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文檔簡介

1、高中生物選修一生物技術(shù)實踐 知識點總結(jié)課題一 果酒和果醋的制作1、發(fā)酵:通過微生物技術(shù)的培養(yǎng)來生產(chǎn)大量代謝產(chǎn)物的過程。2、有氧發(fā)酵:醋酸發(fā)酵 谷氨酸發(fā)酵 ·無氧發(fā)酵:酒精發(fā)酵 乳酸發(fā)酵 3、酵母菌是兼性厭氧菌型微生物真菌 ·酵母菌的生殖方式:出芽生殖(主要) 分裂生殖 孢子生殖4、在有氧條件下,酵母菌進(jìn)行有氧呼吸,大量繁殖。 C6H12O66O26CO26H2O5、在無氧條件下,酵母菌能進(jìn)行酒精發(fā)酵。 C6H12O62C2H5OH2CO26、20左右最適宜酵母菌繁殖 酒精發(fā)酵時一般將溫度控制在18-25 7、在葡萄酒自然發(fā)酵的過程中,起主要作用的是附著在葡萄皮表面的野生型酵

2、母菌.在發(fā)酵過程中,隨著酒精濃度的提高,紅葡萄皮的色素也進(jìn)入發(fā)酵液,使葡萄酒呈現(xiàn)深紅色.在缺氧 呈酸性的發(fā)酵液中,酵母菌可以生長繁殖,而絕大多數(shù)其他微生物都因無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到制約。8、醋酸菌是單細(xì)胞細(xì)菌(原核生物),代謝類型是異養(yǎng)需氧型,生殖方式為二分裂9、當(dāng)氧氣、糖源都充足時,醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸;當(dāng)缺少糖源時,醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?,再將乙醛變?yōu)榇姿帷?2C2H5OH4O2CH3COOH6H2O10、控制發(fā)酵條件的作用醋酸菌對氧氣的含量特別敏感,當(dāng)進(jìn)行深層發(fā)酵時,即使只是短時間中斷通入氧氣,也會引起醋酸菌死亡。醋酸菌最適生長溫度為3035,控制好發(fā)酵溫度,使發(fā)酵時間縮短,又減

3、少雜菌污染的機會。有兩條途徑生成醋酸:直接氧化和以酒精為底物的氧化。11、實驗流程:挑選葡萄沖洗榨汁酒精發(fā)酵果酒(醋酸發(fā)酵果醋)12、酒精檢驗:果汁發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生,可以用重鉻酸鉀來檢驗。在酸性條件下,重鉻酸鉀與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色。先在試管中加入發(fā)酵液2L,再滴入物質(zhì)的量濃度為3mol/L的H2SO43滴,振蕩混勻,最后滴加常溫下飽和的重鉻酸鉀溶液3滴,振蕩試管,觀察顏色13、充氣口是在醋酸發(fā)酵時連接充氣泵進(jìn)行充氣用的;排氣口是在酒精發(fā)酵時用來排出二氧化碳的;出料口是用來取樣的。排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身相連接,其目的是防止空氣中微生物的污染。開口向下的目的是有利于二氧化碳的排出

4、。使用該裝置制酒時,應(yīng)該關(guān)閉充氣口;制醋時,應(yīng)該充氣口連接氣泵,輸入氧氣。疑難解答(1)你認(rèn)為應(yīng)該先沖洗葡萄還是先除去枝梗?為什么?應(yīng)該先沖洗,然后再除去枝梗,以避免除去枝梗時引起葡萄破損,增加被雜菌污染的機會。(2)你認(rèn)為應(yīng)該從哪些方面防止發(fā)酵液被污染?如:要先沖洗葡萄,再除去枝梗;榨汁機、發(fā)酵裝置要清洗干凈,并進(jìn)行酒精消毒;每次排氣時只需擰松瓶蓋,不要完全揭開瓶蓋等。(3)制葡萄酒時,為什么要將溫度控制在1825?制葡萄醋時,為什么要將溫度控制在3035?溫度是酵母菌生長和發(fā)酵的重要條件。20左右最適合酵母菌的繁殖。因此需要將溫度控制在其最適溫度范圍內(nèi)。而醋酸菌是嗜溫菌,最適生長溫度為30

