丹皮活性成分綜合提取工藝的研究

1、丹皮活性成分綜合提取工藝的研究         【摘要】  目的：綜合提取制備丹皮內丹皮多糖、丹皮酚、丹皮總苷三種活性成分。方法：丹皮破碎后，水提醇沉，凍干后得丹皮多糖。剩余藥渣用水蒸汽蒸餾法提取丹皮酚。蒸餾所剩殘渣有機溶劑法提取丹皮總苷。結果：依次提取出三種活性物質，其中丹皮多糖得率1.27%，丹皮酚得率為1.76%，丹皮總苷得率為3.92%。結論：該提取方法切實可行，丹皮內各活性物質均得到較完全分離，為大工業(yè)化生產(chǎn)提供了理論依據(jù)。 【關鍵詞】  綜合提取 丹皮多糖 丹皮酚 丹皮總苷 

2、;  Study on multible-extracting techology of cortex moudan   【Abstract】Objective: To study on the multible-extracting technology of Cortex moutan.Methods:Polysaccharide could be extracted by water.The other ethanol component could be extracted after it has dried.The paeonol can distil

3、led by steam distillation method,the remains can excract the third component.Results:The content of polysaccharides was 1.27%,the paeonol was 1.73% and the total glucoside is 3.84%.Conclusion:The technology of multible-extracting is available for the industrialization.Every component can be distille

4、d by this method.   【Key words】multible-extracting techology;polysaccharide;paeonol;total glucoside of cortex moutan   牡丹皮（Cortex Moutan）為毛茛科植物Paeonia suffruticosa Andr.的干燥根皮1。廣泛應用于醫(yī)藥、香料和化學領域。丹皮中主要活性成分包括丹皮多糖、丹皮酚、丹皮苷、芍藥苷元、白樺脂酸、白樺脂醇等。其中丹皮苷、芍藥苷元、白樺脂酸、白樺脂醇合稱為丹皮總苷。現(xiàn)代研究表明，丹皮多糖具有降血糖和免疫作

5、用。丹皮酚具有抗菌、抗變態(tài)和抗腫瘤作用。丹皮總苷具有抗炎、免疫調節(jié)作用。   丹皮作為我國一種傳統(tǒng)中藥，常年來未得到較完全的利用。大部分丹皮產(chǎn)品只進行其中丹皮酚的提取就廢棄了。隨著對丹皮研究的日益廣泛，丹皮內其他活性成分的提取也越來越受到重視。所以充分提取丹皮內各種活性物質顯得非常必要。本實驗根據(jù)丹皮內三種活性物質不同的理化性質，依次分級分離三種活性物質，達到一次性提取丹皮內三種活性物質的目的。節(jié)約資源，提高產(chǎn)品利用率。   1  材料與儀器   安徽青陽三年生牡丹皮，9月份采集，離心機（上海醫(yī)用分析儀器廠）、電熱鼓風干燥箱

6、（南京實驗儀器廠）、SHZ-3循環(huán)水多用真空泵（上海青浦滬西儀器廠）、旋轉蒸發(fā)儀（上海青浦滬西儀器廠）、DK-S26型電熱恒溫水浴鍋（上海精宏實驗設備有限公司）、ALPHA1-2冷凍干燥機（德國Christ），HPLC（美國Agilent 1100）。Dextran T40(Phamacia 公司)，95%乙醇、濃硫酸、苯酚等均為國產(chǎn)分析純。丹皮酚標準品（購自中國藥品鑒定所，產(chǎn)品批號：11070-200205）。芍藥苷標準品（購自中國藥品鑒定所，產(chǎn)品批號：1107036-200731）。   2  實驗方法   2.1  提取方法&#

7、160;  丹皮粉碎   圖1  綜合提取實驗流程圖   丹皮經(jīng)粉碎機粉碎后，取丹皮粉末分別放入重蒸水中浸泡。然后收集浸泡液加入乙醇，醇沉過夜，于次日離心析出沉淀。加少量水溶解后冰箱冷藏12h。冷凍干燥得丹皮多糖粗品，苯酚硫酸法檢測糖含量。   丹皮殘渣蒸餾水浸泡水浴鍋調節(jié)溫度水蒸汽蒸餾冷藏蒸餾液過夜過濾10%乙醇重結晶干燥得丹皮酚結晶，HPLC法檢測丹皮酚含量。   蒸餾剩余殘渣索氏抽提，石油醚脫脂加入乙醇-水溶液溫浸離心取上清旋轉蒸發(fā)冷凍干燥甲醇溶解，HPLC法測總苷含量。 

