關(guān)于開(kāi)展評(píng)選先進(jìn)基層黨組織、優(yōu)秀77

1、第八章甾體類化合物第一節(jié) 概述含義：以環(huán)戊烷并多氫菲 甾核衍生的一類化合物的總稱。一、甾體化合物的結(jié)構(gòu)與分類 甾體類化合物依-17位取代基團(tuán)的不同，可分為： 類型 C17側(cè)鏈 A/B B/C C/D C21甾類 C2H5衍生物 反 反 順強(qiáng)心苷類 不飽和內(nèi)酯環(huán) 順?lè)?反 順甾體皂苷類 含氧螺雜環(huán) 順?lè)?反 反植物甾醇 810個(gè)碳原子烴類 順?lè)?反 反昆蟲(chóng)變態(tài)激素 810個(gè)碳原子含氧烴類 順 反 反膽汁酸類 戊酸 順 反 反二、甾體化合物的生物合成途徑三、甾體類化合物的顏色反響1Liebermann-Burchard反響2Salkowski反響 3Tschugaev反響4Rosen-Heimer

2、反響5Kahlenberg反響 第二節(jié) 強(qiáng)心苷類化合物一、強(qiáng)心苷概述 強(qiáng)心苷cardiac glycosides是生物界中存在的一類對(duì)心臟有顯著生理活性的甾體苷類，是由強(qiáng)心苷元cardiac aglycones與糖縮合的一類苷。二、強(qiáng)心苷的結(jié)構(gòu)與分類一苷元局部：依C17 -位上連接內(nèi)酯環(huán)大小的不同 強(qiáng)心甾烯 海蔥甾烯蟾蜍甾二烯 3-OH 14-OH 3-OH 14-OH 甲型強(qiáng)心苷元 乙型強(qiáng)心苷元 甲型強(qiáng)心苷 乙型強(qiáng)心苷 3 -位連接糖 3-位連接糖 二糖局部 糖的類型 a-OH糖 a -去氧糖 五碳醛糖 2、6-二去氧糖 六碳醛糖 2、6-二去氧糖甲醚 6-去氧糖 6-去氧糖甲醚依直接與苷元

3、相連的糖的種類 I型 苷元-2、6-二去氧糖-D-葡萄糖 II型 苷元-6-去氧糖 - D-葡萄糖III型 苷元- D-葡萄糖 三、強(qiáng)心苷的結(jié)構(gòu)與活性的關(guān)系四、強(qiáng)心苷的理化性質(zhì) 1性狀 大多為無(wú)色結(jié)晶或無(wú)定形粉末 。具有旋光性。味苦，對(duì)粘膜有刺激性。 2溶解性 水 甲醇、乙醇 醋酸乙酯、含水氯仿、氯仿-甲醇 乙醚、苯、石油醚 原生苷 次生苷 + S水 + + 微溶 可溶 - 難溶-3脫水反響 強(qiáng)心苷用混合強(qiáng)酸35%鹽酸水解時(shí)，苷元上羥基C14-OH ，C5-OH更容易與鄰位上的氫脫去水分子的反響。屬于水解反響的副反響，應(yīng)注意防止。 4水解反響 反響類型 反響條件 水解特點(diǎn) 用 途酸水解溫和酸水

4、解 0.020.05mol/L HCI 含水醇短時(shí)加熱 苷元與a-去氧糖及 a-去氧糖與a-去氧糖 之間的苷鍵開(kāi)裂 I 型強(qiáng)心苷的水解 苷元、a-去氧糖 雙糖、三糖 I型 R O a-去氧糖 a-去氧糖 glc強(qiáng)烈酸水解 35% HCI 所有苷鍵斷裂 ( I )、 II、III型強(qiáng)心苷的水解延長(zhǎng)加熱時(shí)間 苷元和各種單糖或加壓 但易產(chǎn)生脫水苷元 I型 苷元-2、6-二去氧糖-D-葡萄糖 II型 苷元-6-去氧糖 - D-葡萄糖 III型 苷元- D-葡萄糖 氯化氫-丙酮法 II型強(qiáng)心苷的水解 1% HCI丙酮溶液 原生苷元和糖衍生物 20兩周條件溫和水、36左右、24 hr、 專屬性強(qiáng) I、 I

