預(yù)算3% ,扣除 XXX 項(xiàng)目和可轉(zhuǎn)債發(fā)行費(fèi)用的影響后,占支出總預(yù)算6% 。按預(yù)算項(xiàng)目分析如下:XXXX 成本 993 萬(wàn)元,占預(yù)算 20% ,按預(yù)算項(xiàng)目分析如下:人員經(jīng)費(fèi) 197 萬(wàn)元,占預(yù)算 27% 。15生理學(xué)實(shí)驗(yàn)2009.12.09辦公經(jīng)費(fèi)28 萬(wàn)元,占預(yù)算21% 。日常維
35、護(hù)費(fèi)33 萬(wàn)元,占預(yù)算13% 。專(zhuān)項(xiàng)維護(hù)費(fèi)196 萬(wàn)元,占預(yù)算12% ,主要原因是大部分預(yù)算項(xiàng)目尚未實(shí)施。折舊與無(wú)形資產(chǎn)攤銷(xiāo)539 萬(wàn)元,占預(yù)算 25% 。(2)工程結(jié)算成本168萬(wàn)元,占預(yù)算 0.3% ,具體分析詳見(jiàn)“重要問(wèn)題綜述4-3 ”。(3)管理費(fèi)用 883萬(wàn)元,占預(yù)算 43% ,扣除一些費(fèi)用項(xiàng)目的期間性影響后,完成預(yù)算24% ,具體分析詳見(jiàn)“重要問(wèn)題綜述4-4 ”。財(cái)務(wù)費(fèi)用 (利息凈支出 )1204 萬(wàn)元,占預(yù)算 33% ,主要原因是資金計(jì)劃中的上半年貸款規(guī)模大于下半年,使此項(xiàng)費(fèi)用發(fā)生不均衡。具體分析詳見(jiàn)“重要問(wèn)題綜述4-4 ”。營(yíng)業(yè)外支出凈額 18 萬(wàn)元,占預(yù)算 5% ,主要原因是
36、列入預(yù)算事項(xiàng)尚未進(jìn)行處理。3-3預(yù)算分析綜述本期凈利潤(rùn)605 萬(wàn)元,完成全年預(yù)算7% ,如果對(duì)XXXX 收益按預(yù)算平均季度收益250 萬(wàn)元進(jìn)行預(yù)計(jì),本期凈利潤(rùn)調(diào)整為855 萬(wàn)元,完成預(yù)算9.6% 。從以上預(yù)算項(xiàng)目的分析來(lái)看,未完成預(yù)算的主要原因在于:本期利潤(rùn)構(gòu)成中工程利潤(rùn)和投資收益與預(yù)算存在重大差距,將在“重要問(wèn)題綜述”里進(jìn)行詳細(xì)分析。4 . 重要問(wèn)題綜述及建議4-1 XXXXX收入增長(zhǎng)分析本期收入 126 萬(wàn)元,同比增加 3 萬(wàn)元,增長(zhǎng)幅度為 2% 。根據(jù)有關(guān)部門(mén)的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù),車(chē)輛通行情況與收入情況如下表:XXX 同比增長(zhǎng)了14% ,總收入同比只增長(zhǎng)2% ,原因是 XXXXXX 在結(jié)構(gòu)上發(fā)生了
37、較大變化。本期 98.4% 的車(chē)流量集中在收費(fèi)單價(jià)較低的XXXX 和 XXXX 上。建議:公司相關(guān)部門(mén)對(duì)XXX 和 XXX 下降的情況進(jìn)行分析,找出下降原因。16生理學(xué)實(shí)驗(yàn)2009.12.094-2國(guó)債跌價(jià)幅度較大國(guó)債價(jià)格主要受資本市場(chǎng)供求關(guān)系和資本流向的影響,但是國(guó)債的到期價(jià)值是確定的,計(jì)提的跌價(jià)準(zhǔn)備能在兌息和兌本時(shí)得到補(bǔ)償。所以,計(jì)提的跌價(jià)準(zhǔn)備在賣(mài)出國(guó)債前本質(zhì)上是一種浮虧。所獲投資收益與資金成本的差額,才是衡量投資損益的標(biāo)準(zhǔn)。國(guó)債價(jià)格在一定空間內(nèi)與股市行情基本呈負(fù)相關(guān)。從本年股市行情來(lái)看, 有持續(xù)走好的可能,國(guó)債價(jià)格在短期內(nèi)可能難以上漲。2011 年短期投資收益預(yù)算1900 萬(wàn)元 (不含追加投資收益),若國(guó)債價(jià)格遲遲不上漲,計(jì)提的跌價(jià)準(zhǔn)備將無(wú)法轉(zhuǎn)回,對(duì)完成2011年的經(jīng)營(yíng)目標(biāo)會(huì)產(chǎn)生很大影響。對(duì)比 2010 年 12月31日與 2011 年3月 31 日的市場(chǎng)價(jià)格,各類(lèi)國(guó)債跌價(jià)幅度為2.1% 4.1% 。除 21(07)外的其余國(guó)債品種均已跌破面值,跌破面值幅度為5.35% 9.56% 。建議:公司根據(jù)目前市場(chǎng)行情進(jìn)行專(zhuān)題研究,制定出應(yīng)對(duì)措施。4-3工程項(xiàng)目完成量不足鑒于工程項(xiàng)目收入與成本的相關(guān)性,應(yīng)按 2011 年經(jīng)營(yíng)目標(biāo), 著重從完成工程利潤(rùn)預(yù)算情況來(lái)分析?,F(xiàn)按以下已經(jīng)落實(shí)的工程項(xiàng)目(不含 XXXX 項(xiàng)目 ),對(duì)工程
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