202X版高考生物總復(fù)習(xí)考點(diǎn)加強(qiáng)課6課件蘇教版

1、重點(diǎn)題型1目標(biāo)微生物的篩選與鑒定1.分離微生物的原理與措施分離微生物的原理與措施（1）原理：自然環(huán)境中的微生物是混雜在一起的，因此分離獲得純培養(yǎng)物應(yīng)首先）原理：自然環(huán)境中的微生物是混雜在一起的，因此分離獲得純培養(yǎng)物應(yīng)首先采用的方法是將單個(gè)的細(xì)胞與其他細(xì)胞分離，再給細(xì)胞提供合適的營(yíng)養(yǎng)和條件，采用的方法是將單個(gè)的細(xì)胞與其他細(xì)胞分離，再給細(xì)胞提供合適的營(yíng)養(yǎng)和條件，使其生長(zhǎng)成為可見(jiàn)的群體。使其生長(zhǎng)成為可見(jiàn)的群體。（2）常用措施）常用措施接種過(guò)程中盡量使細(xì)胞分散開(kāi)來(lái)，如平板劃線法、稀釋涂布平板法。接種過(guò)程中盡量使細(xì)胞分散開(kāi)來(lái)，如平板劃線法、稀釋涂布平板法。運(yùn)用選擇培養(yǎng)基的作用特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中添加某種特定

2、的物質(zhì)，抑制不需要的微運(yùn)用選擇培養(yǎng)基的作用特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中添加某種特定的物質(zhì)，抑制不需要的微生物的生長(zhǎng)，促進(jìn)所需微生物的生長(zhǎng)。生物的生長(zhǎng)，促進(jìn)所需微生物的生長(zhǎng)。2.選擇培養(yǎng)基四種常見(jiàn)制備方法或?qū)嵗x擇培養(yǎng)基四種常見(jiàn)制備方法或?qū)嵗纠C【例證1】 （2017全國(guó)卷全國(guó)卷，37）某些土壤細(xì)菌可將尿素分解成某些土壤細(xì)菌可將尿素分解成CO2和和NH3，供植，供植物吸收和利用?；卮鹣铝袉?wèn)題：物吸收和利用。回答下列問(wèn)題：（1）有些細(xì)菌能分解尿素，有些細(xì)菌則不能，原因是前者能產(chǎn)生）有些細(xì)菌能分解尿素，有些細(xì)菌則不能，原因是前者能產(chǎn)生。能。能分解尿素的細(xì)菌不能以尿素的分解產(chǎn)物分解尿素的細(xì)菌不能以尿素的分解產(chǎn)物

3、CO2作為碳源，原因是作為碳源，原因是_，但可用，但可用葡萄糖作為碳源，進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是葡萄糖作為碳源，進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是_（答出兩點(diǎn)即可）。（答出兩點(diǎn)即可）。（2）為了篩選可分解尿素的細(xì)菌，在配制培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)選擇）為了篩選可分解尿素的細(xì)菌，在配制培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)選擇（填（填“尿素尿素”“NH4NO3”或或“尿素尿素NH4NO3”）作為氮源，不選擇其他兩組的原因是）作為氮源，不選擇其他兩組的原因是_。（3）用來(lái)篩選分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基含有）用來(lái)篩選分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和和Na2HPO4，其作用有，其作用有_（答出兩點(diǎn)即可）。（答出兩點(diǎn)即可）。解析解析（

4、1）只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作為氮源。能分解尿素）只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作為氮源。能分解尿素的細(xì)菌是一種分解者，屬于異養(yǎng)型生物，不能以尿素的分解產(chǎn)物的細(xì)菌是一種分解者，屬于異養(yǎng)型生物，不能以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源。能作為碳源。能分解尿素的細(xì)菌可以以葡萄糖作為碳源，進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是：一分解尿素的細(xì)菌可以以葡萄糖作為碳源，進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是：一方面可氧化分解為細(xì)胞生命活動(dòng)提供能量，另一方面其代謝中間產(chǎn)物可為多種有機(jī)方面可氧化分解為細(xì)胞生命活動(dòng)提供能量，另一方面其代謝中間產(chǎn)物可為多種有機(jī)物的合成提供原料。物的合成提供原料。（2

