羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究

1、5-羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)2009級研究生 胡茂林 0905008羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究一、概述 抑郁癥是一種常見的情感性疾病,指某種不愉快的心境和一定身體器官的功能紊亂,其程度可以從輕度的憂傷到重度的絕望、自殺企圖等;是一種常見的精神病理狀態(tài)或綜合征。羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究 發(fā)病率高、發(fā)病年齡廣泛,2003年美國的調查研究發(fā)現(xiàn)，其終生患病率為16，有重型抑郁發(fā)作史的自殺率高達15%。給人們的工作和生活造成了嚴重的影響,帶來了沉重的經(jīng)濟負擔。世界衛(wèi)生組織推測在未來10年內,抑郁癥將從疾病負擔的第4位上升到第2位。抑郁癥已成為全球關注的重要

2、精神心理疾病。羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究 名人與抑郁癥 托爾斯泰:在寫完安娜卡列尼娜后，托爾斯泰患上了嚴重的抑郁癥。疾病的折磨使他不僅放棄了個人的家庭生活，同時也放棄了文學創(chuàng)作，將精力投入到哲學與宗教的研究，并宣稱”藝術不僅是沒用的，而且是有害的”。 伍爾夫:英國女作家伍爾夫一生被精神分裂折磨，卻以她獨立特行的強者風范，開了一代意識流小說和散文的先河。她有一種常人不具備的絕妙的頭腦，是個天才的“狂人”，她感受到生命的無常，幸福的無常與人生的空虛，以至于精神崩潰，走到了離她家不遠的馬斯河投水自盡。 葉塞寧:蘇聯(lián)作家葉塞寧患有精神抑郁癥，1925年12月，他離開莫斯科，與自己的兩個

3、孩子吻別后，到了列寧格勒，并在28日凌晨割腕自殺。 黑塞:1946年獲得諾貝爾文學獎的德國作家黑塞，曾遇到特殊的心理壓力，引發(fā)了嚴重的抑郁，甚至是精神分裂。1917年前后他介入心理分析，小說荒原狼把他的孤獨、不能忍受的分裂用文字的方式表現(xiàn)出來。羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究 海明威:曾獲1954年諾貝爾文學獎的美國作家海明威，因患抑郁癥于1961年在美國開槍自殺。 川端康成:日本文學界“泰斗級”人物，亞洲第二位獲諾貝爾文學獎的作家，1972年4月16日自殺身亡。川端康成自幼失去父母，極為任性孤獨和神經(jīng)質，不愛上學。對于獲諾獎后所帶來的榮譽和涌來的慕名者，心里十分厭惡，這與幼年的心理

4、封閉有關。他對夫人發(fā)脾氣“家里并不是旅館，我也不是為客人活著的”。他對因自殺身亡的古賀春江的口頭禪極為贊賞，“再沒有比死更高的藝術了。死就是生”。羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究 徐遲:19歲時，徐遲就在上?，F(xiàn)代發(fā)表詩作，22歲出版轟動文壇的詩集二十歲人，1981年1月在人民文學發(fā)表聞名全國的哥德巴赫猜想。然而在經(jīng)歷愛妻徐松患癌癥去世、第二次婚姻破裂等一連串打擊后，他開始變得孤僻、沉默，足不出戶、閉門獨思。后來干脆實行四不政策:不讀報、不看電視、不下樓、不會客。他孤獨無助，精力衰竭，終于悄無聲息地獨自走向靈魂的天國。 柏楊:2007年12月，因丑陋的中國人一文享譽海內外的中國臺灣作家

5、柏楊，因患抑郁癥，拒絕進食，被家人送往醫(yī)院救治。 三毛:1991年1月4日凌晨，中國臺灣女作家三毛在醫(yī)院被發(fā)現(xiàn)自縊而死，生前她曾有嚴重失眠，幻聽幻覺，精神異常(歇斯底里現(xiàn)象)。羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究 張純如:以南京大屠殺一書聞名的華裔女作家張純如，被路人發(fā)現(xiàn)用手槍在美國加州洛斯蓋多自殺于汽車內時，年僅36歲。張純如生前經(jīng)診斷患有憂郁癥，曾因病而住院。從南京大屠殺到她準備寫的美國二戰(zhàn)被俘軍人受日軍虐待的歷史，都是盡顯人性惡劣、殘忍血腥的歷史，給她內心造成極大折磨。這些內容也與張純如的病因不無關聯(lián)。 海子:詩人海子也是死于抑郁癥，死的方式異常慘烈臥軌自殺。他出身貧寒，生前一無所

