淺談腫瘤標(biāo)志物

1、淺談腫瘤標(biāo)志物淺談腫瘤標(biāo)志物黃慧瑾2016年5月19日腫瘤標(biāo)志物（腫瘤標(biāo)志物（tumor markers，TM) 腫瘤標(biāo)志物是指在腫瘤發(fā)生和增殖的過(guò)程中，由腫瘤細(xì)胞合成、釋放或者是機(jī)體對(duì)腫瘤細(xì)胞反應(yīng)而產(chǎn)生的一類物質(zhì)，這些物質(zhì)在血液、體液及組織中可檢測(cè)到，達(dá)到一定的水平時(shí)能提示某些腫瘤的存在。 腫瘤標(biāo)志物高與查到癌細(xì)胞是兩回事，也不一定腫瘤標(biāo)志物高與查到癌細(xì)胞是兩回事，也不一定是代表患有腫瘤！是代表患有腫瘤！血清腫瘤標(biāo)志物分類血清腫瘤標(biāo)志物分類 一、為什么要查腫瘤標(biāo)記物？一、為什么要查腫瘤標(biāo)記物？ 我們知道，早期診斷是治愈腫瘤的關(guān)鍵；而有些腫瘤標(biāo)記物的升高往往早于臨床癥狀的出現(xiàn)，因此腫瘤標(biāo)記物有

2、助于早期發(fā)現(xiàn)腫瘤跡象，早診斷、早治療，從而提高療效。 比如，我們國(guó)家70年代以后在上海等地，通過(guò)對(duì)大量人群的甲胎蛋白普查，曾檢出不少肝癌特別是小肝癌患者，使很多病人得到了及時(shí)手術(shù)切除的機(jī)會(huì)。二、腫瘤標(biāo)記物還能用于以下方面二、腫瘤標(biāo)記物還能用于以下方面 出現(xiàn)腫瘤癥狀或可疑腫物后的鑒別診斷 腫瘤生物特點(diǎn)和疾病階段的判斷 腫瘤治療后的療效觀察和判斷預(yù)后 提示腫瘤的復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移腫瘤指標(biāo)升高是不是肯定就有腫瘤了？腫瘤指標(biāo)升高是不是肯定就有腫瘤了？ 答案是不一定。 腫瘤標(biāo)志物不僅存在于惡性腫瘤中，也存在于良性腫瘤、胚胎組織、甚至正常組織中； 腫瘤的診斷不能單獨(dú)依靠腫瘤標(biāo)志物的檢查，需要由臨床檢查、影像檢查、

3、內(nèi)鏡檢查或手術(shù)探查等綜合判斷，而病理診斷是腫瘤診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”腫瘤標(biāo)記物篩查結(jié)果判讀腫瘤標(biāo)記物篩查結(jié)果判讀 腫瘤標(biāo)記物檢查腫瘤標(biāo)記物檢查陰性陰性： 患相關(guān)惡性腫瘤的概率相對(duì)較低； 如有家族史、癌前病變或有癥狀，仍需定期復(fù)查,結(jié)合其他檢查； 腫瘤標(biāo)記物檢查腫瘤標(biāo)記物檢查陽(yáng)性陽(yáng)性： 檢測(cè)可能有假陽(yáng)性或患良性疾病； 優(yōu)先考慮復(fù)檢,復(fù)檢仍陽(yáng)性者進(jìn)一步檢查； 指標(biāo)輕度升高，不要輕下結(jié)論，持續(xù)觀察腫瘤標(biāo)志物的動(dòng)態(tài)變化，如進(jìn)行性升高，患惡性腫瘤的概率比較高； 中重度升高或多項(xiàng)指標(biāo)持續(xù)升高，提示腫瘤發(fā)生的可能性很高，必須盡快做醫(yī)學(xué)影像學(xué)和細(xì)胞病理學(xué)等檢查； 不同醫(yī)院檢驗(yàn)科儀器、試劑各不相同，參考值不一定一樣，