5、）為了篩選可分解尿素的細(xì)菌，在配制培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)選擇以尿素作為唯一氮源的）為了篩選可分解尿素的細(xì)菌，在配制培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)選擇以尿素作為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，而其他兩組都含有含氮物質(zhì)選擇培養(yǎng)基，而其他兩組都含有含氮物質(zhì)NH4NO3，能分解尿素的細(xì)菌和不能分解尿，能分解尿素的細(xì)菌和不能分解尿素的細(xì)菌都能利用素的細(xì)菌都能利用NH4NO3不能起到篩選作用。不能起到篩選作用。（3）用來(lái)篩選分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基含有）用來(lái)篩選分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和和Na2HPO4，其作用：，其作用：KH2PO4和和Na2HPO4構(gòu)成緩沖液，可維持培養(yǎng)基的構(gòu)成緩沖液，可維持培養(yǎng)基的pH相對(duì)穩(wěn)定；相對(duì)穩(wěn)定；KH2P

6、O4和和Na2HPO4能為微生能為微生物生長(zhǎng)提供無(wú)機(jī)鹽。物生長(zhǎng)提供無(wú)機(jī)鹽。答案答案（1）脲酶分解尿素的細(xì)菌是異養(yǎng)生物，不能利用）脲酶分解尿素的細(xì)菌是異養(yǎng)生物，不能利用CO2來(lái)合成有機(jī)物為細(xì)來(lái)合成有機(jī)物為細(xì)胞生命活動(dòng)提供能量，為其他有機(jī)物的合成提供原料（胞生命活動(dòng)提供能量，為其他有機(jī)物的合成提供原料（2） 尿素其他兩組都含尿素其他兩組都含有有NH4NO3，能分解尿素的細(xì)菌和不能分解尿素的細(xì)菌都能利用，能分解尿素的細(xì)菌和不能分解尿素的細(xì)菌都能利用NH4NO3，不能起到，不能起到篩選作用（篩選作用（3）為細(xì)菌生長(zhǎng)提供無(wú)機(jī)鹽離子，作為緩沖劑保持細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中）為細(xì)菌生長(zhǎng)提供無(wú)機(jī)鹽離子，作為緩沖劑保持細(xì)

7、胞生長(zhǎng)過(guò)程中pH穩(wěn)定穩(wěn)定【例證【例證2】 （2014全國(guó)卷全國(guó)卷）植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解。回答下列植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解。回答下列問(wèn)題。問(wèn)題。（1）分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由）分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由3種組分組成的復(fù)合種組分組成的復(fù)合酶，其中的葡萄糖苷酶可將酶，其中的葡萄糖苷酶可將分解成分解成。（2）在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅（）在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅（CR）時(shí)，）時(shí)，CR可與纖維素形成可與纖維素形成_色復(fù)合物。用含有色復(fù)合物。用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時(shí)，培養(yǎng)基上會(huì)的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時(shí)

8、，培養(yǎng)基上會(huì)出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的。（3）為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落，某同學(xué)設(shè)計(jì)了甲）為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落，某同學(xué)設(shè)計(jì)了甲、乙兩種培養(yǎng)基（成分見(jiàn)下表）：、乙兩種培養(yǎng)基（成分見(jiàn)下表）：注：注：“”表示有，表示有，“”表示無(wú)。表示無(wú)。據(jù)表判斷，培養(yǎng)基甲據(jù)表判斷，培養(yǎng)基甲（填（填“能能”或或“不能不能”）用于分離和鑒別纖維素分解菌，）用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是原因是；培養(yǎng)基乙；培養(yǎng)基乙（填（填“能能”或或“不能不能”）用于分離和）用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是鑒別纖維素分解菌，原因是_。酵母膏酵母膏無(wú)機(jī)鹽無(wú)機(jī)

9、鹽淀粉淀粉纖維素粉纖維素粉瓊脂瓊脂CR溶液溶液水水培養(yǎng)基甲培養(yǎng)基甲培養(yǎng)基乙培養(yǎng)基乙答案答案（1）纖維二糖葡萄糖（）纖維二糖葡萄糖（2）紅透明圈）紅透明圈（3）不能液體培養(yǎng)基不能用于分離單菌落不能培養(yǎng)基中沒(méi)有纖維素，不會(huì)形）不能液體培養(yǎng)基不能用于分離單菌落不能培養(yǎng)基中沒(méi)有纖維素，不會(huì)形成成CR纖維素紅色復(fù)合物，即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌纖維素紅色復(fù)合物，即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌1.（2019湖南、江西十四校聯(lián)考）湖南、江西十四校聯(lián)考）馬、牛羊的食物主要是草莖類(lèi)，其中還有大量的馬、牛羊的食物主要是草莖類(lèi)，其中還有大量的纖維素。它們胃內(nèi)的微生物，在幫助消化和利用植物纖維

