銀杏葉提取物對大鼠高脂性脂肪肝的實驗觀察

1、銀杏葉提取物對大鼠高脂性脂肪肝的實驗觀察                   作者：劉文珍，王永奇，段斐，寇素茹，孫曉芳，馬幼敏【摘要】  目的通過對大鼠高脂酒精脂肪肝的肝組織學(xué)觀察及血清學(xué)檢測，為銀杏葉提取物防治脂肪肝提供的理論依據(jù)。 方法用高脂飼料加低濃度酒精喂食SD雄性大鼠復(fù)制成脂肪肝模型。分為6組：正常組：普通飼料+生理鹽水；模型組：高脂飼料+38%酒精；陽性藥物對照組：高脂飼料+38%酒精+絞股藍(lán)

2、總苷膠囊；組：高脂飼料+38%酒精+銀杏葉片（高，中，低劑量）。結(jié)果6周后觀察肝組織病理切片及血清學(xué)指標(biāo)，可見肝組織及膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶等各組治療后均與模型組有差別(P<0.05)，與正常對照組無差別(P>0.05)；銀杏葉高、中、低劑量組間比較無差別（P>0.05）。結(jié)論 通過建立符合人們飲食習(xí)慣的脂肪肝模型，說明銀杏葉提取物治療脂肪肝效果好。 【關(guān)鍵詞】  高脂血癥 脂肪肝 肝組織切片 大鼠模型 銀杏葉片Abstract:ObjectiveTo study the effect of Ginkgo leaf extract o

3、n the rats with hyperlipidemia fat liver.MethodsFatty liver model was established by feeding SD male rats with hyperlipidemia feed plus low concentration of alcohol. The rats were divided into six groups: normal group, fed with usual feed plus physiological saline, Model group, fed with hyperlipidem

4、ia feed plus 38 percent of alcohol. Control group with positive medicine, fed with hyperlipidemia feed plus 38 percent of alcohol and capsule of Jiaogulanzongdai. Treatment groups, fed hyperlipidemia feed plus 38 percent of alcohol and Ginkgo Leaf Tablets (with high, medium and low dosages).ResultsS

5、ix weeks after treatment, pathological section of liver tissue and serum indexes were observed in each group. As a result, it was found that there was obvious difference between model group and the other groups in liver tissue, cholesterol, CHO, TG, HDL, ALT, AST, and so on. (p<0.05). There was n

6、o difference between the normal group and the other groups (p>0.05). There was also no difference in the groups with different dosages of Ginkgo Leaf Tablets (p>0.05).Conclusion:Ginkgo leaf extract has a protective effect on hyperlipidemia fat liver.Key words：Hyperlipidemia diseases;  Fat

7、ty liver;  Section of liver tissue;  Rat modals;  Ginkgo Leaf Tablets脂肪肝是一種常見病，隨著人們生活水平的提高，高脂飲食是司空見慣的，并且日常生活中常常飲酒，所以脂肪肝的發(fā)病率越來越高。針對這一現(xiàn)象，筆者建立了有效的大鼠脂肪肝模型，研究用銀杏葉片防治脂肪肝的效果。1  器材與方法1.1   材料60只SD雄性大鼠，體重280 300 g（河北醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供，動物和格證號609068）。銀杏葉片, 國藥準(zhǔn)字Z20027949，24片/盒，揚(yáng)子江藥業(yè)集團(tuán)生產(chǎn)，

8、批號05032901。絞股藍(lán)總苷膠囊，國藥準(zhǔn)字Z10900032,  100/盒，20MG/片，安康正大制藥有限公司生產(chǎn)，批號：20050103。丙硫氧嘧啶片，國藥準(zhǔn)字H31021082，100/盒，50/片，上海復(fù)星朝暉藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號060806。膽固醇，由北京市慶盛達(dá)化工技術(shù)有限公司提供，批號20060906。膽酸鈉，由北京雙旋微生物培養(yǎng)基制品廠提供，批號20050311，企標(biāo)號02-18。保定王酒由保定釀酒廠生產(chǎn)，38%。日本生產(chǎn)OLYMPUS-AU400 全自動生化分析儀。1.2  方法將SD雄性大鼠60只隨機(jī)分為6組，即正常組、模型組、陽性藥物對照組（絞股

