生物高三生物復(fù)習(xí)提綱技術(shù)實(shí)踐

1、生物高三生物復(fù)習(xí)糜技術(shù)實(shí)踐高三生物復(fù)習(xí)提綱（技術(shù)實(shí)踐）考綱中有關(guān)選修一的要求：“見(jiàn)生物科考查的能力”中的“2、實(shí)驗(yàn)與探究能力要求”?？季V展示考綱解讀1.微生物的分離和培養(yǎng)利用平板劃線法和稀釋涂布平板法對(duì)微生物進(jìn)行分離與培養(yǎng)2.某種微生物數(shù)量的測(cè)定學(xué)會(huì)利用平板”數(shù)法或顯微計(jì)數(shù)法測(cè)定微生物的數(shù)量3.培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用學(xué)會(huì)配制選擇培養(yǎng)基，并嘗試從土壤中分離某些細(xì)菌（如分解纖維素和尿素的細(xì)菌）4.利用微生物的發(fā)酵來(lái)生產(chǎn)特定的產(chǎn)物及微生物在其他方面上的嘗試?yán)梦⑸锷a(chǎn)果酒、果醋、腐乳、泡菜等食品應(yīng)用5.酶活力測(cè)定的一般原理和方法學(xué)會(huì)如何測(cè)定酶活力6.酶在食品制造和洗滌等方面的應(yīng)用知道相關(guān)酶在果汁

2、制作和洗滌中的作用7.植物組織培養(yǎng)嘗試植物組織培養(yǎng)的過(guò)程8.蛋白質(zhì)的提取和分離嘗試用凝膠色譜法或電泳法對(duì)血紅蛋白進(jìn)行提取和分離9.PCR技術(shù)的基本操作和應(yīng)用知道PCR技術(shù)的原理并嘗試進(jìn)行操作10.DNA的粗提取與鑒定掌握DNA粗提取的原理及過(guò)程K知識(shí)點(diǎn)一X發(fā)酵的常用菌種1、發(fā)酵：是指利用微生物的某些特性為人類(lèi)生產(chǎn)有用的產(chǎn)品或直接把微生物應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)過(guò)程的一種技術(shù)，在的條件下都有可能進(jìn)行。2、幾種發(fā)酵菌種的比較項(xiàng)目酵母菌醋酸菌毛霉乳酸菌生物學(xué)分類(lèi)代謝類(lèi)型繁殖方式適宜條件下出芽生殖二分裂抱子生殖二分裂生產(chǎn)應(yīng)用發(fā)酵條件前期需氧，后期不需氧一直需氧一直需氧無(wú)氧發(fā)酵的適宜溫度1825（最適為20C）3

3、03515181820C特別提醒：酵母菌的繁殖需大量能量，而發(fā)酵過(guò)程進(jìn)行無(wú)氧呼吸，故果酒制作的前期應(yīng)，而后期應(yīng)。果醋制作過(guò)程中要求，缺氧時(shí)醋酸菌的生長(zhǎng)、增殖都會(huì)受到影響，另外醋酸的生成也會(huì)受到影響。4 / 19生物高三生物復(fù)習(xí)糜技術(shù)實(shí)踐腐乳制作過(guò)程中鹽、香辛料、酒精均可起到作用，由于越接近瓶口，微生物污染越重，故豆腐加鹽時(shí)，越近瓶口處鹽用量。例1、在家庭中用鮮葡萄制作果酒時(shí)，正確的操作是0A.讓發(fā)酵裝置接受光照B.給發(fā)酵裝置適時(shí)排氣C.向發(fā)酵裝置通入空氣D.將發(fā)酵裝置放在45處例2、如圖表示果酒和果醋制作過(guò)程中的物質(zhì)變化過(guò)程，下列敘述正確的是0A.過(guò)程和都只能發(fā)生在缺氧條件下B.過(guò)程和都發(fā)生在

4、酵母細(xì)胞的線粒體中C.過(guò)程和都需要氧氣的參與D.過(guò)程所需的最適溫度基本相同例3、在制作腐乳時(shí)，加鹵湯密封腌制過(guò)程中，對(duì)腐乳風(fēng)味和質(zhì)量無(wú)影響的因素是。A.酒的種類(lèi)和用量B.周?chē)h(huán)境中的濕度C.香辛料的組成和用量D.腌制的溫度和時(shí)間R知識(shí)點(diǎn)二1微生物的實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)培養(yǎng)基的概念：人們按照微生物對(duì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的。1.培養(yǎng)基的類(lèi)型（了解，重點(diǎn)掌握選擇培養(yǎng)基）劃分標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基種類(lèi)特點(diǎn)用途物理性質(zhì)液體培養(yǎng)基不加凝固劑工業(yè)生產(chǎn)半固體培養(yǎng)基加凝固劑，如瓊脂觀察微生物的運(yùn)動(dòng)、分類(lèi)、鑒定固體培養(yǎng)基微生物分離、鑒定、活菌計(jì)數(shù)、保藏菌種化學(xué)成分天然培養(yǎng)基含化學(xué)成分不明確的天然物質(zhì)工業(yè)生產(chǎn)合成培養(yǎng)基培養(yǎng)基成分

