免疫檢測的自動化及標(biāo)準(zhǔn)化ppt課件

1、免疫檢測的自動化及規(guī)范化蚌醫(yī)一附院檢驗科 王鳳超.免疫分析技術(shù)經(jīng)典的免疫分析技術(shù)凝集反響、沉淀反響、溶血反響、補體結(jié)合實驗特點：本錢低、技術(shù)簡單、結(jié)果易于判別，但不易于實現(xiàn)自動化?，F(xiàn)代的免疫分析技術(shù)熒光免疫標(biāo)志、放射性免疫標(biāo)志、酶免疫標(biāo)志、鑭系稀土元素免疫標(biāo)志、臨床化學(xué)免疫分析技術(shù)、發(fā)光免疫標(biāo)志、流式免疫微球技術(shù)及生物傳感器技術(shù)等。特點：靈敏、特異、快速、易于測定及實現(xiàn)自動化。.熒光免疫標(biāo)志技術(shù)1950年Coons合成異硫氰酸鹽(熒光染料)，用作標(biāo)志抗體做小鼠組織切片染色，開創(chuàng)了免疫熒 光技術(shù)immunofluorescence techniques,又稱為熒光抗體技術(shù)Fluorescent

2、antibody 傳統(tǒng)免疫熒光技術(shù)：熒光顯微鏡下分析熒光形狀、分布，及流式細(xì)胞儀，熒光偏振分析現(xiàn)代免疫熒光技術(shù) ：熒光激活細(xì)胞分類儀 FACS )，熒光自動化分析測試儀 、時間分辨熒光技術(shù)TRF )TRF：以稀土離子(鑭系元素標(biāo)志抗原或抗體，稀土原子具有熒光發(fā)射峰譜范圍窄、激發(fā)光波長范圍寬的特點，有利于加強熒光的特異性，提高分辨率；排除非特異性熒光的干擾、降低本底熒光。具有標(biāo)志物制備簡便、有效期長、不污染環(huán)境、操作流程短、規(guī)范曲線線性范圍寬，高靈敏、高特異、有效期長、易于實現(xiàn)自動化、運用范圍廣等優(yōu)點。.放射性免疫標(biāo)志技術(shù)1958年，美國科學(xué)家貝爾森和雅洛把放射性“標(biāo)志引入免疫分析，兩人也因此獲

3、得了1977年的諾貝爾生理學(xué)獎。早期的研討都是以I131 (射線和射線)作為標(biāo)志的，目前用的是高純度、高活性的I125(弱射線)，以減少放射性核素對人體安康潛在的影響。優(yōu)點：高靈敏、高特異缺陷：同位素半衰期及污染問題、試劑有效期短、反響時間長、批間批內(nèi)的差別、規(guī)范曲線穩(wěn)定性差、不易實現(xiàn)自動化。從90年代開場放免分析在國際上每年以10的速度下降。隨著時間的推移，將會被新的技術(shù)方法取代。 .磁微粒分別技術(shù) 2-3um的超順磁性磁微粒作為實現(xiàn)免疫反響結(jié)合物與反響混合物的分別載體其中心制造技術(shù)是在超順磁性磁微粒的外表大量偶聯(lián)了特異性結(jié)合抗體參與反響后的免疫磁微粒經(jīng)過一個外加磁場吸附下來，然后把其它雜質(zhì)

4、去掉 免疫反響在反響形狀上，相比微孔板式的固相反響(固液界面反響)優(yōu)化成了準(zhǔn)液相反響，反響面積、幾率大大添加，其反響速度大大加快。制備的試劑具有靈敏度高、特異性強、穩(wěn)定性好、結(jié)果準(zhǔn)確可靠的優(yōu)點 動力粒子 : .酶免疫標(biāo)志技術(shù)酶免疫標(biāo)志技術(shù)酶免疫測定酶免疫組化技術(shù)均相酶免疫測定異相酶免疫測定液相酶免疫測定固相酶免疫測定 ELISA.酶免疫分析的自動化酶免分析系統(tǒng)的規(guī)范化，自動化與網(wǎng)絡(luò)化，是全實驗室自動化Total Laboratory Automation， TLA)系統(tǒng)的重要組成部分，包括樣本(前處置)模塊、酶免分析(后處置)模塊、軟件信息模塊等，是邁向全面實驗自動化建立的重要基石。 .酶免疫