6、有，沉迷于詩歌的寫作到了癡迷的程度。四任女友都因貧寒先后離他而去。他的詩集是在他死后多年，由好朋友西川幫助整理出版并獲得了極大的成功，詩歌界給了他崇高的榮譽，他的才華也漸漸地被世人了解和接受。羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究 面朝大海，春暖花開作者:海子從明天起，做一個幸福的人喂馬、劈柴，周游世界從明天起，關心糧食和蔬菜我有一所房子，面朝大海，春暖花開從明天起，和每一個親人通信告訴他們我的幸福那幸福的閃電告訴我的我將告訴每一個人給每一條河每一座山取一個溫暖的名字陌生人，我也為你祝福愿你有一個燦爛的前程愿你有情人終成眷屬愿你在塵世獲得幸福我只愿面朝大海，春暖花開羥色胺2C受體基因多態(tài)性

7、與抑郁癥的關聯(lián)研究 林肯；羅斯福；丘吉爾；尼克松； 達爾文；凡高；瑪麗蓮夢露；張國榮 這些我們熟知的成功人士，卻無一不是在“抑郁癥”此迷宮中掙扎，無法解脫。羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究視頻羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究二、病因1. 海馬體積羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究2.神經(jīng)元減少及結構破壞羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究3.神經(jīng)遞質 其引發(fā)的主要原因是中樞去甲腎上腺素(noradrenaline,NA)5-羥色胺（5-HT）多巴胺（DA）這些特定的神經(jīng)遞質的水平過低及其受體功能低下。羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究 5-HT是一種單

8、胺類的神經(jīng)遞質,它廣泛參與了多種腦的功能,包括情感控制、睡眠和體溫的調節(jié)、焦慮、藥物依賴、攝食和性行為。羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究三、治療方法 抑郁癥的治療方法可分為:藥物治療、電休克治療(ECT)、跨顱砸刺激治療(TMS)、迷走神經(jīng)刺激治療(VNS)、睡眠剝奪治療、光照治療、精神外科手術治療以及心理治療等。羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究主要是藥物治療藥物治療又分為兩大類:中醫(yī)藥治療和西藥治療。中醫(yī)治療有疏肝理氣解郁、平肝降火、化痰解郁、益氣養(yǎng)血,健脾補心,交通心腎、清心活血、平肝潛陽等法。羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究西藥治療藥物很多。主要有十大類藥物

9、可供臨床選擇。1、選擇性5-羥色胺重攝取抑制劑(SSRI) 包括氟西汀、氟伏沙明、帕羅西汀、舍曲林、齊美定和曲唑酮等。這類藥目前在臨床上已經(jīng)廣泛應用。其特點是口服易吸收,與血漿蛋白結合率高,半衰期長,顯效快作用強,副作用較三環(huán)類(TCA)少。羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究2、苯基哌嗪衍生物 代表藥物有奈法唑酮,它的特點是對5-羥胺具有雙重作用,既像SSRI抑制5-羥胺的再攝取,又阻斷突觸后5-羥色胺2受體,具有抗抑郁和抗焦慮的雙重作用。羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究3、5-羥色胺、去甲腎上腺素重攝取抑制劑(NSRI) 此類藥通過阻滯去甲腎上腺素和5-羥色胺兩種遞質的再攝

10、取而發(fā)揮抗抑郁作用。無口干、低血壓、過度鎮(zhèn)靜等不良反應,起效快,對重癥抑郁癥或難活性抑郁癥有明顯療效,復發(fā)率低。代表藥物有文拉法辛,主要用于焦慮性抑郁癥,不宜與SSRI或MAOI類藥物合用,以免引起高血壓、意識障礙,甚至昏迷或死亡羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究4、選擇性去甲腎上腺素重攝取抑制劑(去甲腎上腺素RI) 代表藥物有瑞波西汀,作用與氟西汀相似,據(jù)稱其比氟西汀能更有效的治療多種類型的抑郁癥并有良好的耐受性和很少的不良反應,可用于抑郁癥的長期治療羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究5、去甲腎上腺素和特定5-羥色胺再攝取抑制劑(NaSSA) 其代表藥物為米氮平。藥理作用是拮