5、I型 次生苷和葡萄糖植物體內(nèi)只有水解葡萄糖的酶、 III型 苷元、葡萄糖 I型 苷元-2、6-二去氧糖-D-葡萄糖 II型 苷元-6-去氧糖 - D-葡萄糖 III型 苷元- D-葡萄糖酶水解堿水解 酰 基 內(nèi)酯環(huán)a-去氧糖 苷元 a-羥基糖 NaHCO3 + - - -Ca (OH)2 + + + -NaOH + + + + 反響產(chǎn)物與條件有關(guān)水溶液中, 內(nèi)酯環(huán)開(kāi)環(huán)，加酸后環(huán)和。 醇溶液中 電子轉(zhuǎn)移、雙鍵移位 加成反響 皂化開(kāi)環(huán)甲型強(qiáng)心苷 C22活性亞甲基 內(nèi)酯型異構(gòu)化苷 開(kāi)鏈型異構(gòu)化苷 與活性亞甲基試劑反響 用于甲型和乙型強(qiáng)心苷鑒別五、強(qiáng)心苷的顏色反響按作用部位分： 作用于五元不飽和內(nèi)酯環(huán)

6、1、Legal反響2、Kedde反響、Raymond反響、Baljet反響用于甲型與乙型強(qiáng)心苷的鑒別作用于甾核 1、醋酐-濃硫酸L-B反響2、Salkowski氯仿-濃硫酸反響3、三氯醋酸-氯胺T(Rosenheim)反響4. 三氯化銻五氯化銻反響作用于a-去氧糖Keller-KilianiK-K反響2. 對(duì)二甲氨基苯甲醛反響3. 噸氫醇反響4. 過(guò)碘酸-對(duì)硝基苯胺反響 用于 I型與 II、III型強(qiáng)心苷的鑒別六、強(qiáng)心苷的提取與別離原料強(qiáng)心苷提取別離比較困難： 1. 含強(qiáng)心苷成分比較復(fù)雜，含量較低，2. 強(qiáng)心苷為多糖苷, 常與多糖、皂苷、色素、鞣質(zhì)等性質(zhì)相近成分共存， 3. 共存酶的存在及酸、

7、堿等，易造成強(qiáng)心苷的水解，使成分復(fù)雜化。 提取 溶劑法相似者相溶原那么： 原生苷 甲醇、乙醇次生苷 乙醚、氯仿、氯仿-甲醇混合溶劑常用提取溶劑 : 甲醇、70%乙醇提取效率高；能使酶破壞失活 純化 溶劑法: 油脂類雜質(zhì)種子類藥材：壓榨法或石油醚脫脂原料/醇提濃縮液 葉綠素地上局部藥材：靜置析膠法醇提液濃縮至適當(dāng)醇濃度靜置 鉛鹽法: 沉淀酚酸類雜質(zhì)鞣質(zhì)等， 應(yīng)注意調(diào)整含醇量，減少?gòu)?qiáng)心苷的損失注意某些強(qiáng)心苷的脫酰基反響吸附法: 活性炭吸附除去葉綠素等脂溶性雜質(zhì)氧化鋁吸附除去糖類、水溶性色素、皂苷等，注意調(diào)整醇濃度 別離 兩相溶劑萃取法：依分配系數(shù)差異K逆流分流法： 依分配系數(shù)差異K液滴逆流分溶法D

8、CCC: 依分配系數(shù)差異K色譜別離法： 對(duì)親脂性苷單糖苷、次生苷、苷元：吸附原理 對(duì)弱親脂性苷原生苷：分配原理七、強(qiáng)心苷的檢識(shí)1.理化檢識(shí) 2.色譜檢識(shí) 八、強(qiáng)心苷的結(jié)構(gòu)研究一 紫外光譜 a甲型強(qiáng)心苷 乙型強(qiáng)心苷五元不飽和內(nèi)酯環(huán) 六元不飽和內(nèi)酯環(huán)a- 內(nèi)酯 a、-內(nèi)酯max 220nm ( lg 4.34 ) max 295 300nm ( lg 3.93 ) 用于甲型與乙型強(qiáng)心苷及苷元的鑒別 (二) 紅外光譜 強(qiáng)心苷在18001700cm-1 產(chǎn)生特征性兩個(gè)羰基吸收峰, 甲型 乙型高波數(shù)區(qū) 向低波數(shù)移動(dòng)多一個(gè)雙鍵， 分子的共振結(jié)構(gòu)使得-C+-O 比較穩(wěn)定，依據(jù)虎克定律例如：3-乙酰毛花洋地黃