5、分析的自動化樣本處置自動化自動標(biāo)本識別條碼閱讀功能；更高的標(biāo)本處置效率;更少的勞動強度;職業(yè)暴露時機最小化；經(jīng)過減少人為失誤、改善加樣精度與準(zhǔn)確性來改善分析質(zhì)量，采用批量batch )或隨機(random access)進展多種組合與多種方式的檢測全自動酶免分析系統(tǒng)多義務(wù)、多通道，完全實現(xiàn)平行過程處置，特別是自在義務(wù)資源管理系統(tǒng)，可以隨時添加(急診)義務(wù)菜單，實現(xiàn)最優(yōu)反響過程(實驗質(zhì)量)和最大化分析消費力( throughput) 。根據(jù)處置方式的不同，全自動酶免分析系統(tǒng)可分為兩類，即一體機: 如EVOLIS. Alisei. Tecan，Personal LAB，變色龍等;分體機: 如AT和

6、費米；斯達爾和費米;RSP和MPP3000等。 .Microlab AT plus 2加強型全自動樣本處置機采用自動條碼識別12通道加樣針自動丟棄式加樣頭容積從 10一300ul96個標(biāo)本加樣速度小于 5分鐘可批量處置最多5塊微板。.FAME (費米)全自動酶免分析系統(tǒng)硬件上采用綜合模塊化設(shè)計，并行任務(wù)方式、雙孵育雙洗板、單讀數(shù)模塊可包容10塊板，24個試劑位，30個密閉式孵育位采用液體程度探測(LLD )、體積與分量傳感、光學(xué)位置傳感等技術(shù)，實現(xiàn)了真正的全過程控制( TPC )，尤其是專利的洗液傳感器，確保了最正確洗板效果。軟件上采用 全自動GMP/GLP規(guī)范系統(tǒng)，如全面的系統(tǒng)跟蹤記錄Tra

7、ceability與系統(tǒng)追溯Traceability，標(biāo)本試劑加樣校驗 ( Sarnple verification) 及“自在義務(wù)管理等功能。 .哈美頓的輝煌之星 酶免之星.TECAN大型全自動酶免一體機 采用條碼識別和試管架定位兩種標(biāo)本識別方式，可調(diào)式四維方式運動傳輸加樣頭那么運用一次性加樣頭與TEFLON鋼針恣意組合加樣速度高達1956孔/小時，試劑分配速度為7680孔/小時可同時在線20項實驗，每塊板內(nèi)分別進展12項實驗。恒溫孵育器多達2個，每個孵育器至少可包容6個板讀板速度達6秒/板，4種洗液在線方式，清洗液量系統(tǒng)監(jiān)控試劑全開放.BRIO開放式全自動酶免系統(tǒng)中心處置系統(tǒng)為雙試劑和樣本

8、盤方式，可包容4塊微孔板，120樣本，最大運轉(zhuǎn)9項 測試。測試方式可為隨機插入式或成批處置式。雙機連機型加樣速度達768標(biāo)本h，試劑分配速度為 2300孔h孵育及振蕩方式均采用獨立控制的孵育及振蕩位，溫度范圍25-45C，具有1 C增量和/或1300rpm振蕩。原采血試管、試劑、緩沖液、清潔液，廢液瓶均配有液面自動檢測系統(tǒng)。缺陷是讀數(shù)器酶標(biāo)儀獨立于機外。 . Alisei全自動酶免分析系統(tǒng) 中心處置系統(tǒng)采用獨特的滑輪傳送方式，內(nèi)含六塊微孔板具有雙針加樣系統(tǒng)，共配有4個高精度的注射器，加樣速度達700標(biāo)本/h，試劑分配速度為1900孔/h系統(tǒng)利用多批次處置方式，每天可處置20塊微孔板的不同工程測