11、抗中樞NA能神經(jīng)元及末梢突觸前膜2受體,促進NA和5-羥色胺的釋放,對伴有睡眠障礙、焦慮或惡心的患者具有更高的選擇性,不良反應少。國內已有仿制品種。羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究6、氨基酮類 安菲他酮是惟一的上市藥,是多巴胺遞質的選擇性抑制劑,口服吸收率可達80%,血藥達峰時間為13小時,半衰期為610小時,經(jīng)腎臟排泄。適用于對其他抗抑郁藥療效不明顯或不能耐受的患者,對睡眠過度的單、雙相抑郁尤其有效羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究7、選擇性單氨氧化酶抑制劑(MAIO) 嗎氯貝安是該類藥的惟一代表,特點是在體內高度選擇性和可逆地抑制A型單胺氧化酶而起抗抑郁作用,對抑郁效果良

12、好羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究8、三環(huán)類抗抑郁藥代表藥為氯苯帕明,臨床上用于治療老年性抑郁羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究9、四環(huán)類代表藥有麥普替林米舍林諾米芬辛羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究10、作用于5-羥色胺各受體亞型的藥物對突觸后5-羥色胺受體有選擇性的激動劑。對樹突5-羥色胺白身受體有選擇性的拮抗劑。對5-羥色胺1A或5-羥色胺2A具有選擇性的拮抗劑。羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究 四、臨床現(xiàn)狀 抑郁癥,病程長,且易復發(fā),主要靠藥物來治療或控制,費用高、療效欠佳、副作用大，無法治愈。羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究五、發(fā)病機制

13、 流行病學研究提示:遺傳因子在抑郁癥發(fā)病中起重要的作用。 近年來,隨著分子生物學技術的廣泛應用,人們迫切希望能從基因水平找到抑郁癥發(fā)生的原因,以期對抑郁癥做出早期診斷。近年來國內外抑郁癥相關基因的研究進行比較多,包括抑郁癥與染色體某些位點的連鎖分析,與一些候選基因如5-羥色胺受體基因、多巴胺受體基因、單胺氧化酶基因等的關聯(lián)分析等。羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究六、連鎖分析與關聯(lián)分析 連鎖分析是用微衛(wèi)星DNA標記對家系定型,根據(jù)家系遺傳信息中基因間的重組率計算出兩基因之間的染色體圖距,再根據(jù)疾病有無合適的遺傳模式,可分別進行參數(shù)分析與非參數(shù)分析。即通過家系調查來估計兩個基因的重組率,

14、從而進行基因定位的方法。 關聯(lián)分析則是在不相關的人群中尋找與性狀(疾病或藥物反應)相關的染色體區(qū)域。如果某一等位基因能增加患某種疾病(如抑郁癥)的風險,那么患者中含有這種等位基因的頻率應高于正常者,即這一等位基因與該疾病存在著關聯(lián)。 連鎖分析由于受到遺傳模式和其他因素的影響,對復雜的多基因遺傳疾病的研究往往很困難,而關聯(lián)分析可彌補其缺陷,成為行之有效的方法。對于多基因遺傳疾病,主基因效應可由連鎖分析測知,而輔基因效應則更多的采用關聯(lián)分析。羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究 七、染色體位點與抑郁癥抑郁癥相關基因在1號染色體上的分布最多,其次是2號、6號、11號。在14號、21號、22號以

15、及人Y染色體上尚未見抑郁癥相關基因。從染色體區(qū)域分布上可知, 1p12含有抑郁癥相關基因最多,含有Ta2、Ta3、Ta5、Ta6、Ta7、Ta8、Ta9、Ta10、Ta12、Ta13、Ta14、Ta15、TRAR4基因。羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究 八、候選基因與抑郁癥的關聯(lián)研究1、 5-羥色胺(5-HT)受體基因與抑郁癥的關聯(lián)研究 5-HT與情感性精神障礙的關聯(lián)已較早認識到,它能直接或間接調整人的心境。5-羥色胺(5-HT)系統(tǒng)參與情緒、心境、應激等方面的調節(jié),其功能的改變和神經(jīng)傳遞異常與抑郁癥

16、等精神性疾病發(fā)病相關。突觸間隙5-HT水平改變及5-HT受體亞型功能的失調則有可能參與抑郁癥的發(fā)病。羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究1、 5-羥色胺(5-HT)受體基因 （1） 5 -羥色胺1A(5-HT1A)受體基因 （2） 5-羥色胺2A(5-HT2A)受體基因 （3） 5-羥色胺轉運體(5-HTT)基因 （4） 色氨酸羥化酶(TPH1)基因羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究 2、 多巴胺受體基因 3、 單胺氧化酶(MAO)基因 4、 DXS7基因座與抑郁癥的關聯(lián)研究 5、 兒茶酚胺氧位甲基轉移酶(COMT)基因 6、 腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)基因 7、 多巴胺羥化