9、毒苷元 1738 cm-1乙酰羰基 嚏根草苷元1756 cm-1內(nèi)酯環(huán)正常羰基吸收峰 1718 cm-11783 cm-1內(nèi)酯環(huán)非正常羰基吸收 1740 cm-1極性溶劑中減弱或消失 40 cm-1a甲型強(qiáng)心苷 乙型強(qiáng)心苷五元不飽和內(nèi)酯環(huán) 六元不飽和內(nèi)酯環(huán)a- 內(nèi)酯 a、-內(nèi)酯UV max 220nm ( lg 4.34 ) 295 300nm ( lg 3.93 )IR 高波數(shù)區(qū) 低波數(shù)區(qū) 40 cm-1用于甲型與乙型強(qiáng)心苷的區(qū)別 a飽和內(nèi)酯環(huán)羰基吸收峰1786 cm-1a不飽和內(nèi)酯環(huán)羰基吸收峰1756 cm-1 a-不飽和內(nèi)酯環(huán)羰基吸收峰1718 cm-1羰基共軛程度增大，第三節(jié) 甾體皂苷

10、一、概述甾體皂苷steroidal saponins是一類由螺甾烷spirostane類化合物與糖結(jié)合而成的甾體苷類，其水溶液經(jīng)振搖后多能產(chǎn)生大量肥皂水溶液樣的泡沫，故稱為甾體皂苷。甾體皂苷類在植物中分布廣泛，但在雙子葉植物中較少，主要分布在單子葉植物中 二、皂苷的分類及結(jié)構(gòu)特點(diǎn)： 皂苷 甾體皂苷 三萜皂苷 螺甾烷醇型 : 25L、25SC25-甲基 直立a鍵、為型 異螺甾烷醇型 : 25D 25R( C25-甲基 平伏e鍵、為a型)變形螺甾烷醇型 ：F環(huán)變形為呋喃甾烷五元含氧環(huán)呋甾烷型 ：F環(huán)裂環(huán),C26-OH多與葡萄糖相連成苷 五環(huán)三萜皂苷 四環(huán)三萜皂苷 -香樹(shù)脂醇型( )a -香樹(shù)脂醇型

11、 羽扇豆醇型達(dá)瑪烷型 羊毛脂甾烷型甾體皂苷的結(jié)構(gòu)特點(diǎn) ： 甾體皂苷 = 甾體皂苷元 + 糖a-羥基糖1由A 、B、C、D環(huán)甾核與E、F環(huán)以縮酮形式相連接組成的螺甾烷結(jié)構(gòu)2A/B/C/D環(huán)稠和方式：順?lè)?、反、?C25的絕對(duì)構(gòu)型依其上甲基的取向不同有兩種 C25-甲基 直立a鍵、為型 L型 (25S 25L 25F) 平伏e鍵、為a型 D型 25R 25D 25aF ) 螺甾烷型 異螺甾烷型 4取代基團(tuán)：OH 多在C3-位或其他位置羰基 多在C12-位雙鍵 多在5 911甾體皂苷不含羧基，呈中性，故稱為 中性皂苷。 異螺甾烷醇型 螺甾烷醇型 呋甾烷型 變形螺甾烷醇型 -香樹(shù)脂醇型 a-香樹(shù)脂醇型

