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1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上專心-專注-專業(yè)專心-專注-專業(yè)精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上專心-專注-專業(yè)離心機1.離心機工作原理: 離心是利用旋轉(zhuǎn)運動的離心力以及物質(zhì)的沉降系數(shù)或浮力密度的差異進行分離。懸浮液在高速旋轉(zhuǎn)下,由于巨大的離心力作用,使懸浮的微小顆粒(細胞器、生物大分子的沉淀等)以一定的速度沉降,從而使溶液得以分離,顆粒的沉降速度取決于離心機的轉(zhuǎn)速、顆粒的質(zhì)量、大小和密度。2.相對離心力和沉降速度:相對離心力:是指在離心場中,作用于顆粒的離心力相當于地球重力的倍數(shù),單位是重力加速度“g”。沉降速度:在強大離心力作用下,單位時間內(nèi)物質(zhì)運動的距離。3常用的離心方法(

2、1)差速離心法(又稱分步離心法)在同一離心條件下,采用不同的離心速度和離心時間,使沉降速度不同的顆粒分步離心的方法。差速離心主要用于分離大小和密度差異較大的顆粒。差速離心法的優(yōu)點是:操作簡單,離心后用傾倒法即可將上清液與沉淀分開,并可使用容量較大的角式轉(zhuǎn)子;分離時間短、重復性高;樣品處理量大。缺點是:分辨率有限、分離效果差,不能一次得到純顆粒;壁效應嚴重等。(2)密度梯度離心法(又稱區(qū)帶離心法)分為速率區(qū)帶離心法和等密度區(qū)帶離心法。優(yōu)點:具有很好的分辨率,分離效果好,可一次獲得較純顆粒;適用范圍廣并可防止已形成區(qū)帶由于對流而引起混合。缺點是:離心時間較長;需要制備梯度液;操作嚴格,不宜掌握。離

3、心機的分類與結構(1)低速離心機10000r以內(nèi),RCF15000g以內(nèi),它主要用作血漿、血清的分離及腦脊液、胸腹水、尿液等有形成份的分離;高速離心機20000-25000r以內(nèi),RCF89000g以內(nèi),它主要用于臨床實驗室分子生物學中的DNA、RNA的分離和基礎實驗室對各種生物細胞、無機物溶液、懸浮液及膠體溶液的分離、濃縮、提純樣品等;超速離心機50000-80000r以內(nèi),RCFg以內(nèi):制備型超速離心機主要用于生物大分子、細胞器和病毒等的分離純化,能使亞細胞器分級分離,并可用于測定蛋白質(zhì)及核酸的分子量;(2)離心機的結構:離心機的結構由轉(zhuǎn)動裝置、速度控制系統(tǒng)、定時器、離心套管、溫度控制系統(tǒng)

4、、真空系統(tǒng)等,高速和超速離心機一定有制冷系統(tǒng)。(3)離心機的主要技術參數(shù)及性能指標:主要參數(shù)包括:最大轉(zhuǎn)速;最大離心力;最大容量等。離心機轉(zhuǎn)頭的常用標記及轉(zhuǎn)頭參數(shù)。轉(zhuǎn)頭參數(shù)有,Rmax、Rmin、RCFmax、RCFmin、RPMmax、等。鞏固與練習一、選擇題1、應用離心沉降進行物質(zhì)的分析和分離的技術稱為(C)A、向心現(xiàn)象B、離心現(xiàn)象C、離心技術D、向心技術2、在強大離心力作用下,單位時間內(nèi)物質(zhì)運動的距離稱為(C)A、沉降運動B、重力沉降C、沉降速度D、離心技術3、下列屬于低速離心機部件的是(C)A、真空系統(tǒng)B、冷凝器C、離心轉(zhuǎn)盤D、水冷卻系統(tǒng)4、單位離心力場下的沉降速度是指(C)A、向心速

