高效液相色譜法同時(shí)測定染發(fā)劑中9種氧化型染料

1、染發(fā)劑是一類含有染料的化妝品。根據(jù)其染色后的牢固程度，染發(fā)劑可分為暫時(shí)性、半永久性和永久性三類。其中永久性染發(fā)劑染發(fā)原料又可分為氧化染料、還原染料和仿天然黑素染料。氧化染料是合成染料中最早用于毛發(fā)染色的，也是目前應(yīng)用最廣泛的持久性染發(fā)劑原料。氧化型染發(fā)劑以其染色效果好、色調(diào)變化寬、維持時(shí)間長等諸多優(yōu)點(diǎn)而成為最受歡迎的染發(fā)劑。但氧化型染發(fā)劑主要由氧化型染料和氧化劑組成。染發(fā)劑中的染料成分多屬于芳香胺類化合物，芳香胺中有很多物質(zhì)具有致癌性，所以染發(fā)劑的安全性一直受到人們的極大關(guān)注。由染發(fā)劑引起的過敏反應(yīng)非常普遍，長期使用還可能致畸、致突變、致癌及引起內(nèi)分泌效應(yīng)等。目前對染發(fā)劑中氧化型染料的檢測方法

2、主要包括氣相色譜法、氣質(zhì)聯(lián)用法和液相色譜法。為了加強(qiáng)對該類產(chǎn)品中氧化型染料的監(jiān)管，中華人民共和國衛(wèi)生部頒布的化妝品衛(wèi)生規(guī)范（2007年版明確規(guī)定了93種暫時(shí)允許使用的染發(fā)劑，并規(guī)定了限量要求。文章在相關(guān)文獻(xiàn)及化妝品衛(wèi)生規(guī)范（2007年版方法的基礎(chǔ)上，建立了一種高效液相色譜同時(shí)檢測染發(fā)劑中9種氧化型染料的方法。該方法前處理簡單、快捷，檢測靈敏,有效地提高了檢測效率。1.1.1 試劑對苯二胺、對氨基苯酚、間苯二胺、對苯二酚、甲苯-2,5二胺硫酸鹽、問氨基苯酚、鄰苯二胺、間苯二酚、對甲氨基苯酚硫酸鹽均為分析純；乙月青（色譜純;超純水,甲醇（分析純，其他試劑除特別標(biāo)注外均為分析純。1.1.2 儀器Wa

3、tersAlliance2695HPLC高效液相色譜儀（配紫外檢測器，美國沃特世公司;AvantiJ-E冷凍高速離心機(jī)，美國貝克曼公司；Milli-Q超純水純化系統(tǒng)，美國Millipore公司;分析天平，德國賽多利斯公司；渦旋混合器；超聲波振蕩器。1.2.1標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制準(zhǔn)確稱取對苯二胺等9種氧化型染料樣品各0.25g各加入0.1g亞硫酸鈉（精確至0.01g,其中對苯二胺、對氨基苯酚、間苯二胺、對苯二酚、問氨基苯酚、鄰苯二胺、間苯二酚等7種氧化型染料樣品加入甲醇使之溶解，并在100mL容量瓶中定容至刻度；甲苯-2,5-二胺硫酸鹽和對甲氨基苯酚123451實(shí)驗(yàn)部分1.1 試劑與儀器1.2 實(shí)驗(yàn)方

4、法摘要:關(guān)鍵詞：中圖分類號(hào)：文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：文章編號(hào):文章建立了染發(fā)劑中9種氧化型染料的高效液相色譜檢測方法。樣品經(jīng)甲醇提取、離心和過濾后，經(jīng)高效液相色譜分離檢測。方法對不同氧化型染料的檢測限低于40ug/g;9種氧化型染料空白樣品加標(biāo)回收率為72.7%108.0%相對標(biāo)準(zhǔn)偏差不大于3%,9種氧化型染料在0.050mg/mL2mg/mL濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，線性回歸系數(shù)r土勻大于0.99。高效液相色譜法；氧化型染料；染發(fā)劑doi:10.3696/j.issn.1007-550X.2010.04.001O657.72A1007-550X（201004-0032-03高效液相色譜法同時(shí)測定染發(fā)劑

