血液處理過程中的紅細(xì)胞溶血

1、血液處理過程中的紅細(xì)胞溶血Samuel O. Sowemimo-CokerTransfusion Medicine Reviews 2002, 16(1): 46摘要：輸注的紅細(xì)胞制品中紅細(xì)胞發(fā)生溶血已有報(bào)道，這對(duì)于需要輸血的病人具有重要的臨床意義。因?yàn)橛坞x血紅蛋白將裂解成二聚體與結(jié)合珠蛋白結(jié)合，進(jìn)而通過網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)清除，一旦超出結(jié)合珠蛋白的結(jié)合能力，將會(huì)發(fā)生血紅蛋白血癥。溶血是指紅細(xì)胞破壞后釋放出血紅蛋白并引起血漿顏色改變。紅細(xì)胞異常溶血由許多因素引起，包括在血液處理過程中操作不當(dāng)、保存條件不當(dāng)、細(xì)菌性溶血、抗體激活補(bǔ)體的溶血、紅細(xì)胞膜的缺陷及獻(xiàn)血者異常等。溶血的程度常用紅細(xì)胞比容校正后的整

2、個(gè)血紅蛋白中游離血紅蛋白的百分率來表示。北美尚未建立可被接受的溶血范圍，但是1%溶血標(biāo)準(zhǔn)目前用于評(píng)估血液保存材料的生物相容性，而歐洲委員會(huì)將標(biāo)準(zhǔn)定為0.8%。本文強(qiáng)調(diào)要對(duì)全血制備紅細(xì)胞的全程進(jìn)行充分的監(jiān)控，從而減少溶血的發(fā)生。仔細(xì)評(píng)估血液制備過程將降低因溶血而廢棄的紅細(xì)胞量。溶血是紅細(xì)胞膜的完整性受到裂解或破損并釋放血紅蛋白的過程。血制品溶血可以通過懸液如血漿或添加劑中出現(xiàn)游離血紅蛋白而證實(shí)。某些疾病如溶血性貧血病，或者血液處理過程如離心，都能導(dǎo)致紅細(xì)胞破裂。雖然已有多種措施能提高紅細(xì)胞在血液處理、保存、輸注過程中的穩(wěn)定性，但細(xì)胞離體后仍將增加溶血的危險(xiǎn)。被認(rèn)為能引起溶血的部分因素將在后面討論

3、，包括血液流動(dòng)或處理過程中由于高速和旋渦引起的切變力以及與管道、血袋塑料表面的接觸等等。血液保存中與溶血有關(guān)的因素制備過程血庫(kù)在血液采集和成分制備的過程中也會(huì)使紅細(xì)胞破裂而釋放血紅蛋白，例如采血后分離不及時(shí)、快速抗凝（包括抗凝劑和血液的混勻）、離心速度的驟變、壓積紅細(xì)胞在添加劑中快速重新懸浮、血液保存袋外形和組成成分的多樣化。當(dāng)獻(xiàn)血者采血量不足時(shí)，其血中抗凝劑相對(duì)比率將加大，易致紅細(xì)胞損傷。此外為了提高血漿的回收量而采取的高速離心，會(huì)使紅細(xì)胞過度壓縮，甚至使紅細(xì)胞比容超過80%。過度壓縮的紅細(xì)胞在CPD抗凝劑中會(huì)降低紅細(xì)胞的活性，增加保存過程中的溶血。過濾前紅細(xì)胞的保存血袋也會(huì)影響溶血的程度。

4、常用血袋中有一些含有可提取的或不可提取的增塑劑，如鄰苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEHP）和三（2-乙基己基）三辛酯。DEHP能降低紅細(xì)胞保存時(shí)的溶血率。紅細(xì)胞在不含DEHP的塑料容器保存時(shí)溶血率會(huì)明顯增加，42天后可達(dá)到1%以上，例如紅細(xì)胞保存在含增塑劑丁基n三己基枸櫞酸鹽（BTHC）的聚氯乙烯（PVC）血袋中，上清血紅蛋白濃度平均為850 mg/dl，上限為1470 mg/dl。許多廠商采用不含DEHP的血袋保存紅細(xì)胞。紅細(xì)胞在制備過程或保存于不含DEHP血袋中將受到損傷，更易在保存期或后續(xù)處理中發(fā)生溶血。除前面討論的因素外，有時(shí)壓積紅細(xì)胞輸注前需洗滌，這一增加的操作步驟洗去了紅細(xì)胞外的血