5、明確（用化學(xué)成分已知的化學(xué)物質(zhì)配成）分類(lèi)、鑒定用途年承承養(yǎng)莘培養(yǎng)基中加入，以不需要的微生物的生長(zhǎng)，所需要的微生物的生長(zhǎng)（如培養(yǎng)酵母菌和寄菌，可在培養(yǎng)基中加入青霉素:培養(yǎng)金黃色葡萄球菌，可在培養(yǎng)基中加入高濃度食鹽）舉別承養(yǎng)舉根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中加入不同種類(lèi)的微生物，如可用伊紅一美藍(lán)培養(yǎng)基鑒別飲用水或乳制品中是否有大腸桿菌（若有,菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤）2、培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成：一般都含有等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，另外還需要滿(mǎn)足微生物生長(zhǎng)對(duì)，例如：生長(zhǎng)因子（即細(xì)菌生長(zhǎng)必需，而自身不能合成的化合物，如維生素、某些氨基酸、噪嶺、喀噬）以及氧氣、二氧化碳、滲透壓等的要求°2 / 19生物高三生

6、物復(fù)習(xí)提綱技術(shù)實(shí)踐【1】顯微鏡直接計(jì)數(shù)法原理：利用特定，在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量。方法：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。缺點(diǎn)：O例：【實(shí)驗(yàn)】探究培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量的動(dòng)態(tài)變化（必修三）實(shí)驗(yàn)?zāi)康模? .通過(guò)探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化，嘗試建構(gòu)種群增長(zhǎng)的數(shù)學(xué)模型。2 .用數(shù)學(xué)模型解釋種群數(shù)量的變化。3 .學(xué)會(huì)使用血球計(jì)數(shù)板進(jìn)行計(jì)數(shù)。2 .實(shí)驗(yàn)原理：1 .在含糖的液體培養(yǎng)基（培養(yǎng)液）中酵母菌繁殖很快，迅速形成一個(gè)封閉容器內(nèi)的酵母菌種群，通過(guò)細(xì)胞計(jì)數(shù)可以測(cè)定封閉容器內(nèi)的酵母菌種群隨時(shí)間而發(fā)生的數(shù)量變化。2 .養(yǎng)分、空間、溫度和有毒排泄物等是影響種群數(shù)量持續(xù)增長(zhǎng)的限制因素。3 .方法步驟：1 .酵母

7、菌的培養(yǎng)。將10mL的無(wú)菌馬鈴薯培養(yǎng)液或肉湯培養(yǎng)液加入試管中。將酵母菌接種入試管的培養(yǎng)液中混合均勻。將試管在28C條件下連續(xù)培養(yǎng)7天。2 .酵母菌的顯微鏡計(jì)數(shù)。抽樣檢測(cè)法,稀釋?zhuān)簩⒔湍妇鬟m當(dāng)?shù)南♂專(zhuān)喝绮粷鈩t不必稀釋。加樣。將蓋玻片放在計(jì)數(shù)室上。接著，搖勻菌液后，且吸管吸取培養(yǎng)液，滴于蓋玻片邊緣，讓培養(yǎng)液自行滲入。多余培養(yǎng)液用濾紙吸去。計(jì)數(shù)。稍待片刻，待酵母菌細(xì)胞全部沉降到計(jì)數(shù)室底部，將計(jì)數(shù)板放在載物臺(tái)的中央，先用低倍鏡找到計(jì)數(shù)室的位置，然后用高倍鏡計(jì)數(shù)。每個(gè)計(jì)數(shù)室選5個(gè)（另一種規(guī)格選4個(gè)）中方格（可選4個(gè)角和中央的中方格，或只選取4個(gè)角），每次取樣要計(jì)數(shù)3次，求平均值，換算成每亳升菌液中

