生化復習題修改版

1、生物化學實驗一、解詞1、總氮量: 水中各種形態(tài)無機和有機氮的總量2、酶的抑制作用: 是指在某個酶促反應系統(tǒng)中某種低相對分子質量的物質加入后，導致酶活力降低的過程。3、酶的最適溫度: 酶催化活性最高時的溫度。 4、蛋白質的等電點: 每個蛋白都存在一個 pH 使 它的表面凈電荷為零即等電點 5、鹽析: 增加中性鹽濃度使蛋白質、氣體、未帶電分子溶 解度降低的現(xiàn)象 6、蛋白質變性: 些物理和化學因素作用下其特定的空間構 象被改變，從而導致其理化性質的改變和生物活性的喪失7、酶的專一性: 酶對底物及 其催化反應的嚴格選擇性通常 酶只能催化一種化學反應或一類相似的反應 8、激活劑: 能

2、提高酶活性的物質大部分是離子或簡單的有機化合物 9、抑制劑: 凡能使酶催化活性下降而不引起酶蛋白變性的物質 10、酶: 催化特定化學反應的蛋白質、RNA 或其復合體 11、電泳: 由于膠體粒子帶有電荷，在電場的作用下，膠體粒子在分散劑里作定向移動，這種現(xiàn)象叫做電泳 12、維生素: 是人和動物為維持正常的生理功能而必需從食物中獲得的一類微量有機物質二、填空1、球蛋白可在 半飽和硫酸銨 溶液中析出，清蛋白可在 飽和硫酸銨 溶液中析出。2、在PH3.0、和9.5時的電場中，卵清蛋白（PI4.6）移動方向分別為 負 移動 ， 正 移動。3、唾液淀粉酶的最適溫度是 37C。 4、還原糖與本乃狄試劑共熱現(xiàn)

3、象生成生成 磚紅色沉淀 5、維生素C也稱 抗壞血酸 ，它具有很 強還原性 。6、用地衣酚濃鹽酸溶液可以鑒定 核糖核酸 7、當溶液的PH低于蛋白質等電點時，蛋白質分子帶 正 電荷；當溶液的PH大于蛋白質等電點時，蛋白質分子帶 負 電荷；8還原糖與本乃狄試劑共熱現(xiàn)象生成生成 磚紅色 沉淀。10凱氏定氮法測定蛋白質含量消化終點顏色為清澈的 藍紫 色。11蛋白質變性的實質是 空間結構被破壞 。12常用的RNA提取方法有苯酚法、 稀堿法 、 高鹽法等。13、維持蛋白質親水膠體穩(wěn)定的因素是 蛋白質顆粒表面的電荷層 和 水化膜 、14、蛋白質在等電點時，主要以  兩性 離子形式存在；當溶液的PHP

4、I時，蛋白質分子以 負 離子形式存在；當溶液的PHPI時，蛋白質分子帶 正 離子形式存在。15、蛋白質分子中氮的平均含量為 5.16% ，樣品中的蛋白質含量常以測氮量乘以 6.25 、即 6 。16、在聚丙烯酰胺凝膠電泳分離過氧化物同工酶的實驗中，電泳開始時應調節(jié)電流恒流 20 毫安，樣品進入下層膠后，應調節(jié)電流恒流 30 毫安。樣品中加入溴酚藍是起 指示劑 作用。聚丙烯酰胺是有單體 （Acr）和交聯(lián)劑 N,N-甲叉丙烯酰胺 （Bis）在催化劑 （AP）和加速劑N,N,N,N-四甲基乙二胺 （TEMEM）的作用下，聚合而成的三維網(wǎng)狀結構。電泳槽的上槽接電源 極，下槽接 極。17、卵磷脂又稱 磷

5、脂酰膽堿 ，是 甘油磷脂 的一種。三、選擇1、鹽析法沉淀蛋白質的原理 ( C ) A 與蛋白質結合成不溶性蛋白鹽 B 次級鍵斷裂蛋白質的構象改變 C 中和電荷，破壞水化膜 D 調節(jié)蛋白質溶液的等電點2、以下哪項不是酶的特性 （ D ） A 酶是生物催化劑，催化效率極高 B 易受Ph，溫度等外界因素的影響 C 能加速化學反應但不改變反應平衡點 D 有高度特異性3、RNA和DNA的最大紫外吸收值是在 （ B ） A 280nm B 260nm C 510nm D 620nm4、凱氏定氮法使用的混合催化劑硫酸鉀-硫酸銅配比為 （ C ） A 1:3 B 5:1 C 3:1 D 1:15、下列關于維生