5、35,因此要將溫度控制在3035。課題二 腐乳的制作1、多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵,如青霉、酵母、曲霉、毛霉等,其中起主要作用的是毛霉。毛霉是一種絲狀真菌。代謝類型是異養(yǎng)需氧型。生殖方式是孢子生殖。營腐生生活。2、原理:毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸;脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。3、實驗流程:讓豆腐上長出毛霉加鹽腌制加鹵湯裝瓶密封腌制4、釀造腐乳的主要生產(chǎn)工序是將豆腐進(jìn)行前期發(fā)酵和后期發(fā)酵。前期發(fā)酵的主要作用:1.創(chuàng)造條件讓毛霉生長。2.使毛酶形成菌膜包住豆腐使腐乳成型。后期發(fā)酵主要是酶與微生物協(xié)同參與生化反應(yīng)的過程。通過各種輔料與酶的緩解作用,生成腐

6、乳的香氣。5、將豆腐切成3cm×3cm×1cm的若干塊。所用豆腐的含水量為70左右,水分過多則腐乳不易成形。*水分測定方法如下:精確稱取經(jīng)研缽研磨成糊狀的樣品510g(精確到0.02mg),置于已知重量的蒸發(fā)皿中,均勻攤平后,在100105電熱干燥箱內(nèi)干燥4h,取出后置于干燥器內(nèi)冷卻至室溫后稱重,然后再烘30min,直至所稱重量不變?yōu)橹?。樣品水分含量?)計算公式如下:(烘干前容器和樣品質(zhì)量-烘干后容器和樣品質(zhì)量)/烘干前樣品質(zhì)量·毛霉的生長:條件:將豆腐塊平放在籠屜內(nèi),將籠屜中的控制在1518,并保持一定的溫度。來源:1.來自空氣中的毛霉孢子,2. 直接接種優(yōu)良

7、毛霉菌種時間:5天·加鹽腌制:將長滿毛霉的豆腐塊分層整齊地擺放在瓶中,同時逐層加鹽,隨著層數(shù)的加高而增加鹽量,接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些。加鹽腌制的時間約為8天左右。·用鹽腌制時,注意控制鹽的用量:鹽的濃度過低,不足以抑制微生物的生長,可能導(dǎo)致豆腐腐敗變質(zhì);鹽的濃度過高會影響腐乳的口味·食鹽的作用:1.抑制微生物的生長,避免腐敗變質(zhì)2.析出水分,是豆腐變硬,在后期制作過程中不易酥爛3.調(diào)味作用,給腐乳以必要的咸味4.浸提毛酶菌絲上的蛋白酶。·配制鹵湯:鹵湯直接關(guān)系到腐乳的色、香、味。鹵湯是由酒及各種香辛料配制而成的。鹵湯中酒的含量一般控制在12%左右。&

8、#183;酒的作用:1.防止雜菌污染以防腐2.與有機酸結(jié)合形成酯,賦予腐乳風(fēng)味3.酒精含量的高低與腐乳后期發(fā)酵時間的長短有很大關(guān)系,酒精含量越高,對蛋白酶的抑制作用也越大,使腐乳成熟期延長;酒精含量過低,蛋白酶的活性高,加快蛋白質(zhì)的水解,雜菌繁殖快,豆腐易腐敗,難以成塊。·香辛料的作用:1.調(diào)味作用2.殺菌防腐作用3.參與并促進(jìn)發(fā)酵過程·防止雜菌污染:用來腌制腐乳的玻璃瓶,洗刷干凈后要用沸水消毒。裝瓶時,操作要迅速小心。整齊地擺放好豆腐、加入鹵湯后,要用膠條將瓶口密封。封瓶時,最好將瓶口通過酒精燈的火焰,防止瓶口被污染。疑難解答(1)利用所學(xué)的生物學(xué)知識,解釋豆腐長白毛是怎

9、么一回事?豆腐生長的白毛是毛霉的白色菌絲。嚴(yán)格地說是直立菌絲,在豆腐中還有匍匐菌絲。(2)為什么要撒許多鹽,將長毛的豆腐腌起來?鹽能防止雜菌污染,避免豆腐腐敗。(3)我們平常吃的豆腐,哪種適合用來做腐乳?含水量為70%左右的豆腐適于作腐乳。用含水量高的豆腐制作腐乳,不易成形。(4)吃腐乳時,你會發(fā)現(xiàn)腐乳外部有一層致密的“皮”。這層“皮”是怎樣形成的呢?它對人體有害嗎?它的作用是什么?“皮”是前期發(fā)酵時在豆腐表面上生長的菌絲(匍匐菌絲),對人體無害。它能形成腐乳的“體”,使腐乳成形。微生物的實驗室培養(yǎng)1·培養(yǎng)基:人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求,配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì),是進(jìn)行微