8、所含的酵母菌總數(shù)。四、血球計(jì)數(shù)板的結(jié)構(gòu)：血球計(jì)數(shù)板通常是一塊特制的載玻片，其上有4條槽構(gòu)成3個(gè)平臺(tái)。中間的平臺(tái)又被一短橫槽隔成兩半，每邊的平臺(tái)上各刻有一個(gè)方格網(wǎng)（如圖A、B）o每個(gè)方格網(wǎng)共分9個(gè)大方格，中間的大方格為計(jì)數(shù)室（如圖C）計(jì)數(shù)室的刻度一般有兩種規(guī)格，一種是一個(gè)大方格分成16個(gè)中方格，以4個(gè)中方格為一排，每1中方格中有25個(gè)小方格，整個(gè)計(jì)數(shù)室內(nèi)有16x25=400個(gè)小方格（如圖D所示）。另一種是一個(gè)大方格分成25個(gè)中方格，以5個(gè)中方格為一排，每1中方格中有16個(gè)小方格,整個(gè)計(jì)數(shù)室內(nèi)有16x25=400個(gè)小方格（如圖E所示）。每1個(gè)小方格邊長(zhǎng)為O.O5mmxO.O5mm,加上蓋玻片后的空

9、間深度為O.lmnL每個(gè)大方格的邊長(zhǎng)為Immxlmm,面積為ImnF,由于蓋上蓋玻片后的空間深度為0.1mm。所以計(jì)數(shù)室的體積為五、計(jì)算公式：計(jì)數(shù)時(shí)，通常數(shù)5個(gè)（另一種規(guī)格數(shù)4個(gè)）中方格的總數(shù)，然后求得每個(gè)中方格的平均值，再乘上25（或16）,得出一個(gè)大方格中的菌數(shù)，最后換算成1mL菌液的菌數(shù)?，F(xiàn)以一個(gè)大方格有25個(gè)中方格的計(jì)數(shù)板為例進(jìn)行計(jì)算：設(shè)5個(gè)中方格中總菌數(shù)為A,菌液稀釋倍數(shù)為B,則一個(gè)大方格中的菌數(shù)為A/5x25xB。所以1mL酵母菌培養(yǎng)液中的菌數(shù)=A/5x25xBxl0xl000o血細(xì)胞計(jì)數(shù)器構(gòu)造圖兒正面留B.縱場(chǎng)面圖C.放大后的方格網(wǎng)D、E.放大后的計(jì)數(shù)宣教材討論題答案：1 .從試

10、管中吸出培養(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)之前，為什么要將試管輕輕震蕩幾次？答：目的是使培養(yǎng)液中的酵母菌均勻分布，減少誤差2 .本實(shí)驗(yàn)需要設(shè)置對(duì)照嗎？如果需要，請(qǐng)討論對(duì)照組應(yīng)怎樣設(shè)出和操作；如果不需要，請(qǐng)說(shuō)明理由。答：3 .需要做重復(fù)實(shí)驗(yàn)嗎？為什么？答：4.怎樣記錄結(jié)果？記錄表怎樣設(shè)計(jì)？（答案見(jiàn)下表）重復(fù)實(shí)驗(yàn)1234567123平均5.如果一個(gè)小方格內(nèi)酵母菌過(guò)多，難以數(shù)清，應(yīng)當(dāng)采取怎樣的措施?答：提高菌種培養(yǎng)液的稀釋倍數(shù)。6 .對(duì)于壓在小方格界線上的酵母菌，應(yīng)當(dāng)怎樣計(jì)數(shù)？答：應(yīng)只計(jì)數(shù)相鄰兩邊及其頂角的酵母菌。7 .影響酵母菌種群數(shù)量增長(zhǎng)的因素可能是什么？答：養(yǎng)分、空間、溫度和有毒排泄物等是影響種群數(shù)量持續(xù)增長(zhǎng)的限

11、制因素。練習(xí)題：1 .下面是探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量與時(shí)間變化關(guān)系的實(shí)驗(yàn)：【實(shí)驗(yàn)材料】酵母菌菌種和無(wú)菌馬鈴薯培養(yǎng)液、試管、血球計(jì)數(shù)板(immxlmm方格)、滴管、顯微鏡等?！举Y料參考】酵母菌的顯微計(jì)數(shù)方法：血球計(jì)數(shù)板是帶有微小方格刻度的玻璃片，用于在顯微鏡下對(duì)血細(xì)胞、微生物的計(jì)數(shù)：將含有酵母菌的培養(yǎng)液滴在計(jì)數(shù)板上,計(jì)數(shù)一個(gè)小方格內(nèi)的酵母菌數(shù)量，再以此為根據(jù)，估算試管中的酵母菌總數(shù)。連續(xù)觀察7天，并記錄每天的數(shù)值。根據(jù)以上敘述回答下列問(wèn)題：(1)根據(jù)所學(xué)知識(shí)，該課題的實(shí)驗(yàn)假設(shè)是：開(kāi)始在資源和空間充裕的環(huán)境中，酵母菌呈J型增長(zhǎng)，隨著時(shí)間的推移，由于，酵母菌呈S型增長(zhǎng)。(2)本實(shí)驗(yàn)沒(méi)有另設(shè)置對(duì)照實(shí)