10、素方面起了決定性的作纖維素。它們胃內(nèi)的微生物，在幫助消化和利用植物纖維素方面起了決定性的作用，土壤中也存在著分解纖維素的微生物。請(qǐng)根據(jù)所學(xué)的知識(shí)，回答下列問(wèn)題：用，土壤中也存在著分解纖維素的微生物。請(qǐng)根據(jù)所學(xué)的知識(shí)，回答下列問(wèn)題：（1）纖維素酶是一種復(fù)合酶，主要包括）纖維素酶是一種復(fù)合酶，主要包括、。（ 2 ） 在 培 養(yǎng) 基 中 進(jìn) 入 剛 果 紅 染 液 可 以 鑒 別 纖 維 素 分 解 菌 ， 其 原 因 是） 在 培 養(yǎng) 基 中 進(jìn) 入 剛 果 紅 染 液 可 以 鑒 別 纖 維 素 分 解 菌 ， 其 原 因 是_。（3）分離土壤中纖維素分解菌用到的方法是）分離土壤中纖維素分解菌用

11、到的方法是。稀釋倒平板法稀釋倒平板法涂布平板法涂布平板法單細(xì)胞挑取法單細(xì)胞挑取法選擇培養(yǎng)分離選擇培養(yǎng)分離A.B.C.D.（4）在微生物的分離與培養(yǎng)的過(guò)程中，為了防止雜菌的污染，需要進(jìn)行嚴(yán)格的無(wú)菌）在微生物的分離與培養(yǎng)的過(guò)程中，為了防止雜菌的污染，需要進(jìn)行嚴(yán)格的無(wú)菌操作，如接種環(huán)和接種針需要操作，如接種環(huán)和接種針需要，培養(yǎng)基需要，培養(yǎng)基需要等。等。（5）下表為鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基配方，請(qǐng)判斷該培養(yǎng)基為）下表為鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基配方，請(qǐng)判斷該培養(yǎng)基為培養(yǎng)基，培養(yǎng)基，酵母膏和土豆汁在實(shí)驗(yàn)中的作用是酵母膏和土豆汁在實(shí)驗(yàn)中的作用是_。鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基配方鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基配方CM

12、CNa510gKH2PO40.25g酵母膏酵母膏1g瓊脂瓊脂15g土豆汁土豆汁100mL將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1000mL。解析解析（1）纖維素酶包括）纖維素酶包括C1酶、酶、CX酶和葡萄糖苷酶。酶和葡萄糖苷酶。（2）剛果紅染液可以與纖維素結(jié)合形成紅色的復(fù)合物，纖維素分解菌產(chǎn)生的纖維素）剛果紅染液可以與纖維素結(jié)合形成紅色的復(fù)合物，纖維素分解菌產(chǎn)生的纖維素酶能夠?qū)⒗w維素分解為葡萄糖而使其菌落周?chē)霈F(xiàn)透明圈，所以在培養(yǎng)基中加入剛酶能夠?qū)⒗w維素分解為葡萄糖而使其菌落周?chē)霈F(xiàn)透明圈，所以在培養(yǎng)基中加入剛果紅染液可以鑒別纖維素分解菌。果紅染液可以鑒別纖維素分解菌

13、。（3）分離土壤中纖維素分解菌，先進(jìn)行選擇培養(yǎng)，增大纖維素分解菌的濃度，梯度）分離土壤中纖維素分解菌，先進(jìn)行選擇培養(yǎng)，增大纖維素分解菌的濃度，梯度稀釋?zhuān)坎计桨濉⑴囵B(yǎng)，單細(xì)胞挑取以獲得純培養(yǎng)，稀釋?zhuān)坎计桨?、培養(yǎng)，單細(xì)胞挑取以獲得純培養(yǎng)，正確；稀釋倒平板法是正確；稀釋倒平板法是先進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)缓蠓謩e取不同稀釋液少許，與已熔化并冷卻至先進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)缓蠓謩e取不同稀釋液少許，與已熔化并冷卻至50左右的瓊脂左右的瓊脂培養(yǎng)基混合、搖勻后，傾入滅菌的培養(yǎng)皿中，制成可能含菌的瓊脂平板，保溫一定培養(yǎng)基混合、搖勻后，傾入滅菌的培養(yǎng)皿中，制成可能含菌的瓊脂平板，保溫一定時(shí)間即可出現(xiàn)菌落，時(shí)間即可出現(xiàn)菌落，錯(cuò)