9、試，同時在線16個不同工程。獨立的孵育振蕩位多達6個，試劑開放具有時間優(yōu)化管理功能.Personal LAB全自動酶免分析系統(tǒng)可同時處置兩塊酶標(biāo)板最多運轉(zhuǎn)6種不同工程192個檢測機械手臂可以根據(jù)樣本詳細(xì)情況，選擇運用金屬針或者一次性的塑料加樣頭，加樣速度小于14分鐘(96個樣本)，試劑分配速度小于3分 鐘(96孔) 系統(tǒng)擁有兩個獨立的封鎖式溫育倉，一個清洗站和兩個讀數(shù)平臺，專利的洗板頭為8個加液器和8個吸液器組成 探針的內(nèi)外雙沖洗可最大限制地減少交叉污染。 .Nexgen Four全自動酶免分析系統(tǒng) 雙臂四針，可并行運轉(zhuǎn)4塊96孔酶標(biāo)板系統(tǒng)由1個中央樣品裝載盤，2套獨立三維加樣臂、4個獨立孵育

10、艙、48通道讀數(shù)器、2套洗板安裝組成。擁有可實時互換的雙重加樣針(金屬加樣針和一次性加樣頭)，并行加樣本速度800孔/h，加試劑速度 3 800孔/h。該儀器由內(nèi)、外2套計算機管理， 先進的運轉(zhuǎn)軟件基干WINDOWS XP和NET架構(gòu)設(shè)計。儀器還可以增選全自動過敏原分析安裝。 . EVOLIS全自動酶免分析系統(tǒng) EVOLIS是一個全面開放的全自動酶免系統(tǒng)，內(nèi)置多種方式的條形碼解讀功能，用戶可恣意設(shè)置或修正ELISA實驗涉及到的一切參數(shù)?？赏瑫r處置四塊酶聯(lián)反響微孔板，每板多達12種測試,同時上樣180個標(biāo)本;系統(tǒng)配置八個濾光片同時對多塊板進展不同組合的操作樣品和試劑加樣針采用一次性加樣頭具有液面

11、及血凝/氣泡感應(yīng)檢測器；4個獨立的孵育盤，3種不同的洗液，靈敏多變的微孔板清洗方式.變色龍開放式全自動酶免系統(tǒng) 變色龍是一套全自動、開放式，延續(xù)、多批次酶免分析系統(tǒng)。高度靈敏的加樣功能，可在加樣針中進展稀釋，加樣速度 9分鐘/96孔，加試劑速度為2.5分鐘/96孔，可放置188個樣品管和預(yù)稀釋管120個加樣用Tips頭、8個預(yù)稀釋液56 個對照或規(guī)范品。一次性Tip頭和固定加樣針自在互選，獨有的微孔交叉吸液使殘留液減至2 ul以下。獨立的溫控板位多達4個，可進展獨有的振蕩式加蓋孵育。 .小結(jié)目前，部分全自動酶免分析系統(tǒng)已具備全過程控制TPC系統(tǒng)，符合GMP，GLP硬件和軟件規(guī)范，可以全自動生成

12、實驗操作記錄( Traceability )和系統(tǒng)追溯記錄(Trackability )，這些技術(shù)提高不僅有助于建立信息化的質(zhì)量控制( QC )和 質(zhì)量保證( QA體系，而且在醫(yī)療責(zé)任舉證倒置的實際中，這些記錄或證據(jù)將可以闡明酶免實驗的正確性和可靠性，以防患各種糾紛的產(chǎn)生。 .化學(xué)發(fā)光免疫測定.化學(xué)發(fā)光免疫測定的分類1發(fā)光酶免疫測定間接化學(xué)發(fā)光AP /OH HPO4 2光.化學(xué)發(fā)光免疫測定的分類2直接化學(xué)發(fā)光+ 光.化學(xué)發(fā)光免疫測定的分類3電化學(xué)發(fā)光.電化學(xué)發(fā)光反響原理:化學(xué)發(fā)光劑三聯(lián)吡啶釕Ru (bpy)32+和電子供體三丙胺(TPA)在陽電極外表可同時失去一個電子而發(fā)生氧化反響。二價的Ru