6、素C結構和性質的敘述哪一項是錯誤的 （ B ） A 維生素C是含六個碳原子骨架的化合物 B 維生素C具有酸性是因為-COOH釋放質子 C 還原性維生素C為烯醇式，而氧化性維生素C為酮式 D還原性維生素C的元素組成C:H:O=6:8:66、下列哪條對蛋白質變性的描述是正確（ C ）A蛋白質變性后溶解度增加 B蛋白質變性后理化性質不變C 蛋白質變性后喪失原有的生物活性 D蛋白質變性后導致分子量的下降7、下列哪條對蛋白質敘述的描述是正確（ A ）A蛋白質分子的凈電荷為零時的PH是它的等電點B通常蛋白質的溶解度在等電點時最大C大多數(shù)蛋白質在飽和硫酸銨中溶解度增大D由于蛋白質在等電點時溶解度大，所以一般

7、沉淀蛋白質時遠離等電點8、關于酶的抑制劑的敘述正確的是（ C ）A酶的抑制劑中一部分是酶的變性劑 B酶的抑制劑只與活性中心上的基團結合C酶的抑制劑均能使反應速度下降 D酶的抑制劑一般是大分子物質四判斷1、變性的蛋白質易形成沉淀，而沉淀的蛋白質都發(fā)生了變性。 ( × )2、RNA與10%硫酸共熱所得水解液（2ml）氨水（2ml）5%硝酸銀（1ml）混合靜置，可觀察到黑色嘌呤堿的銀化物絮狀沉淀。 ( × )3、 氧化性2,6-二氯酚腈酚鈉在酸性溶液中呈藍色，在中性或堿性溶液中呈紅色 ( × )4、比色皿由兩個面組成即透光面和玻璃面，在使用時要將透光面對準光路，用自來水

8、和間蒸餾水沖洗干凈便可使用 ( × )5、唾液淀粉酶的最適PH為8.0 ( × )6、蛋白質在等電點是溶解度最大 ( × )7、凱氏定氮法中加硫酸鉀可提高硫酸的沸點使溶液沸點由290提高到400 ( )8、氯化鈉濃度為1%時可激活唾液淀粉酶的活力 ( )9、蛋白質變性后，其相對分子質量變小 ( × )10. 用稀堿法提取RNA時應注意掌握溫度，避免在20 70 之間停留過長 ( )五、簡答1、什么是蛋白質的變性作用，哪些因素可引起蛋白質變性？答：蛋白質在某些物理和化學因素作用下其特定的空間構象被改變， 從而導致其理化性質的改變 和生物活性的喪失 能使蛋白

9、質變性的化學方法有加強酸、強堿、重金屬鹽、尿素、 乙醇、丙酮等；能使蛋白質變性的物理方法有加熱(高溫)、紫外線及 X 射線照射、 超聲波、劇烈振蕩或攪拌等。2、什么是蛋白質的沉淀作用，哪些因素可引起蛋白質沉淀？變性與沉淀的關系答：蛋白質的沉淀: 由于外界條件改變,蛋白質水化膜被除去且其電荷被中和時,蛋白質凝聚成團下沉,但其結構未變；水溶液中的蛋白質分子由于表面形成水化層和雙電層從而形成穩(wěn)定的親水膠體顆粒，在一定的理化因素影響下蛋白質顆粒因失去電荷和脫水而沉淀。這些因素包括溶液的酸堿度、鹽溶液的濃度、溫度、重金屬離子以及有機溶劑等。變性蛋白質不一定沉淀，沉淀的蛋白質不一定變性。沉淀時蛋白質可能仍

