粒度與粒度分布測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

1、粒度與粒度分布測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程粒度系指顆粒的粗細(xì)程度及粗細(xì)的分布，用于測(cè)定原料藥和藥物制劑的粒子大小或粒度分布。中國(guó)藥典2005年版二部附錄IXE“粒度和粒度分布測(cè)定法”項(xiàng)下列有三種不同的測(cè)定方法，第一法（顯微鏡法）、第二法（篩分法）和第三法（光散射法），其中第一、第二法用于測(cè)定藥物制劑的粒子大小或限度，第三法用于測(cè)定原料藥或藥物制劑的粒度分布。第一法顯微鏡法1簡(jiǎn)述1.1本法中的粒度，系以顯微鏡下觀察到的長(zhǎng)度表示。1.2本法適用于混懸型眼用制劑、混懸型軟膏劑、混懸型凝膠劑等制劑以及品種項(xiàng)下規(guī)定的粒度檢查。2儀器與用具2.1顯微鏡。2.2鏡臺(tái)測(cè)微尺和目鏡測(cè)微尺（直尺式）。2.3蓋、載波片。2.4

2、計(jì)數(shù)器3操作方法3.1目鏡測(cè)微尺的標(biāo)定用以確定使用同一顯微鏡及特定倍數(shù)的物鏡、目鏡和鏡筒長(zhǎng)度時(shí)，目鏡測(cè)微尺上每一格所代表的長(zhǎng)度。標(biāo)定時(shí)，將鏡臺(tái)測(cè)微尺置于載物臺(tái)上，對(duì)光調(diào)焦，并移動(dòng)測(cè)微尺使物象于視野中央，取下目鏡，旋下接目鏡的目鏡蓋，將目鏡測(cè)微尺放入目鏡筒中部的光欄上（正面向上），旋上目鏡蓋后返置鏡筒上，此時(shí)在視野中可同時(shí)觀察到鏡臺(tái)測(cè)微尺的像及目鏡測(cè)微尺的分度小格，移動(dòng)鏡臺(tái)測(cè)微尺和旋轉(zhuǎn)目鏡，使兩種量尺的刻度平行，并使左邊的“0”刻度重合；然后再尋找第二條刻度，記錄兩條刻度的讀數(shù)，并根據(jù)比值計(jì)算出目鏡測(cè)微尺每小格在該物鏡條件下所相當(dāng)?shù)拈L(zhǎng)度（剛）。由于鏡臺(tái)測(cè)微尺每格相當(dāng)于10m，故目鏡測(cè)微尺每一小格

3、的長(zhǎng)度為：10X相重合區(qū)間鏡臺(tái)測(cè)微尺的格數(shù)三相重合區(qū)間目鏡測(cè)微尺的格數(shù)例如：鏡臺(tái)測(cè)微尺15格和目鏡測(cè)微尺34格完全重合，則目鏡測(cè)微尺在該目鏡與物鏡的組合下，每小格的長(zhǎng)度即為4.4gm（10X15H-34=4.4）o當(dāng)測(cè)定時(shí)要用兩種放大倍數(shù)（即該目鏡與不同物鏡組合）時(shí)，應(yīng)分別標(biāo)定。3.2測(cè)定法除另有規(guī)定外，取供試品，用力搖勻，黏度較大這可按該品種項(xiàng)下的規(guī)定加適量甘油溶液（1-2）稀釋，使顆粒分散均勻，照高劑型或品種項(xiàng)下的規(guī)定，量取供試品，置載玻片上，蓋以蓋玻片（注意防止氣泡混入），輕壓使顆粒分布均勻；半固體可直接涂在載玻片上，立即在50100倍顯微鏡下檢視蓋玻片全部視野，應(yīng)無(wú)凝聚現(xiàn)象，并不得檢出

4、超過(guò)該劑型或品種項(xiàng)下規(guī)定的最大顆粒，再在200500倍的顯微鏡下檢視，并用計(jì)數(shù)器記錄該品種規(guī)定的視野內(nèi)的總粒數(shù)及規(guī)定大小的粒數(shù)，并計(jì)算其百分率。4注意事項(xiàng)4.1應(yīng)注意物鏡、目鏡的正確選擇。4.2所用器具應(yīng)清潔。4.3蓋蓋玻片使，用鑷子夾取一蓋玻片，先使其一邊與藥物接觸，慢慢放下，以防止氣泡混入，輕壓使顆粒分布均勻。4.4蓋、載玻片應(yīng)平整，光潔、無(wú)痕、透明度良好，以免引起散射等現(xiàn)象。4.5直接取樣時(shí)，取樣量應(yīng)適量，若量過(guò)多時(shí)，粒子重疊不易觀察、判斷，若過(guò)少代表性差。4.6如為混懸液，振搖時(shí)要有一定力度，振搖后應(yīng)快速取樣。4.7如為混懸型軟膏劑、混懸型眼用半固體制劑或混懸凝膠劑，在取樣混勻過(guò)程中應(yīng)