5、漿蛋白保護(hù)層，也可使紅細(xì)胞受損。切變力或機(jī)械性損傷而致的溶血溶血有時(shí)也可能因切變力所引起，主要發(fā)生在以下情形：扭結(jié)管道的邊緣、部分閉合的轉(zhuǎn)移管道夾、采血袋的入口部分（紅細(xì)胞從留樣管道進(jìn)入半閉合采集袋過程中）。切變力的損傷也發(fā)生在過度壓縮的壓積紅細(xì)胞的重新懸浮過程。過濾前混勻時(shí)對(duì)血袋的搖晃或振蕩也會(huì)致紅細(xì)胞脆性增加及衰老紅細(xì)胞的溶解。10001500達(dá)因/cm2的低切變力，與自然重力或過濾過程類似，本身不會(huì)導(dǎo)致溶血。但是保存容器表面異常粗糙或不規(guī)則可能引發(fā)湍流，這會(huì)發(fā)生溶血。例如人工瓣膜流體動(dòng)力學(xué)特性所致湍流切變力會(huì)破壞紅細(xì)胞，因此瓣膜置換病人常出現(xiàn)明顯的溶血。紅細(xì)胞被強(qiáng)行通過白細(xì)胞過濾器、小針

6、孔、狹窄開口、扭結(jié)或扭曲的靜脈導(dǎo)管、部分阻塞或閉合血袋時(shí)，都可能使紅細(xì)胞受損。未稀釋的濃縮紅細(xì)胞比全血或稀釋的濃縮紅細(xì)胞更易出現(xiàn)機(jī)械性或外傷性溶血，因?yàn)榍罢呒t細(xì)胞比容較高，而后者紅細(xì)胞比容和粘滯度較低。細(xì)菌污染紅細(xì)胞異常溶血也可能是由于細(xì)菌污染而引起。當(dāng)血液中出現(xiàn)了異常物質(zhì)、血凝塊、顏色改變（細(xì)胞或血漿呈褐色或紫色）、液體血中的異常團(tuán)塊、血漿不透明或渾濁、出現(xiàn)氣泡或特殊氣味時(shí)，應(yīng)懷疑該血有可能被污染。紅細(xì)胞膜的缺陷及變形能力紅細(xì)胞變形能力對(duì)于體內(nèi)細(xì)胞通過狹窄的毛細(xì)血管非常重要。紅細(xì)胞變形能力下降或細(xì)胞膜的缺陷在紅細(xì)胞的自發(fā)或保存誘導(dǎo)的溶血中起重要作用。如變形能力下降對(duì)遺傳性球形細(xì)胞增多癥和橢圓

7、形紅細(xì)胞增多癥的溶血起重要的作用。6-磷酸-葡萄糖脫氫酶缺乏、鐮狀細(xì)胞貧血、鐮刀狀紅細(xì)胞和其它血紅蛋白病等獻(xiàn)血者紅細(xì)胞都有膜的缺陷將導(dǎo)致溶血。尿毒癥及糖尿病病人紅細(xì)胞的變形力很弱，因此紅細(xì)胞對(duì)機(jī)械性損傷很敏感。紅細(xì)胞的變形能力受細(xì)胞內(nèi)在粘度的影響（如鐮狀細(xì)胞病和血紅蛋白C?。?，也受膜特性的有限影響（如地中海貧血）。溫度血液和成分在保存、過濾或過濾過程、血液處理等時(shí)的溫度是溶血的重要因素。溫度很大程度上影響了紅細(xì)胞膜的變形能力和血液處理過程中膜的穩(wěn)定性。紅細(xì)胞突然冰凍會(huì)發(fā)生溶解，如血液被儲(chǔ)存在溫度失控的冰箱內(nèi)或未添加冷凍保護(hù)劑放在冰凍層。溫度達(dá)到40時(shí)紅細(xì)胞也會(huì)遭破壞。熱合留樣管道的熱合機(jī)所產(chǎn)生