5、度B、離心速度C、沉降系數(shù)D、上浮速度5、沉降系數(shù)與樣品顆粒的質(zhì)量或密度的關系,下列敘述中正確的是(A)A、質(zhì)量和密度越大,沉降系數(shù)越大B、質(zhì)量越小,沉降系數(shù)越大C、質(zhì)量或密度與沉降系數(shù)無關D、密度越大,沉降系數(shù)越小6、差速離心法和速率區(qū)帶離心法進行分離時,主要的根據(jù)是不同樣品組份的(C)A、密度B、重力C、沉降系數(shù)D、體積7、根據(jù)樣品組份的密度差別進行分離純化的分離方法是(B)A、差速離心法B、密度梯度分析離心法C、速率區(qū)帶離心法D、等密度區(qū)帶離心法8、表示從轉(zhuǎn)軸中心至試管最內(nèi)緣或試管頂?shù)木嚯x的轉(zhuǎn)頭參數(shù)是(B)A、RPMmaxB、RmaxC、RminD、RCFmax9、利用不同的粒子在離心場

6、中沉降的差別,在同一離心條件下,通過不斷增加相對離心力,使一個非均勻混合液內(nèi)大小、形狀不同的粒子分布沉淀的離心方法是(A )A、差速離心法B、速率區(qū)帶離心法C、等密度區(qū)帶離心法D、高速離心法10、下列轉(zhuǎn)頭標識代表固定角轉(zhuǎn)頭的是(A )A、FAB、VC、SWD、CF11、低速離心機可達到的最大轉(zhuǎn)速是(A )A、10000B、8000C、6000D、1200012、高速離心機由于運轉(zhuǎn)速度高,一般都帶有(C)A、自動控制裝置B、平衡控制裝置C、低溫控制裝置D、室溫控制裝置二、簡答題1離心機的工作原理是什么?2差速離心法的優(yōu)、缺點是什么?3低速離心機、高速離心機、超速離心機的應用范圍是什么?生物安全柜

7、一選擇題1、生物安全柜根據(jù)生物安全防護水平的差異,分為( C )A. 1級 B. 2級 C. 3級 D. 4級下列有關1級生物安全柜功能特點的敘述中,正確的是(B)用于保護操作人員合樣品的安全,而不保護環(huán)境安全用于保護操作人員和環(huán)境安全,而不保護樣品安全用于保護操作人員安全,而不保護樣品和環(huán)境安全用于保護樣品和環(huán)境安全,而不保護操作人員安全生物安全柜內(nèi)保持負壓狀態(tài)的主要目的是(B)保護試驗樣品 B. 保護工作人員C. 保護環(huán)境 D. 保護試驗安全和環(huán)境下列有關級生物安全柜性能特點的敘述中,不正確的是(D)為臨床生物防護中應用最普遍的一類生物安全柜可同時保護操作人員、處理樣品安全和環(huán)境安全進入和

8、排出安全柜的氣體均須經(jīng)HEPA過濾器過濾空氣的流動為單向、非循環(huán)式下列有關生物安全柜的實驗操作中,不正確的是(D)手臂緩慢移動,避免影響正常的氣流盡量避免江離心機、漩渦振蕩器安裝在柜內(nèi)柜內(nèi)盡量不要使用明火處理不同標本時,因柜內(nèi)有垂直潔凈氣流,故不用擔心標本之間相互污染二簡答題1. 生物安全柜的工作原理是什么?答:生物安全柜是防止操作處理過程中某些含有危險性或未知性生物微粒發(fā)生氣溶膠散逸的箱形空氣凈化負壓安全裝置。其工作原理主要是將柜內(nèi)空氣向外抽吸,使柜內(nèi)保持負壓狀態(tài),通過垂直氣流來保護工作人員;外界空氣經(jīng)高效空氣過濾器過濾后進入安全柜內(nèi),以避免處理樣品被污染;柜內(nèi)的空氣也需經(jīng)過HEPA過濾器過

9、濾后再排放到大氣中,以保護環(huán)境。臨床分析化學儀器1.光譜分析技術的基礎理論吸收光譜是由于物質(zhì)對光的選擇性吸收產(chǎn)生的,物質(zhì)的吸收光譜取決于物質(zhì)的結構,包括分子吸收光譜和原子吸收光譜。分子吸收光譜包括電子、振動和轉(zhuǎn)動這三種光譜。利用被測定組分中的分子所產(chǎn)生的吸收光譜進行測定的分析方法,即分子吸收法,包括可見與紫外分光光度法、紅外光譜法;利用被測定組分中的原子吸收光譜進行測定的分析方法,即原子吸收法。原子吸收光譜通常是線狀光譜,只包括外層電子躍遷吸收的能量,所以原子吸收光譜儀器采用的是銳線光源。發(fā)射光譜是物質(zhì)的分子、原子或離子接受能量輻射躍遷到激發(fā)態(tài),由激發(fā)態(tài)返回基態(tài)時以輻射的方式釋放能量而產(chǎn)生的光