14、誤。錯(cuò)誤。（4）在微生物的分離與培養(yǎng)的過(guò)程中，接種環(huán)和接種針需要灼燒滅菌，培養(yǎng)基需要）在微生物的分離與培養(yǎng)的過(guò)程中，接種環(huán)和接種針需要灼燒滅菌，培養(yǎng)基需要高壓蒸汽滅菌。高壓蒸汽滅菌。（5）根據(jù)表格分析，該培養(yǎng)基中有瓊脂，因此為固體培養(yǎng)基；酵母膏和土豆汁在實(shí)）根據(jù)表格分析，該培養(yǎng)基中有瓊脂，因此為固體培養(yǎng)基；酵母膏和土豆汁在實(shí)驗(yàn)中的作用是為纖維素分解菌提供生長(zhǎng)因子。驗(yàn)中的作用是為纖維素分解菌提供生長(zhǎng)因子。答案答案（1）C1酶酶CX酶葡萄糖苷酶（酶葡萄糖苷酶（2）剛果紅染液可以與纖維素結(jié)合形成紅）剛果紅染液可以與纖維素結(jié)合形成紅色的復(fù)合物，纖維素分解菌產(chǎn)生的纖維素酶能夠?qū)⒗w維素分解為葡萄糖而使其菌

15、落色的復(fù)合物，纖維素分解菌產(chǎn)生的纖維素酶能夠?qū)⒗w維素分解為葡萄糖而使其菌落周?chē)霈F(xiàn)透明圈（周?chē)霈F(xiàn)透明圈（3）B（4）灼燒滅菌高壓蒸汽滅菌（）灼燒滅菌高壓蒸汽滅菌（5）固體提供生長(zhǎng)）固體提供生長(zhǎng)因子因子2.亞硝胺廣泛存在于化工類(lèi)廢水中，對(duì)環(huán)境有嚴(yán)重危害。某研究小組欲從處理廢水亞硝胺廣泛存在于化工類(lèi)廢水中，對(duì)環(huán)境有嚴(yán)重危害。某研究小組欲從處理廢水的活性污泥中分離純化亞硝胺降解高效菌株。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：的活性污泥中分離純化亞硝胺降解高效菌株。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）泡菜腌制過(guò)程中產(chǎn)生的）泡菜腌制過(guò)程中產(chǎn)生的在特定的條件下也會(huì)轉(zhuǎn)變成亞硝胺，對(duì)人體健在特定的條件下也會(huì)轉(zhuǎn)變成亞硝胺，對(duì)人體健康產(chǎn)生危害，所

16、以在泡菜腌制過(guò)程中，要注意控制腌制的康產(chǎn)生危害，所以在泡菜腌制過(guò)程中，要注意控制腌制的和食鹽的用量和食鹽的用量。（2）選擇培養(yǎng)時(shí)的培養(yǎng)基只能以）選擇培養(yǎng)時(shí)的培養(yǎng)基只能以作為唯一氮源，經(jīng)作為唯一氮源，經(jīng)滅菌后用于滅菌后用于富集亞硝胺降解菌。富集亞硝胺降解菌。（3）分離純化出）分離純化出3種亞硝胺降解高效菌株，為了比較種亞硝胺降解高效菌株，為了比較3種菌株的降解效率，將等量種菌株的降解效率，將等量的的3種菌株接種于富含亞硝胺的培養(yǎng)基，一組不接種作為空白對(duì)照，一段時(shí)間后測(cè)種菌株接種于富含亞硝胺的培養(yǎng)基，一組不接種作為空白對(duì)照，一段時(shí)間后測(cè)定定4組培養(yǎng)基中亞硝胺的組培養(yǎng)基中亞硝胺的。設(shè)置空白對(duì)照的目的