8、的高熱會(huì)致熱損傷。但是某些個(gè)體對(duì)溫度的敏感性或受溫度的影響明顯要小。熱損傷的紅細(xì)胞在采集、離心、成分分離時(shí)會(huì)破裂。此外過冷環(huán)境或?qū)⒀湃氲陀?的地方，此時(shí)白細(xì)胞過濾或過濾前混勻、處理過程都會(huì)發(fā)生紅細(xì)胞溶血。血液運(yùn)輸時(shí)也可能意外冰凍。血液運(yùn)輸中必須確保保存溫度在110。若獻(xiàn)血者血漿中游離血紅蛋白濃度出現(xiàn)異常，很可能是由于血液運(yùn)輸保存或采集時(shí)溫度處理不當(dāng)。滲透壓（低滲與高滲）和pH的變化紅細(xì)胞突然接觸血袋中的高滲或低滲溶液、抗凝劑、添加劑或溶液pH發(fā)生驟變，都可能引起紅細(xì)胞的破壞或溶解脆性增高。引起紅細(xì)胞破壞的低滲和高滲溶液臨界值會(huì)隨著懸浮液溫度的改變而降低。細(xì)胞壽命與保存時(shí)限輸注的血液按常規(guī)可

9、保存3542天，這取決于抗凝劑和保養(yǎng)液的成分。先前有關(guān)血液保存作用的報(bào)道都表明保存期中紅細(xì)胞的膜完整性和流動(dòng)性有很大改變，游離的血紅蛋白水平明顯上升。很多學(xué)者對(duì)保存期內(nèi)的壓積紅細(xì)胞的游離血紅蛋白含量進(jìn)行定量研究，證實(shí)保存期中游離血紅蛋白量明顯增加。保存于Adsol添加劑（Baxter Health Care Corporation; Fenwal Division, Deerfields, IL）存放2天的未過濾紅細(xì)胞，游離血紅蛋白含量為17.4mg/dl（范圍為3.7到45.5 mg/dl），這個(gè)程度血漿略呈淡黃色的。儲(chǔ)存26天其游離血紅蛋白的含量升至90.2 mg/dl（范圍為46.5-1

10、51.5 mg/dl）。儲(chǔ)存40天其含量增至193 mg/dl（范圍49.0413.9 mg/dl），濃縮紅細(xì)胞下層顏色由淡黃色至呈淺紅色，上層為明顯可見的紅色（如表1所示）。Hogman 等報(bào)導(dǎo)保存血的容器對(duì)保存期中紅細(xì)胞的溶血情況產(chǎn)生很大的影響。用BTHC增塑劑的PVC容器儲(chǔ)存紅細(xì)胞42天，上清血紅蛋白平均為830 mg/dl（2.5%紅細(xì)胞溶血），其上限約為1470 mg/dl（4.5%溶血）。白細(xì)胞的影響未過濾紅細(xì)胞懸液中存在的白細(xì)胞可能導(dǎo)致增加保存期間的溶血。在保存期間，白細(xì)胞破損并釋放出一些化學(xué)物質(zhì)和酶如過氧化氫和蛋白酶等。已有報(bào)道指出，保存期白細(xì)胞釋放的蛋白酶可造成紅細(xì)胞溶血、破