5、緩慢混勻，以免產(chǎn)生氣泡。第二法篩分法1簡(jiǎn)述1.1本法適用于局部散劑或顆粒劑的粒度測(cè)定。2儀器與用具2.1天平根據(jù)稱樣量選用適當(dāng)?shù)奶炱健?.2藥篩（各品種項(xiàng)下規(guī)定的藥篩號(hào)），并備有篩蓋和密合的接受容器，用前應(yīng)干燥。3操作方法3.1單篩方法取各品種項(xiàng)下規(guī)定量的供試品，稱定重量，置規(guī)定號(hào)的藥篩（篩下配有密合的接受容器）內(nèi)，篩上加蓋，按水平方向旋轉(zhuǎn)振搖至少3分鐘，并不時(shí)在垂直方向輕叩篩。取篩下的顆粒及粉末，稱定重量，計(jì)算其百分率。3.2雙篩分法除另有規(guī)定外，取單劑量包裝的供試品5包（瓶）過(guò)多劑量包裝的供試品1包（瓶）的內(nèi)容物，稱定重量，置該品種規(guī)定藥篩的上層小號(hào)篩中，蓋好篩蓋，保持水平狀態(tài)過(guò)篩，左右往

6、返，邊篩動(dòng)邊拍扌打3分鐘。取不能通過(guò)小號(hào)篩和能通過(guò)大號(hào)篩的顆粒及粉末，稱定重量，計(jì)算其半分率。4注意事項(xiàng)4.1在篩動(dòng)時(shí)速度不宜太快，否則由于粉末運(yùn)動(dòng)速度太快，可篩過(guò)的粉末來(lái)不及與篩網(wǎng)接觸而混于不可篩過(guò)粉末之中而影響結(jié)果。4.2適當(dāng)增加振動(dòng)力度，使藥粉跳動(dòng)運(yùn)動(dòng)增強(qiáng)，能有效地增加粉末間距，篩孔得到充分暴露而利于篩選。4.3振動(dòng)的力要適當(dāng)，因?yàn)榱接蟹较蛐?，通過(guò)某一篩孔的粒子的實(shí)際長(zhǎng)度可能比篩孔的孔徑大。如果振動(dòng)力度較強(qiáng)，此種誤差會(huì)增大。4.4篩動(dòng)時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)。若篩動(dòng)時(shí)間長(zhǎng)、振動(dòng)力大，顆粒間相互撞擊破碎，也可引起誤差。5記錄記錄篩號(hào)、稱量數(shù)據(jù)、計(jì)算結(jié)果。6結(jié)果與判定6.1局部用散劑（采用單篩分法）除

7、另有規(guī)定外，通過(guò)七號(hào)（125期土5.8期）的粉末重量，如不低于供試量的95%，判為符合規(guī)定；低于供試量的95%，則判為不符合規(guī)定。6.2顆粒劑（采用單篩分法）除另有規(guī)定外，不能通過(guò)一號(hào)篩（2000剛）和能通過(guò)五號(hào)篩（180剛）的顆粒及粉末的總和，不超過(guò)供試量的15%，判為符合規(guī)定；超過(guò)供試量的15%，則判為不符合規(guī)定。第三法光散射法1簡(jiǎn)述1.1由光源（如He、Ne激光器）發(fā)射出的特定波長(zhǎng)光束，經(jīng)濾鏡調(diào)制成第一的平行光束，該光束照射到顆粒品后發(fā)生散射現(xiàn)象；由于散射角與顆粒的直徑呈反比，依據(jù)米氏散射良論和弗朗霍夫近似理論，通過(guò)測(cè)量散射角的大小，即可換算出顆粒的粒徑；讓散射光經(jīng)過(guò)傅立葉或反傅立葉透鏡

8、成像在排列有多個(gè)檢測(cè)妻的焦平面上，散射光的能量分布與顆粒徑的分布直接相關(guān)，通過(guò)接受和測(cè)量散射光的能量分布就可以計(jì)算出顆粒的粒徑分布特征。1.2本法適用于液體、固體、浮狀液和混懸液等的粒度分布測(cè)定，通常采用激光為光源，其測(cè)量范圍為0.023500剛。2儀器2.1儀器構(gòu)成光散射法所用的儀器為光散射粒度測(cè)定儀。該儀器主要由光源、單色器、樣品分散系統(tǒng)、樣品池、檢測(cè)器、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)和打印機(jī)組成。2.2儀器性能檢定儀器光源系統(tǒng)的光強(qiáng)度應(yīng)在一定范圍內(nèi)穩(wěn)定，并且能夠自動(dòng)扣除電子背景和光學(xué)背景等的干擾。采用粒徑分布特征值d（0.1）、d（0.5）、d（0.9）已知的“標(biāo)準(zhǔn)粒子”對(duì)儀器進(jìn)行評(píng)價(jià)。d（0.5）值表示