4、因此，不能隨意比較不同醫(yī)院測(cè)量值的高低。除了惡性腫瘤，引起腫瘤標(biāo)記物升除了惡性腫瘤，引起腫瘤標(biāo)記物升高的其他因素包括：高的其他因素包括： 良性疾病良性疾病，如炎癥性疾?。焊闻K良性疾病時(shí)，AFP、CA19-9、CEA會(huì)升高；腎功能衰竭時(shí)2-微球蛋白及CA15-3、CA19-9、CEA和PSA會(huì)升高；風(fēng)濕病時(shí)CA19-9濃度可增高； 生理變化生理變化：妊娠時(shí)AFP、CA125、HCG會(huì)升高； 不良習(xí)慣不良習(xí)慣：吸煙、酗酒； 檢查引起檢查引起：屢次進(jìn)行直腸指檢后，PSA值可升高； 服用某些藥物服用某些藥物； 飼養(yǎng)寵物飼養(yǎng)寵物； 此外，抽血過(guò)程中的污染、抽血引起的紅細(xì)胞破裂、標(biāo)本保存不當(dāng)、試劑差異及檢

5、測(cè)欠規(guī)范等因素也會(huì)干擾檢查結(jié)果。腫瘤標(biāo)志物升高了，可不可以明確腫瘤標(biāo)志物升高了，可不可以明確是哪個(gè)部位的腫瘤？是哪個(gè)部位的腫瘤？ 有時(shí)可以，但多數(shù)不能單憑借腫瘤標(biāo)記物來(lái)明確，還需要有時(shí)可以，但多數(shù)不能單憑借腫瘤標(biāo)記物來(lái)明確，還需要結(jié)合其他檢查。結(jié)合其他檢查。 一種腫瘤標(biāo)記物往往與多種惡性腫瘤有關(guān)，以下是一些常見的腫瘤標(biāo)記物及其所提示可能有腫瘤發(fā)生的臟器： CA19-9 胰腺、胃腸道和肝膽 CA15-3 乳腺、肺、卵巢、肝 CA242 結(jié)直腸、胰腺、卵巢 CA72-4 胃、卵巢、胰腺、乳腺 CA125 卵巢、子宮、胰腺、肝、肺 CA50 胰腺、乳腺、肺、胃腸道和肝膽常見腫瘤的標(biāo)志物檢測(cè)常見腫瘤的

6、標(biāo)志物檢測(cè) ADVIA Centaur XP全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)檢測(cè)原全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)檢測(cè)原理理經(jīng)典直接化學(xué)發(fā)光方法經(jīng)典直接化學(xué)發(fā)光方法 吖啶酯(AE)為放光劑 采用微磁顆粒分離 兩種結(jié)合模式：競(jìng)爭(zhēng)法夾心法免疫測(cè)定免疫測(cè)定 抗體 抗原 示蹤/發(fā)光劑：吖啶酯 分離方法：微磁顆粒分離 檢測(cè)裝置抗原抗體特意專一結(jié)合是檢測(cè)的抗原抗體特意專一結(jié)合是檢測(cè)的基礎(chǔ)基礎(chǔ)抗原抗原抗體抗體結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合位點(diǎn)發(fā)光劑是檢測(cè)的技術(shù)核心發(fā)光劑是檢測(cè)的技術(shù)核心AE抗原抗原抗體抗體結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合位點(diǎn)吖啶酯簡(jiǎn)介吖啶酯簡(jiǎn)介提升擴(kuò)散速率最大程度避免結(jié)合位點(diǎn)的遮蔽提高分析靈敏度堿性磷酸酶哎啶酯 一秒鐘高強(qiáng)度的光釋放使報(bào)告結(jié)果更快光

