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1、第1講基因工程和克隆技術(shù)(時(shí)間:40分鐘)一、選擇題1(2013杭州五校聯(lián)考)下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞、組織培養(yǎng)的敘述,不正確的是()。A傳代培養(yǎng)的原因是培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞密度過大和代謝消耗引起營(yíng)養(yǎng)枯竭B連續(xù)細(xì)胞系是指發(fā)生了轉(zhuǎn)化的細(xì)胞系,有的獲得了不死性,但保留接觸抑制現(xiàn)象C細(xì)胞系一般具有恒定的染色體組型、同功酶類型、病毒敏感性等生化特性D細(xì)胞克隆的最基本要求是必須保證分離出來的是一個(gè)細(xì)胞而不是多個(gè)細(xì)胞解析細(xì)胞株一般具有恒定的染色體組型、同功酶類型,病毒敏感性和生化特性等。答案C2(2013義烏模擬)克隆羊“多莉”的產(chǎn)生、“抗蟲棉”的培育、“番茄馬鈴薯”的創(chuàng)造、單克隆抗體的制備、抗生素的生產(chǎn)依次是下列哪項(xiàng)
2、生物技術(shù)取得的成果()?;蚬こ碳?xì)胞工程發(fā)酵工程酶工程A BC D解析“克隆羊”“番茄馬鈴薯”“單克隆抗體”均為細(xì)胞工程產(chǎn)物,抗蟲棉為基因工程產(chǎn)物,抗生素的生產(chǎn)為發(fā)酵工程產(chǎn)物。答案B3(2013浙江五校聯(lián)考)下圖1表示含有目的基因的DNA 片段和部分堿基序列,圖2表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列?,F(xiàn)有Msp、BamH、Mbo、Sma 4種限制性核酸內(nèi)切酶切割的堿基序列和酶切位點(diǎn)分別為CCGG、GGATCC、GATC、CCCGGG。下列敘述正確的是()。A上述4種限制性核酸內(nèi)切酶中BamH、Mbo切出的粘性末端不相同BBamH、Mbo酶切DNA后加DNA連接酶重新拼接,都能被Mbo再次切割CMs
3、p、Sma切出的兩個(gè)末端可以用DNA連接酶相互連接D作為載體的質(zhì)粒上,原本一定就有抗生素A抗性基因解析BamH、Mbo酶切DNA后加DNA連接酶拼接,仍可形成 Mbo的識(shí)別位點(diǎn),故可重新被其切割。答案B4(2013西城區(qū)質(zhì)檢)通過植物體細(xì)胞雜交可以獲得“煙草菠菜”一種新型的煙草品種。下圖為培育雜種植株過程的示意圖,下列操作不是必需的是()。A在融合之前除去兩種細(xì)胞的細(xì)胞壁B原生質(zhì)體先進(jìn)行脫分化處理再融合C原生質(zhì)體融合后篩選雜種細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)D誘導(dǎo)雜種細(xì)胞形成愈傷組織再分化成植株解析植物體細(xì)胞雜交之前需要利用酶解法除去細(xì)胞壁,然后利用適宜的誘導(dǎo)方法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合得到雜種細(xì)胞,再進(jìn)行植物組織培養(yǎng)形
4、成雜種植株,所以原生質(zhì)體優(yōu)先進(jìn)行脫分化處理再融合的操作是不需要的。答案B5(2013杭州質(zhì)檢)下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述,正確的是()。A從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中選擇和純化可以獲得細(xì)胞株B動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基添加胰島素的目的是調(diào)節(jié)血糖濃度C定期更換培養(yǎng)液的原因只是為了給動(dòng)物細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)D胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),加滋養(yǎng)層是為了抑制胚胎干細(xì)胞分化解析動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)添加胰島素的目的在于“刺激”提高細(xì)胞克隆形成率,而不是調(diào)節(jié)血糖濃度。定期更換培養(yǎng)液還可以及時(shí)排除細(xì)胞產(chǎn)生的代謝廢物。答案A6如圖為轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過程的示意圖(其中ampr為抗氨芐青霉素基因)。下列敘述不正確的是()。A可同時(shí)選用限制酶Pst、Sm