10、生物培養(yǎng)的物質(zhì)基礎(chǔ)。2·培養(yǎng)基按照物理性質(zhì)可分為液體培養(yǎng)基 半固體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑瓊脂(是從紅藻中提取的一種多糖,在配制培養(yǎng)基中用作凝固劑)后,制成瓊脂固體培養(yǎng)基。微生物在固體培養(yǎng)基表面生長,可以形成肉眼可見的菌落。根據(jù)菌落的特征可以判斷是哪一種菌。液體培養(yǎng)基應(yīng)用于工業(yè)或生活生產(chǎn),固體培養(yǎng)基應(yīng)用于微生物的分離和鑒定,半固體培養(yǎng)基則常用于觀察微生物的運動及菌種保藏等。3·按照成分培養(yǎng)基可分為人工合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基是用成分已知的化學(xué)物質(zhì)配制而成,其中成分的種類比例明確,常用于微生物的分離鑒定。天然培養(yǎng)基是用化學(xué)成分不明的天然物質(zhì)配制而

11、成,常用于實際工業(yè)生產(chǎn)。4·按照培養(yǎng)基的用途,可將培養(yǎng)基分為選擇培養(yǎng)基和鑒定培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基是指在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì),以抑制不需要的微生物生長,促進(jìn)所需要的微生物的生長。鑒別培養(yǎng)基是根據(jù)微生物的特點,在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品配制而成的,用以鑒別不同類別的微生物。5·培養(yǎng)基的化學(xué)成分包括 水 、 無機鹽 、 碳源 、 氮源 、生長因子等。·碳源:能為微生物的代謝提供碳元素的物質(zhì)。如CO2、NaHCO3等無機碳源;糖類、石油、花生粉餅等有機碳源。異養(yǎng)微生物只能利用有機碳源。單質(zhì)碳不能作為碳源。·氮源:能為微生物的代謝提供氮元素的物質(zhì)。如N2

12、、NH3、NO3-、NH4+(無機氮源)蛋白質(zhì)、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨(有機氮源)等。只有固氮微生物才能利用N2。·培養(yǎng)基還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。例如,培養(yǎng)乳酸桿菌時需要在培養(yǎng)基中添加維生素,培養(yǎng)霉菌時須將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性,培養(yǎng)細(xì)菌是需要將pH調(diào)至中性或微堿性,培養(yǎng)厭氧型微生物是則需要提供無氧的條件·無菌技術(shù)·獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵,要注意以下幾個方面:對實驗操作的空間、操作者的衣著和手,進(jìn)行清潔和消毒。將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行滅菌。為避免周圍環(huán)境中微生物的污染,實驗操作應(yīng)在酒精燈

13、火焰附近進(jìn)行。實驗操作時應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸。無菌技術(shù)除了用來防止實驗室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外,還有什么目的?答:無菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。·消毒與滅菌的區(qū)別消毒指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。消毒方法常用煮沸消毒法,巴氏消毒法(對于一些不耐高溫的液體)還有化學(xué)藥劑(如酒精、氯氣、石炭酸等)消毒、紫外線消毒。滅菌則是指使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽孢和孢子。滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。滅菌方法:接種環(huán)、接種針、試管口等使用灼燒滅菌法;

14、玻璃器皿、金屬用具等使用干熱滅菌法,所用器械是干熱滅菌箱 ; 培養(yǎng)基、無菌水等使用高壓蒸汽滅菌法,所用器械是高壓蒸汽滅菌鍋 。表面滅菌和空氣滅菌等使用紫外線滅菌法,所用器械是紫外燈 。比較項理化因素的作用強度消滅微生物的數(shù)量芽孢和孢子能否被消滅消毒較為溫和部分生活狀態(tài)的微生物不能滅菌強烈全部微生物能制作牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基(1)方法步驟:計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。(2)倒平板操作的步驟:將滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上,右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶,左手拔出棉塞。右手拿錐形瓶,將瓶口迅速通過火焰。用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基(約1020mL)