8、60; 2.2  樣品含量測定   丹皮多糖總量/原料質量×100%。            3  結果與分析   3.1  丹皮多糖的提取工藝  根據(jù)單因素初步試驗，影響丹皮多糖提取率的主要因素有浸提時間、浸提溫度、料水比、醇沉濃度，為綜合分析各因素的影響，以多糖提取率為指標，采用L9（34）正交實驗設計，確定最佳提取工藝。正交實驗設計方案及結果見表1。表1 丹皮多糖正交實驗設計方案及結果從上表可以看出影

9、響丹皮多糖得率的各因素排序為浸提溫度浸提時間醇沉濃度料液比。綜合各因素K值和極差分析，得出丹皮多糖的最佳提取工藝為：溫度45，提取時間11h，料液比1:9，醇沉濃度80%，此工藝條件下丹皮多糖的得率為1.27%。   3.2  丹皮酚提取工藝  在單因素實驗的基礎上，選擇影響丹皮酚溶出的4個主要因素：料液比、浸泡時間、浸泡溫度和溶液PH，以丹皮酚得率為指標采用L16（45）正交試驗設計，確定最佳提取工藝。正交實驗設計方案及結果見表2。表2   丹皮酚正交實驗設計方案及結果對上述正交實驗結果進行分析，浸泡溫度為丹皮酚得率的主要影響因素。

10、綜合各因素K值和極差分析，丹皮酚的最佳提取工藝為料水比為1:11，浸泡溫度40。浸泡時間3h，溶液PH6。此工藝條件下丹皮酚的得率為1.76%。   3.3  丹皮總苷提取工藝   根據(jù)單因素初步試驗，影響丹皮總苷提取率的主要因素有浸提時間、浸提溫度、料水比、乙醇濃度，為綜合分析各因素的影響，以總苷提取率為指標，采用L9（34）正交實驗設計，確定最佳提取工藝。正交實驗設計方案及結果見表3。 表3丹皮酚正交實驗設計方案及結果通過以上數(shù)據(jù)綜合得出，影響丹皮總苷得率的各因素排序為浸提溫度浸提時間料液比乙醇濃度。綜合各因素K值和極差分析，得出丹皮總苷的

11、最佳提取工藝為：溫度70，提取時間6h，料液比1:10，醇沉濃度90%。此工藝條件下丹皮總苷的得率為3.92%。   4  結論   首先進行丹皮多糖的提取，在溫度45，提取時間11h，料液比1:9，醇沉濃度80%條件下，多糖得率為1.27 %。浸提藥渣烘干后，在溶液PH6，料水比1:11，溫度40，浸泡時間3h條件下進行水蒸汽蒸餾提取丹皮酚，得率為1.76%。蒸餾后所剩余藥渣用乙醇提取法提取丹皮中剩余的總苷類物質，在1:10料水比，溫度70，浸泡6h，90%乙醇條件下，總得率為3.92%。   經(jīng)此工藝連續(xù)提取出的各活性物

12、質，多糖得率與文獻報道相近，丹皮酚含量與文獻報道相接近?？傑疹惡柯缘陀谖墨I報道?？赡茉蚴窃诘谝徊糠炙岫嗵菚r，有部分小分子苷類物質溶入水中，致使后期總苷類物質有小部分的損失。   筆者采用連續(xù)提取工藝，實現(xiàn)了丹皮內各活性物質的連續(xù)分離。本工藝的特點就是根據(jù)丹皮內各活性物質不同的理化性質，分步分離出三種主要活性成分，既節(jié)省了時間，又實現(xiàn)了單一原料多產(chǎn)物的問題，大大提高了原料的利用率?！緟⒖嘉墨I】  1 國家藥典委員會中華人民共和國藥典（一部）S北京：化學工業(yè)出版社，2005：119劉麗萍，洪浩丹皮多糖-2b降血糖作用的實驗研究J中國臨床藥理學與治療學，2002，7（5）：424427章靈華，尚陪根，黃藝，等丹皮酚的藥理與臨床研究進展J中國中西藥結合雜志，1996，16（3）：187189湯文路，李俊，徐叔云，等丹皮總苷的抗炎免疫作用及部分機制研究J中國藥理學通報，200