13、 (bpy)32+被氧化成三價，這是一種強氧化劑,TPA失去電子后被氧化成陽離子自在基TPA十.，它很不穩(wěn)定，可自發(fā)地失去1個質(zhì)子(H十)，構(gòu)成自在基TPA. ，這是一種很強的復(fù)原劑，可將一個電子給三價的Ru (bpy)33+使其構(gòu)成激發(fā)態(tài)的 Ru (bpy)32+ ，。激發(fā)態(tài)的三聯(lián)吡啶釕很快發(fā)射出一個波長620nm的光子，回復(fù)成基態(tài)的三聯(lián)吡啶釕。這一過程可以在電極外表周而復(fù)始地進展，產(chǎn)生許多光子，使光信號加強。 基態(tài)激發(fā)態(tài).美國雅培公司的AXSYM全自動快速酶免疫分析系統(tǒng)技術(shù)原理：MEIA、FPIA、ICIA標(biāo)志物：堿性磷酸酶包被技術(shù)：微粒子包被分別技術(shù)：纖維網(wǎng)分別發(fā)光劑：4MUP發(fā)光誘導(dǎo)：

14、酶催化底物發(fā)光檢測方法：夾心法和競爭法檢測速度：70Th試劑位：20靈敏度： 1015反復(fù)性：批內(nèi)5，批間10.美國雅培公司的I2000SR技術(shù)原理：化學(xué)發(fā)光標(biāo)志物：吖啶酯包被技術(shù)：磁微粒子包被分別技術(shù)：磁性分別發(fā)光劑：吖啶酯發(fā)光誘導(dǎo)：改動PH值檢測方法：夾心法和競爭法檢測速度：200Th試劑位：25靈敏度： 1015反復(fù)性：批內(nèi)5，批間10.美國拜耳CS 180SE和ACS CENTAUR全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)技術(shù)原理：化學(xué)發(fā)光標(biāo)志物：吖啶酯包被技術(shù)：磁微粒子包被分別技術(shù)：磁性分別發(fā)光劑：吖啶酯發(fā)光誘導(dǎo)：改動PH值檢測方法：夾心法和競爭法檢測速度：100Th試劑位：13靈敏度： 1015

15、反復(fù)性：批內(nèi)5，批間10.德國全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀LIAISON 技術(shù)原理：直接化學(xué)發(fā)光技術(shù)標(biāo)志物：異魯米諾包被技術(shù)：磁微粒子包被分別技術(shù)：磁性分別發(fā)光劑：異魯米諾發(fā)光誘導(dǎo)：改動PH值檢測方法：夾心法和競爭法檢測速度：180Th試劑位：15靈敏度： 1015反復(fù)性：批內(nèi)5，批間10.Vitros ECI全自動加強化學(xué)發(fā)光酶免分析儀系統(tǒng) 技術(shù)原理：加強化學(xué)發(fā)光技術(shù) 標(biāo)志物：辣根過氧化物酶標(biāo)志包被技術(shù)：鏈霉親和素包被的子彈頭型塑料小孔管為固相載體包被分別技術(shù)：直接清洗分別發(fā)光劑：魯米諾 發(fā)光誘導(dǎo)：酶催化底物發(fā)光檢測方法：夾心法和競爭法檢測速度：70Th試劑位：15靈敏度： 1015反復(fù)性：批內(nèi)