5、a對(duì)含目的基因的DNA進(jìn)行切割B過程使用的DNA連接酶對(duì)DNA的兩端堿基序列沒有特異性要求C過程可采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法D質(zhì)粒上的抗性基因有利于篩選含目的基因的細(xì)胞和促進(jìn)目的基因的表達(dá)解析本題中的抗性基因是重組質(zhì)粒的標(biāo)記基因,標(biāo)記基因有利于篩選含目的基因的受體細(xì)胞,而不能促進(jìn)目的基因的表達(dá)。答案D7(2013金麗衢十二校聯(lián)考)下圖表示轉(zhuǎn)基因動(dòng)、植物的培育過程。下列有關(guān)敘述正確的是()。A在獲得目的基因的過程中,需要使用限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶等工具酶B受體細(xì)胞A需要氯化鈣處理以增加細(xì)胞膜的通透性C過程需要用到體外受精、胚胎體外培養(yǎng)、胚胎移植等生物技術(shù)D受體細(xì)胞B可以不經(jīng)過脫分化階段再生出完整的
6、植株解析獲得目的基因未必使用限制性內(nèi)切酶和DNA連接酶(如人工合成法);針對(duì)原核細(xì)胞可使用CaCl2處理增強(qiáng)細(xì)胞壁的通透性,動(dòng)物受精卵則不需要;過程不需“體外受精”。答案D8(2013浙江十校聯(lián)考)毛角蛋白型中間絲(KIF)基因與絨山羊的羊絨質(zhì)量密切相關(guān)。獲得轉(zhuǎn)KIF基因的高絨質(zhì)絨山羊的簡(jiǎn)單流程如圖。下列說法錯(cuò)誤的是()。A過程中要用的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶和質(zhì)粒B在過程中,用胰蛋白酶處理將皮膚組織塊分散成單個(gè)成纖維細(xì)胞C在培養(yǎng)過程中,將成纖維細(xì)胞置于5%CO2的氣體環(huán)境中,CO2的作用是調(diào)節(jié)pHD.在胚胎移植前,通過胚胎分割技術(shù)可獲得較多胚胎解析質(zhì)粒為基因載體而不是“工具酶”
7、。答案A9(2013臺(tái)州模擬)進(jìn)行生物工程設(shè)計(jì)時(shí),下表各組所選擇的常用實(shí)驗(yàn)材料與實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐渲缅e(cuò)誤的是()。選項(xiàng)實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)材料材料特點(diǎn)A獲得克隆動(dòng)物卵(母)細(xì)胞細(xì)胞大,細(xì)胞質(zhì)能有效調(diào)控核發(fā)育B植物的誘變育種愈傷組織細(xì)胞分裂能力強(qiáng),突變率高C獲得表達(dá)生長(zhǎng)激素的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物乳腺細(xì)胞分泌乳汁,產(chǎn)生生長(zhǎng)激素D燒傷患者移植皮膚自體干細(xì)胞分裂能力強(qiáng),且不會(huì)引起免疫排斥解析獲得表達(dá)目的基因的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物需將外源基因轉(zhuǎn)入到受精卵中,再經(jīng)胚胎早期培養(yǎng)及胚胎移植方可達(dá)到目的。答案C10(2013廣東梅州質(zhì)檢二)應(yīng)用生物工程技術(shù)培育人們需要的生物新品種或新產(chǎn)品,提高了經(jīng)濟(jì)效率。下圖表示培育生物新品種的過程,請(qǐng)據(jù)圖判斷下
8、列敘述中不正確的是()。A圖中過程需要的工具酶是限制性內(nèi)切酶和DNA聚合酶B圖中過程需要的培養(yǎng)基中一定含有植物激素和無機(jī)養(yǎng)料C將PrG導(dǎo)入到細(xì)胞,則最可能是效應(yīng)B細(xì)胞D圖中過程中不是都發(fā)生了堿基互補(bǔ)配對(duì)現(xiàn)象解析基因工程中需要的工具酶是限制酶和DNA連接酶,故A不對(duì);植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基需加入無機(jī)礦質(zhì)養(yǎng)料、有機(jī)物和植物激素,故B對(duì);抗體是由效應(yīng)B細(xì)胞分泌的,故C對(duì);過程重組載體的構(gòu)建發(fā)生了堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,過程均不發(fā)生,故D對(duì)。答案A11(2013浙江紹興一中)應(yīng)用基因工程方法,可將酵母菌制造成“工程菌”,用于生產(chǎn)乙肝疫苗,在制造該“工程菌”時(shí),應(yīng)向酵母菌導(dǎo)入()。A乙肝病毒的表面抗原B抗乙肝病
9、毒抗體的基因C抗乙肝病毒的抗體D乙肝病毒的表面抗原的基因解析乙肝疫苗是指減毒或滅毒的乙肝病毒,利用基因工程生產(chǎn)乙肝疫苗時(shí),應(yīng)向酵母菌導(dǎo)入目的基因乙肝病毒的表面抗原的基因。答案D12(2013浙江五校聯(lián)考)如圖表示利用棉花葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體培養(yǎng)進(jìn)行遺傳改良的過程,據(jù)圖分析錯(cuò)誤的是()。A過程需在適宜條件下用纖維素酶和果膠酶的混合物處理B過程能定向誘導(dǎo)原生質(zhì)體產(chǎn)生優(yōu)良性狀的突變C過程中葉肉細(xì)胞失去了其特有的結(jié)構(gòu)和功能D過程需用適宜配比的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素處理命題意圖本題考查植物組織培養(yǎng)的過程,意在考查考生的理解及應(yīng)用能力。解析植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠,故需用纖維素酶和果膠酶的混合物處理獲得
