實驗六、細胞凝集反應(yīng)目的要求1、掌握細胞凝集反應(yīng)的_第1頁
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1、實驗六、細胞凝集反應(yīng)實驗六、細胞凝集反應(yīng)目的要求目的要求 1 1、掌握細胞凝集反應(yīng)的原理。、掌握細胞凝集反應(yīng)的原理。2 2、掌握細胞凝集的實驗方法。、掌握細胞凝集的實驗方法。實驗用品實驗用品 光學(xué)顯微鏡、離心機、載玻片、生理鹽水、光學(xué)顯微鏡、離心機、載玻片、生理鹽水、PBSPBS液、液、土豆塊莖、兔血紅細胞土豆塊莖、兔血紅細胞( (無細胞核無細胞核) )實驗原理實驗原理 凝集素是一類含糖(少數(shù)例外)并能與糖專凝集素是一類含糖(少數(shù)例外)并能與糖專一結(jié)合的蛋白質(zhì),它具有凝集細胞和刺激細胞一結(jié)合的蛋白質(zhì),它具有凝集細胞和刺激細胞分裂的作用。在細胞膜的表面,組成細胞膜的分裂的作用。在細胞膜的表面,組

2、成細胞膜的糖脂和糖蛋白伸出寡糖鏈,形成細胞外被(又糖脂和糖蛋白伸出寡糖鏈,形成細胞外被(又稱為糖萼)。凝集素能與細胞外被中的糖分子稱為糖萼)。凝集素能與細胞外被中的糖分子鏈接,在細胞間形成鏈接,在細胞間形成“橋橋”,從而引起細胞凝,從而引起細胞凝集。集。 大多數(shù)凝集素存在于儲藏器官內(nèi),作為一種大多數(shù)凝集素存在于儲藏器官內(nèi),作為一種氮源。氮源。實驗內(nèi)容和方法實驗內(nèi)容和方法一、一、2%2%兔血紅細胞制備:兔血紅細胞制備: 1ml1ml兔血加入兔血加入5ml5ml生理鹽水,生理鹽水,2000r/min,52000r/min,5分鐘離心分鐘離心2 2次次 后,按照紅細胞體積比配制后,按照紅細胞體積比配

3、制2%2%兔血紅細胞懸液。兔血紅細胞懸液。二、土豆塊莖:二、土豆塊莖: 1 1、提取凝集素:稱取土豆去皮塊莖、提取凝集素:稱取土豆去皮塊莖4g4g,加少許磷酸緩沖,加少許磷酸緩沖 液研磨成勻漿,最終加到液研磨成勻漿,最終加到30ml30ml磷酸緩沖液,浸泡磷酸緩沖液,浸泡2h2h, 浸出的粗提液含有可溶性土豆凝集素。浸出的粗提液含有可溶性土豆凝集素。 2 2、測定血凝活性:一滴、測定血凝活性:一滴 2%2%兔血紅細胞懸液和一滴凝集兔血紅細胞懸液和一滴凝集 素粗提液,靜置素粗提液,靜置1515分鐘于低倍鏡下觀察。分鐘于低倍鏡下觀察。 3 3、用磷酸緩沖液作為對照:一滴、用磷酸緩沖液作為對照:一滴 2%2%兔血紅細胞懸液和兔血紅細胞懸液和 一滴磷酸緩沖液,靜置一滴磷酸緩沖液,靜置1515分鐘于低倍鏡下觀察。分鐘于低倍鏡下觀察。 4 4、實驗繪圖、實驗繪圖顯

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