16、5，批間10.Access2全自動微粒子酶放大化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)技術(shù)原理：間接化學(xué)發(fā)光標(biāo)志物：堿性磷酸酶包被技術(shù)：磁微粒子包被分別技術(shù)：磁性分別發(fā)光劑：AMPPDDioxetane)發(fā)光誘導(dǎo)：酶催化底物發(fā)光檢測方法：夾心法和競爭法檢測速度：80Th試劑位：24靈敏度：1015反復(fù)性：批內(nèi)5，批間10.UniCel DxI 800免疫分析系統(tǒng) 真正24小時待機，50個試劑儲存于儀器自備冷藏系統(tǒng)中，每小時400個實驗 , 自動稀釋、重檢、 樣本檢測工程的隨機組合，急診標(biāo)本具有優(yōu)先權(quán)益 儀器前部具備一次性上機120個原始管才干，運轉(zhuǎn)形狀中可不斷循環(huán)參與 , 儀器背部預(yù)留自動化軌道進樣方式的加樣才干

17、分立的4個進樣系統(tǒng)、一體化的整系統(tǒng)檢測方式, 共享一個檢測系統(tǒng)和孵育器、共享一套沖洗、讀數(shù)系統(tǒng) 、運用同一個光量子探測器、共享一個定標(biāo)和QC結(jié)果 .美國DPC公司Immulite2000型全自動酶放大化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)技術(shù)原理：間接化學(xué)發(fā)光標(biāo)志物：堿性磷酸酶包被技術(shù)：塑料珠包被分別技術(shù)：離心分別發(fā)光劑：AMPPDDioxetane)發(fā)光誘導(dǎo)：酶催化底物發(fā)光檢測方法：夾心法和競爭法檢測速度：120Th試劑位：24靈敏度：1015反復(fù)性：批內(nèi)5，批間10.ELECSYS 1010和ELECSY 2021型全自動電化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)技術(shù)原理：電化學(xué)發(fā)光標(biāo)志物： Ru (bpy)32+包被技術(shù)：磁

18、微粒子包被分別技術(shù)：磁性分別發(fā)光劑：Ru (bpy)32+發(fā)光誘導(dǎo)：酶催化底物發(fā)光檢測方法：夾心法和競爭法檢測速度：85Th試劑位：18靈敏度：1015、1018反復(fù)性：批內(nèi)5，批間10.電化學(xué)發(fā)光電化學(xué)發(fā)光免疫測定(ECLIA)是繼放射免疫、酶聯(lián)免疫、熒光免疫，化學(xué)發(fā)光免疫以后的新一代標(biāo)志免疫測定技術(shù)，是電化學(xué)發(fā)光和免疫測定相結(jié)合的產(chǎn)物。電化學(xué)發(fā)光標(biāo)志物發(fā)光的原理與普通化學(xué)發(fā)光不同，是一種在電極外表由電化學(xué)引發(fā)的特異性化學(xué)發(fā)光反響。它包括電化學(xué)和化學(xué)發(fā)光兩個過程。ECLIA的優(yōu)點:是靈敏度高，測定速度快、線性范圍寬、結(jié)果穩(wěn)定、自動化程度高、試劑保管期長，運用范圍廣等。 .E170模塊化170

19、Th其它同2021.法國梅里埃公司的VIDAS全自動熒光酶標(biāo)免疫測試系統(tǒng)該系統(tǒng)以堿性磷酸酶標(biāo)志抗原或抗體，用塑料吸管( SPR)為固相載體，以4一甲基傘型酮磷酸鹽4一MUP為發(fā)光劑，它被酶標(biāo)抗體上的堿性磷酸酶分解，脫磷酸構(gòu)成4一甲基傘型酣，經(jīng)37Onm激光照射 下，發(fā)出450nm的熒光，經(jīng)熒光讀數(shù)儀記錄，并計算出所測物質(zhì)的含量。 AP H3PO4+360nm激發(fā)光4-MU4-MUP.美國Wallac公司的DELFIA全自動時間分辨熒光免疫檢測系統(tǒng)該 系統(tǒng)用鑭系元素標(biāo)志抗原或抗體作為示蹤物,并與時間分辨熒光測定技術(shù)(TRFIA)相結(jié)合，建立了一種新的非放射性微量分析技術(shù)，具有靈敏度高，示蹤物發(fā)光