17、酶(DH)基因 8、 信號傳導(G3 )基因羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究九、我的研究設想5-羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究關鍵詞： 抑郁癥5-HT2C受體基因多態(tài)性羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究摘要 目的: 探討5-羥色胺2C(5-HT2C)受體基因-759C /T多態(tài)性與抑郁癥發(fā)病機制之間的關系。 方法:30例抑郁癥患者作為研究組, 30名正常者作為對照組,應用聚合酶鏈式反應(PCR)擴增技術及限制性片段長度多態(tài)性(RFLP)分別測定所有受試者的5-HT2C受體基因的基因型和等位基因,由于5-HT2C基因位于X性染色

18、體,故對女性個體行基因鑒定,對男性患者只行半合子型鑒定。羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究摘要 預期結果:抑郁癥組男性半合子型T、C分布頻率,與對照組比較差異有/無顯著性(2,P值)。抑郁癥組女性基因型TT、CC分布頻率與對照組比較差異有/無顯著性(2,P值)。抑郁癥組T、C等位基因分布頻率與對照組比較差異有/無顯著性（2,P值)。 預測結論: 5-HT2C受體基因啟動子區(qū)-759C/T單核苷酸置換多態(tài)性與女性抑郁癥的發(fā)病機制相關性如何,與男性患者的相關性如何。以及男性、女性之間有何不同。羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究十、結語 目前

19、國內外對抑郁癥及其相關基因組的研究尚在探索階段。由于技術手段的局限性,單個特異性基因作為抑郁癥的危險因素的假說尚不能完全被排除,但是構成抑郁癥易感性的更大可能是很多無特異性的基因共同作用的結果。大量的研究支持抑郁癥是多基因遺傳,即這種遺傳是由于許多基因的積累作用造成的,沒有顯性、隱性基因那種明顯的傳遞規(guī)律。抑郁癥的發(fā)生是遺傳易感性和環(huán)境因素共同作用的結果。羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究十一、展望 新近出現(xiàn)的分子生物學的先進技術-基因芯片技術,為我們研究抑郁癥的遺傳基礎,探索該病的病因和致病機制帶來了希望的曙光。這將克服目前僅就抑郁癥與一個或幾個候選基因之間連鎖、關聯(lián)研究的局限,而是

20、同時進行成千上萬個基因與本病之間關聯(lián)的探索,極大地增加了發(fā)現(xiàn)致病基因的幾率。此外, cDNA芯片可在基因的表達水平尋找問題,可能更符合抑郁癥這種多基因遺傳病的特點。相信隨著遺傳學和分子生物學技術的不斷發(fā)展,以及人們研究認識層面的不斷深入,將有望使抑郁癥患者的基因組序列得到比較詳盡的分析,從而闡明該病的發(fā)病機理,開創(chuàng)抑郁癥的生物學診斷和基因水平的治療,從而達到抗抑郁治療的高度個體化,為抑郁癥的預后提供廣闊前景。羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究路漫漫其修遠兮吾將上下而求索羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究謝謝羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究備注： 一、Stata 是一套

21、提供其使用者數(shù)據(jù)分析、數(shù)據(jù)管理以及繪制專業(yè)圖表的完整及整合性統(tǒng)計軟件。它提供許許多多功能，包含線性混合模型、均衡重復反復及多項式普羅比模式。羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究 二、HardyWeinberg平衡定律Hardy-Weinberg平衡條件：無限大的群體；隨機婚配；沒有突變；沒有選擇；沒有遷移；沒有遺傳漂變（小群體內基因頻率隨機波動）。結論：群體內一個位點上的基因型頻率和基因頻率將代代保持不變，處于遺傳平衡狀態(tài)。影響Hardy-Weinberg平衡的因素：突變：自然突變率： u=n x 10-6/配子/位點/代 選擇：生殖適合度（f）:為后代提供基因能力的一種量度，以正常的生

22、育力為1作比較。雜合子優(yōu)勢：在某些隱性遺傳病中，在特定的條件下雜合子可能比正常純合子個體更有利與生存而繁殖后代。 隨機遺傳漂變：小群體或隔離的人群中，基因頻率的隨機波動稱為遺傳漂變。 遷移：不同種族和不同民族的基因頻率可有差異。遷移的結果使不同人群通婚，彼此摻入外來基因，導致基因流動，可改變原來群體的基因頻率。 遺傳異質性：由于相似的病理性狀（如白化癥）可受控于若干不同的基因位點，若不加以嚴格區(qū)分，往往會使Hardy-Weinberg平衡復雜化。 奠基者效應：效應是遺傳漂變的一種形式，指由帶有親代群體中部分等位基因的少數(shù)個體重新建立新的群體，這個群體后來的數(shù)量雖然會增加，但因未與其他生物群體交