12、驗(yàn)，原因是0該實(shí)驗(yàn)是否需要重復(fù)實(shí)驗(yàn)？，試解釋原因0(3)如果一個(gè)小方格內(nèi)酵母菌過(guò)多，難以數(shù)清，應(yīng)當(dāng)采取的措施是。(4)請(qǐng)你設(shè)計(jì)表格處理實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)。(5)試在該實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，根據(jù)你對(duì)影響酵母菌種群生長(zhǎng)的因素的推測(cè)，確定一個(gè)進(jìn)一步探究的課題：、2 .在探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化實(shí)驗(yàn)中，采用了如下圖所示的血球計(jì)數(shù)器，該血球計(jì)數(shù)器的計(jì)數(shù)室中，以4個(gè)中方格為一排，16個(gè)中方格為一個(gè)大方格，每1中方格中有25個(gè)小方格,整個(gè)計(jì)數(shù)室內(nèi)有16x25=400個(gè)小方格,每1個(gè)小方格邊長(zhǎng)為O.O5mmxO.O5mm,加上蓋玻片后的空間深度為0.1mm。計(jì)數(shù)時(shí)，取原液1mL,加入9mL的無(wú)菌水稀釋成10倍的樣液，

13、用無(wú)菌的移液管吸取一滴混合均勻的樣液注入血球計(jì)數(shù)器的計(jì)數(shù)室內(nèi)，裝滿(mǎn)整個(gè)計(jì)數(shù)室，沒(méi)有產(chǎn)生氣泡，成功制片,然后放入顯微鏡下觀察，并計(jì)數(shù)最左上、最右上、最左下、最右下四角的4個(gè)中方格中的細(xì)胞數(shù)，共200個(gè)，則1mL培養(yǎng)液中酵母菌細(xì)胞的數(shù)量約為個(gè)。2稀釋涂布平板法(間接計(jì)數(shù)法，也叫)原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表而生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的，通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。操作：a.設(shè)置重復(fù)組，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力與準(zhǔn)確性。b.為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。(4)設(shè)置對(duì)照：指設(shè)置除了以外，其他條件都相同的實(shí)驗(yàn)，目的是排除實(shí)驗(yàn)組中對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影

14、響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。(5)實(shí)驗(yàn)流程：土壤取樣一制備一微生物的培養(yǎng)與觀察一6 / 19生物高三生物復(fù)習(xí)提綱技術(shù)實(shí)踐7、分解纖維素的微生物的分離(1)纖維素酶的組成：是一種復(fù)合酶，至少包括三種組分，即CI酶、CX酶和葡萄糖苗酶，在這三種酶的作用下，纖維素最終被催化水解成。(2)篩選方法:，即通過(guò)是否產(chǎn)生來(lái)篩選纖維素分解菌。(3)實(shí)驗(yàn)操作步驟：土壤取樣一一一將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上一例1、制備牛肉膏蛋白陳固體培養(yǎng)基的下列操作中，不正確的是()A.操作流程是計(jì)算、稱(chēng)量、溶化、滅菌和倒平板B.將稱(chēng)好的牛肉膏連同稱(chēng)量紙一同倒入燒杯中再加水、去紙C.滅菌后向牛肉膏蛋白陳溶液中加2%瓊脂，

15、并使其溶解D.將培養(yǎng)基冷卻到約50時(shí)，在酒精燈火焰附近倒平板例2、在實(shí)驗(yàn)室里，從上壤里分離出尿素分解菌所需的培養(yǎng)基屬于()A.天然培養(yǎng)基B.鑒別培養(yǎng)基C.選擇培養(yǎng)基D.液體培養(yǎng)基K知識(shí)點(diǎn)三】酶的應(yīng)用(-)酶的制備1 .對(duì)于細(xì)胞內(nèi)酶：用搗碎機(jī)、研磨器等機(jī)械將生物組織細(xì)胞破碎，使酶從活細(xì)胞中釋放出來(lái)，進(jìn)入細(xì)胞外的溶液中，經(jīng)、離心制備成。2 .對(duì)于分泌到細(xì)胞外的酶；直接從分泌物或細(xì)胞外的組織間隙中提取，提取過(guò)程中注意溫度、等多種環(huán)境因素對(duì)酶活性的影響。3 .酶活力測(cè)定的原理：通常以單位時(shí)間內(nèi)，單位體積中來(lái)表示。(二)果膠酶在果汁生產(chǎn)中的作用1 .果膠酶的組成與作用(1)果膠酶不是一種酶，而是一類(lèi)酶的