20、穩(wěn)定，不受樣品自然熒光干擾，規(guī)范曲線范圍寬，檢測反復(fù)性好等優(yōu)點。 .免疫檢測自動化分析的特點快速靈敏穩(wěn)定減少誤差及過失的發(fā)生.免疫檢測的規(guī)范化.主要儀器設(shè)備加樣器 加樣系統(tǒng)洗板機酶標(biāo)儀全自動檢測系統(tǒng).酶標(biāo)儀-酶標(biāo)儀的運用1.測定波長 波長范圍：400 nm750或800 nm 常用波長： 450 nm和492 nm目前國內(nèi)常見的ELISA試劑盒所運用的標(biāo)志用酶均為辣根過氧化物酶HRP，底物通常為四甲基聯(lián)苯胺TMB和鄰苯二胺OPD 雙波長比色：應(yīng)有620 nm 或630 nm或650 nm和 405 nm波長的濾光片2.測定的吸光度范圍通常：在02.5之間即可以滿足ELISA的測定要求：對于酶標(biāo)

21、儀的吸光度范圍不用去刻意追求大的吸光度范圍，主要要看在一定的吸光度范圍內(nèi)的線性和精細(xì)度如何.酶標(biāo)儀-酶標(biāo)儀的自檢和校準(zhǔn)1.酶標(biāo)儀的線性選用540nm波長,將標(biāo)稱值0.5,1.0A中性濾光片分別放入公用測試板樣本位置中,以空氣為參比,各反復(fù)測定3次;然后將以上兩片中性濾光片疊加后置于公用測試板的同一孔位中,反復(fù)測定3次.線性誤差 2.測定速度的檢定選用492nm波長，放入96孔酶標(biāo)板進展測定，用秒表計測儀器的打印出全部數(shù)據(jù)的時間。.酶標(biāo)儀-酶標(biāo)儀的自檢和校準(zhǔn)3.通道差檢測取一只酶標(biāo)板小孔杯杯底須光滑、透明、無劃痕、無污染以酶標(biāo)板架作載體，分別參與三種不同濃度的甲基橙溶液 200 ul先后置于8個

22、通道的相應(yīng)位置，蒸餾水調(diào)零，采用雙波長測定波長490nm，參比波長630或650nm，以下均一樣延續(xù)測三次，察看其不同通道之間丈量結(jié)果的一致性可用極差值來表示其通道差。4.孔間差的丈量選擇同一廠家、同一批號酶標(biāo)板條8條共96 孔分別參與200 ul甲基橙溶液吸光度調(diào)至0.065 0.070 A先后置于同一通道，蒸餾水調(diào)零，采用雙波長檢測，其誤差大小用1.96s衡量。.酶標(biāo)儀雙波長問題雙波長測定： 由于標(biāo)本中干擾組份的存在以及小孔杯本身質(zhì)量等緣由，經(jīng)常導(dǎo)致測定結(jié)果的假性增高，而酶標(biāo)儀提供的雙波長測定功能那么可以消除干擾組份或要素對測定結(jié)果的影響。 對于標(biāo)本中干擾組份的去除，在選擇參比波長時，我們

23、應(yīng)對于擾組份的光譜進展研討，以正確選擇參比波長；而對于小孔杯本身質(zhì)量問題等干擾要素的消除，只需選擇遠(yuǎn)離測定波長的參比波長即可以了，這對保證測定結(jié)果的準(zhǔn)確性是非常重要的。 .洗板機本卷須知 1.有一定的洗滌次數(shù)多次洗滌有利于獲得好的效果，普通不超越6次。 2.留意每孔的加液量以加滿為宜，但不可溢出，普通為每孔300微升 3.建議在洗滌前進展位置調(diào)理，吸針要到微孔底部，以降低殘留量。 4.建議用戶采用兩點吸液與底部沖洗方式，以得到好的洗滌效果。 5. 每天運用后用雙蒸水沖洗管路。 6.定期維護、檢修儀器及配件。.加樣器-加樣器的類型單道延續(xù)可調(diào)式移液器多通道延續(xù)可調(diào)式移液器單道延續(xù)移液器單道移液管