23、配繁殖，彼此之間基因的差異性甚小。這種情形一般發(fā)生于對外隔絕的海島，或較為封閉的新開辟村落等。在實際應用中，符合理想群體的情況一般是不存在的，但Hardy-Weinberg平衡還是可以應用的，這是因為：我們所調查的群體不可能大到足以顯示出這些影響因素；各種影響因素可相互抵消，如突變和選擇。羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究三、基因多態(tài)性概念多態(tài)性（polymorphism）是指在一個生物群體中，同時和經(jīng)常存在兩種或多種不連續(xù)的變異型或基因型（genotype）或等位基因（allele），亦稱遺傳多態(tài)性（genetic polymorphism）或基因多態(tài)性。從本質上來講，多態(tài)性的產(chǎn)生在

24、于基因水平上的變異，一般發(fā)生在基因序列中不編碼蛋白的區(qū)域和沒有重要調節(jié)功能的區(qū)域。對于一個體而言，基因多態(tài)性堿基順序終生不變，并按孟德爾規(guī)律世代相傳。 基因多態(tài)性分類人類基因多態(tài)性既來源于基因組中重復序列拷貝數(shù)的不同，也來源于單拷貝序列的變異。通常分為3大類： 限制性片段長度多態(tài)性（RFLP），即由于單個堿基的缺失、重復和插入所引起限制性內切酶位點的變化，而導致DNA片段長度的變化。這是一類比較普遍的多態(tài)性。DNA重復序列的多態(tài)性，特別是短串聯(lián)重復序列，如小衛(wèi)星DNA和微衛(wèi)星DNA，并主要表現(xiàn)于重復序列拷貝數(shù)的變異。小衛(wèi)星（minisatallite）DNA由1565bp的基本單位串聯(lián)而成，總

25、長通常不超過20kb，重復次數(shù)在人群中是高度變異的。這種可變數(shù)目串聯(lián)重復序列（VNTR）決定了小衛(wèi)星DNA長度的多態(tài)性。衛(wèi)星（microsatallite）DNA的基本序列只有18bp，而且通常只重復1060次。單核苷酸多態(tài)性（SNP），即散在的單個堿基的不同，包括單個堿基的缺失和插入，但更多的是單個堿基的置換，這是目前倍受關注的一類多態(tài)性。SNP通常是一種雙等位基因的（biallelic），或二態(tài)的變異。作為一種堿基的替換，SNP大多數(shù)為轉換，特別在CG序列上出現(xiàn)最為頻繁。SNP在基因組中數(shù)量巨大，分布頻密，而且其檢測易于自動化和批量化，因而被認為是新一代的遺傳標記。羥色胺2C受體基因多態(tài)性

26、與抑郁癥的關聯(lián)研究各種生物都能通過生殖產(chǎn)生子代，子代和親代之間，不論在形態(tài)構造或生理功能的特點上都很相似，這種現(xiàn)象稱為遺傳（heredity）。但是，親代和子代之間，子代的各個體之間不會完全相同，總會有所差異，這種現(xiàn)象叫變異（variation）。遺傳和變異是生命的特征。遺傳和變異的現(xiàn)象是多樣而復雜的，正因為如此，才導致生物界的多種多樣性，生物體所具有的遺傳性狀稱為表型或表現(xiàn)型（phernotype）。生物體所具有的特異基因成分稱為基因型（genotype）。表型是基因型與環(huán)境因素相互作用的結果。遺傳物質是相對穩(wěn)定的，但是又是可變的，遺傳物質的變化以及由其所引起表型的改變，稱為突變（mutat

27、ion）。遺傳物質突變包括染色體畸變和基因突變。基因突變是染色體中某一點上發(fā)生化學改變，所以又稱為點突變（pointmutation）?；蚪Y構和遺傳表型的研究是深入了解脂蛋白代謝缺陷癥的分子生物學基礎，逆向遺傳學方法（reversegeneticapproach）則使其有可能在蛋白質水平系統(tǒng)地分析結構和功能的關系。 基因多態(tài)性的生物學作用：（1）遺傳密碼的改變：如果基因多態(tài)性的堿基的取代、缺失、插入引編碼序列的核苷酸順序改變，在轉錄和翻譯合成蛋白質的過程中，有的對多肽鏈中氨基酸的排列順序產(chǎn)生影響，有的不產(chǎn)生影響?？煞譃椋哄e義突變(missense mutation)指DNA分子中堿基對的取代