7、釋放光釋放(RLUs)時(shí)間時(shí)間 (妙妙)12吖啶酯簡(jiǎn)介吖啶酯簡(jiǎn)介哎啶酯直接化學(xué)發(fā)光法的優(yōu)點(diǎn)哎啶酯直接化學(xué)發(fā)光法的優(yōu)點(diǎn) 無(wú)需額外的信號(hào)放大或底物無(wú)需額外的信號(hào)放大或底物 光的釋放快速光的釋放快速 對(duì)溫度和對(duì)溫度和pH值的影響不敏感值的影響不敏感 背景干擾最小背景干擾最小微磁顆粒微磁顆粒分離技術(shù)分離技術(shù) 氧化鐵顆粒被吸引至磁場(chǎng)區(qū) 與抗原或抗體發(fā)生共價(jià)結(jié)合微磁顆粒(PMP)抗體 用于分離結(jié)合與未結(jié)合的反應(yīng)物磁場(chǎng)未結(jié)合的AE微磁顆粒分離技術(shù)微磁顆粒分離技術(shù)檢測(cè)原理的反應(yīng)模式檢測(cè)原理的反應(yīng)模式 夾心法 競(jìng)爭(zhēng)法 抗體捕獲模式夾心法夾心法 步驟步驟 1哎啶酯哎啶酯 (AE)抗體抗體樣品中的分析樣品中的分析物

8、特異性抗原物特異性抗原其它顆粒其它顆粒PMP-抗體抗體-抗原抗原-抗體抗體AE復(fù)合物復(fù)合物加入與特異性抗體結(jié)合的微磁顆粒PMP，孵育，結(jié)合抗原的PMP再與AE-標(biāo)記抗體結(jié)合夾心法夾心法 步驟步驟 2MagnetPMP-抗體抗體-抗原抗原-抗體抗體AE復(fù)合物復(fù)合物比色杯比色杯夾心法夾心法 步驟步驟 3樣品濃度樣品濃度光釋放光釋放(RLUs)加入酸堿試劑啟動(dòng)化學(xué)發(fā)光反應(yīng)計(jì)算濃度夾心法夾心法 步驟步驟 4微磁顆粒微磁顆粒(PMP)抗體抗體樣品抗原樣品抗原AE- 標(biāo)記抗原標(biāo)記抗原AE-標(biāo)記抗原與樣品抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合與PMP共價(jià)結(jié)合的有限的抗體結(jié)合位點(diǎn) 磁場(chǎng)磁場(chǎng)PMP- 抗體抗體- 抗原抗原復(fù)合物復(fù)合物PM

9、P- 抗體抗體- 抗原抗原 AE復(fù)合物復(fù)合物孵育后將反應(yīng)混合物置于磁場(chǎng)下，分離并除去未結(jié)合的AE樣品濃度樣品濃度光釋放光釋放(RLUs)加入酸堿啟動(dòng)化學(xué)發(fā)光反應(yīng)計(jì)算濃度AE-標(biāo)記抗體標(biāo)記抗體PMP- 標(biāo)記抗原標(biāo)記抗原樣品中的分析樣品中的分析物特異性抗原物特異性抗原結(jié)合抗原的PMP與樣品抗原競(jìng)爭(zhēng)AE-標(biāo)記抗體上有限的抗原結(jié)合位點(diǎn) 磁場(chǎng)磁場(chǎng)PMP-抗原抗原-抗體抗體AE復(fù)合物復(fù)合物孵育后將反應(yīng)混合物置于磁場(chǎng)下，分離并除去未結(jié)合的AE樣品濃度樣品濃度光釋放光釋放(RLUs)加入酸堿試劑啟動(dòng)化學(xué)發(fā)光反應(yīng)計(jì)算濃度競(jìng)爭(zhēng)法競(jìng)爭(zhēng)法夾心法夾心法樣品濃度樣品濃度樣品濃度樣品濃度光釋放光釋放(RLUs)光釋放光釋放(RLUs)抗體捕獲模式抗體捕獲模式 分析物是樣品中含有的抗體 采用一種直接針對(duì)樣品中抗體的特異性抗體抗體捕獲模式抗體捕獲模式 結(jié)合有抗人類IgM特異性抗體的微磁顆粒（PMP）被加入到樣品中 人類IgM抗體與PMP上結(jié)合的抗人類IgM抗體進(jìn)行結(jié)合 樣品中的抗體通過(guò)磁場(chǎng)作用與可能造成干擾的其它物質(zhì)進(jìn)行分離抗體捕獲模式抗體捕獲模式 加入對(duì)樣品