16、總稱(chēng)，包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶和果膠酯酶等。(2)果膠酶可以分解果膠，使變得更容易；果膠分解后，也使得果汁變得。2 .探究果膠酶的適宜溫度、pH(1)溫度和pH都可以影響，在探究果膠酶的最適溫度或pH的實(shí)驗(yàn)中，自變量分別是和，其他如蘋(píng)果泥、反應(yīng)時(shí)間等都是，可以通過(guò)測(cè)定或觀察度來(lái)判斷酶活性高低。(2)在混合蘋(píng)果泥和果膠酶之前，要將蘋(píng)果泥和果膠酶分裝在不同的試管中處理3 .酶的活性和酶反應(yīng)速度(1)酶的活性：是指。酶活性的高低可以用在一定條件下，酶所催化的某一化學(xué)反應(yīng)的反應(yīng)速度來(lái)表示。(2)酶反應(yīng)速度：用單像時(shí)回內(nèi)、單像他根中反廢物的誠(chéng)少單3產(chǎn)物的承加單米因不。(3)影響因素：溫度、pH、

17、酶濃度、底物濃度和酶的抑制劑等。4 .探究溫度(或pH)對(duì)果膠酶活性的影響(1)實(shí)驗(yàn)原理：果膠酶活性受溫度(或pH)影響，處于最適溫度(或pH)時(shí)活性最高。果肉的出汁率、果汁的澄清度與果膠酶的活性大小成正比。(三)探討加酶洗衣粉的洗滌效果1 .加酶洗衣粉中常有的酶制劑包括蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶四種,這些酶的活性受溫度、酸堿度和表面活性劑的影響。2 .加酶洗衣粉去污機(jī)理(1)堿性蛋白酶能將血漬、奶漬等含有的大分子水解成可溶性的或小分子肽。(2)脂肪酶：淀粉酶和纖維素酶分別把大分子脂肪、淀粉和纖維素水解為小分子物質(zhì)。(四)酶的應(yīng)用：利用一定技術(shù)使酶既既容易催化反應(yīng)，又易于回收，可以重復(fù)使

18、用。類(lèi)型固定化酶的種類(lèi)適用方法優(yōu)點(diǎn)及不足實(shí)例固定化酶可反復(fù)利用，但只催化一種或一類(lèi)化學(xué)反應(yīng)固定化葡萄糖異構(gòu)酶固定化細(xì)胞成本低，反應(yīng)容易，但固定化酵母細(xì)胞例(雙選題)下列關(guān)于加酶洗衣粉的說(shuō)法不正確的是0A,加酶洗衣粉的效果總比普通洗衣粉的好B.加酶洗衣粉中常用的酶制劑有蛋白酶、脂肪酶等C.加酶洗衣粉是將酶直接添加到普通洗衣粉中D.加酶洗衣粉相對(duì)普通洗衣粉來(lái)說(shuō)有利于環(huán)保R知識(shí)點(diǎn)四植物組織培養(yǎng)1.植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程2.菊花組織培養(yǎng)過(guò)程10 / 19(1)選材：一般選擇植株的莖上部新生的側(cè)枝(2)營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)：培養(yǎng)基：常用營(yíng)養(yǎng)成分：大量元素、微量元素、有機(jī)物如蔗糖等、植物激素(如)實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程制備MS

19、固體培養(yǎng)基：配制好的培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌一外植體消毒一接種-培養(yǎng)-移栽一栽培3.月季的花藥培養(yǎng)(1)花粉發(fā)育過(guò)程：花粉母細(xì)胞(小抱子母細(xì)胞)一四分體時(shí)期一單核期一雙核期一花粉粒(2)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑：影響花藥培養(yǎng)的因素：主要因素是的選擇和培養(yǎng)基的?；ㄋ幣囵B(yǎng)一般選擇在，選擇的花粉處于發(fā)育過(guò)程中的。知識(shí)點(diǎn)五DNA的粗提取和鑒定1. DNA的粗提取溶值度(1)根據(jù)DNA的。DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCI/溶液中溶解度不同。如圖表示DNA在NaCI溶液中的溶解度/隨著NaCI溶液濃度變化而變化的曲線。,(2)DNA不溶于溶液。0.14LlNadlS濃濃度(3)DNA對(duì)酶、高溫和的

20、耐受性:蛋白酶能水解蛋白質(zhì)，但是對(duì)DNA沒(méi)有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受6080C的高溫，而DNA在80C以上才會(huì)變性。洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜，但是對(duì)DNA沒(méi)有影響。2. DNA的提純(1)方案一：利用DNA在不同濃度的NaQ溶液中溶解度不同，通過(guò)控制Na。溶液的濃度除去雜質(zhì)。(2)方案二：直接在DNA濾液中加入，其中的能夠分解蛋白質(zhì)。(3)方案三：將DNA濾液放在的恒溫水浴箱中保溫1015min03. DNA的鑒定(1)所用試劑:。(2)處理方法：將試劑與DNA溶液混合后加熱5mino現(xiàn)象：溶液顏色。特別提醒：DNA的鑒定中為什么需要兩支試管？原因：一支試管中加入二苯胺試劑，另一支不加，可以通過(guò)