5、中9種氧化型染料黃紅霞（福建省中心檢驗(yàn)所，福建福州350002;國家加工食品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心，福建福州350002收稿日期：作者簡介:2010-03-05黃紅霞（1965-,女，高級(jí)工程師，研究方向：食品安全分析。黃紅霞:高效液相色譜法同時(shí)測定染發(fā)劑中9種氧化型染料福隹軒加領(lǐng)I煽加硫酸鹽用水溶解并定容至刻度。1.2.2 樣品提取稱取樣品于50ml具塞閉塞管，加入1ml2%亞硫酸鈉、25ml甲醇，渦旋振蕩30s,再加入15ml甲醇，混勻，超聲提取15min,用甲醇定容至刻度，充分混勻后，靜置，上清液經(jīng)0.45仙mPTFEg膜后上機(jī)測試。1.2.3 液相色譜條件色譜柱為XBC18柱（5小小4.61

6、50柱溫：35C;流動(dòng)相:A為純乙月青,B為三乙醇胺磷酸緩沖溶液（準(zhǔn)確移取10.0mL三乙醇胺溶解于1L水中，用HPO調(diào)節(jié)pH值8.5，經(jīng)過0.45濾膜過濾。洗脫程序?yàn)樘荻认疵摚ㄒ姳?。流速1mL/min;進(jìn)樣量5L參考相關(guān)文獻(xiàn)，同時(shí)通過紫外分光光度計(jì)掃描200600nm發(fā)現(xiàn)9種氧化型染料在280.0nm處均具有較大吸收，因此實(shí)驗(yàn)選擇280nm作為檢測波長對染發(fā)劑中9種氧化型染料進(jìn)行檢測。通過化學(xué)結(jié)構(gòu)的分析，9種氧化型染料可以采用C18色譜柱、C8柱或苯基柱分離。實(shí)驗(yàn)采用C18柱對9種染發(fā)劑標(biāo)準(zhǔn)品及其空白加標(biāo)樣品進(jìn)行分析，獲得良好的分離，具有較好的峰型。并且比較了不同流動(dòng)相組成、梯度洗脫條件及

7、不同進(jìn)樣體積對色譜峰分離及峰型的影響。實(shí)驗(yàn)采用乙月青-三乙醇胺磷酸緩沖溶液（pH8.5作為流動(dòng)相。并通過調(diào)節(jié)不同流動(dòng)相比例及洗脫程序（見表1,獲得較好的色譜分離。同時(shí)試驗(yàn)表明進(jìn)樣量5仙L可獲得較好的峰型和色譜峰分離效果，色譜峰達(dá)到基線分離。而隨著進(jìn)樣體積的增加色譜峰展寬加大，色譜峰分離度降低。（見圖1實(shí)驗(yàn)比較了不同極性提取溶劑（包括水、甲醇、乙醇和95%乙醇對染發(fā)劑中9種氧化型染料的提取效果。資料表明，對苯二胺、對氨基苯酚、間苯二胺、對苯二酚甲苯、間氨基苯酚、鄰苯二胺、間苯二酚在極性溶劑中有較大溶解性，而2,5二胺硫酸鹽、對甲氨基苯酚硫酸鹽易溶于水，同時(shí)甲醇對上述氧化型染料的溶解性明顯強(qiáng)于乙醇

8、，且色譜峰型較好，無明顯拖尾。因此在試驗(yàn)過程中我們通過甲醇溶解對苯二胺、對氨基苯酚、間苯二胺、對苯二酚甲苯、間氨基苯酚、鄰苯二胺、間苯二酚純水溶解2,5二胺硫酸鹽、對甲氨基苯酚硫酸鹽。并且鑒于氧化型染料易氧化，不穩(wěn)定等特點(diǎn)，在配置標(biāo)準(zhǔn)溶液和提取樣品時(shí)均加入一定量的亞硫酸鈉，減緩目標(biāo)組分的氧化。實(shí)驗(yàn)還比較了不同時(shí)間（5、10、15、30min對超聲提取效果的影響，實(shí)驗(yàn)表明超聲時(shí)間為15min時(shí)獲得滿意的提取效果。Xmm;pm342結(jié)果與討論2.1液相色譜條件的選擇2.2樣品的提取Time（min061720rate20.125Flow111111A%999990659999B%11103611表