28、，使得mRNA的某一密碼子發(fā)生變化，由他所編碼的氨基酸就變成另一種不同的氨基酸，使得多肽鏈中氨基酸的順序也相應地發(fā)生改變。無義突變(nonsense mutation)指由于堿基取代使原來可翻譯某種氨基酸的密碼子變成了終止密碼子。例如UAU（氨酸）顛換成UAA（終止密碼子）使多肽鏈的合成到此終止，形成一條不完整的多肽鏈，使蛋白質的生物活性和功能改變。轉換也可引起無義突變。同義突變(same sense mutation)指堿基的取代并不都是引起錯義突變和翻譯終止，也就是雖然堿基被取代了，但蛋白質水平上沒有引起變化，氨基酸沒有被取代。移碼突變 (frame-shifting mutation)指

29、在編碼序列中單個堿基、數(shù)個堿基的缺失或插入，片段的缺失或插入可使突變位點之后的三聯(lián)體密碼子閱讀框發(fā)生改變，不能編碼原來的正常蛋白質。羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究（2）對mRNA剪接的影響：如果點突變發(fā)生內含子的剪切位點，可以產(chǎn)生兩種影響：一是原有的剪接位點消失，二是產(chǎn)生新的剪切位點。無論是那一種形式，都可以導致mRNA的錯誤剪接，產(chǎn)生異常的mRNA，最終產(chǎn)生異常的表達產(chǎn)物，數(shù)個堿基的缺失、片段缺失等勻有可能造成剪接位點的缺失。（3）蛋白質肽鏈中的片段缺失：無義突變和DNA片段的缺失都可以導致肽鏈中的片段缺失，致使基因編碼的蛋白質失去原有的功能。移碼突變不僅翻譯后的肽鏈中氨基酸序列

30、發(fā)生改變，而且也導致肽鏈中的大片段缺失。（4）啟動子的突變及非轉錄區(qū)的突變：可以使基因的轉錄水平或活性的增強或降低。（5）基因多態(tài)性的基因型頻率分布：在人群中符合Hardy-Wenberg平衡。羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究基因多態(tài)性的醫(yī)學意義：人類基因多態(tài)性在闡明人體對疾病、毒物的易感性與耐受性，疾病臨床表現(xiàn)的多樣性（clinical phenotype diversity），以及對藥物治療的反應性上都起著重要的作用。臨床上早期有關基因多態(tài)性的研究是從HLA基因開始的，分析基因型在疾病發(fā)生易感性方面的作用，如HLA-B27等位基因與強直性脊椎炎發(fā)生率的密切關聯(lián)，可作為診斷的依據(jù)。

31、通過基因多態(tài)性的研究，可從基因水平揭示人類不同個體間生物活性物質的功能及效應存在著差異的本質。通過對基因多態(tài)性與疾病的易感性的聯(lián)系研究，如P53抑癌基因多態(tài)性與腫瘤發(fā)生及轉移的關系研究，可闡明人體對疾病、毒物和應激的易感性，不僅為臨床醫(yī)學也為預防醫(yī)學的發(fā)展帶來新的領域。疾病基因多態(tài)性與臨床表型多樣性的聯(lián)系已受到重視，如腫瘤等多基因病的臨床表型往往多樣化，闡明基因型（genotype ）與表型(phenotype)之間的聯(lián)系在認識疾病的發(fā)生機理、預測疾病的轉歸等方面也有重要的作用。藥物代謝基因多態(tài)性可以影響藥物的代謝過程及清除率，從而影響治療效果。致病基因的多態(tài)性使同一疾病不同個體其體內生物活性

32、物質的功能及效應出現(xiàn)差異，導致治療反應性上懸殊，按照基因多態(tài)性的特點用藥，將會使臨床治療符合個體化的要求。在疾病基因多態(tài)性研究的引導下，臨床醫(yī)生將有可能預斷不同的個體在同樣的致病條件下會出現(xiàn)什么樣的病理反應和臨床表現(xiàn)，即臨床表型。如高血壓的治療將根據(jù)基因多態(tài)性的研究選擇更具針對性的藥物，調整其劑量，而不是不加選擇地使用ACEI、鈣拮抗劑或交感神經(jīng)受體阻斷劑。合并癥的防治也會更個體化，更具針對性。羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究基因多態(tài)性的研究對于遺傳病具有雙重意義，一方面，基因的有害突變，不論是經(jīng)典的點突變，還是動態(tài)突變，其本身就可能是遺傳病的病因，另一方面,眾多的多態(tài)性位點又是很好