24、配合運用的移液器.加樣器-加樣器的運用.加樣器-加樣器的校準(zhǔn)校準(zhǔn)環(huán)境和器具要求：室 溫：2025，測定中動搖范圍不大于0.5。電子天平：放置于無塵和震動影響的臺面上，房間盡能夠有空調(diào)。稱量時，為保證天平內(nèi)的濕度相對濕度60-90%，天平內(nèi)應(yīng)放置一裝有10 ml蒸餾水的小燒杯。小燒杯： 510 ml體積。測定液體：溫度為2025的去氣雙蒸水。選定校準(zhǔn)體積：加樣器標(biāo)定體積的中間體積；最小可調(diào)體積不小于擬校準(zhǔn)體積的10%。擬校準(zhǔn)體積； 如為固定體積加樣器，那么只需一種校準(zhǔn)體積。.加樣器-加樣器的校準(zhǔn)校準(zhǔn)步驟：將加樣器調(diào)至擬校準(zhǔn)體積，選擇適宜的吸頭；調(diào)理好天平；來回吸吹蒸餾水3次，以使吸頭潮濕，用紗布

25、拭干吸頭垂直握住加樣器，將吸頭浸入液面23 mm處，緩慢13秒一致地汲取蒸餾水；將吸頭分開液面，靠在管壁，去掉吸頭外部的液體；將加樣器以30角放入稱量燒杯中，緩慢一致地將加樣器壓至第一 檔，等待13秒，再壓至第二檔，使吸頭里的液體完全排出；記錄稱量值；擦干吸頭外面；按上述步驟稱量10次；取10次測定值的均值作為最后加樣器汲取的蒸餾水分量，按附表所列蒸餾水Z因子計算體積。按校準(zhǔn)結(jié)果調(diào)理加樣器。.加樣器本卷須知根據(jù)所需取液量選擇相應(yīng)的移液器及吸頭汲取液體時應(yīng)緩慢勻速汲取，防止液體回吸。在調(diào)整取液量的旋鈕時，不要用力過猛，并應(yīng)留意計數(shù)器顯示的數(shù)值不要超越其可調(diào)范圍。延續(xù)可調(diào)式移液器不可在無吸頭時運用

26、，吸頭有液體時不可平放或倒置。操作時要慢和穩(wěn)，吸嘴浸入液體深度要適宜，吸液過程盡量堅持不變；改吸不同液體、樣品或試劑前要換新吸嘴；發(fā)現(xiàn)吸嘴內(nèi)有殘液時必需改換；新吸嘴運用前應(yīng)先預(yù)測。.全自動檢測系統(tǒng)校準(zhǔn)溫育系統(tǒng)校準(zhǔn)加樣系統(tǒng)校準(zhǔn)任務(wù)程序的優(yōu)化.免疫測定的數(shù)據(jù)處置及結(jié)果報告.定性？定量？定性測定常以“有或“無也即“陽性或“陰性來表達測定結(jié)果；半定量測定雖介于定性和定量之間，但從嚴(yán)厲意義上來說，其仍屬于定性測定，只不過其對定性測定中的“陽性作了進一步的分級，即所謂的強陽性陽性弱陽性的區(qū)別定量測定的結(jié)果那么以濃度如IU/L、ug/L等的方式表達。.定性測定結(jié)果確定的根據(jù)定性測定結(jié)果確定的根據(jù)在于陽性陰性斷定值Cut-off的建立， Cut-off 值確實立應(yīng)盡能夠地防止假陽性或假陰性結(jié)果的出現(xiàn)。除了 Cut-off 值以外，還有許多其它的設(shè)值方法以判別陰性和陽性結(jié)果，如S/N常稱為P/N比值Ratio等。.定量測定結(jié)果的根