17、是。設(shè)置空白對(duì)照的目的是_。（4）在上述實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上研究亞硝胺降解高效菌株混合使用的降解效率，理論上）在上述實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上研究亞硝胺降解高效菌株混合使用的降解效率，理論上還需要設(shè)計(jì)還需要設(shè)計(jì)組實(shí)驗(yàn)。組實(shí)驗(yàn)。解析解析（1）泡菜腌制過(guò)程中產(chǎn)生的亞硝酸鹽在特定的條件下也會(huì)轉(zhuǎn)變成亞硝胺，所）泡菜腌制過(guò)程中產(chǎn)生的亞硝酸鹽在特定的條件下也會(huì)轉(zhuǎn)變成亞硝胺，所以在泡菜腌制過(guò)程中，要注意控制腌制的時(shí)間、溫度和食鹽的用量。以在泡菜腌制過(guò)程中，要注意控制腌制的時(shí)間、溫度和食鹽的用量。（2）培養(yǎng)基只能以亞硝胺作為唯一氮源，經(jīng)高壓蒸汽滅菌后用于富集亞硝胺降解菌）培養(yǎng)基只能以亞硝胺作為唯一氮源，經(jīng)高壓蒸汽滅菌后用于富集亞硝

18、胺降解菌。（3）亞硝胺菌株的降解效率，可根據(jù)反應(yīng)物的剩余量（即亞硝胺的剩余量）來(lái)判斷）亞硝胺菌株的降解效率，可根據(jù)反應(yīng)物的剩余量（即亞硝胺的剩余量）來(lái)判斷，設(shè)置空白對(duì)照的目的是排除亞硝胺自然降解對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，以保證本實(shí)驗(yàn)的，設(shè)置空白對(duì)照的目的是排除亞硝胺自然降解對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，以保證本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果是由菌株引起的。結(jié)果是由菌株引起的。（4）3種亞硝胺降解高效菌株，如研究亞硝胺降解高效菌株混合使用的降解效率，種亞硝胺降解高效菌株，如研究亞硝胺降解高效菌株混合使用的降解效率，可從可從3種亞硝胺中任取兩種，有種亞硝胺中任取兩種，有3種組合，種組合，3種亞硝胺混合種亞硝胺混合1種組合，因此理論上還需

19、種組合，因此理論上還需要設(shè)計(jì)要設(shè)計(jì)4組實(shí)驗(yàn)。組實(shí)驗(yàn)。答案答案（1）亞硝酸鹽時(shí)間、溫度（）亞硝酸鹽時(shí)間、溫度（2）亞硝胺高壓蒸汽（）亞硝胺高壓蒸汽（3）剩余量（含）剩余量（含量）排除亞硝胺自然降解對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，以保證本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果是由菌株引量）排除亞硝胺自然降解對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，以保證本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果是由菌株引起的（起的（4）4重點(diǎn)題型重點(diǎn)題型2微生物的分離與計(jì)數(shù)微生物的分離與計(jì)數(shù)微生物計(jì)數(shù)的方法專(zhuān)項(xiàng)歸納微生物計(jì)數(shù)的方法專(zhuān)項(xiàng)歸納1.間接計(jì)數(shù)法（也叫活菌計(jì)數(shù)法）間接計(jì)數(shù)法（也叫活菌計(jì)數(shù)法）常用的是稀釋涂布平板法。常用的是稀釋涂布平板法。（1）原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)

20、源于樣品）原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌，通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多稀釋液中的一個(gè)活菌，通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少個(gè)活菌。少個(gè)活菌。（2）操作：）操作：設(shè)置重復(fù)組，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力與準(zhǔn)確性。將待測(cè)樣品經(jīng)一系列設(shè)置重復(fù)組，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力與準(zhǔn)確性。將待測(cè)樣品經(jīng)一系列10倍倍稀釋?zhuān)x擇三個(gè)稀釋度的菌液，分別取稀釋?zhuān)x擇三個(gè)稀釋度的菌液，分別取0.1mL接種到已制備好的平板上，然后用無(wú)接種到已制備好的平板上，然后用無(wú)菌涂布器將菌液涂布于整個(gè)平板表面，放在適宜的溫度下培養(yǎng)，計(jì)算菌落數(shù)。為使菌涂布器將

21、菌液涂布于整個(gè)平板表面，放在適宜的溫度下培養(yǎng)，計(jì)算菌落數(shù)。為使結(jié)果接近真實(shí)值，可將同一稀釋度的樣液加到三個(gè)或三個(gè)以上的平板上，經(jīng)涂布、結(jié)果接近真實(shí)值，可將同一稀釋度的樣液加到三個(gè)或三個(gè)以上的平板上，經(jīng)涂布、培養(yǎng)，計(jì)算出菌落平均數(shù)。培養(yǎng)，計(jì)算出菌落平均數(shù)。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)為為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)為30300個(gè)的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，若設(shè)置的重復(fù)個(gè)的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，若設(shè)置的重復(fù)組中結(jié)果相差太遠(yuǎn)，意味著操作有誤，需重新實(shí)驗(yàn)。組中結(jié)果相差太遠(yuǎn)，意味著操作有誤，需重新實(shí)驗(yàn)。計(jì)算公式：每克樣品中的細(xì)菌數(shù)（計(jì)算公式：每克樣品中的細(xì)菌數(shù)（C/V）M，其中，其中C代表某一稀釋度下平板上代表某一稀