10、譜。如熒光光譜儀。2.紫外-可見分光光度計2.1紫外-可見分光光度計的基本結構紫外-可見分光光度計的基本結構由光源、單色器、樣品池、檢測器和放大顯示系統(tǒng)等五部分組成。光源是提供入射光的裝置,包括熱輻射燈(鎢燈、鹵鎢燈等),氣體放電燈(氫燈、氘燈及氙燈等)多種。單色器是將來自光源的復合光分解為單色光并分離出所需波段光束的裝置,其性能直接影響射出光的純度,從而影響測定的靈敏度、選擇性及校正曲線的線性范圍。吸收池是用來盛放被測溶液的器件,同時也決定著透光液層厚度,可用玻璃、石英。檢測器是把光信號轉(zhuǎn)換為電信號的裝置,常用的有光電管、光電倍增管、光電二極管陣列、等。信號顯示系統(tǒng)是把放大的信號以適當?shù)姆绞?/p>

11、顯示或記錄下來的裝置。3熒光光譜儀3.1熒光發(fā)生的機理分子吸收了照射光的高能量后,處于基態(tài)最低能級的分子,到達激發(fā)態(tài),到達激發(fā)態(tài)的各個振動能級的分子,和周圍的分子碰撞,并把部分能量以熱能的形式傳給周圍的分子,自己降落到單激發(fā)態(tài)的最低振動能級。然后,由此最低振動能級向基態(tài)的各個振動能級躍遷,同時以發(fā)光的形式釋放出其能量。簡單的說,物質(zhì)經(jīng)高能量射線激發(fā)后,所發(fā)出的比原激發(fā)光波較長的可見光稱為熒光。3.2激發(fā)光譜和熒光光譜任何發(fā)射熒光的物質(zhì)都具有激發(fā)光譜和熒光光譜兩個特征光譜,它們是熒光分析中定性和定量的基礎。3.3熒光光譜儀的工作原理和主要結構熒光分析法和紫外、原子吸收分析方法有本質(zhì)的不同。它所測

12、量的是待測物質(zhì)所發(fā)射的熒光強弱,而不是物質(zhì)對光譜的吸收強弱,屬于發(fā)射光譜分析。熒光分光光度計的結構包括五個基本部分:激光光源:用來激發(fā)樣品中熒光分子產(chǎn)生熒光。常用汞燈、氙燈等單色器:用來分離出所需要的單色光。儀器中具有兩個單色器,一是激發(fā)單色器,用于選擇激發(fā)光波長;二是發(fā)射單色器,用于選擇發(fā)射到檢測器上的熒光波長。樣品池:放置測試樣品,用石英做成。檢測器:作用是接受光信號,并將其轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘枴?原子吸收光譜儀4.1原子吸收光譜儀基本工作原理是測定氣態(tài)的自由原子對某種特定光譜的吸收。其結構原理與普通的分光光度計是相似的,只是用銳線光源代替了連續(xù)光源,用原子化器代替吸收池??招年帢O燈發(fā)出相應待測元

13、素特征波長的射線,它穿過火焰,把試樣的溶液以細粒子流的形式噴射到火焰上,部分射線被吸收。這一部分正比于試樣的濃度,測量吸收量將其與標準溶液進行對比,從而確定濃度。4.2原子吸收光譜儀基本結構由光源、原子化器、分光系統(tǒng)及檢測系統(tǒng)四個主要部件組成。光源的作用是發(fā)射被測元素的特征共振輻射。應用較多的有空心陰極燈。原子化器作用是提供能量將液態(tài)試樣中的待測元素干燥蒸發(fā)使之轉(zhuǎn)變成原子態(tài)的蒸氣。常用的有火焰原子化器和石墨爐原子化器兩種。分光系統(tǒng)作用是將所需要的共振吸收線分離出來。分光系統(tǒng)的關鍵部件是色散元件,可以是棱鏡或衍射光柵。檢測系統(tǒng)是將接收到的光信號轉(zhuǎn)變成電信號,然后再經(jīng)同步檢波放大器放大,同時把接收