11、壞紅細(xì)胞的代謝和活性。這些由白細(xì)胞造成的損害可通過用白細(xì)胞濾器過濾后而減輕或消除。藥物誘導(dǎo)的溶血獻(xiàn)血者在獻(xiàn)血前服用高濃度的某類藥物會(huì)導(dǎo)致紅細(xì)胞溶血，主要是通過滲透壓改變、氧化作用或免疫機(jī)制，如青霉素、維生素C、奎尼丁和甲基多巴胺等。服用此類藥物的獻(xiàn)血者未能在獻(xiàn)血時(shí)被排除。因此發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞溶血時(shí)應(yīng)追溯獻(xiàn)血者的藥物史。許多藥物會(huì)導(dǎo)致6-磷酸葡萄糖脫氫酶缺乏的病人紅細(xì)胞發(fā)生溶血，即便是健康獻(xiàn)血者，在超量服用某些藥物后也可導(dǎo)致溶血。紅細(xì)胞輻照目前唯一被接受的防止輸血相關(guān)性移植物抗宿主?。═A-GVHD）的方法是對(duì)全血或細(xì)胞成分進(jìn)行輻照。有許多研究者報(bào)導(dǎo)，經(jīng)射線輻照的紅細(xì)胞膜的完整性發(fā)生很大改變，其表現(xiàn)為

12、滲透脆性增加、細(xì)胞裂解、K+外泄及24小時(shí)體內(nèi)生存力降低。輻照的全血及紅細(xì)胞懸液在過濾中或成分制備中易溶解及釋放血紅蛋白。另外形式的輻照如紫外線（UV-A，UV-B，及UV-C）輻照，其主要用于血液及血液成份中病原體的滅活，也會(huì)損傷紅細(xì)胞。補(bǔ)體激活及血小板激活已有文獻(xiàn)報(bào)道血小板或白細(xì)胞激活后釋放的化學(xué)物質(zhì)將損傷紅細(xì)胞，使紅細(xì)胞在保存期間或進(jìn)一步的操作處理中容易發(fā)生裂解。此外血液中補(bǔ)體激活物也會(huì)明顯損傷紅細(xì)胞。生化改變和溶血傾向還有一些導(dǎo)致溶血的情況并不是前面所描述過的任何一項(xiàng)?，F(xiàn)已知道，來自不同健康獻(xiàn)血者的血樣本呈現(xiàn)不同的溶血傾向。溶血率也隨采集血液的時(shí)間而改變，如采自餐后獻(xiàn)血者的血液比采自空

13、腹獻(xiàn)血者的血液更易溶血。過濾對(duì)紅細(xì)胞溶血的影響少白細(xì)胞過濾前面討論表明有多種與過濾無關(guān)的可引起紅細(xì)胞溶解的因素。文獻(xiàn)公布的數(shù)據(jù)和我們研究數(shù)據(jù)表明，按廠家說明使用Pall 少白細(xì)胞濾器，不會(huì)產(chǎn)生超過規(guī)定的0.8%的溶血。與之形成對(duì)照的是，未過濾紅細(xì)胞制品中的白細(xì)胞對(duì)保存期內(nèi)溶血明顯增加起重要作用。保存期間白細(xì)胞降解釋放一些化學(xué)物質(zhì)和酶如過氧化氫和蛋白酶。已有報(bào)道保存期白細(xì)胞釋放的蛋白酶可引起紅細(xì)胞裂解。一些研究表明保存前過濾白細(xì)胞的濃縮紅細(xì)胞明顯提高保存活性，包括溶血明顯少于未過濾的紅細(xì)胞。在一項(xiàng)全面協(xié)作的研究中，4家臨床研究中心調(diào)查了過濾對(duì)溶血的影響。40位志愿者在兩個(gè)不同的場(chǎng)合獻(xiàn)血，在室溫或