15、倒入培養(yǎng)皿,左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋。等待平板冷卻凝固,大約需510min。然后,將平板倒過來放置,使培養(yǎng)皿蓋在下、皿底在上。·倒平板操作的討論1.培養(yǎng)基滅菌后,需要冷卻到50左右時,才能用來倒平板。你用什么辦法來估計培養(yǎng)基的溫度?提示:可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶,感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時,就可以進(jìn)行倒平板了。2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰?答:通過灼燒滅菌,防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。3.平板冷凝后,為什么要將平板倒置?答:平板冷凝后,皿蓋上會凝結(jié)水珠,凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高,將平板倒置,既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā),又可以防止皿蓋上的水珠落入培

16、養(yǎng)基,造成污染。4.在倒平板的過程中,如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位,這個平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎?為什么?答:空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生,因此最好不要用這個平板培養(yǎng)微生物。13純化大腸桿菌(1)微生物接種的方法最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法。(2)平板劃線法是通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作。將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后培養(yǎng),可以分離到由一個細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體,這就是菌落。(3)稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面,進(jìn)行培養(yǎng)。分為系列稀釋操作

17、和涂布平板操作兩步。(4)用平板劃線法和稀釋涂布平板法接種的目的是:使聚集在一起的微生物分散成單個細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落,以便于純化菌種。(5)平板劃線法操作步驟:將接種環(huán)放在火焰上灼燒,直到接種環(huán)燒紅。在火焰旁冷卻接種環(huán),并打開棉塞。將試管口通過火焰。將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)菌液。將試管通過火焰,并塞上棉塞。左手將皿蓋打開一條縫隙,右手將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi),劃三至五條平行線,蓋上皿蓋。注意不要劃破培養(yǎng)皿。灼燒接種環(huán),待其冷卻后,從第一區(qū)域劃線的末端開始往第二區(qū)域內(nèi)劃線。重復(fù)以上操作,在三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。注意不要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連。將平板倒置

18、放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。(6)涂布平板操作的步驟:將涂布器浸在盛有酒精的燒杯中。取少量菌液,滴加到培養(yǎng)基表面。將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃,待酒精燃盡后,冷卻810s。用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面。14平板劃線操作的討論(1)為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)?在劃線操作結(jié)束時,仍然需要灼燒接種環(huán)嗎?為什么?答:操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物;每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后,接種環(huán)上殘留的菌種,使下一次劃線時,接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端,從而通過劃線次數(shù)的增加,使每次劃線時菌種的數(shù)目逐漸減少,以便得到菌落。劃

19、線結(jié)束后灼燒接種環(huán),能及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。(2)在灼燒接種環(huán)之后,為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線?答:以免接種環(huán)溫度太高,殺死菌種。(3)在作第二次以及其后的劃線操作時,為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線?答:劃線后,線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少,每次從上一次劃線的末端開始,能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少,最終能得到由單個細(xì)菌繁殖而來的菌落。15涂布平板操作的討論涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求,想一想,第2步應(yīng)如何進(jìn)行無菌操作?提示:應(yīng)從操作的各個細(xì)節(jié)保證“無菌”。例如,酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合

20、適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍;等等。16菌種的保存(1)對于頻繁使用的菌種,可以采用臨時保藏的方法。臨時保藏方法 :將菌種接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上,在合適的溫度下培養(yǎng)。當(dāng)菌落長成后,將試管放入4的冰箱中保藏。以后每36個月,都要重新將菌種從舊的培養(yǎng)基上轉(zhuǎn)移到新鮮的培養(yǎng)基上。缺點:這種方法保存的時間不長,菌種容易被污染或產(chǎn)生變異。(2)對于需要長期保存的菌種,可以采用甘油管藏的方法。在3mL的甘油瓶中,裝入1mL甘油后滅菌。將1mL培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中,與甘油充分混勻后,放在20的冷凍箱中保存。疑難解答(1)生物的營養(yǎng)營養(yǎng)是指生物攝取、利用營養(yǎng)物質(zhì)的過程。營養(yǎng)物