14、到的非被測信號濾掉。練習與鞏固一、選擇題1紫外-可見分光光度法是基于被測物質(zhì)對(D)A光的發(fā)射 B 光的衍射 C 光的散射 D 光的吸收2.輻射能作用于粒子(原子、分子或離子)后,粒子選擇性地吸收某些頻率的輻射能,并從低能態(tài)(基態(tài))躍遷至高能態(tài)(激發(fā)態(tài)),這種現(xiàn)象稱為(C)A.折射B.發(fā)射C.吸收D.散射3.棱鏡或光柵可作為(B)A.濾光元件B.聚焦元件C.分光元件D感光元件4.原子吸收分光光度計的主要部件有光源、單色器、檢測器和(C)A.電感耦合等離子體B.空心陰極燈C.原子化器D.輻射源5下述中不是石墨爐原子化器特點的是(C)A電極插入樣品觸點時好時壞B重復性差C原子化效率較低D設備復雜下

15、述屬于發(fā)射光譜的是(D)A紫外吸收光譜B原子吸收光譜C紅外光譜D熒光光譜7在原子吸收分析法中,被測定元素的靈敏度、準確度在很大程度上取決(C)A空心陰極燈B火焰C原子化系統(tǒng)D分光系統(tǒng)8分光光度計出現(xiàn)不能調(diào)零故障時,可能的原因包括(A)A光門不能完全關閉B比色器架沒落位C光能量不夠D光源損壞二、簡答題1簡述光吸收定律的物理意義及使用范圍。2紫外-可見分光光度計的基本結構及各部分功能是什么?3簡述原子吸收光譜儀的主要結構、性能及特點。4簡述熒光光譜儀的主要結構及特點。自動生化分析相關儀器1自動生化分析儀根據(jù)儀器反應裝置結構不同,可分為連續(xù)流動式、離心式、分立式和干化學式;根據(jù)自動化程度不同,可分為

16、全自動化和半自動化。分立式自動生化分析儀是目前國內(nèi)外應用最多的一類自動生化分析儀,工作原理與手工操作相似,按手工操作的方式編排程序,用加樣探針將樣品加入各自的反應杯中,試劑探針按一定時間自動定量加入試劑,經(jīng)攪拌器充分混勻后,在一定條件下反應。反應杯同時作為比色杯進行比色測定。各環(huán)節(jié)用傳送帶連接,按順序依次操作,故稱為“順序式”分析。2.自動生化分析儀的重要的結構單元樣品處理系統(tǒng)(1)樣品架:有圓盤狀和傳送條帶狀等類型,用以放置樣品杯或原始樣品管。(2)試劑倉:用來放置實驗試劑,一般都有冷藏裝置,可同時放置幾十種試劑。(3)樣品和試劑取樣單元:由機械臂、樣品針或試劑針、吸量器、步進馬達等組成。機

17、械臂根據(jù)計算機的指令攜帶樣品針或試劑針移動至指定位置,由吸量器準確吸量,轉(zhuǎn)移至反應杯中。(4)攪拌器:使反應液和樣品充分混勻,由電機和攪拌棒組成。檢測系統(tǒng)(1)光源:大多采用鹵素燈,工作波長為325800nm,少數(shù)采用氙燈,工作波長為285750nm。(2)分光裝置:分光元件一般采用干涉濾光片或光柵。干涉濾光片價格便宜,使用方便,但易受潮霉變。光柵分光有前分光和后分光兩種,目前自動生化分析儀多采用后分光,即光源光線直接透過樣品,通過光柵,再進行吸光度的檢測。使用后分光技術,可以在同一體系中測定多種成分。(3)比色杯:通常采用石英或者優(yōu)質(zhì)塑料。儀器的檢測速度與比色杯的數(shù)量也有關,數(shù)量更多,速度更

