唾液淀粉酶的影響因素

1、背景酶具有催化效率高，專一性強(qiáng)，作用條件溫和等特酶具有催化效率高，專一性強(qiáng)，作用條件溫和等特點(diǎn)，目前在科研、食品加工、飼料生產(chǎn)、醫(yī)療等方點(diǎn)，目前在科研、食品加工、飼料生產(chǎn)、醫(yī)療等方面具有廣泛的應(yīng)用。唾液淀粉酶存在于唾液中，是面具有廣泛的應(yīng)用。唾液淀粉酶存在于唾液中，是一種有催化活性的蛋白質(zhì)，可將淀粉水解為麥芽糖。一種有催化活性的蛋白質(zhì)，可將淀粉水解為麥芽糖。影響其活性的因素有很多，除了本身結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和結(jié)影響其活性的因素有很多，除了本身結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和結(jié)構(gòu)功能特點(diǎn)影響之外，還主要包括構(gòu)功能特點(diǎn)影響之外，還主要包括PHPH值、溫度、重值、溫度、重金屬離子、抑制劑、激活劑及酶濃度等。金屬離子、抑制劑、激活劑

2、及酶濃度等。實(shí)驗(yàn)背景實(shí)驗(yàn)原理麥芽糖、葡萄糖遇碘不顯色麥芽糖、葡萄糖遇碘不顯色淀粉水解產(chǎn)物與碘液反應(yīng)生成不同的顏色反應(yīng)淀粉水解產(chǎn)物與碘液反應(yīng)生成不同的顏色反應(yīng)淀粉淀粉+碘生成藍(lán)色碘生成藍(lán)色糊精糊精+碘根據(jù)水解程度，由紫色到橙色，水解越徹底，碘根據(jù)水解程度，由紫色到橙色，水解越徹底，顏色越淺，直到生成無(wú)色糊精（碘不顯色）顏色越淺，直到生成無(wú)色糊精（碘不顯色） 實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)儀器實(shí)驗(yàn)儀器：控溫水浴鍋、制冰機(jī)、電磁灶：控溫水浴鍋、制冰機(jī)、電磁灶、不銹鋼鍋不銹鋼鍋 白瓷板白瓷板、試管、滴管、移液管（試管、滴管、移液管（1-2ml）實(shí)驗(yàn)試劑實(shí)驗(yàn)試劑：蒸餾水蒸餾水、1%淀粉液淀粉液、1%蔗糖、蔗糖、0.1%尿

3、素液尿素液 大豆尿素酶溶液大豆尿素酶溶液、0.1%CuSO4、0.1%HgCl2 0.1%NaCl、1M NaOH、0.5M H2SO4、碘液碘液 各種各種pH緩沖液：緩沖液：5.0；6.8；8.0淀粉酶溫度pH抑制劑實(shí)驗(yàn)步驟1.1.稀釋唾液的準(zhǔn)備。稀釋唾液的準(zhǔn)備。2.2.準(zhǔn)備好準(zhǔn)備好3737水浴、冰水浴及沸水浴，點(diǎn)滴板加碘液水浴、冰水浴及沸水浴，點(diǎn)滴板加碘液 各各1 1滴，備用。滴，備用。3.3.取小試管取小試管4 4支，編號(hào)，各加支，編號(hào)，各加1%1%淀粉溶液淀粉溶液3030滴，滴，pHpH 6.8 6.8緩沖液緩沖液1010滴。滴。1 1號(hào)管作對(duì)照，號(hào)管作對(duì)照，2 2號(hào)管放號(hào)管放3737

4、水浴水浴, , 3 3號(hào)管放冰水浴，號(hào)管放冰水浴，4 4號(hào)管放沸水浴中，各預(yù)溫號(hào)管放沸水浴中，各預(yù)溫10min10min。4.4.向向1 1號(hào)管加蒸餾水號(hào)管加蒸餾水1010滴，向滴，向2 2，3 3和和4 4號(hào)管各加稀釋唾號(hào)管各加稀釋唾 液液1010滴，混勻放原水浴中。滴，混勻放原水浴中。5.5min5.5min后由后由2 2號(hào)管每隔一定時(shí)間（號(hào)管每隔一定時(shí)間（1min1min或或2min2min），取），取 液液1 1滴于白瓷凹板上做碘反應(yīng)，觀察并記錄顏色變滴于白瓷凹板上做碘反應(yīng)，觀察并記錄顏色變 化情況，到碘反應(yīng)接近淺紅色時(shí)，取出各管，包括化情況，到碘反應(yīng)接近淺紅色時(shí)，取出各管，包括 1