10、然保持天然構像，而變性是蛋白質的高級結構被破壞失去活性。3、.什么是鹽析？鹽析會引起蛋白質的變性嗎？鹽析時一般加什么試劑？答：鹽析是指當溶液中的中性鹽持續(xù)增加時，蛋白質的溶解度下降，當中性鹽的濃度達到一定程度的時候，蛋白質從溶液 析出的現(xiàn)象。鹽析不會引起蛋白質的變性，因為蛋白質的結構并未發(fā)生改變，去掉引起鹽析的因素蛋白質仍能溶解;一般用飽和硫酸銨溶液進行鹽析。4.雞蛋清為何可做鉛汞中毒的解毒劑？答：鉛和汞是重金屬，會使蛋白質變性，由于重金屬離子能與蛋白質中帶負電基團如-COOH等作用，生成難容重金屬的蛋白質鹽，減少機體組織對重金屬的吸收，進而減輕毒性5、簡述常量凱氏定氮法的實驗原理（含化學反應

11、方程式）？為什么一些不法商人要在蛋白質制品中加入三聚氰胺？答：在有催化劑的條件下， 用濃硫酸消化樣品將有機氮都轉變成無機銨鹽， 然后在堿性條件下將 銨鹽轉化為氨，隨水蒸氣餾出并為過量的酸液吸收，再以標準堿滴定，就可計算出樣品中的氮量。機物中的胺根在強熱和 CuSO4，濃 H2SO4 作用下，硝化生成 （NH4）2SO4 反應式為： 2NH2+H2SO4+2H=(NH4)2SO4 （其中 CuSO4 做催化劑） 2.在凱氏定氮器中與堿作用，通過蒸餾釋放出 NH3 ，收集于 H3BO3 溶液中 (NH4)2SO4+2NaOH=2NH3+2H2O+Na2SO4 2NH3+4H3BO3=(NH4)2B

12、4O7+5H2O 用已知濃度的 H2SO4（或 HCI）標準溶液滴定，根據(jù) HCI 消耗的量計算出氮 的含量，然后乘以相應的換算因子，既得蛋白質的含量 反應式為：(NH4)2B4O7+H2SO4+5H2O=(NH4)2SO4+4H3BO3 (NH4)2B4O7+2HCl+5H2O=2NH4Cl+4H3BO36、酶和一般催化劑有何共性，又有什么區(qū)別答：共性：都具有催化作用  區(qū)別：特性：高效性，專一性，調節(jié)性（高溫，低溫可是酶失去活性）7、舉例說明酶的五點特性（結合實驗內(nèi)容舉例）答：1、 高效性 用過氧化氫酶催化 H2O2 水解比用 Fe 快很多倍 2、專一性 淀粉酶只能水解

13、淀粉不能水解蔗糖 3、多樣性 4、溫和性 5、活性可調節(jié)性在 37 度時淀粉酶催化效率很高 70 度時很低易變性 大多數(shù)酶是蛋白質，因而會被高溫、酸、強堿等破壞8、什么是抑制劑？什么是變性劑？兩者區(qū)別是什么？答：凡是能使酶活性降低而不使酶失活變性的物質成為抑制劑；凡是能引起蛋白質變性失活的物質叫變性劑。抑制劑只是抑制蛋白質的特性而變性劑則破環(huán)蛋白質的結構。9.2，6二氯酚靛酚法測定維生素C含量的基本原理答：氧化型2,6-二氯酚靛酚在酸性溶液中呈粉紅色，在中性或堿性溶液中呈藍色，還原型2,6-二氯酚靛酚無色。當用此染料滴定含有Vc的酸性溶液時，在Vc未全部氧化前，滴下的染料立即被還原成無色；一旦

14、溶淀中的Vc全部被氧化時，則滴下的染料立即使溶液顯示粉紅色，此時即為滴定終點，表示溶液中的Vc剛剛被氧化完全。因此，從滴定時2,6一二氯酚靛酚標準液的消耗量，可以計算出被檢物質中Vc的含量。10、在過氧化物酶同工酶聚丙烯酰胺凝膠電泳實驗中的不連續(xù)性表現(xiàn)在哪些方面？顯色原理是什么？答：不連續(xù)性表現(xiàn)在：1、凝膠板由上、下兩層膠組成，兩層凝膠的孔徑不同。2、緩沖液離子組成及各層凝膠的Ph不同。3、在電場中形成不連續(xù)的電位梯度。顯色原理：根據(jù)酶的生物化學反應，通過染色方法顯示出酶的不同區(qū)帶。過氧化物酶能催化過氧化氫使聯(lián)苯胺氧化成藍色或棕色產(chǎn)物，據(jù)此即可將該酶在凝膠中顯色定位。11、含氮量的計算12、vc含量的計算抗壞血酸含量（mg/100