18、快。光徑一般為0.5cm1cm,小孔徑比色杯更節(jié)省試劑,一般都校正光徑到1cm。(4)恒溫裝置:通過溫度控制系統(tǒng)保證反應在恒溫環(huán)境下進行,反應溫度通常為25、30、37。(5)清洗裝置:一般包括吸液針、吐液針和擦拭塊。計算機系統(tǒng)具有樣品識別、自動吸加樣品和試劑、混勻、恒溫調(diào)控、結果計算和打印、數(shù)據(jù)管理等功能。3自動生化分析儀的參數(shù)設置與操作(1)波長的選擇:當測定體系中只有一種組分或混合溶液中待測組分的吸收峰與其他共存物質(zhì)的吸收峰無重疊時,可用單波長檢測。一般情況下自動生化分析儀常用雙波長或多波長。(2)溫度的選擇:自動生化分析儀通常設有25、30、37三種溫度。(3)分析方法的選擇:主要有終

19、點分析法、連續(xù)監(jiān)測法、比濁測定法等。(4)分析時間的選擇:一點終點法的分析時間應設在待測物質(zhì)反應將完成時,過早會由于反應未達到終點而影響結果的準確性,過遲易受其他反應物質(zhì)干擾。二點終點法應選擇合適的第一試劑和第二試劑加入時間,以消除標本空白和內(nèi)源性物質(zhì)干擾。連續(xù)監(jiān)測法的分析時間選擇在零級反應期,以保證檢測結果的準確性。(5)線性范圍的選擇:主要是設定吸光度的最大值和最小值。(6)校正方法:自動生化分析儀有多種校正方法,常用的有一點校正、兩點校正、多點校正等。練習與鞏固一、選擇題1自動生化儀比色杯的材料多用(D)A.普通玻璃B.隔熱玻璃C.石英和玻璃D.石英和優(yōu)質(zhì)塑料2大多數(shù)生化分析儀的校正后光

20、徑是(B)A. 0.5cmB. 1 cmC. 1.5cmD. 2 cm3.為消除內(nèi)源性干擾自動生化分析儀利用下列哪種方法:(C)A.采用雙試劑B.采用單試劑C.采用雙波長D.采用單波長4.鹵素燈可以提供的光源波長(A)A. 325800nmB. 400600nmC. 200400nmD. 400700nm5.(A)自動生化分析儀的樣品和試劑在各自的試管中反應。A.分立式B.離心式C.干化學式D.連續(xù)流動式6.主波長一般選擇待測組分的(D)波長。A.較大B.最小C.峰谷處D.最大7.自動生化儀利用物質(zhì)對光的(C),一般采用()形式。A.吸收前分光B.發(fā)射后分光C.吸收后分光D.發(fā)射前分光二、填空

21、題1自動生化分析儀按照反應裝置分為(分立式)、(干化學式)、(管式)和(離心式)四類。2自動生化分析儀的分析方法(終點分析法)、(連續(xù)檢測法)和(比濁測定法)。3.自動生化儀通常設有(25)、(30)和(37度)三種溫度。4.自動生化儀中的校準品是為了校準(系統(tǒng))誤差,質(zhì)控品是為了控制(隨機)誤差。5.儀器的管理系統(tǒng)一般選用5%的(次氯酸鈉)溶液清洗,蠕動泵(6)月更換一次。三、簡答題1.何為后分光光路系統(tǒng),有何特點?2.自動生化分析儀的工作原理和基本結構?免疫分析相關儀器1酶免疫分析儀 酶免疫分析是目前臨床應用最多的。免疫分析技術,可分為非均相(或異相)酶免疫測定和均相酶免疫測定兩種方法。均

22、相酶免疫分析法測定對象是激素、藥物等小分子抗原或者是半抗原。非均相酶免疫分析法與均相酶免疫分析法最大的區(qū)別是前者需要將游離的和結合的酶標記物分離。酶免疫分析儀基本工作原理就是分光光度法,在光電比色計或分光光度計的基礎上根據(jù)ELISA技術的特點而設計。與普通光電比色計的不同之處在于:比色液的容器不是比色皿,而是用塑料微孔板;酶標儀以垂直光束通過微孔板中的待測液;酶標儀通常使用光密度OD來表示吸光度。現(xiàn)在大部分的酶標儀還加上了判讀系統(tǒng)和軟件操作分析系統(tǒng)等。酶免疫分析儀大多采用96孔的微孔板。酶免疫分析儀維護的重點是在光學部分,防止濾光片霉變。2.發(fā)光免疫分析儀全自動化學發(fā)光免疫分析系統(tǒng)采用化學發(fā)光

