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文檔簡介
1、輸血科配制自備試劑的標準操作規(guī)程1、目的本文件規(guī)定了輸血科自備試劑的相關(guān)操作程序,以確保輸血科試驗的質(zhì)量控制,使檢驗結(jié)果更準確。2、適用范圍本文件適用于醫(yī)院輸血科 ABOffll型、RhD血型、鹽水交叉配 血、凝聚胺交叉配血、柱凝膠法血型鑒定及交叉配血,新生兒溶 血篩查試驗,抗人球蛋白試驗等試驗項目檢驗過程的質(zhì)量控制管 理。3、職責輸血科技術(shù)人員負責本實驗室所用自備試劑的配制與確認。4、操作規(guī)程4.1 0.1mol/L2- 前基乙醇(2-Me)的配制材料:2-Me, PH7.4PBS配制方法:稱取 2-Me80mg加入PH7.4PBS 10mL放4 c冰箱 可以保存4周。適用范圍:該試劑為硫氫
2、化合物,能分裂19S的IgM抗體成為 7s單位。含IgM抗體的血清經(jīng)2-Me溶液處理后,IgM抗體重鏈 之間的二硫鍵被打開,不能再凝集鹽水介質(zhì)中的對應(yīng)紅細胞, 用 于含IgG和IgM混合抗體血清中IgG的檢測;鑒定抗體的免疫球 蛋白類別;消除被IgM抗體包被的紅細胞的自身聚集。4.2 磷酸鹽緩沖液(PBS配制材料:KH2PO4分析純),Na2HPO4分析純),去離子蒸儲水配制方法1)溶液A: 1/15mol/L KHPO溶液:取 KHPO9.08g (若試劑含結(jié) 晶水請計算后加入相應(yīng)重量),加少量蒸儲水溶解后,移至 1000ml容量瓶稀釋至刻度,調(diào) PH至5.0 o2)溶液 B: 1/15mo
3、l/L NaHPO容液:取 NaHP(49.47g (若試劑含 結(jié)晶水請計算后加入相應(yīng)重量),加少量蒸儲水溶解后,移至 1000ml容量瓶稀釋至刻度,調(diào) PH至9.0。3)取兩種溶液以適當比例混合,配制符合要求的PHE作緩沖液, 血清學試驗常用PBS PH如下表:PH溶液A (ml)溶液B (ml)5.496.04.05.594.06.07.228.072.07.323.276.87.419.280.87.710.689.47.88.591.57.96.893.28.05.894.78.14.295.88.23.097.04)使用之前要檢查工作液的 PH,若不符合要求,加少量酸性溶 液A或堿性
4、溶液B矯正。適用范圍:廣泛用于血型血清學試驗、試劑稀釋等。4.3 紅細胞懸液的制備分別采取已知正常 A、B、O三種血型的紅細胞,以鹽水洗滌3 次以壓積紅細胞配成不同濃度的紅細胞懸液(見表)。紅細胞懸液的配制懸液濃度(% 壓積紅細胞(滴)鹽水(滴)2 ml (40)210.8 ml (16)511010.4 ml (8)2010.2 ml (4) 為了防止紅細胞懸液敏感性不一致。可隨機采取3個或3個以上 的健康成人血液,按A B。型分別混合后,按上述方法制備。如 用于不規(guī)則抗體篩查,則至少應(yīng)選5人以上的紅細胞混合。參照定型血清質(zhì)控標準,進行質(zhì)量檢查合格,置4 c冰箱保存?zhèn)溆?。如抗原性降低或長菌、溶血則應(yīng)棄之。配置者應(yīng)做好記錄、 登記。如將紅細胞保存,應(yīng)嚴格注意無菌技術(shù),以ACD呆存7按4:1抗凝??杀4嫒?。臨時取出一部分,洗滌后配成所需濃度使用。2%勺紅細胞懸液一般用于滴定抗體效價,5%勺紅細胞懸液常用于 血型鑒定和間接抗人球蛋白實驗,10%勺紅細胞懸液用于測定抗體親 和力。4.4生理鹽水(NS)配制材料:NaCl (分析純),去
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