21、質(zhì)是指維持機體生命活動,保證發(fā)育、生殖所需的外源物質(zhì)。人及動物的營養(yǎng)物質(zhì):水、無機鹽、糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、維生素六類。植物的營養(yǎng)物質(zhì):礦質(zhì)元素、水、二氧化碳等三類。微生物的營養(yǎng)物質(zhì):水、無機鹽、碳源、氮源及特殊營養(yǎng)物質(zhì)五類。(2)確定培養(yǎng)基制作是否合格的方法將未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫12天,無菌落生長,說明培養(yǎng)基的制備是成功的,否則需要重新制備。課題2探討加酶洗衣粉的洗滌效果1基礎(chǔ)知識活動1:閱讀“課題背景”及“基礎(chǔ)知識”,討論并完成學(xué)案11加酶洗衣粉是指含有酶制劑的洗衣粉,目前常用的酶制劑有四類:蛋白酶 、 脂肪酶 、淀粉酶 、 纖維素酶 。其中應(yīng)用最廣泛、效果最明顯的是 堿性蛋白酶 和

22、 堿性脂肪酶 。思考1堿性蛋白酶為什么具有如此強的功效?它的作用機理是怎樣的?請寫出作用示意圖。酶具有高效性,能迅速將血漬、奶漬等含有的大分子蛋白質(zhì)分解成可溶性小分子肽和氨基酸。蛋白酶肽酶蛋白質(zhì)多肽氨基酸思考2你能寫出脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶的作用示意圖嗎?淀粉酶淀粉麥芽糖脂肪酶脂肪甘油脂肪酸C1酶、Cx酶葡萄糖苷酶纖維素纖維二糖氨基酸12影響酶活性的因素有 溫度 、 酸堿度 和 表面活性劑 。思考3酶能直接添加到洗衣粉中嗎?為什么?科學(xué)家是如何解決這一難題的?不能,因為洗衣粉中的表面活性物質(zhì)會降低酶的活性。將基因工程生產(chǎn)出的酶用特殊水溶性物質(zhì)包裹起來,與洗衣粉的其它成分隔離開來。思考4為什么

23、說加酶洗衣粉能減少對環(huán)境的污染?加酶洗衣粉可以降低表面活性劑和三聚磷酸鈉的用量,使洗滌劑朝低磷、無磷的方向發(fā)展。【補充】普通洗衣粉的化學(xué)成分有:表面活性劑、水軟化劑、堿劑、漂白粉等成分,有的洗衣粉中還含有增白劑、香精和色素,以及填充劑等。2實驗設(shè)計活動2:閱讀“資料一有效地控制變量”,探究普通洗衣粉和加酶洗衣粉的洗滌效果的不同:21分析:A同學(xué)的實驗方案存在問題嗎?若有問題,請說明存在的問題。有問題。未說明控制相同的適宜溫度;玻璃棒攪拌的強度難于控制相同;為確定布料顏色等。思考5你同意B同學(xué)觀點嗎?請說明理由。不同意。B同學(xué)忽略了實驗中變量的控制問題。思考6影響加酶洗衣粉洗滌效果的因素有哪些?

24、水溫、水量、水質(zhì)、洗衣粉的用量、衣物的質(zhì)料、大小及侵泡時間和洗滌時間等。22設(shè)計:你認(rèn)為應(yīng)該控制的單一變量是 普通洗衣粉和加酶洗衣粉 的區(qū)別,其他條件(如洗衣粉用量、水溫、水質(zhì)、水量、布料的大小和顏色、洗滌方式、洗滌時間等)完全性同。活動3:閱讀“資料二考慮實際生活中的具體情況”,探究溫度對加酶洗衣粉效果的影響:23水溫的控制:通常情況下春、夏、秋、冬四季可分別選取 5 、 15 、 25 、 35 。24其他條件控制:洗滌方式有半自動和全自動,相比之下采用 全自動 方式比較好,并且應(yīng)盡量使用同一型號小容量的洗衣機,其機械攪拌作用 相同 ;洗滌材料以(衣物、布料)作為實驗材料比較可行,做對照實