23、技術和磁性微粒子分離技術相結合的免疫分析系統(tǒng)。小分子抗原物質(zhì)測定采用的是競爭法,而大分子抗原物質(zhì)測定采用的是夾心法。全自動微粒子化學發(fā)光免疫分析系統(tǒng)采用磁性微粒作為固相載體,以堿性磷酸酶作為發(fā)光劑,固相載體的應用擴大了測定的范圍。全自動電化學發(fā)光免疫分析儀發(fā)生在電極的表面,應用了免疫學、鏈酶親合素生物包被技術及電化學發(fā)光標記技術。3免疫比濁分析儀免疫比濁法根據(jù)檢測原理的不同又分為透射比濁法和散射比濁法。前者是在180角測定透射光的強度,后者是在5-96方向上(折射)測定散射光強度免疫透射比濁測定原理:抗原抗體在緩沖液中快速形成抗原抗體復合物,使反應液出現(xiàn)濁度。當反應液中保持抗體過剩時,形成的復

24、合物隨抗原增加而增加,反應液的濁度亦隨之增加。速率散射比濁法原理:抗體過量的前提下,抗原抗體在緩沖液中快速形成抗原抗體復合物使反應液出現(xiàn)濁度。在抗原與抗體反應的最高峰測定其復合物形成的量,信號的強度與抗原濃度成正比。4.時間分辨熒光免疫分析儀基本原理:用鑭系三價稀土離子及其螯合物(如Eu3+螯合物)作為示蹤物標記抗原、抗體、核酸探針等物質(zhì);當免疫反應發(fā)生后,將結合部分和游離的部分分離,根據(jù)稀土離子螯合物的熒光光譜的特點用時間分辨熒光分析儀延緩測量時間,等到背景熒光降低到零以后再測定。排除標本中非特異性熒光的干擾,所得信號完全是稀土元素螯合物發(fā)射的特異熒光。根據(jù)熒光強度判斷反應體系中分析物的濃度

25、,達到定量分析的目的。5放射免疫分析以放射性核素作為標記物。最理想且臨床最常用的放射性核素是125 I練習與鞏固一、選擇題1酶免疫分析技術用于樣品中抗原或抗體的定量測定是基于(C)A酶標記物參與免疫反應B固相化技術的應用,使結合和游離的酶標記物能有效地分離C含酶標記物的免疫復合物中酶可催化底物顯色,其顏色深淺與待測物含量相關D酶催化免疫反應,復合物中酶的活性與樣品測值呈正比2均相酶免疫分析法的測定對象主要是(A)A小分子抗原或半抗原B不完全抗體C免疫復合物D補體3微孔板固相酶免疫測定儀器(酶標儀)的固相支持是(D)A玻璃試管B磁性小珠C磁微粒DPVC微孔板4電化學發(fā)光免疫分析中,電化學反應進行

26、在(C)A液相中B固相中C電極表面上D氣相中5速率散射比濁法之所以能比傳統(tǒng)的沉淀反應試驗大大地縮短時間,主要是因為(A)A在抗原抗體反應的第一階段判定結果B不需復雜的儀器設備C使用低濃度的瓊脂或瓊脂糖D反應的敏感度高6透射免疫比濁法檢測的原理是(D)A測定光線通過反應混合液時,被其中免疫復合物反射的光的強度B測定光線通過反應混合液時,被其中免疫復合物折射的光的強度C測定光線通過反應混合液時,被其中免疫復合物吸收的光的強度D測定光線通過反應混合液時,透過的光的強度7散射免疫比濁法檢測的原理是(B)A測定光線通過反應混合液時,被其中免疫復合物反射的光的強度B測定光線通過反應混合液時,被其中免疫復合

27、物折射的光的強度C測定光線通過反應混合液時,被其中免疫復合物吸收的光的強度D測定光線通過反應混合液時,透過的光的強度8最適合于時間分辨熒光免疫測定的熒光物質(zhì)(C)A異硫氰酸熒光素B四乙基羅丹明C鑭系稀土元素(Eu 3+)D藻紅蛋白9酶免疫分析儀的維護重點是(B)A計算機B光學部分,防止濾光片霉變C傳動裝置D電倍增管二、簡答題1速率散射免疫比濁法的基本原理是什么?酶免疫分析儀測定法基本工作原理?臨床電化學分析技術相關儀器1.pH值測定常用的指示電極是pH玻璃膜電極。2.離子選擇性電極是一種用特殊敏感膜制成的,對溶液中特定離子具有選擇性響應的電極。3.電解質(zhì)分析儀多采用離子選擇性電極法,將離子選擇