33、的遺傳標記，可以在遺傳病的研究和臨床診斷中發(fā)揮重要的作用。1.多態(tài)性作為遺傳病的病因：點突變引起的疾病：從鐮刀狀細胞貧血開始，突變引起各種遺傳病的例子愈來愈多，遺傳性腫瘤也逐漸被認識。重復序列多態(tài)性作為遺傳病的病因：如CCG，CTG和CAG這樣的三核苷酸重復序列，當其拷貝數(shù)過度增高時可以引起強直性肌營養(yǎng)不良等。三核苷酸拷貝數(shù)的擴增或突變發(fā)生在世代傳遞過程中，由于拷貝數(shù)在世代間的改變，它被稱為動態(tài)突變。目前動態(tài)突變疾病大多是些神經(jīng)系統(tǒng)的退行性疾病，也有少數(shù)腫瘤。動態(tài)突變疾病的發(fā)現(xiàn)提示序列拷貝數(shù)的多態(tài)性能夠成為遺傳病的病因。2.多態(tài)性作為遺傳標記的應用：絕大多數(shù)DNA多態(tài)性并不引起遺傳病，但可作為

34、遺傳標記來使用。例如：上述提到的各種多態(tài)性標記，包括RFLP位點，微衛(wèi)星和小衛(wèi)星DNA標記都已廣泛用于遺傳病的連鎖診斷。利用各條染色體上位置已知的眾多的多態(tài)性標記，通過患病家系的連鎖分析，可以找到多基因病的致病基因或相關基因的位置，并為他們的分離克隆提供依據(jù)。此外，在疾病的關聯(lián)分析和病因學研究方面，通過比較患病群體和正常群體，可以發(fā)現(xiàn)兩組間多態(tài)性位點的特定等位基因頻率有顯著差別，則表明該位點與該疾病相關聯(lián)。使用多態(tài)性標記的關聯(lián)分析既可以提示相關基因存在的位置，也有助于發(fā)病機理的闡明?；蚨鄳B(tài)性還可以用于疾病的分型與治療，即根據(jù)患者疾病多態(tài)性的基因型來解釋疾病的病因和臨床表現(xiàn)。羥色胺2C受體基因

35、多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究在預防醫(yī)學方面，基因多態(tài)性的研究涉及的范圍廣泛，包括基因多態(tài)性與病因未知的疾病關系的研究，也包括對已知特定環(huán)境因素致病易感基因的篩選。由于基因多態(tài)性有明顯的種族差異，因此在基因-環(huán)境交互作用模式上，不同的種族之間有可能不同。所以，開展我國人群的基因多態(tài)性與環(huán)境的作用關系的研究具有重要的意義。而基因多態(tài)性的研究在職業(yè)病醫(yī)學中則更具有實際的意義。對易感基因和易感性生物標志物的分析，將某些攜帶敏感基因型的人甄別開來，采取針對性預防措施，提高預防職業(yè)性危害工作的效率。對特定的污染物易感人群和耐受人群的基因多態(tài)性研究，有助于闡明環(huán)境因素的致病機制，也推動了遺傳易感性標志物的研究。

36、羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究四、連鎖分析( linkage analysis)和關聯(lián)分析(association analysis)復雜疾病的基因組分型方法最主要的是采用連鎖分析和關聯(lián)分析,抑郁癥也不例外。我們有必要首先了解連鎖分析和關聯(lián)分析技術。細胞中每一對染色體的其中一條是來自父親,另一條來于母親。細胞分裂時這兩條染色體會發(fā)生重組。如果決定兩種性能的兩個基因在染色體上的位置靠的很近,那么被重組的可能性就比較小,因而可留在同一條染色體上,遺傳到下一代。連鎖分析是用微衛(wèi)星DNA標記對家系定型,根據(jù)家系遺傳信息中基因間的重組率計算出兩基因之間的染色體圖距,再根據(jù)疾病有無合適的遺傳模

37、式,可分別進行參數(shù)分析與非參數(shù)分析。即通過家系調查來估計兩個基因的重組率,從而進行基因定位的方法。關聯(lián)分析則是在不相關的人群中尋找與性狀(疾病或藥物反應)相關的染色體區(qū)域。如果某一等位基因能增加患某種疾病(如抑郁癥)的風險,那么患者中含有這種等位基因的頻率應高于正常者,即這一等位基因與該疾病存在著關聯(lián)。 連鎖分析由于受到遺傳模式和其他因素的影響,對復雜的多基因遺傳疾病的研究往往很困難,而關聯(lián)分析可彌補其缺陷,成為行之有效的方法。對于多基因遺傳疾病,主基因效應可由連鎖分析測知,而輔基因效應則更多的采用關聯(lián)分析。羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究五、基因芯片技術“微處理器在本世紀使我們的經(jīng)