5、1號(hào)管，分別各取號(hào)管，分別各取1 1滴做碘反應(yīng)，觀察對(duì)比結(jié)果。滴做碘反應(yīng)，觀察對(duì)比結(jié)果。6.6.把把4 4支試管放入支試管放入3737水浴下，水浴下，510min510min后取出，向各后取出，向各 管內(nèi)加碘液管內(nèi)加碘液2 2滴，混勻，觀察結(jié)果。綜合分析所測(cè)滴，混勻，觀察結(jié)果。綜合分析所測(cè) 三種溫度下的酶活性情況，并以三種溫度下的酶活性情況，并以1 1號(hào)管為對(duì)照說(shuō)明號(hào)管為對(duì)照說(shuō)明 冰水浴及沸水浴兩溫度對(duì)酶活性影響的異同。冰水浴及沸水浴兩溫度對(duì)酶活性影響的異同。 試管號(hào)試管號(hào) 1234第一次碘反應(yīng)第一次碘反應(yīng) 第二次碘反應(yīng)第二次碘反應(yīng)4.54.5號(hào)管加稀釋唾液號(hào)管加稀釋唾液1010滴，放滴，放3

6、737水浴中，記錄時(shí)間，每水浴中，記錄時(shí)間，每隔隔1min1min或或2min2min，由第，由第5 5號(hào)試管中取出號(hào)試管中取出1 1滴溶液做碘反應(yīng)，滴溶液做碘反應(yīng)，待碘反應(yīng)呈淺紅色或橙黃色時(shí)，取出試管記錄保溫時(shí)間。待碘反應(yīng)呈淺紅色或橙黃色時(shí)，取出試管記錄保溫時(shí)間。5.145.14號(hào)試管放入號(hào)試管放入3737水浴中，向水浴中，向1 1號(hào)管加號(hào)管加1010滴蒸餾水。滴蒸餾水。以以1min1min間隔，并記錄時(shí)間，依次向間隔，并記錄時(shí)間，依次向2424號(hào)試管中加入稀釋號(hào)試管中加入稀釋唾液唾液1010滴，搖勻，按照滴，搖勻，按照5 5號(hào)管的保溫時(shí)間，以號(hào)管的保溫時(shí)間，以1min1min間隔，間隔，依

7、次取出各管，并立即加碘液依次取出各管，并立即加碘液2 2滴，混勻。向滴，混勻。向1 1號(hào)管加號(hào)管加2 2滴滴碘液。觀察各管顏色，判斷在同碘液。觀察各管顏色，判斷在同pHpH條件下淀粉被水解的條件下淀粉被水解的程度，分析程度，分析pHpH對(duì)淀粉酶活性的影響，確定其最適對(duì)淀粉酶活性的影響，確定其最適pHpH。 時(shí)間（時(shí)間（min）試管號(hào)試管號(hào) 12341234試劑（滴）試劑（滴） 管管號(hào)號(hào) 1234 1 1% %淀粉淀粉30303030pH=6.8pH=6.8緩沖液緩沖液101010100.10.1%Cu%CuSOSO4 4100.10.1%NaCl%NaCl10蒸餾水蒸餾水10 0.10.1% %HgClHgCl2 210稀釋唾液的準(zhǔn)備稀釋唾液的準(zhǔn)備取點(diǎn)滴板取點(diǎn)滴板1 1個(gè)，向白瓷凹板內(nèi)各加碘液個(gè)，向白瓷凹板內(nèi)各加碘液1 1滴，準(zhǔn)備好滴，準(zhǔn)備好3737水浴水浴取小試管取小試管3 3支，如下表加入試劑支，如下表加入試劑5min5min后由后由2 2號(hào)試管每隔號(hào)試管每隔1min,1min,取液滴取液滴于白瓷凹板上做碘反應(yīng)，觀察記錄于白瓷凹板上做碘反應(yīng)，觀察記錄顏色變化情況，至反應(yīng)