21、對(duì)比說(shuō)明通過(guò)二苯胺試劑確實(shí)可以鑒定DNA。總結(jié)：DNA的粗提取與鑒定中用到的試劑及其作用Na。溶液：冷卻的體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精：二苯胺：洗滌劑：嫩肉粉R知識(shí)點(diǎn)六工血紅蛋白的提取和分離1、實(shí)驗(yàn)原理：依據(jù)蛋白質(zhì)的可以將不同種類(lèi)的蛋白質(zhì)分離。2、凝膠色譜法：也稱(chēng)，是根據(jù)分離蛋白質(zhì)的有效方法。相對(duì)分子量較的蛋白質(zhì)在凝膠移動(dòng),路程，移動(dòng)速度較，相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)易進(jìn)入凝膠，路程，移動(dòng)速度，以此可以將不同相對(duì)分子質(zhì)量的蛋白質(zhì)分離。3、電泳(1)概念：電泳是指在電場(chǎng)的作用下發(fā)生遷移的過(guò)程。特點(diǎn)：蛋白質(zhì)等在一定pH下會(huì)帶電，在電場(chǎng)作用下，帶電分子會(huì)向著與其所帶電荷相反的電極移動(dòng)，電泳利用待分離樣品中各

22、種分子遜隨的差異以及分子本身的大小、形狀的不同,使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離。生物高三生物復(fù)習(xí)提綱技術(shù)實(shí)踐例：下列關(guān)于DNA和蛋白質(zhì)提取與分離實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的有0A.提取細(xì)胞中的DNA和蛋白質(zhì)都需要用蒸儲(chǔ)水漲破細(xì)胞B.用不同濃度NaCl溶液反復(fù)溶解與析出DNA可去除蛋白質(zhì)C.蛋白質(zhì)提取和分離過(guò)程中進(jìn)行透析可去除溶液中的DNAD.蛋白質(zhì)和DNA可以用電泳方法進(jìn)行分離純化# / 19生物高三生物復(fù)習(xí)提綱技術(shù)實(shí)踐參考答案R知識(shí)點(diǎn)一】發(fā)酵的常用菌種1、發(fā)酵：是指利用微生物的某些特性為人類(lèi)生產(chǎn)有用的產(chǎn)品或直接把微生物應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)過(guò)程的一種技術(shù)，在直氧租無(wú)氧的條件下都有可

23、能進(jìn)行。2、幾種發(fā)酵菌種的比較項(xiàng)目、酵母菌醋酸菌毛霉乳酸菌生物學(xué)分類(lèi)真核生物原核生物真核生物原核生物代謝類(lèi)型異養(yǎng)兼性厭氧型異養(yǎng)需氧型異養(yǎng)需氧型異養(yǎng)厭氧型繁殖方式適宜條件下出芽生殖二分裂抱子生殖二分裂生產(chǎn)應(yīng)用限酒、發(fā)面釀醋制作腐乳制作泡菜、酸奶發(fā)酵條件前期需氧，后期不需氧一直需氧一直需氧無(wú)氧發(fā)酵的適宜溫度1825（最適為20）303515181820特別提醒：酵母菌的繁殖需大量能量，而發(fā)酵過(guò)程進(jìn)行無(wú)氧呼吸，故果酒制作的前期應(yīng)通入氧氣,而后期應(yīng)保證嚴(yán)格的無(wú)氧環(huán)境。果醋制作過(guò)程中要求適時(shí)通氣,缺氧時(shí)醋酸菌的生長(zhǎng)、增殖都會(huì)受到影響，另外醋酸的生成也會(huì)受到影響。腐乳制作過(guò)程中鹽、香辛料、酒精均可起到抑制

24、雜菌生長(zhǎng)的作用,由于越接近瓶口，微生物污染越重，故豆腐加鹽時(shí)，越近瓶口處鹽用量越芟。例1、（B）例2、（C）例3、（B）K知識(shí)點(diǎn)二】微生物的實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)培養(yǎng)基的概念：人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求,配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì).1.培養(yǎng)基的類(lèi)型（了解，重點(diǎn)掌握選擇培養(yǎng)基）劃分標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基種類(lèi)特點(diǎn)用途用途羊殍培寺舉培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物培養(yǎng)、分離出特定微生物（如培養(yǎng)匝，以抑制不需要的微生物的生長(zhǎng)，促進(jìn)所需要的微生物的生長(zhǎng)酵母菌和霉菌，可在培養(yǎng)基中加入青霉素：培養(yǎng)金黃色葡萄球菌，可在培養(yǎng)基中加入高濃度食鹽）箏別皚養(yǎng)莘根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品鑒別不同種類(lèi)的微生物,如可用