14、4的情況下6到8小時(shí)后對(duì)血液進(jìn)行處理。結(jié)果顯示：與未過濾的對(duì)照比較，經(jīng)Pall Leukotrap RC濾器過濾的紅細(xì)胞在42天后溶血明顯降低（P0.0001）。其他研究者在全血和壓積紅細(xì)胞中進(jìn)行了類似的實(shí)驗(yàn)，結(jié)果證實(shí)了我們的結(jié)論，過濾與未過濾的血制品相比溶血明顯降低。不同保存階段過濾紅細(xì)胞一系列實(shí)驗(yàn)研究了在不同保存期過濾對(duì)紅細(xì)胞溶血的情況。試驗(yàn)中紅細(xì)胞比容平均為46，保存在AS-1添加劑中，在不同的保存階段依據(jù)廠家說明將紅細(xì)胞經(jīng)Pall BPF4少白細(xì)胞濾器（Pall公司，East Hill，NY）過濾，通過保存袋的一個(gè)插口無菌采集檢測(cè)樣本。結(jié)果顯示保存期內(nèi)過濾和未過濾的血樣溶血率隨時(shí)間延長(zhǎng)

15、而增長(zhǎng)，這與先前的報(bào)道相符。雖然過濾制品比多存放2天的未過濾制品的游離血紅蛋白濃度略高，但溶血率仍遠(yuǎn)低于1或0.8，而這分別是美國(guó)對(duì)添加劑的標(biāo)準(zhǔn)和歐洲標(biāo)準(zhǔn)。濃縮紅細(xì)胞經(jīng)少白細(xì)胞過濾后，可以保護(hù)紅細(xì)胞不受白細(xì)胞介導(dǎo)的溶血影響，使保存期中溶血率低于1。最近Gammon等研究證實(shí)了這些結(jié)果，并表明過濾血制品溶血明顯低于上述嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)。溶血的標(biāo)準(zhǔn)和臨床并發(fā)癥 在美國(guó)，除了去甘油紅細(xì)胞外，其他血液成份的血漿游離血紅蛋白濃度還沒有標(biāo)準(zhǔn)。一般來說血漿或紅細(xì)胞懸液呈現(xiàn)粉紅色，其游離血紅蛋白濃度低于25mg/dl（相當(dāng)于紅細(xì)胞比容45%、血紅蛋白為16g/dl的血樣有0.09溶血）。當(dāng)游離血紅蛋白濃度為100mg

16、/dl時(shí)，上清液明顯為紅色。溶血是評(píng)價(jià)保存紅細(xì)胞質(zhì)量的重要參數(shù)。在體內(nèi)游離血紅蛋白分解為二聚體，通過與結(jié)合珠蛋白結(jié)合，并經(jīng)網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)清除。正常成年人結(jié)合珠蛋白的濃度為30-200mg/dl。結(jié)合珠蛋白是二聚糖蛋白，每分子結(jié)合2個(gè)血紅蛋白二聚體或相當(dāng)于血漿血紅蛋白濃度為1g/l。成人輸注大約g游離血紅蛋白（或大約10單位紅細(xì)胞，每單位0.5溶血）不會(huì)出現(xiàn)血紅蛋白血癥。血紅蛋白在尿中不會(huì)明顯出現(xiàn)，除非血漿中血紅蛋白大于100mg/dl。由于結(jié)合珠蛋白的快速生成和新陳代謝的加快，實(shí)際上人體耐受能力很大。美國(guó)食品及藥物管理局（FDA）尚未建立輸注血液制品的溶血標(biāo)準(zhǔn)，然而FDA推薦去甘油紅細(xì)胞最高溶血

17、為1，批準(zhǔn)和許可的紅細(xì)胞添加劑必須使壓積紅細(xì)胞保存期末溶血少于1。與FDA不同，歐洲對(duì)輸注紅細(xì)胞制品的官方標(biāo)準(zhǔn)為溶血率不大于0.8。雖然沒有大范圍的臨床試驗(yàn)調(diào)查游離血紅蛋白對(duì)人體的毒性，但自體溶血輸注仍有各種實(shí)驗(yàn)性調(diào)查。Spector和Crosby用溶血樣本輸注正常志愿者以誘導(dǎo)產(chǎn)生血紅蛋白血癥。靜脈輸注540mg/dl游離血紅蛋白后5小時(shí)維持輸注240mg/dl，志愿者無臨床癥狀。進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)誘導(dǎo)中等程度的血紅蛋白血癥不會(huì)導(dǎo)致彌漫性血管內(nèi)凝血。其他研究報(bào)道了更高濃度的血漿血紅蛋白輸注水平。Aaron等報(bào)道給關(guān)節(jié)內(nèi)窺鏡手術(shù)病人輸注未洗滌紅細(xì)胞，其血漿血紅蛋白濃度在1000625mg/dl（大約3溶