25、驗時可以控制布料的 大小 、 顏色 以及 污物的量 (可用滴管控制)使其相同,同時也便于洗滌效果的比較;水量和洗衣粉用量與布料的大小是成 正比 的。3實驗操作課題名稱:溫度對加酶洗衣粉洗滌效果的影響實驗?zāi)康模罕容^不同溫度下加酶洗衣粉的洗滌效果實驗原理:酶的催化活性受溫度影響,在適宜溫度下酶的催化活性最高,溫度過低或過高酶的催化能力降低實驗材料:加酶洗衣粉、天平、白色棉布、1000mL燒杯、玻棒、溫度計、滴管、新鮮雞血、水浴缸、溫度分別為5、15、25、35的清水。實驗步驟:(1)取10cm×10cm的白色棉布4塊,用滴管各滴加5滴新鮮雞血,晾干備用。(2)取1000mL燒杯4個,用天

26、平分別稱取0.5g加酶洗衣粉,依次倒入4個燒杯中。(3)將5、15、25、35清水各500mL依次倒入4個燒杯中,用玻棒攪拌溶化洗衣粉。(4)取水浴缸4個,依次倒入5000mL 5、15、25、35清水,插入溫度計保持恒溫。(5)將4個燒杯分別放到相同水溫的水浴缸中,將帶雞血的棉布分別放到燒杯中浸泡20min。(6)按相同方式用不同玻棒攪拌棉布各,放到水浴缸中課題3 酵母細(xì)胞的固定化1基礎(chǔ)知識葡萄糖異構(gòu)酶果糖葡萄糖1固定化酶的應(yīng)用實例生產(chǎn)高果糖漿(1)高果糖漿的生產(chǎn)原理:(2)葡萄糖異構(gòu)酶固定:將葡萄糖異構(gòu)酶固定在顆粒狀載體上,裝入反應(yīng)柱中。(3)高果糖漿的生產(chǎn)操作(識圖45反應(yīng)柱):從反應(yīng)柱

27、上端注入葡萄糖溶液,從下端流出果糖溶液,一個反應(yīng)柱可連續(xù)使用半年。2固定化技術(shù)的方法(識圖46固定方法):將酶和細(xì)胞固定化方法有包埋法、化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法?!颈容^】酶和細(xì)胞的固定方法和特點固定對象酶細(xì)胞適宜固定法化學(xué)結(jié)合法、物理吸附法包埋法特 點體積小,固定一種酶。包埋法容易丟失體積大,固定一系列酶。難以化學(xué)結(jié)合和吸附思考1對固定酶的作用影響較小的固定方法是什么?吸附法。思考2將谷氨酸棒狀桿菌生產(chǎn)谷氨酸的發(fā)酵過程變?yōu)檫B續(xù)的酶反應(yīng),應(yīng)當(dāng)固定(酶、細(xì)胞);若將蛋白質(zhì)變成氨基酸,應(yīng)當(dāng)固定(酶、細(xì)胞)。3固定細(xì)胞的材料:固定細(xì)胞時應(yīng)當(dāng)選用不溶于水多孔性載體材料,如明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉、醋酸纖維素

28、和聚丙烯酰胺等2實驗設(shè)計1制備固定化酵母細(xì)胞(1)酵母細(xì)胞的活化:1g干酵母10mL蒸餾水50mL燒杯攪拌均勻放置1h,使之活化。思考3活化是指讓處于休眠狀態(tài)的微生物重新恢復(fù)正常生活狀態(tài)的過程。(2)配制CaCl2溶液:0.83gCaCl2150mL蒸餾水200mL燒杯溶解備用。(3)配制海藻酸鈉溶液:0.7g海藻酸10mL水50mL燒杯酒精燈微火(或間斷)加熱,并不斷攪拌,使之溶化蒸餾水定容到10mL。思考4微火加熱并不斷攪拌的目的是什么?防止海藻酸南焦糊。(4)海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞的混合:將溶化的海藻酸鈉溶液冷卻至室溫,加入活化酵母細(xì)胞液,攪拌后吸入到注射器中。思考5為什么要海藻酸鈉溶液

29、冷卻后才能加入酵母細(xì)胞?防止高溫殺死酵母細(xì)胞。(5)固定化酵母細(xì)胞:以恒定速度緩慢地將注射器中的溶液滴加到CaCl2溶液中,形成凝膠珠狀顆粒。2固定化酵母細(xì)胞的發(fā)酵(6)沖洗:將固定的酵母細(xì)胞凝膠珠用蒸餾水沖洗23次。(7)發(fā)酵:150mL10葡萄糖固定化酵母細(xì)胞200mL錘形瓶密封25發(fā)酵24h。思考6發(fā)酵過程中錐形瓶為什么要密封?酵母菌的酒精發(fā)酵需要缺氧條件。思考7錐形瓶中的氣泡和酒精是怎樣形成的?酵母菌進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生的。思考8在利用固定化酶或固定化細(xì)胞進(jìn)行生產(chǎn)的過程中,需要無菌操作碼?需要。酵母細(xì)胞的活化配制CaCl2溶液配制海藻酸鈉溶液將海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞的混合固定化酵母細(xì)胞沖洗