22、釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)，生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積（代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積（mL），），M代表稀釋倍代表稀釋倍數(shù)。數(shù)。提醒提醒此種方法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低。這是因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在此種方法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低。這是因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落。一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落。2.顯微鏡直接計(jì)數(shù)法顯微鏡直接計(jì)數(shù)法（1）原理：利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)算一定容積的）原理：利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量。樣品中微生物的數(shù)量。（2

23、）方法：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。）方法：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。（3）缺點(diǎn)：不能區(qū)分死菌與活菌。）缺點(diǎn)：不能區(qū)分死菌與活菌。（4）操作：將清潔干燥的血球計(jì)數(shù)板蓋上蓋玻片，再將稀釋的樣品滴在計(jì)數(shù)板）操作：將清潔干燥的血球計(jì)數(shù)板蓋上蓋玻片，再將稀釋的樣品滴在計(jì)數(shù)板上，稍等片刻，待細(xì)菌全部沉降到計(jì)數(shù)室底部再在顯微鏡下統(tǒng)計(jì)上，稍等片刻，待細(xì)菌全部沉降到計(jì)數(shù)室底部再在顯微鏡下統(tǒng)計(jì)45個(gè)中格中的個(gè)中格中的細(xì)菌數(shù)，并求出每個(gè)小格所含細(xì)菌的平均數(shù)，再按公式求出每毫升樣品中所含的細(xì)菌數(shù)，并求出每個(gè)小格所含細(xì)菌的平均數(shù)，再按公式求出每毫升樣品中所含的細(xì)菌數(shù)。細(xì)菌數(shù)。點(diǎn)悟：點(diǎn)悟：（1）計(jì)數(shù)板是一塊特制的載玻片，上面有一個(gè)特定面積（）計(jì)

24、數(shù)板是一塊特制的載玻片，上面有一個(gè)特定面積（1mm2）和高（）和高（0.1mm）的計(jì)數(shù)室，在）的計(jì)數(shù)室，在1mm2的面積里又被劃分成的面積里又被劃分成25個(gè)（或個(gè)（或16個(gè)）中格，每個(gè)中格個(gè)）中格，每個(gè)中格進(jìn)一步劃分成進(jìn)一步劃分成16個(gè)（或個(gè)（或25個(gè)）小格，但計(jì)數(shù)室都是由個(gè)）小格，但計(jì)數(shù)室都是由400個(gè)小格組成的。個(gè)小格組成的。（2）計(jì)算公式：每毫升原液所含細(xì)菌數(shù)每小格平均細(xì)菌數(shù)）計(jì)算公式：每毫升原液所含細(xì)菌數(shù)每小格平均細(xì)菌數(shù)40010000稀釋稀釋倍數(shù)。倍數(shù)。3.濾膜法濾膜法以測(cè)定飲用水中大腸桿菌的數(shù)目為例，將已知體積的水過(guò)濾后，將濾膜放于伊紅以測(cè)定飲用水中大腸桿菌的數(shù)目為例，將已知體積的

25、水過(guò)濾后，將濾膜放于伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上培養(yǎng)，在該培養(yǎng)基上，大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)黑色，可根據(jù)培養(yǎng)基美藍(lán)培養(yǎng)基上培養(yǎng)，在該培養(yǎng)基上，大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)黑色，可根據(jù)培養(yǎng)基上黑色菌落的數(shù)目，計(jì)算出水樣中大腸桿菌的數(shù)量。上黑色菌落的數(shù)目，計(jì)算出水樣中大腸桿菌的數(shù)量。【例證】【例證】 （2014全國(guó)卷全國(guó)卷，39）為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測(cè)定了為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測(cè)定了該河流水樣中的細(xì)菌含量，并進(jìn)行了細(xì)菌分離等工作?；卮鹣铝袉?wèn)題：該河流水樣中的細(xì)菌含量，并進(jìn)行了細(xì)菌分離等工作?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）該小組采用稀釋涂布平板法檢測(cè)水樣中細(xì)菌含量。在涂布接種前，隨機(jī)取若）該小組采用稀釋涂布

