食品中菌落總數(shù)的測定方法

1、食品中菌落總數(shù)的測定一、試驗目的（1） 學習和把握測定食品中菌落總數(shù)的基本方法（2） 學會菌落總數(shù)的報告方式二、試驗材料1、儀器與設備：恒溫培育箱、托盤天平、電爐、吸管、三角瓶、平皿、試管、試管架、酒精燈、滅菌刀或剪刀、75%酒精棉球、玻璃蠟筆。2、 培育基和試劑：75%乙醇、0.85%生理鹽水、瓊脂培育基：胰蛋白胨5.0g、酵母浸膏2.5g、葡萄糖1.0g、瓊脂15.0g、蒸餾水1000mL、pH 7.0±0.2 3、檢樣：利樂包裝鮮牛奶250ml三、試驗方法與步驟1、檢驗程序菌落總數(shù)檢驗程序：檢樣做成幾個適當倍數(shù)的稀釋液選擇2-3個適宜稀釋度各以1ml之量分別入滅菌平皿內(nèi)每皿內(nèi)加

2、入4615-20ml養(yǎng)分瓊脂置36±1恒溫箱內(nèi)培育（48±2）h取出 菌落數(shù)報告2、檢樣稀釋及培育（1）以無菌操作，將檢樣包裝打開，用吸管取25ml鮮牛奶，放于含有225ml滅菌生理鹽水的500ml滅菌玻璃三角瓶內(nèi)（瓶內(nèi)預先置適當數(shù)量的玻璃珠），經(jīng)充分振搖做成1：10的均勻稀釋液。（2）用1ml滅菌吸管吸取1：10稀釋液1ml，沿管壁緩緩注入含有9ml滅菌生理鹽水的試管內(nèi)（留意吸管尖端不要觸及管內(nèi)稀釋液，下同），振搖試管混合均勻，做成1：100的稀釋液。（3）另取1ml的滅菌吸管，按上項操作挨次作10倍遞增稀釋液，如此每遞增稀釋一次，即換用1支1ml滅菌吸管。（4）依據(jù)食品

3、衛(wèi)生檢驗標準要求和檢樣的菌落數(shù)量，選擇3個連續(xù)適宜稀釋度即10、101、102，分別在作10倍遞增稀釋的同時，即以吸取該稀釋度的吸管移1ml稀釋液于滅菌平皿內(nèi)，每個稀釋度作兩個平皿。（5）稀釋液移入平皿后，應準時將涼至46養(yǎng)分瓊脂培育基注入平皿15ml20mL，并轉(zhuǎn)動平皿使與稀釋檢樣混合均勻，同時將養(yǎng)分瓊脂培育基傾入加有1ml稀釋液（不含樣品）的滅菌平皿內(nèi)作空白對比。 （6）等瓊脂凝固后，翻轉(zhuǎn)平板，置36±1恒溫箱內(nèi)培育（48±2）h取出，計算平板內(nèi)菌落數(shù)目乘以倍數(shù)，即得1mL樣品所含菌落總數(shù)。 四、檢樣中細菌菌落總數(shù)的計算與報告1、菌落計算方法（1）菌落計數(shù)方法做平板菌落

4、計數(shù)時，可用肉眼觀查，必要時用放大鏡檢查，以防遺漏。在登記各平板的菌落數(shù)后，求出同稀釋度的各平板平均菌落總數(shù)。（2）菌落計數(shù)的報告平板菌落數(shù)的選擇 選取菌落數(shù)在30300 CFU之間的平板作為菌落總數(shù)測定標準。一個稀釋度使用兩個平板，應接受兩個平板平均數(shù)，稀釋度的選擇應選擇平均菌落數(shù)在30300 CFU之間的稀釋度，乘以稀釋倍數(shù)報告之。若有兩個稀釋度，其生長的菌落數(shù)均在30300之間， 按以下公式計算：N = 樣品中菌落數(shù)C = 含適宜范圍CFU的平板菌落數(shù)之和n1 = 第一稀釋度（低稀釋度）平板個數(shù)n2 = 其次稀釋度（高稀釋度）平板個數(shù)d = 稀釋因子（第一稀釋度） 若全部稀釋度的平均菌落

5、數(shù)均大于300 CFU，則應按稀釋度最高的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之，若全部稀釋度的平均菌落數(shù)均小于30 CFU，則應按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告若全部稀釋度及樣品原液均無菌落生長，則以小于l乘以最低稀釋倍數(shù)報告之，若全部稀釋度的平均菌落數(shù)均不在30300 CFU之間，其中一部分大于300 CFU或小于30 CFU時，則以最接近30 CFU或300 CFU的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之。菌落數(shù)的報告菌落數(shù)小于100 CFU 時，按“四舍五入”原則修約，以整數(shù)報告。菌落數(shù)大于或等于100 CFU 時，第3 位數(shù)字接受“四舍五入”原則修約后，取前2 位數(shù)字，后面用0 代替位數(shù)；也可用

6、10 的指數(shù)形式來表示，按“四舍五入”原則修約后，接受兩位有效數(shù)字。若全部平板上為集中菌落而無法計數(shù)，則報告菌落集中。若空白對比上有菌落生長，則此次檢測結(jié)果無效。稱重取樣以CFU/g 為單位報告，體積取樣以CFU/mL 為單位報告。3、試驗結(jié)果與記錄稀釋度菌落數(shù)皿號10101102報告數(shù)12稀釋液對比皿空白皿判定所檢測樣品菌落總數(shù)是否符合國家標準Phibro is required to respond to the FDA that Jianmin:·       Is Prepared to add the follow

7、ing tests; light absorbing impurities, related substances and particle size to their OTC COA;·       Will provide a COA as evidence that these tests have been conducted and added to the COA;·       Will update VMF 6023 to include the data and report to support validation or verification of the methods used to analyze the tests cited above; and·       Will provide us with a report or a statemen