28、性電極和參比電極插入被測樣品中組成電池,然后通過測量原電池電動勢進行測試分析。濕式電解質(zhì)分析儀由離子選擇性電極、參比電極、分析箱、測量電路、控制電路、驅(qū)動電機和顯示器等組成。最重要的是電極系統(tǒng),電極系統(tǒng)包括指示電極和參比電極。指示電極包括pH、Na+、K+、Li+、Cl-、Ca2+、Mg2+等離子選擇性電極。參比電極一般是銀/氯化銀電極。干式電解質(zhì)分析儀干化學測定法目前主要有兩類:反射光度法,離子選擇性電極(ISE)方法。4.血氣分析儀結構和工作原理血氣分析儀:儀器結構包括:電極系統(tǒng)、管路系統(tǒng)和電路系統(tǒng)三部分。被測血液樣品在管路系統(tǒng)的抽吸下,進入樣品室內(nèi)的測量毛細管中。毛細管的管壁上開有四個孔

29、,孔內(nèi)分別插有pH、PCO2和PO2三支測量電極和一支參比電極。pH和pH參比電極共同組成對pH值的測量系統(tǒng)。血液樣品進入樣品室的測量管后,管路系統(tǒng)停止抽吸,樣品同時被四個電極所感測。電極產(chǎn)生對應于pH、PCO2和PO2三項參數(shù)的電信號。這些電信號分別經(jīng)放大、模數(shù)轉(zhuǎn)換后送到微處理機。經(jīng)微機處理系統(tǒng)處理、運算后,再分別被送到各自的顯示單元顯示或打印機打印出測量結果。測定后的樣本被沖洗液排入廢液瓶。5.血氣分析儀電極主要包括兩大類,即離子極(主要有K+、Na+、Li+、Ca2+、Cl-、pH和PCO2)和伏安型傳感器(主要是PO2)。一般使用四支電極,分別是pH、PCO2、PO2電極和pH參比電極

30、。管路系統(tǒng)完成自動定標、自動測量、自動沖洗等,在工作過程中,該系統(tǒng)出現(xiàn)的故障最多。氣路系統(tǒng)提供PCO2和PO2兩種電極定標時所用的兩種氣體。液路系統(tǒng)提供pH值電極系統(tǒng)定標用的緩沖液,并用于測量和沖洗。血氣分析儀具有真空泵、蠕動泵兩個泵。練習和鞏固一、選擇題1.血氣分析儀的電化學傳感器中,屬于伏安型傳感器的是()A. pH玻璃電極B. PO2電極C. PCO2電極D. K電極2.電化學分析儀器所使用的電極中,現(xiàn)在常用的內(nèi)參比電極是()A.鉑電極B.銀電極C.銀-氯化銀電極D.甘汞電極3.能夠指示血液樣本中pH值大小的電極是()A.鉑電極B.玻璃電極C.銀-氯化銀電極D.甘汞電極4.離子選擇電極膜

31、電位產(chǎn)生的機理是()A.離子吸附作用B.離子交換反應C.電子交換反應D.電子置換反應5. PO2電極屬于()A.離子選擇電極B.金屬電極C.氧化還原電極D.離子交換電極6.臨床上大量使用的電解質(zhì)分析儀,測量樣本溶液中離子濃度的電極是()A.離子選擇電極B.金屬電極C.氧化還原電極D.離子交換電極7.濕式電解質(zhì)分析儀中為各種試劑流動提供動力的是()A.三通閥B.蠕動泵C.真空泵D.吸樣器8 血氣分析儀氣路系統(tǒng)提供的氣體是()A. CO2和O2B. CO2C. O2D.空氣二、簡答題1.簡述血氣分析儀的基本結構及工作原理。血液分析相關儀器1.血細胞分析儀1.1電阻抗法血細胞檢測原理:血細胞電阻值大