26、平板法檢測(cè)水樣中細(xì)菌含量。在涂布接種前，隨機(jī)取若干 滅 菌 后 的 空 白 平 板 先 行 培 養(yǎng) 了 一 段 時(shí) 間 ， 這 樣 做 的 目 的 是干 滅 菌 后 的 空 白 平 板 先 行 培 養(yǎng) 了 一 段 時(shí) 間 ， 這 樣 做 的 目 的 是_；然后，將；然后，將1mL水樣稀釋水樣稀釋100倍，在倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別接入個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為別為39、38和和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為。（2）該小組采用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌，操作時(shí)，

27、接種環(huán)通過(guò)）該小組采用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌，操作時(shí)，接種環(huán)通過(guò)滅菌滅菌。在第二次及以后的劃線時(shí)，總是從上一次劃線的末端開(kāi)始劃線。這樣做的目的是。在第二次及以后的劃線時(shí)，總是從上一次劃線的末端開(kāi)始劃線。這樣做的目的是_。（3）示意圖）示意圖A和和B中，中，表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。（4）該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng)，另一）該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng)，另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快。分部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培

28、養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中的含量，同時(shí)可使菌體與培養(yǎng)液充的含量，同時(shí)可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高分接觸，提高的利用率。的利用率。解析解析（1）在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)一段時(shí)間，檢測(cè)）在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)一段時(shí)間，檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格；每升水樣中的活菌數(shù)為：（培養(yǎng)基平板滅菌是否合格；每升水樣中的活菌數(shù)為：（393837）/338，再除，再除以以0.1乘以乘以100，得到，得到1毫升中的菌數(shù)，再乘以毫升中的菌數(shù)，再乘以1000就是就是1升中的菌數(shù)，故為升中的菌

29、數(shù)，故為3.8107。（2）用平板劃線法應(yīng)先將接種環(huán)灼燒滅菌再劃線。第二次及以后的劃線時(shí)，總是從）用平板劃線法應(yīng)先將接種環(huán)灼燒滅菌再劃線。第二次及以后的劃線時(shí)，總是從上一次劃線的末端開(kāi)始劃線，達(dá)到稀釋的目的，使得最后能夠得到單個(gè)菌落。上一次劃線的末端開(kāi)始劃線，達(dá)到稀釋的目的，使得最后能夠得到單個(gè)菌落。（3）根據(jù)圖示可知，）根據(jù)圖示可知，B為稀釋涂布平板法接種后培養(yǎng)得到的菌落。為稀釋涂布平板法接種后培養(yǎng)得到的菌落。（4）振蕩的作用相當(dāng)于攪拌，可以提高培養(yǎng)液中溶解氧的含量，還可以使菌體與培）振蕩的作用相當(dāng)于攪拌，可以提高培養(yǎng)液中溶解氧的含量，還可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高了營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率，因

30、此振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌養(yǎng)液充分接觸，提高了營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率，因此振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快。生長(zhǎng)速度快。答案答案（1）檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格）檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格3.8107（2）灼燒將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落）灼燒將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落（3）B（4）溶解氧營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)）溶解氧營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)1.（2019河北衡水中學(xué)模擬）河北衡水中學(xué)模擬）“貴州茅臺(tái)貴州茅臺(tái)”被譽(yù)為我國(guó)的國(guó)酒，雖然工藝并不復(fù)雜，被譽(yù)為我國(guó)的國(guó)酒，雖然工藝并不復(fù)雜，但是大家公認(rèn)其獨(dú)特品質(zhì)的關(guān)鍵是當(dāng)?shù)氐莫?dú)特氣候、水質(zhì)、以及當(dāng)?shù)乜諝饣颦h(huán)境但是大家公認(rèn)其獨(dú)特品質(zhì)的關(guān)鍵是當(dāng)?shù)氐莫?dú)特氣候、水