18、血），研究證實(shí)了此濃度的血紅蛋白是可以耐受的，不會(huì)有后遺癥，其研究對(duì)正常血容量病人適用，可能不能適用于其他類型的病人（如低血容量者）。溶血的調(diào)查溶血常通過紅細(xì)胞懸液中存在游離血紅蛋白而確認(rèn)。過濾前、后紅細(xì)胞制品或全血懸液中出現(xiàn)粉紅色改變，則需要立即對(duì)溶血的因素進(jìn)行調(diào)查。第一步應(yīng)確保獻(xiàn)血者紅細(xì)胞在過濾前未被前面討論的因素所破壞。例如暴露在過熱或過冷的環(huán)境、高壓下使用過細(xì)針管采集血液、接觸不當(dāng)?shù)娜萜?，均可?dǎo)致在過濾或離心前，紅細(xì)胞破壞釋放出血紅蛋白。白色的背景下肉眼觀察血袋或管道中上清液可以看出由于紅細(xì)胞溶血或破壞所出現(xiàn)的粉紅色。紅細(xì)胞放置在過冷的環(huán)境中會(huì)發(fā)生溶解而顯紫紅色，紫紅色可以作為發(fā)生溶血

19、的警示標(biāo)志。雖然肉眼觀察可鑒別出血漿血紅蛋白濃度為25mg/dl的情形，此時(shí)其粉紅色改變對(duì)肉眼已很明顯，但為了進(jìn)行合適的質(zhì)控和建立輸注紅細(xì)胞拒收標(biāo)準(zhǔn)制度，游離血紅蛋白濃度必須采用后面提到的方法準(zhǔn)確檢測(cè)。調(diào)查過濾后的溶血必須詳細(xì)詢問獻(xiàn)血的環(huán)境、制備紅細(xì)胞的全程和過濾過程。其中與過濾相關(guān)的溶血可能與以下因素有關(guān)：1強(qiáng)行將紅細(xì)胞或全血通過濾器，以完成過濾前濾器系統(tǒng)的初始化。2. 拔去控制管進(jìn)行留樣分析。3. 過濾器中的殘留空氣或混勻血液時(shí)產(chǎn)生的氣泡4. 過濾溫度過高或過低。5. 未按廠家少白細(xì)胞濾器或過濾系統(tǒng)的使用說明操作。6. 過濾前紅細(xì)胞經(jīng)輻照。為了測(cè)定血液中的溶血程度是否大于1，建議使用恰當(dāng)?shù)?/p>

20、方法定量測(cè)定血紅蛋白的濃度。這將避免血液不必要的被退回，而這些血液本來可以加入添加劑，用于制備符合標(biāo)準(zhǔn)的可長(zhǎng)期保存的紅細(xì)胞。過濾中預(yù)防溶血的指南以下指南基于現(xiàn)有的文獻(xiàn)資料，可以幫助減少白細(xì)胞過濾或血液處理過程中溶血的可能。值得注意的是許多調(diào)查表明這與常用標(biāo)準(zhǔn)或良好的管理規(guī)范相關(guān)。1嚴(yán)格按廠家說明使用白細(xì)胞濾器，實(shí)驗(yàn)人員的充分培訓(xùn)是很重要的。處理血液的人員必須經(jīng)過必要的培訓(xùn)，并定期檢測(cè)以保證設(shè)備的使用按廠家說明進(jìn)行。2 全血必須加入推薦使用的抗凝劑量，避免采血量不足或過多。紅細(xì)胞制品必須保存在FDA批準(zhǔn)的添加劑中，有適宜的化學(xué)成分、滲透壓和pH值。3過濾紅細(xì)胞前，用比色計(jì)測(cè)定上清液的游離血紅蛋白

