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1、Working InstructionWI-7.5.3-01F 客戶送樣登記表特別說(shuō)明:賽默飛世爾提供的技術(shù)服務(wù)僅為獲得測(cè)序原始結(jié)果,服務(wù)本身不涉及任何基因診斷、基因治療并不得用于任何臨床診斷、治療等醫(yī)療用途??蛻魬?yīng)嚴(yán)格恪守上述規(guī)定,不得超越正常的科研或教學(xué)目的而違規(guī)使用技術(shù)服務(wù)的交付物,否則由此造成的一切后果均應(yīng)由客戶承擔(dān)。*為必填項(xiàng) 請(qǐng)仔細(xì)閱讀并認(rèn)真填寫(xiě)該表格內(nèi)容 (生產(chǎn)填寫(xiě))訂單號(hào)*聯(lián) 系 人 *聯(lián)系電話 *電子郵箱 *結(jié)賬課題組 發(fā)票抬頭(單位) 地址 樣品類型代號(hào):菌(大腸桿菌); 質(zhì)粒; PCR已純化; 單一條帶PCR未純化; 多條帶PCR未純化; 其它 請(qǐng)不要直接送噬菌體菌液,否
2、則可能承擔(dān)法律責(zé)任*樣品名稱*樣本 類型(請(qǐng)?zhí)顚?xiě)代號(hào))*片段長(zhǎng)度(插入片段長(zhǎng)度或PCR產(chǎn)物長(zhǎng)度)*抗性(僅限菌液)*載體名稱 (填寫(xiě)全稱,僅限菌液和質(zhì)粒)*引物名稱*測(cè)序要求1單向測(cè)序2雙向測(cè)序3單向測(cè)通(F)4雙向測(cè)通(B)*樣品信息1.高GC2.重復(fù)序列3.發(fā)夾結(jié)構(gòu)4. 其他請(qǐng)備注備注(例如:重新送樣、用以前引物、樣品或引物備用等) 引物填寫(xiě)規(guī)則:1單向測(cè)序填寫(xiě)一條,雙向測(cè)序填寫(xiě)兩條。備用引物務(wù)必注明”備用”避免多安排反應(yīng),多收費(fèi);2如需合成引物,發(fā)送引物序列至seqbj 郵箱或者請(qǐng)?jiān)谟唵蔚撞刻顚?xiě)引物序列3如用他人引物,請(qǐng)注明他人姓名及引物名稱;4如片斷長(zhǎng)度大于800,僅填寫(xiě)“通用引物”,
3、且沒(méi)有選擇測(cè)通,默認(rèn)兩個(gè)反應(yīng)5自備引物請(qǐng)寫(xiě)明引物濃度,沒(méi)有備注濃度默認(rèn)為10pmol/ul合成測(cè)序引物信息(g小寫(xiě),其他字母大寫(xiě);長(zhǎng)度在17-25之間):引物名稱 引物序列 引物名稱 引物序列 引物名稱 引物序列 引物名稱 引物序列 重要提醒:1、請(qǐng)確保樣品或引物包裝完好密封,如果需要快遞,請(qǐng)做好防壓措施,避免樣品在運(yùn)送途中發(fā)生滲漏或損壞。2、如需返回樣品或者引物,請(qǐng)?jiān)诜磻?yīng)結(jié)束后通知客服或通過(guò)在線系統(tǒng)自助申請(qǐng) 3、如果需要拼接,請(qǐng)?jiān)趥渥⒅凶⒚鳌捌唇印?4、如您在“聯(lián)系人”處簽名則代表您確認(rèn)客戶送樣登記表的信息無(wú)誤并與實(shí)際所送樣品相符。5、樣品送樣要求請(qǐng)見(jiàn)背面 送樣要求分類具體要求未純化PCR產(chǎn)