31、質(zhì)、以及當(dāng)?shù)乜諝饣颦h(huán)境中存在獨(dú)特的微生物。為了提取當(dāng)?shù)丨h(huán)境中的獨(dú)特菌種，某研究小組以優(yōu)質(zhì)高粱中存在獨(dú)特的微生物。為了提取當(dāng)?shù)丨h(huán)境中的獨(dú)特菌種，某研究小組以優(yōu)質(zhì)高粱、上等小麥為原料，制作培養(yǎng)基，搜集、分離空氣中的微生物?；卮鹣铝袉?wèn)題：、上等小麥為原料，制作培養(yǎng)基，搜集、分離空氣中的微生物?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）該培養(yǎng)基按成分分類(lèi)，屬于）該培養(yǎng)基按成分分類(lèi)，屬于（“天然天然”或或“合成合成”）培養(yǎng)基，培養(yǎng)基在）培養(yǎng)基，培養(yǎng)基在接種微生物前，必須先進(jìn)行接種微生物前，必須先進(jìn)行滅菌。滅菌。（2）將上述培養(yǎng)基暴露在空氣中培養(yǎng)一段時(shí)間后，?。⑸鲜雠囵B(yǎng)基暴露在空氣中培養(yǎng)一段時(shí)間后，取10g該培養(yǎng)基用無(wú)菌水制

32、成該培養(yǎng)基用無(wú)菌水制成100mL樣品溶液，再將樣品溶液稀釋樣品溶液，再將樣品溶液稀釋104倍后，各取樣品溶液倍后，各取樣品溶液0.1mL在在5個(gè)細(xì)菌培養(yǎng)個(gè)細(xì)菌培養(yǎng)基平板上接種，培養(yǎng)一段時(shí)間后，平板上長(zhǎng)出的細(xì)菌菌落數(shù)分別為基平板上接種，培養(yǎng)一段時(shí)間后，平板上長(zhǎng)出的細(xì)菌菌落數(shù)分別為13、156、462、178和和191。該過(guò)程采取的接種方法是。該過(guò)程采取的接種方法是，每克培養(yǎng)基樣品中的細(xì)菌，每克培養(yǎng)基樣品中的細(xì)菌數(shù)量為數(shù)量為個(gè)；與血細(xì)胞計(jì)數(shù)板相比，此計(jì)數(shù)方法測(cè)得的細(xì)菌數(shù)目較實(shí)際值個(gè)；與血細(xì)胞計(jì)數(shù)板相比，此計(jì)數(shù)方法測(cè)得的細(xì)菌數(shù)目較實(shí)際值，原因是，原因是_。（3）生產(chǎn)酒的主要微生物是酵母菌，其代謝類(lèi)型

33、是）生產(chǎn)酒的主要微生物是酵母菌，其代謝類(lèi)型是，其產(chǎn)物乙醇，其產(chǎn)物乙醇與與試劑反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色，這一反應(yīng)可用于乙醇的檢驗(yàn)。試劑反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色，這一反應(yīng)可用于乙醇的檢驗(yàn)。解析解析（1）題述培養(yǎng)基是由優(yōu)質(zhì)高粱、上等小麥等化學(xué)成分不明確的天然物質(zhì)配制而）題述培養(yǎng)基是由優(yōu)質(zhì)高粱、上等小麥等化學(xué)成分不明確的天然物質(zhì)配制而成的，屬于天然培養(yǎng)基。培養(yǎng)基在接種微生物前，必須先進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。（成的，屬于天然培養(yǎng)基。培養(yǎng)基在接種微生物前，必須先進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。（2）根）根據(jù)題意可知，題中所述的過(guò)程采取的接種方法是稀釋涂布平板法；為了計(jì)數(shù)結(jié)果準(zhǔn)確據(jù)題意可知，題中所述的過(guò)程采取的接種方法是稀釋涂布平板法；為了計(jì)數(shù)結(jié)

34、果準(zhǔn)確，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)應(yīng)介于，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)應(yīng)介于30300之間，故應(yīng)選擇細(xì)菌菌落數(shù)為之間，故應(yīng)選擇細(xì)菌菌落數(shù)為156、178和和191的平板計(jì)的平板計(jì)數(shù)。稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)微生物的計(jì)算公式：?jiǎn)挝粯悠分械木鋽?shù)（數(shù)。稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)微生物的計(jì)算公式：?jiǎn)挝粯悠分械木鋽?shù)（CV）M，其中其中C代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)為（代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)為（156178191）3175，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積為代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積為0.1mL，M代表稀釋倍數(shù)代表稀釋倍數(shù)104，所以每克該培，所以每克該培養(yǎng)基樣品中的菌落數(shù)為養(yǎng)基樣品中的菌落數(shù)為1750.1104100101.75108