9、1液相色譜測定染發(fā)劑中9種氧化型染料的梯度洗脫條件圖1空白樣品（A、標(biāo)準(zhǔn)品（B、空白加標(biāo)樣品（B中9種氧化型染料的液相色譜圖（1:對苯二胺2對氨基苯酚；3:間苯二胺;4:對苯二酚;5:甲苯-2,5-二胺硫酸鹽;6:問氨基苯酚；7:鄰苯二胺;8:間苯二酚;9:對甲氨基苯酚丁|Papers福建輕紡費(fèi)|睇口購2.3分析方法確證2.3.1 選擇性實(shí)驗(yàn)通過空白染發(fā)劑樣品及9種氧化型染料標(biāo)準(zhǔn)品及實(shí)際樣品加標(biāo)實(shí)驗(yàn)表明，在9種氧化型染料標(biāo)準(zhǔn)品色譜保留時(shí)間無明顯干擾峰存在，該分析檢測方法無明顯干擾。2.3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線與檢測限配制不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，作出9種氧化型染料的線性方程（見表2,其線性范圍為0.050m

10、g/mL至I2mg/mL。按信噪比S/N為3計(jì)，方法中目標(biāo)組分的檢測限不高于40ng/g。2.3.3 回收率取空白染發(fā)劑樣品進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)添加實(shí)驗(yàn)，每個(gè)添加樣做3個(gè)平行試驗(yàn)，樣品回收率為72.7%108.0%相對標(biāo)準(zhǔn)偏差不大于3%。具體試驗(yàn)結(jié)果見表3。文章建立了染發(fā)劑中9種氧化型染料含量的液相色譜同時(shí)檢測方法，可有效滿足檢驗(yàn)部門、衛(wèi)生質(zhì)量檢驗(yàn)部門對染發(fā)劑中氧化型染料的快速檢測的需要，同時(shí)可應(yīng)用于相關(guān)化妝產(chǎn)品的檢測。為嚴(yán)格質(zhì)量管理和監(jiān)控提供必要的技術(shù)支持，提高產(chǎn)品質(zhì)量水平，保障人民身體健康。1周樺,張國棋，高巖，劉洪英，龍峰.氣相色譜法測定氧化型染發(fā)劑中化學(xué)物質(zhì)J.中國公共衛(wèi)生，2003,19,996

11、.2李海濤，吳平谷.氣相色譜法測定氧化型染發(fā)劑中染料J.中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志2002,12:435.3朱英,楊艷偉，李靜.氣相色譜-質(zhì)譜法同時(shí)測定氧化型染發(fā)劑中的多種染料中間體J.色譜,2005,23:566.4王駿,胡俊明.高效液相色譜法測定化妝品中的染料J.色譜,1999,17:486.5化妝品衛(wèi)生規(guī)范S.北京:中華人民共和國衛(wèi)生部,2007.3結(jié)論參考文獻(xiàn)：序號(hào)123466789目標(biāo)組份對苯二胺對氨基苯酚間苯二胺對苯二酚甲苯2,5二胺硫酸鹽間氨基苯酚鄰苯二胺間苯二酚對甲氨基苯酚硫酸鹽線性方程Y=1.73e+003X+2.12e+003Y=2.71e+003X-1.23e+003Y=3.25e

12、+003X+2.03e+004Y=4.63e+003X+2.90e+004Y=9.35e+002X+4.55e+003Y=4.65e+003X+2.90e+004Y=5.42e+003X+1.47e+004Y=4.49e+003X+1.82e+004Y=1.42e+003X+1.13e+004r0.9980.9970.9980.9980.9980.9990.9990.9970.9982表29種氧化型染料的檢測線性方程及線性回歸系數(shù)表3染發(fā)劑中9種氧化型染料的加標(biāo)回收率和精密度在舁廳廳(n=31 2 3 4 5 6 7 8 9目標(biāo)組份對苯二胺對氨基苯酚間苯二胺對苯二酚甲苯2,5二胺硫酸鹽間氨基苯酚鄰苯二胺間苯二酚對甲氨基苯酚硫酸鹽回收率86.287.684.690.284.289.5108.098.684.4精密度3.01