32、于稀釋液的電阻值;當細胞通過檢測器微孔的孔徑感受區(qū)時,在內(nèi)外電極之間恒流源電路上,電阻值瞬間增大,產(chǎn)生一個電壓脈沖信號;產(chǎn)生的脈沖信號數(shù),等于通過的細胞數(shù),脈沖信號幅度大小與細胞體積大小成正比。1.2聯(lián)合檢測型原理:主要體現(xiàn)在白細胞分類,實質(zhì)是選用較特異的方法將血液中含量較少的嗜酸、嗜堿性粒細胞檢出,發(fā)現(xiàn)異常細胞。共有特點是:均使用了鞘流技術。容量、電導、光散射檢測技術;光散射與細胞化學聯(lián)合檢測技術;多角度激光散射聯(lián)合檢測技術;電阻抗、射頻與細胞化學聯(lián)合技術。1.3網(wǎng)織紅細胞檢測原理: 依據(jù)網(wǎng)織紅細胞中殘存的嗜堿性物質(zhì)RNA,在活體狀態(tài)下與特殊的熒光染料結合,熒光強度與RNA含量成正比,用流式

33、細胞術檢測網(wǎng)織紅細胞大小和RNA含量及血紅蛋白的含量,由計算機分析得出各種參數(shù)。1.4血紅蛋白測定原理:采用光電比色原理2.血液凝固分析儀血液凝固分析儀是對血栓與出血有關成分自動檢測的臨床常規(guī)檢驗儀器。在血栓/出血實驗室中最基本的設備就是血凝儀。血凝儀檢測原理 主要檢測方法:有凝固法(生物物理法)、底物顯色法(生物化學法)、免疫學法等。血凝儀主要采用光學法,根據(jù)血液凝固過程中濁度逐漸增強,導致光強度變化。根據(jù)光學測定的原理不同,又可分為散射比濁法和透射比濁法。透射比濁法是根據(jù)血漿凝固過程中黏度逐漸增大,標本吸光度逐漸增強來確定檢測終點。散射比濁法是根據(jù)血漿凝固過程中黏度逐漸增大,標本散射光強度

34、逐漸增強來確定檢測終點。雙磁路磁珠法原理:其中一對磁路產(chǎn)生交替電磁場,另一對磁路利用測試杯中磁珠擺動對磁力線的切割產(chǎn)生電信號,檢測磁珠擺動幅度的變化,擺動幅度衰減到50%為終點。3.血液黏度計旋轉(zhuǎn)式黏度計:是以牛頓的粘滯定律為理論依據(jù),常見有筒-筒式和錐板式黏度計。轉(zhuǎn)動的力矩通過樣本傳遞到錐體;樣本越粘稠,傳入的力矩越大。信號大小與樣本黏度成正比。評價:重復性:取比容在0.400.45血樣,取后10次(測量11次)計算CV值,在高剪切率時,血液表觀黏度CV3%;在低剪切率時,血液表觀黏度CV5%。靈敏度與量程,儀器的測力傳感器應具有10mPa靈敏度才能測定1s-1的血液黏度,對于恒定剪切應力的

35、黏度計,控制范圍包括100mPa1000mPa。4.自動血沉分析儀原理:利用紅細胞下沉過程中血漿濁度的改變,采用紅外線探測或者其他光電技術定時掃描紅細胞和血漿界面位置,動態(tài)記錄血沉全過程,由計算機處理檢測結果。練習和鞏固一、選擇題1.血細胞分析儀是用來檢測(D)A.紅細胞異質(zhì)性B.白細胞異質(zhì)性C.血小板異質(zhì)性D.全血內(nèi)血細胞異質(zhì)性2.下面有關血凝儀檢測原理的敘述中,不正確的是(A)A.雙磁路雙磁珠法檢測的是光信號B.凝固法是最常用的檢測方法C.凝固法以血漿凝固達50%時作為判定的終點D.底物顯色法屬生物化學法3下述有關電阻抗血細胞檢測原理的敘述中,不正確的是(A)A.白細胞的電阻抗值最大B.小紅細胞可干擾血小板的測定C.直流電、恒流電路D.脈沖數(shù)等于細胞數(shù)4白細胞的三分群分類中,第三群細胞區(qū)中主要是(C)A.淋巴細胞B.單核細胞C.中性粒細胞D.嗜堿性粒細胞5電阻抗檢測原理中脈沖、振幅和細胞體積之間的關系是

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