9、藍(lán)總苷膠囊組）；高、中、低劑量治療組（銀杏葉片組）。每組10只，飼養(yǎng)于二級動物房，自由飲水。正常組喂食河北醫(yī)科大學(xué)動物實驗中心提供的普通飼料，其余（模型組，陽性對照組，治療組）均喂食自制高脂飼料（82.3%普通飼料，2%膽固醇，0.5%膽酸鈉，0.2%丙硫氧嘧啶片，5%蔗糖，10%豬油）。正常組每天灌服2 ml生理鹽水，其余5組每天按1.0 ml/100 g予以38%乙醇2ml灌胃； 2 h后陽性藥物組給絞股藍(lán)總苷21 mg·kg-1·d-1，藥物治療組給銀杏葉片20，15，10 mg·kg-1·d-1等量灌胃，共6周。正常組及模型組每天灌服等量生理鹽水

10、。1         2  結(jié)果2.1  病理結(jié)果正常組（圖1）：肝組織結(jié)構(gòu)完整，肝細(xì)胞呈多邊形，排列整齊，以中央靜脈為中心呈放射狀排列，肝細(xì)胞核圓，位居中央；細(xì)胞質(zhì)豐富，核膜清楚。模型組（圖2）：肝細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)大小不等的脂滴，大脂滴和中等大小脂滴較多，細(xì)胞胞質(zhì)呈現(xiàn)空泡狀。陽性藥物組（圖3）：肝細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)大小不等的脂滴，可見一些較大的脂滴散在分布，數(shù)量較少，較小的脂滴數(shù)量較多。銀杏葉片高劑量組（圖4）：肝細(xì)胞內(nèi)偶見中等大小脂滴和散在的小脂滴，脂滴散在分布于細(xì)胞內(nèi)，數(shù)量較少。銀杏葉片中劑量組（圖5）

11、：肝細(xì)胞內(nèi)偶見中等大小脂滴和散在的小脂滴，小脂滴非常細(xì)小。幾乎接近于正常組織。銀杏葉片低劑量組（圖6）：肝細(xì)胞內(nèi)有極細(xì)小脂滴散在分布，肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)幾乎接近于正常組織。從病理結(jié)構(gòu)看，中、低劑量組的銀杏葉片劑效果最好。2.2  血清學(xué)檢測模型組血清膽固醇、甘油三酯均高于正常組，兩組間比較差異顯著（P<0.05）；灌胃給藥后，陽性對照組及銀杏葉高、中、低劑量組大鼠血清膽固醇、甘油三酯較模型組明顯降低，差別顯著（P<0.01或P<0.05）。模型組血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶均高于正常組，兩組間比較差異顯著（P<0.01）；灌胃給藥后，陽性對照組及銀杏葉高、中、低劑量組大

12、鼠血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶較模型組明顯降低，差別顯著（P<0.01或P<0.05）；銀杏葉高、中、低劑量組間比較無差別（P>0.05）。結(jié)果見表1。表1  各項血清學(xué)檢測指標(biāo)結(jié)果  (略)3   討論與以往馮志強(qiáng)1的大鼠脂肪肝模型比較，本實驗采用混合方式復(fù)制模型，即高脂飼料加酒精飲用，費用低，時間短，從病理學(xué)檢查看造模復(fù)制較成功，且與人類飲食習(xí)慣相適應(yīng)，為人類防治脂肪肝提供了的理論依據(jù)。     銀杏葉為銀杏科植物銀杏的干燥葉，性甘、味苦、澀、平，歸心、肺經(jīng)。有斂肺、平喘、活血化淤、止痛之功。中

13、醫(yī)可用于治療高脂血癥2。銀杏葉提取物具有強(qiáng)烈的抗氧自由基，保護(hù)肝竇內(nèi)皮細(xì)胞，改善肝臟微循環(huán)紊亂3。通過減少酒精所致谷胱甘肽的耗竭，增加抗氧化物質(zhì)活性或含量抑制脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，從而預(yù)防酒精性肝損傷，其機(jī)制可能與誘導(dǎo)血紅素氧化酶-1（HO-1）表達(dá)有關(guān)4。通過本實驗證實銀杏葉明顯降低血清膽固醇、甘油三酯、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶，表明其具有保護(hù)肝細(xì)胞功能，促進(jìn)肝細(xì)胞功能的恢復(fù)?？傊?，銀杏葉提取物對高脂酒精性脂肪肝具有明顯的治療作用。并且以中、低劑量組的銀杏葉片效果最好，臨床值得推廣?！尽?#160; 1馮志強(qiáng)，沈志祥，譚詩云，等.大鼠急性酒精性脂肪肝造模方法的改進(jìn)J.世界華人消化雜志，2003，11（8）：1189.2國家藥典委員會.藥典,部S.北京：化學(xué)出版社，2000：257.3Zhang C, Zu J, Shi H, et al.