4、物1. 片段大于150bp;2. 請(qǐng)?zhí)峁?0-50µl PCR擴(kuò)增產(chǎn)物(20ng/ul,總量>600ng),取3µl樣品,應(yīng)該能夠清晰的分辨出目的條帶3. 建議根據(jù)片段長(zhǎng)度范圍提供足夠的PCR產(chǎn)物總量:PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度100-200 bp200-500 bp500-1000 bp1000-2000 bp>2000 bp總量20-60 ng60-200 ng100-400ng200-800 ng800-2000 ng純化后PCR產(chǎn)物1. PCR產(chǎn)物溶于ddH2O中(請(qǐng)勿溶解在TE溶液中);2. 濃度大于50ng/µl,體積大于10µl(僅限一個(gè)
5、反應(yīng),每增加一個(gè)反應(yīng),多提供5ul)。3. 電泳檢測(cè)條帶單一并且清晰。PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度100-200 bp200-500 bp500-1000 bp1000-2000 bp>2000 bp最佳濃度1-3 ng/ul3-10 ng/ul5-20 ng/ul10-40 ng/ul40-100 ng/ul質(zhì)粒1. 質(zhì)粒溶于ddH2O中(請(qǐng)勿溶解在TE溶液中),質(zhì)粒濃度100ng/µl;質(zhì)粒OD 260nm/280nm 在1.82.0之間;體積大于10µl(僅限一個(gè)反應(yīng),每增加一個(gè)反應(yīng),多提供5ul);2. 建議用相關(guān)試劑盒提取質(zhì)粒;3. 如有可能,同時(shí)提供1ml含有相應(yīng)質(zhì)粒
6、的菌液備用;4. 需注明載體和插入目的片段長(zhǎng)度、以及測(cè)序要求。細(xì)菌(僅為大腸桿菌)1.各類型細(xì)菌要求:細(xì)菌類型要求菌液新鮮菌液,培養(yǎng)12小時(shí)左右,100ul以上,菌液有明顯的渾濁。*如果需要我們對(duì)菌液進(jìn)行直接抽提(無(wú)需重新接種培養(yǎng),強(qiáng)烈推薦),請(qǐng)按以下要求送樣: 如果是高拷貝質(zhì)粒,提供1.2ml菌液(培養(yǎng)12小時(shí)以上); 如果是低拷貝質(zhì)粒,提供3-4ml菌液(培養(yǎng)12小時(shí)以上)。沉菌菌液離心沉淀后的菌體(菌液濃度OD0.6;體積不小于3ml)。平板菌培養(yǎng)時(shí)間在12小時(shí)內(nèi),菌落獨(dú)立,不得粘連、不得有衛(wèi)星菌落穿刺菌有明顯的穿刺菌2.說(shuō)明載體抗性類型,我們提供氨芐青霉素、羧芐青霉素、卡那霉素、氯霉素
7、、四環(huán)素抗生素;其余類型抗生素需自備;引物1. 濃度不低于3.2pmol/µl,溶液體積大于10µl;(反應(yīng)數(shù)多需多提供,正常情況下,按2ul/個(gè)反應(yīng)提供)2. 隨機(jī)引物(RAPD引物)和簡(jiǎn)并引物,混合引物以及引物長(zhǎng)度不足17bp不能用于測(cè)序;3. 引物長(zhǎng)度一般在18-23bp比較適合測(cè)序,特異性高。 友情提醒:1.樣品及引物均只保存1個(gè)月,如需返還,請(qǐng)?jiān)诒4嫫趦?nèi)通知我們安排返還; 2. 投訴期一個(gè)月,如果對(duì)測(cè)序結(jié)果有任何異議,請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系溝通。送樣地址:seqsh 蘇州實(shí)驗(yàn)室:蘇州市高新區(qū)泰山路297號(hào) 測(cè)序部 郵編:215129 電話eqbj 北京實(shí)驗(yàn)室:北京順義區(qū)空港B區(qū)裕華路28號(hào)10號(hào)樓賽默飛二樓測(cè)序部 郵編:101318 電話eqgz 廣州實(shí)驗(yàn)室:廣州市科學(xué)城南云五路
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