12、 羽扇豆醇型 羊毛脂甾烷型 達(dá)瑪烷 三、甾體皂苷的理化性質(zhì)1、性狀 皂苷大多為無(wú)色或乳白色無(wú)定形粉末低聚糖苷，極性大，分子量大皂苷元極性小大多有完好結(jié)晶。皂苷多數(shù)具有苦而辛辣味，對(duì)粘膜有強(qiáng)烈刺激性，尤其鼻粘膜，易引起噴嚏 。 皂苷大多具引濕性。2、溶解性皂苷低聚糖苷，極性大易于水、熱甲醇、乙醇、含水丁醇， 難于丙酮、乙醚次生皂苷極性降低 易于醇、丙酮、乙酸乙酯皂苷元極性小 易于石油醚、乙醚、苯、氯仿，難于水皂苷的助溶作用外表活性劑作用，可以增加其他成分在水中的溶解度。3與膽甾醇的沉淀反響 皂苷與甾醇多為膽甾醇形成的分子復(fù)合物沉淀反響。生成的分子復(fù)合物沉淀用乙醚回流提取時(shí)，膽甾醇可溶于乙醚，皂苷

13、不溶。甾體皂苷與膽甾醇形成沉淀的溶度積小，因此， 可用于甾體皂苷的別離純化。4發(fā)泡性 皂苷的外表活性劑作用 ，其水溶液在劇烈振搖時(shí)，可以產(chǎn)生大量、持久的泡沫，而且不因加熱而消失。5溶血性 皂苷有使紅細(xì)胞破裂的作用。溶血能力的大小用溶血指數(shù)表示。溶血指數(shù)是指皂苷對(duì)同一動(dòng)物來(lái)源的紅細(xì)胞稀懸浮液，在同一等滲條件、緩沖條件及恒溫下造成完全溶血的最低濃度。原因在于皂苷對(duì)膽甾醇有強(qiáng)的親和力，可形成分子復(fù)合物，作用于紅細(xì)胞外表的類脂質(zhì)而破壞血細(xì)胞，表現(xiàn)強(qiáng)的溶血作用。同時(shí)，與膽甾醇的沉淀作用可用于解除皂苷的溶血作用。6與金屬鹽類的沉淀反響 三萜皂苷可被中性鹽如醋酸鉛沉淀， 甾體皂苷可被堿式鹽或堿，如堿式醋酸鉛

14、、氫氧化鋇等沉淀。四、甾體皂苷的提取與別離一 皂苷的提取別離 原料 以醇提較好，回收乙醇，加適量水稀釋 提取水溶液1正丁醇萃取法：必要時(shí)石油醚脫脂，正丁醇萃取，減壓回收正丁醇 2大孔樹(shù)脂純化法：水溶液過(guò)柱，少量水洗糖分等，稀醇洗脫，蒸干純化 粗總皂苷乙醚丙酮、乙醚-丙酮沉淀法：粗品溶于少量甲醇，滴加乙醚等，混勻，皂苷及可析出，反復(fù)幾次，可提高皂苷的純度 膽甾醇沉淀法：主要用于甾體皂苷的別離純化 精制 較純的皂苷分配原理為佳皂苷極性大硅膠分配柱色譜：氯仿-甲醇-水等梯度洗脫或水飽和正丁醇洗脫制備薄層色譜別離：反相色譜別離：反相鍵合相硅膠RP18、RP-8、RP-2, 甲醇-水、乙氫 - 水 Se

15、phadex LH-20：甲醇洗脫液滴逆流色譜法：難別離皂苷，制備成衍生物乙酰化或甲酯，硅膠柱色譜別離鉛鹽沉淀法：中性和酸性皂苷的別離別離 皂苷單體實(shí)際中，需要多種方法配合應(yīng)用 二皂苷元的提取、別離 方法1. 原料預(yù)發(fā)酵 水，36保溫2448小時(shí) 藥渣 酸水解 3%硫酸加熱水解36小時(shí)，過(guò)濾，水 洗，枯燥 藥渣 提取 石油醚、汽油或甲苯連續(xù)回流46小時(shí) 石油醚提取液回收 適量回收，放置析晶，抽濾 皂苷元粗品 重結(jié)晶 乙醇或丙酮處理，活性炭脫色 皂苷元精品 方法2. 原料 提取 按上述提取皂苷工藝進(jìn)行 皂苷 水解 常規(guī)酸水解 水解液 萃取 苯、氯仿等有機(jī)溶劑 萃取液 苯、氯仿回收 皂苷元皂苷元的