30、凝膠珠酒精發(fā)酵3發(fā)酵操作課題一的粗提取與鑒定DNA的粗提取與鑒定1·提取DNA的溶解性原理包括哪些方面?DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同;DNA不溶于酒精。A·DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度有何特點?要使DNA溶解,需要使用什么濃度?要使DNA析出,又需要使用什么濃度?在0.14mol/L時溶解度最??;較高濃度可使DNA溶解;0.14mol/L可使DNA析出。B·在溶解細(xì)胞中的DNA時,人們通常選用2mol/LNaCl溶液;將DNA分子析出的方法是向溶有DNA的NaCl溶液中緩慢注入蒸餾水,以稀釋NaCl溶液。酒精是一種常用有機溶劑,但DNA卻不能溶

31、于酒精(特別是95冷卻酒精),但細(xì)胞中蛋白質(zhì)可溶于酒精。從理論上分析,預(yù)冷的乙醇溶液具有以下優(yōu)點。一是抑制核酸水解酶活性,防止DNA降解;二是降低分子運動,易于形成沉淀析出;三是低溫有利于增加DNA分子柔韌性,減少斷裂。C·采用DNA不溶于酒精的原理,可以達(dá)到什么目的?將DNA和蛋白質(zhì)進(jìn)一步分離。D·提取DNA還可以利用DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性原理。利用該原理時,應(yīng)選用怎樣的酶和怎樣的溫度值?蛋白酶,因為酶具有專一性,蛋白酶只水解蛋白質(zhì)而不會對DNA產(chǎn)生影響。溫度值為6080,因為該溫度值蛋白質(zhì)變性沉淀,而DNA不會變性。補充:DNA的變性是指DNA分子在高溫下解螺

32、旋,其溫度在80以上,如在PCR技術(shù)中DNA變性溫度在95。E·洗滌劑在提取DNA中有何作用?洗滌劑將細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì),從而瓦解細(xì)胞膜。F·當(dāng)鑒定提取出的物質(zhì)是否是DNA時,需要使用什么指示劑進(jìn)行鑒定?在沸水浴條件下,DNA遇二苯胺呈現(xiàn)藍(lán)色。原理總結(jié):通過利用不同濃度NaCl溶液溶解或析出DNA,可以從細(xì)胞中提取和提純DNA;再利用酒精進(jìn)一步將DNA與蛋白質(zhì)分離開來,達(dá)到提純的目的;最后利用二苯胺試劑鑒定提取的物質(zhì)是否是DNA。實驗材料的選取不同生物的組織中DNA含量不同。在選取材料時,應(yīng)本著DNA含量高、材料易得、便于提取的原則。本實驗用雞血細(xì)胞做實驗材料有兩個原因。一是因為雞血細(xì)胞核的DNA含量豐富,材料易得;二是雞血細(xì)胞極易吸水脹破,而用動物肝臟細(xì)胞作實驗材料常常需要勻漿和離心,對設(shè)備要求較高,操作繁瑣,歷時較長。雞血細(xì)胞破碎以后釋放出的DNA,容易被玻璃容器吸附,所以在提取過程中為了減少DNA的損失,最好使用塑料的燒杯和試管盛放雞血細(xì)胞液。破碎細(xì)胞,獲取含DNA的濾液·若選用雞血和洋蔥作實驗材料,則怎樣獲取含DNA的濾液?在雞血細(xì)胞液中加入一定量蒸餾水并用玻棒攪拌,過濾后收集濾液;切碎洋蔥,加入一定量洗滌劑和食鹽,攪拌研磨,過濾后收集濾液。·為什么加入蒸餾水能使雞血細(xì)胞破裂?答:蒸餾水對于雞血細(xì)胞來說是一種低滲液體,水分可以大量進(jìn)入

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