21、。如果比色計(jì)讀數(shù)大于或等于25mg/dl，血液的處理過程應(yīng)格外小心。避免將裝有血液的血袋反復(fù)振搖、擠壓。4確保連接血袋和濾器的管道完全伸開。如果濾器和血袋間的管道或連接部分扭結(jié)或部分閉合，就不要過濾血液或紅細(xì)胞。5濾器與血袋間如果轉(zhuǎn)移管道夾部分閉合或管道被部分夾住，不要過濾。6不定期抽查采血袋中紅細(xì)胞添加劑的滲透壓和pH值，并確保這些參數(shù)在采血袋保存或運(yùn)輸中沒有改變。7保存超過1天的紅細(xì)胞或全血，在處理過程中必須非常小心。例如保存7至42天的紅細(xì)胞在過濾前可以用2次顛倒血袋方法來進(jìn)行血液的混勻。8不要將血液儲(chǔ)存在冷庫(kù)的通風(fēng)口，此處的溫度會(huì)低于規(guī)定的1-6。9紅細(xì)胞或全血必須在合適的容器中運(yùn)輸，

22、此容器必須保持在規(guī)定的溫度。10少白細(xì)胞過濾過程中避免氣泡進(jìn)入過濾系統(tǒng)。11避免用外力強(qiáng)行將紅細(xì)胞或全血通過少白細(xì)胞濾器。濾器的初始化應(yīng)采用自然重力，除非少白細(xì)胞濾器廠家另有推薦方法。12全血制備濃縮紅細(xì)胞應(yīng)避免高速離心（大于5000g5分鐘）。在添加劑中重新懸浮壓緊的壓積紅細(xì)胞必須非常小心，避免紅細(xì)胞破壞。13射線輻照前，用少白細(xì)胞濾器過濾紅細(xì)胞制品。14防止紅細(xì)胞轉(zhuǎn)移至低滲或高滲溶液血袋中，低滲或高滲常發(fā)生在血袋滅菌過程。15血液在處理前必須完全抗凝。未經(jīng)充分抗凝的血袋中會(huì)有可見凝塊，切勿使用。血漿血紅蛋白的測(cè)定方法游離血紅蛋白測(cè)定對(duì)于評(píng)估全血和血液制品溶血的程度具有重要價(jià)值。在大多數(shù)血庫(kù)

23、和醫(yī)院，通過觀察和血袋相連的管道作為一種快速、簡(jiǎn)便的方法檢測(cè)溶血。然而這類肉眼觀察的方法不能精確測(cè)定溶血程度，而且管道和血袋中會(huì)有不同的結(jié)果。除了血袋和管道中血容量/塑料表面積比例不同外，應(yīng)當(dāng)指出的是血袋和管道所用的塑料也會(huì)不同。由此血袋和管道接觸面的紅細(xì)胞呼吸氣道就是不相同的。定量方法評(píng)估血液制品溶血最好的方法是有效的定量分析方法。目前已發(fā)展有多種方法，大多基于血紅蛋白吸收光譜的特性，包括不連續(xù)波長(zhǎng)比色法、波長(zhǎng)掃描分析、導(dǎo)數(shù)分光光度法。血漿血紅蛋白定量方法可分為直接光學(xué)法，該技術(shù)定量是基于氧化血紅蛋白在415、541、576nm存在吸收峰。直接波長(zhǎng)掃描分析測(cè)定血漿樣品，膽紅素、血漿蛋白、白蛋白、脂類和其它吸收物質(zhì)的本底水平對(duì)結(jié)果有強(qiáng)烈干擾。其它定量的方法是利用化學(xué)法，當(dāng)樣本與化合物如鐵氰化鉀或四乙基聯(lián)苯胺混合，所有形式血紅蛋白（除了硫化血紅蛋白外）形成顯色反應(yīng)產(chǎn)物。國(guó)際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)推薦氰化高鐵血紅蛋白法作為全血測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)方法。雖然直接光學(xué)比色方法