25、伊紅一美藍(lán)培養(yǎng)基鑒別飲用水或乳制品中是否有大腸桿菌（若有，菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤）2、培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成：一般都含有水、碳源、和氮源、無(wú)機(jī)鹽等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),另外還需要滿(mǎn)足微生物生長(zhǎng)對(duì)DH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),例如：生長(zhǎng)因子(即細(xì)菌生長(zhǎng)必需，而自身不能合成的化合物，如維生素、某些氨基酸、噂嶺、嚙噬)以及氧氣、二氧化碳、滲透壓等的要求。3、無(wú)菌技術(shù)(1)含義：指在培養(yǎng)微生物的操作中，所有防止雜菌污染的方法。(2)關(guān)鍵：防止外來(lái)雜菌的入侵比較項(xiàng)目條件結(jié)果常用的方法消毒較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的微生物(不包括芽抱和孩子)煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外線或化學(xué)藥物消毒法滅菌強(qiáng)

26、烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽泡和抱子灼燒火菌、干熱火菌、高壓蒸汽滅菌特別提醒：用酒精消毒時(shí)，70%的酒精殺菌效果最好。4、純化大腸桿菌的實(shí)驗(yàn)操作(1)制備牛肉膏蛋白陳固體培養(yǎng)基的步驟：計(jì)算-稱(chēng)量-溶化火菌-倒平扳。特別提醒：平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表而的溫度也比較高，將平板倒置,既可以使培養(yǎng)基表而的水分更好地?fù)]發(fā)：又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。純化大腸桿菌的原理：在培養(yǎng)基上將聚集的菌種稀釋分散成單個(gè)細(xì)胞，形成單個(gè)菌落，此菌落是由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的子細(xì)胞群體。(3)接種技術(shù)一平板劃線法和稀釋涂布平板法平板劃線法：是通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連

27、續(xù)劃線,操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表而。稀釋涂布平板法：是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面。特別提醒：目的是使每一次劃線后菌體數(shù)目減少，培養(yǎng)之后形成的菌落是由單個(gè)菌體繁殖而成。5、菌種的保藏(1)短期保存：固體斜而培養(yǎng)基上4c保存，菌種易被污染或產(chǎn)生變異。(2)長(zhǎng)期保存：20甘油管在冷凍箱中保藏。6、上壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)土壤中的細(xì)菌之所以能夠分解尿素，是因?yàn)樗鼈凅w內(nèi)能合成明豆。這種物質(zhì)在把尿素分解成無(wú)機(jī)物的過(guò)程中起催化作用。實(shí)驗(yàn)室中微生物篩選的原理：人為提供有利于目的菌株生長(zhǎng)的條件(包括營(yíng)養(yǎng)、溫度、pH等)，同時(shí)抑制或阻

28、止其他微生物生長(zhǎng)。(2)分離分解尿素的細(xì)菌所使用的特定培養(yǎng)基：分離分解尿素的細(xì)菌的培養(yǎng)基應(yīng)為選擇培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中的氮源只有尿素，加入酚紅染色劑(變紅)(3)統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目：常用方法有顯微鏡直接計(jì)數(shù)法、稀釋涂布平板法。1顯微鏡直接計(jì)數(shù)法原理：利用特定細(xì)菌沖數(shù)板或由細(xì)胞計(jì)數(shù)板,在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量。方法：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。缺點(diǎn)：不能區(qū)分死菌與活菌。例：練習(xí)答案：1.(1)環(huán)境中資源和空間逐漸變得有限，代謝廢物積累(2)該實(shí)驗(yàn)在時(shí)間上形成前后自身對(duì)照需要為了提高實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性(3)增加菌種培養(yǎng)液的稀釋倍數(shù)(4)(2分。橫表頭時(shí)間共7天寫(xiě)對(duì)得1分，縱表頭重復(fù)實(shí)驗(yàn)(3次以上)和“平均”

29、答全得1分)重復(fù)實(shí)驗(yàn)1234567123平均(5)酵母菌的種群數(shù)量與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(溶氧或pH或代謝廢物等)的變化關(guān)系2.8X1O72稀釋涂布平板法(間接計(jì)數(shù)法，也叫活菌計(jì)數(shù)法)原理；當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表而生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌，通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。操作：a.設(shè)置重復(fù)組，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力與準(zhǔn)確性。b.為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。(4)設(shè)置對(duì)照：指設(shè)置除了越測(cè)試的條件以外，其他條件都相同的實(shí)驗(yàn)，目的是排除實(shí)驗(yàn)組中非測(cè)試因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響,提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。(5)實(shí)驗(yàn)流程：土壤取樣一制備培養(yǎng)基一