38、濟結構發(fā)生了根本改變，給人類帶來了巨大的財富，改變了我們的生活方式。然而，生物芯片給人類帶來的影響可能會更大，它可能從根本上改變醫(yī)學行為和我們的生活質量，從而改變世界的面貌 ”。（一）、生物芯片與基因芯片 生物芯片技術是通過縮微技術，根據(jù)分子間特異性地相互作用的原理，將生命科學領域中不連續(xù)的分析過程集成于硅芯片或玻璃芯片表面的微型生物化學分析系統(tǒng)，以實現(xiàn)對細胞、蛋白質、基因及其它生物組分的準確、快速、大信息量的檢測。按照芯片上固化的生物材料的不同，可以將生物芯片劃分為基因芯片、蛋白質芯片、細胞芯片和組織芯片。生物芯片技術與傳統(tǒng)的儀器檢測方法相比具有高通量、微型化、自動化、成本低、防污染等特點。

39、按照生物芯片的制作技術，可以將生物芯片劃分為微矩陣和原位合成芯片。鑒于生物芯片技術領域的飛速發(fā)展，美國科學促進會將生物芯片評為1998年的十大科技突破之一，認為生物芯片技術將是繼大規(guī)模集成電路之后的又一次具有深遠意義的科學技術革命。羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究目前,最成功的生物芯片形式是以基因序列為分析對象的“微陣列(microarray)”,也被稱為基因芯片(Gene chip)DNA芯片(DNA chip)。按照載體上點的DNA種類的不同，基因芯片可分為寡核苷酸和cDNA兩種芯片。按照基因芯片的用途可分為表達譜芯片、診斷芯片、指紋圖譜芯片、測序芯片、毒理芯片等等。早在八十年代

40、初期,Bains等人就用雜交的方法對固定在支持物上的短DNA片段進行序列測定?；蛐酒夹g從實驗階段走向工業(yè)化是得益于其他技術的引入，如激光共聚焦顯微技術、探針固相原位合成技術與照相平板印刷技術的結合和雙色熒光探針雜交系統(tǒng)的建立。90年代初期人類基因組計劃（Human Genome Project, HGP）和分子生物學相關學科的發(fā)展也為基因芯片技術的出現(xiàn)和發(fā)展提供了有利條件。1992年，Affymatrix公司Fodor領導的小組運用半導體照相平板技術，對原位合成制備的DNA芯片作了首次報道，這是世界上第一塊基因芯片。1995年，Stanford大學的P.Brown實驗室發(fā)明了第一塊以玻璃為

41、載體的基因微矩陣芯片。標志著基因芯片技術進入了廣泛研究和應用的時期。羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究（二）、制備基因芯片的必要條件1、靶基因 用于芯片點樣的是靶基因。靶基因可分為染色體DNA（或基因組DNA）、cDNA（或人工合成DNA）。目前，以cDNA的研究為主，因為cDNA是染色體上編碼蛋白質的DNA序列，有醫(yī)療和其他領域的研究價值和商業(yè)價值。 2、制備技術 基因芯片的制備綜合了生命科學、化學染料、微電子技術、激光、統(tǒng)計學等領域的前沿技術，主要包括芯片的制備（選擇點樣儀和玻片、靶基因的擴增和固定）、雜交探針的制備（mRNA的抽提、mRNA的逆轉錄、PCR和探針熒光標記）、雜交條

42、件的優(yōu)化技術（雜交液、雜交條件和洗滌條件的選擇）和數(shù)據(jù)分析技術。其中，基因芯片的制備主要依賴于微細加工（microfabrication）、自動化（automatism）及化學合成技術。通常比較典型的DNA芯片制備方法有3種：（1）原位合成法（in situ synthesis） 以Affymetrix公司開發(fā)的光引導原位合成法為代表（2）合成點樣法 又根據(jù)是否與芯片的表面接觸分為化學噴射法和接觸式點涂法，分別以Incyte Pharmaceutical公司和Stanford大學為代表（3）壓電法 通過使用4支分別裝有A、T、G、C核苷的壓電噴頭在芯片上作原位DNA探針合成。羥色胺2C受體基因多態(tài)性與抑郁癥的關聯(lián)研究（三）、基因芯片技術簡介 基因芯