16、別離： 1 吉拉爾試劑法：羰基與非羰基皂苷元的別離2 柱色譜別離法 吸附原理 硅膠、氧化鋁 苯-氯仿、苯-甲醇、氯仿-甲醇不同比例洗脫 注：甾體皂苷- 主要作為合成激素等的原料，故以提取苷元較為實(shí)用。三萜皂苷 為許多中藥的有效活性部位，故以提取皂苷為主。 五、甾體皂苷的檢識(shí)1. 皂苷的化學(xué)檢識(shí) 顏色反響 試劑類型 鑒別特點(diǎn) 鑒別意義醋酐-濃硫酸反響 甾體皂苷 黃紅紫藍(lán) 三萜皂苷 最后顯綠色 用于兩類皂苷的區(qū)別 五氯化銻反響 6070加熱藍(lán)、灰藍(lán)、灰紫色 可在濾紙上進(jìn)行 三氯醋酸反響 甾體皂苷 加熱60顯色三萜皂苷 加熱100 顯色 可在濾紙上進(jìn)行用于兩類皂苷的區(qū)別 氯仿濃硫酸反響 硫酸層-紅或

17、藍(lán)色，氯仿層-綠色熒光 鹽酸-對(duì)二甲氨基苯甲醛 Ehrlich試劑，簡(jiǎn)稱 E試劑 螺甾烷類 不顯色 呋甾烷類 顯紅色 茴香醛-硫酸 (Anisaldehyde, 簡(jiǎn)稱A試劑 螺甾烷類 顯黃色 呋甾烷類 顯黃色 F環(huán)裂環(huán) 可用于兩類皂苷的區(qū)別 2色譜檢識(shí) 甾體皂苷的色譜檢識(shí)可采用吸附薄層色譜和分配薄層色譜。常用硅膠作吸附劑或支持劑，用中性溶劑系統(tǒng)展開(kāi)。親水性強(qiáng)的皂苷，用分配色譜效果較好。假設(shè)采用吸附薄層色譜，常用的展開(kāi)劑有氯仿-甲醇-水65：35：10，下層、正丁醇-醋酸-水4：1：5，上層等；親脂性皂苷和皂苷元，用苯-甲醇、氯仿-甲醇、氯仿-苯等。薄層色譜常用的顯色劑有三氯醋酸、10濃硫酸乙醇

18、液、磷鉬酸和五氯化銻等，噴霧后加熱，不同的皂苷和皂苷元顯不同的顏色。六、甾體皂苷的結(jié)構(gòu)研究1、紫外特征UV 飽和的甾體皂苷元 紫外區(qū)無(wú)吸收 孤立雙鍵 205225nm900 羰基 285nm500 a、- 不飽和酮基 240nm11000飽和的 甾體皂苷元與 共軛雙鍵 235nm 濃硫酸 40，1hr 220 600nm出現(xiàn)最大吸收 峰max 依吸收峰的位置max及吸收系數(shù)與標(biāo)準(zhǔn)圖譜相對(duì)照，即可用于不同皂苷元的鑒別 2紅外光譜IR 甾體皂苷的螺縮酮結(jié)構(gòu)在紅外光譜的指紋區(qū)表現(xiàn)特征性的四個(gè)吸收峰：980 cm-1A 920cm-1B 900cm-1C 860cm-1D 25S B C A最強(qiáng) 25

19、R B 40-K&G#CXzTvPrhneka:630-K&G#CWyTvPrhnda:63N)K&G#CWySvPrhnd9;63N)J%G#CWySuOrhnd9;52=M(I$EYBVxRtjpflc8.40-K*H!DXzTvQsioeka:63N)J%F#CWySuOqgnd9;51+M(I$EYAUxRtjpflb8.40-K&H!DXzTvPrioeka:640-K&G#DXzTvPrhneka:630-K&G#CWzTvPrhnda:63N-K&G#CWySvPrhnd9:63N)J&G#CWySuOrhnd9;53N)J%F#CWySuOqhnd9;51=M(I$EYAUxR

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