9、粒子體積累計(jì)分布圖中50%處的粒徑值，即有50%的粒子粒徑小于此值，另有50%的粒子粒徑大于此值；d（0.1）表示在此分布圖中10%處的粒徑值，即有10%的粒子粒徑小于此值；d（0.9）表示在此分布圖中90%處的粒徑值，即有90%的粒子粒徑小于此值。通常用變異系數(shù)（Variationcoefficient）表征“標(biāo)準(zhǔn)粒子”的粒徑分布范圍，當(dāng)變異系數(shù)小于50%（最大粒徑與最小粒徑的比率約為10:1）時(shí)，平行測(cè)定5次，“標(biāo)準(zhǔn)粒子”的d（0.5）均值與其特征值的偏差應(yīng)小于3%,平行測(cè)定的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）不得過(guò)3%；“標(biāo)準(zhǔn)粒子”的d（0.1）和d（0.9）均值與其特征值的偏差應(yīng)小于5%，平行測(cè)定

10、的RSD均不得過(guò)5%；對(duì)粒徑小于10剛的“標(biāo)準(zhǔn)粒子”，測(cè)定的d（0.5）均值與特征值的偏差應(yīng)小于6%，平行測(cè)定的RSD均不得過(guò)6%；d（0.1）和d（0.9）均值與其特征值的偏差均應(yīng)小于10%，平行測(cè)定的RSD均不得過(guò)10%。3測(cè)定法根據(jù)供試品的性狀和溶解性能，通常分為濕法測(cè)定和干法測(cè)定；濕法測(cè)定用于測(cè)定混懸液樣品或不溶于分散介質(zhì)的供試品，干法測(cè)定用于測(cè)定水溶性或無(wú)合適分散介質(zhì)的固態(tài)供試品。濕法測(cè)定通常濕法測(cè)定的檢測(cè)下限為20nm。根據(jù)供試品的特性，選擇適宜的分散方法使供試品分散成穩(wěn)定的混懸液；通?？刹捎梦锢矸稚⒌姆椒ㄈ绯?、攪拌等，通過(guò)調(diào)節(jié)超聲功率和攪拌速度，必要時(shí)可加入適量的化學(xué)分散劑或表

11、面活性劑，使分散體系成穩(wěn)定狀態(tài)，以保證供試品能夠均勻穩(wěn)定地通過(guò)檢測(cè)窗口，得到準(zhǔn)確的測(cè)定結(jié)果。只有當(dāng)分散體系的雙電層電位（Zeta電位）處于一定范圍內(nèi)，體系才處于穩(wěn)定狀態(tài)，因此，在制備待測(cè)供試品的分散體系時(shí)，應(yīng)注意體系的Zeta電位，以保證分散體系的重現(xiàn)性。濕法測(cè)量所需要的供試品兩通常應(yīng)達(dá)到檢測(cè)器遮光度范圍的8%20%；最先進(jìn)的激光粒度儀對(duì)遮光度的下限要求為0.2%。干法測(cè)定通常干法測(cè)定的檢測(cè)下限為200nm。通常采用密閉測(cè)量法，以減少樣品吸潮。選用的干法進(jìn)樣器及樣品池需克服偏流效應(yīng)，根據(jù)供試品分散的難易，調(diào)節(jié)分散器的氣流壓力，使不同大小的粒子以同樣的速度均勻穩(wěn)定地通過(guò)檢測(cè)窗口，以得到準(zhǔn)確的測(cè)量

12、結(jié)果。對(duì)于化學(xué)原料藥，應(yīng)采用噴射式分散器。在樣品盤(pán)中先加入適量的金屬小球，再加入供試品，調(diào)節(jié)振動(dòng)進(jìn)樣速度、分散氣壓（通常為00.4Mpa）和樣品出口的狹縫寬度，以控制供試品的分散程度和通過(guò)檢測(cè)器的供試品量。干法測(cè)量所需要的樣品量通常應(yīng)達(dá)到檢測(cè)器遮光度范圍的0.5%5%。4注意事項(xiàng)4.1儀器光學(xué)參數(shù)的設(shè)置與待測(cè)供試品系統(tǒng)中的粒徑分布有關(guān)。粒徑大于10期的微粒，對(duì)系統(tǒng)折光率和吸光度的影響較小;粒徑小于10Am的微粒，對(duì)系統(tǒng)折光率和吸光度的影響較大。在對(duì)不同原料和制劑的粒度進(jìn)行分析時(shí)，目前還沒(méi)有成熟的理論用于指導(dǎo)對(duì)儀器光學(xué)參數(shù)的設(shè)置，應(yīng)通過(guò)大量的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)粒子對(duì)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)。4.2對(duì)有色物質(zhì)、乳化液和粒徑小于10剛的物質(zhì)進(jìn)行粒度分布測(cè)量時(shí)，為了減少測(cè)量誤差，應(yīng)使用米氏理論計(jì)算