10、原生質(zhì)體?;蛲蛔兙哂胁欢ㄏ蛐?。過程(脫分化)產(chǎn)生愈傷組織,細(xì)胞形態(tài)、結(jié)構(gòu)、功能均發(fā)生改變。生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的不同配比,誘導(dǎo)生根或生芽的情況不同,故過程需用適宜配比的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素處理。答案B二、非選擇題13下圖為培育農(nóng)作物新品種的過程示意圖。請(qǐng)據(jù)圖回答有關(guān)問題。(1)圖示育種過程涉及的生物工程技術(shù)有_、_、_等。(2)圖中分別表示一個(gè)已插入外源DNA片段的重組Ti質(zhì)粒載體的_和_。(3)圖中從愈傷組織到形成完整的新品種植株的途徑有兩條,具體通過哪條途徑主要取決于培養(yǎng)基中的_的種類及其濃度配比。(4)若僅用二倍體植物細(xì)胞甲的未成熟花粉培養(yǎng)完整植株,則該植株稱為_植株,說明未成熟花粉具有_
11、;這些植株只有通過_才能結(jié)實(shí)。(5)若要從大量培養(yǎng)的紫草愈傷組織中提取紫草素,則_條件是不需要的。A消毒、滅菌 B充足光照C適宜溫度 D適宜養(yǎng)料和激素(6)用植物組織培養(yǎng)制作的人工種子,可解決有些作物品種的_等問題(至少答出兩點(diǎn))。解析(1)由圖可知,上述育種過程涉及了植物體細(xì)胞雜交、植物組織培養(yǎng)和基因工程等技術(shù)。(2)基因表達(dá)載體中目的基因的兩端需要添加啟動(dòng)子和終止子,同時(shí)還需要添加某種特定基因作為標(biāo)記基因,便于篩選。(3)在愈傷組織經(jīng)再分化形成試管苗時(shí),培養(yǎng)基中植物激素(主要是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素)的濃度配比和種類不同,導(dǎo)致愈傷組織的分化方向不同。(4)由未成熟花粉直接培育成的植株,屬于單倍
12、體,同時(shí)這說明花粉細(xì)胞具有全能性;于單倍體不含同源染色體,減數(shù)分裂過程聯(lián)會(huì)紊亂,不能產(chǎn)生種子,其需要經(jīng)染色體加倍處理后才可以產(chǎn)生種子。(5)愈傷組織的形成不需要光照。答案(1)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)基因工程植物組織培養(yǎng)(2)啟動(dòng)子和終止子標(biāo)記基因(3)植物激素(4)單倍體全能性染色體數(shù)目加倍(5)B(6)多年不結(jié)種子、果實(shí),雜種優(yōu)勢(shì)倒退,生產(chǎn)種子受到季節(jié)、氣候和地域的影響,生產(chǎn)種子占用大量土地(答出兩點(diǎn)即可)14(2013金華十校期末)甲圖表示一種含有逆轉(zhuǎn)錄病毒序列的表達(dá)型質(zhì)粒,圖中的“逆轉(zhuǎn)錄病毒序列”可以整合到動(dòng)物細(xì)胞的染色體上,并能表達(dá)其攜帶的目的基因(注:A、B、C分別為不同限制核酸內(nèi)切酶的
13、酶切位點(diǎn))。請(qǐng)回答下列有關(guān)問題。(1)在構(gòu)建用于培育轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的重組質(zhì)粒時(shí),目的基因應(yīng)插入到圖中的位置是_,理由是_。(2)目的基因隨重組質(zhì)粒被導(dǎo)入到細(xì)胞后,在細(xì)胞中以_方式進(jìn)行復(fù)制和克隆,此過程需要消耗細(xì)胞中的_(填物質(zhì)名稱)。(3)乙圖表示培育具有人生長(zhǎng)激素基因小鼠的基本過程示意圖。過程涉及細(xì)胞間的_和融合過程,將含有目的基因的重組質(zhì)粒依據(jù)圖中方法轉(zhuǎn)入到受精卵中后,經(jīng)過_過程和_過程,可獲得轉(zhuǎn)基因小鼠。小鼠出生后可以從其尾巴細(xì)胞中提取_分子進(jìn)行分析,篩選出攜帶人生長(zhǎng)激素基因的小鼠。若目的基因進(jìn)入細(xì)胞后整合在一條染色體DNA上,那么獲得轉(zhuǎn)基因純合子小鼠的方法是_。解析(1)由于“逆轉(zhuǎn)錄病毒序列”可以整合到動(dòng)物細(xì)胞的染色體上,故宜將目的基因插入該序列中,以便整合至受體細(xì)胞中。(2)目的基因在受體細(xì)胞中應(yīng)以半保留復(fù)制方式進(jìn)行復(fù)制和克隆,此過程需消耗細(xì)胞中的ATP及四
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