30、微生物的培養(yǎng)與觀察一細(xì)菌的計(jì)數(shù)。7、分解纖維素的微生物的分離(1)纖維素酶的組成：是一種復(fù)合酶，至少包括三種組分，即C1酶、CX酶和葡萄糖昔酶，在這三種酶的作用下，纖維素最終被催化水解成葡萄糖。(2)篩選方法：剛果紅染色法,即通過(guò)是否產(chǎn)生邈膽來(lái)篩選纖維素分解菌。(3)實(shí)驗(yàn)操作步驟：土壤取樣一選擇培養(yǎng)(可省略)一梯度稀釋一將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上一挑選產(chǎn)生透明圈的菌落例1、(C)例2、(C)K知識(shí)點(diǎn)三】酶的應(yīng)用(-)酶的制備1 .對(duì)于細(xì)胞內(nèi)酶：用搗碎機(jī)、研磨器等機(jī)械將生物組織細(xì)胞破碎，使酶從活細(xì)胞中釋放出來(lái)，進(jìn)入細(xì)胞外的溶液中，經(jīng)過(guò)濾、離心制備成粗酶液。2 .對(duì)于分泌到細(xì)胞外的酶；

31、直接從分泌物或細(xì)胞外的組織間隙中提取，提取過(guò)程中注意溫度、膽等多種環(huán)境因素對(duì)酶活性的影響。3 .酶活力測(cè)定的原理：通常以單位時(shí)間內(nèi)，單位體積中反應(yīng)物的減少量或產(chǎn)物的增加量來(lái)表示。(二)果膠酶在果汁生產(chǎn)中的作用1 .果膠酶的組成與作用(1)果膠酶不是一種酶，而是一類(lèi)酶的總稱(chēng)，包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶和果膠酯酶等。(2)果膠酶可以分解果膠，使榨取果汁變得更容易;果膠分解后，也使得果汁變得澄清。2 .探究果膠酶的適宜溫度、pH(1)溫度和DH都可以影響酶的活性,在探究果膠酶的最適溫度或pH的實(shí)驗(yàn)中，自變量分別是溫度和世1，其他如蘋(píng)果泥、反應(yīng)時(shí)間等都是無(wú)關(guān)變量,可以通過(guò)測(cè)定果汁體積或觀察果汁澄

32、清度來(lái)判斷酶活性高低。(2)在混合蘋(píng)果泥和果膠酶之前，要將蘋(píng)果泥和果膠酶分裝在不同的試管中期處理3 .酶的活性和酶反應(yīng)速度(1)酶的活性：是指酶催化一定化學(xué)反應(yīng)的能力。酶活性的高低可以用在一定條件下，酶所催化的某一化學(xué)反應(yīng)的反應(yīng)速度來(lái)表示。(2)酶反應(yīng)速度：用單位時(shí)間內(nèi)、單位體枳中反應(yīng)物的減少量或產(chǎn)物的增加量來(lái)表示。(3)影響因素：溫度、pH、酶濃度、底物濃度和酶的抑制劑等。4 .探究溫度(或pH)對(duì)果膠酶活性的影響(1)實(shí)驗(yàn)原理：果膠酶活性受溫度(或pH)影響，處于最適溫度(或pH)時(shí)活性最高。果肉的出汁率、果汁的澄清度與果膠酶的活性大小成正比。(三)探討加酶洗衣粉的洗滌效果1 .加酶洗衣粉中常有的酶制劑包括蛋白酶、脂肪隨、淀粉酶和纖維素酶四種,這些酶的活性受溫度、酸堿度和表面活性劑的影響。2 .加酶洗衣粉去污機(jī)理(1)堿性蛋白酶能將血漬、奶漬等含有的大分子蛋白質(zhì)水解成可溶性的氨基酸或小分子肽。(2)脂肪酶：淀粉酶和纖維素酶分別把大分子脂肪、淀粉和纖維素水解為小分子物質(zhì)。(四)酶的應(yīng)用：利用一定技術(shù)使酶既既容易催化反應(yīng)，又易于回收，可以重復(fù)使用。類(lèi)型固定化酶的種類(lèi)適用方法優(yōu)點(diǎn)及不足實(shí)例固定化酶一種化學(xué)結(jié)合、物理吸附可反復(fù)利用，但只催化一種或一類(lèi)化學(xué)反應(yīng)固定化葡萄糖異構(gòu)酶固定化細(xì)胞一系列包埋成本低，反應(yīng)容易，但成本下降固定化酵母細(xì)胞例(AC)K知識(shí)點(diǎn)四植物組織培養(yǎng)(1)選材：一