血液病基因檢測的臨床意義

1、髓細胞系惡性腫瘤髓細胞系惡性腫瘤 根據(jù)細胞形態(tài)學(xué)、免疫學(xué)、細胞遺傳學(xué)、根據(jù)細胞形態(tài)學(xué)、免疫學(xué)、細胞遺傳學(xué)、分子生物學(xué)以及臨床特征分子生物學(xué)以及臨床特征WHOWHO分型法將髓系腫瘤分為分型法將髓系腫瘤分為 骨髓增生性疾?。ü撬柙錾约膊。∕PDMPD）（腫瘤，）（腫瘤，MPNMPN） 骨髓增生異常骨髓增生異常/ /骨髓增生性疾病骨髓增生性疾病 （腫瘤）（腫瘤） （MDS/MPD, MDS/MPNMDS/MPD, MDS/MPN） 骨髓增生異常綜合征（骨髓增生異常綜合征（MDSMDS） 急性髓細胞白血?。毙运杓毎籽。ˋMLAML） 四四 大大 類類 PHPH染色體染色體t(9;22)(q34

2、;q11),t(9;22)(q34;q11),BCR/ABLBCR/ABL 陽性陽性 的慢性髓系白血病（的慢性髓系白血?。–MLCML） 慢性中性粒細胞白血?。灾行粤＜毎籽。–NLCNL） 慢性嗜酸粒細胞白血病慢性嗜酸粒細胞白血病/ /高嗜酸粒細胞綜征高嗜酸粒細胞綜征 （CEL/HESCEL/HES） 真性紅細胞增多癥（真性紅細胞增多癥（PVPV） 慢性原發(fā)性骨髓纖維化（伴髓外造血）慢性原發(fā)性骨髓纖維化（伴髓外造血） （CIMFCIMF） 原發(fā)性血小板增多癥（原發(fā)性血小板增多癥（ETET） 不能分類骨髓增生性疾病不能分類骨髓增生性疾病 七七 類類骨髓增生性腫瘤（骨髓增生性腫瘤（MPN）

3、骨髓增生異常骨髓增生異常/骨髓增生性腫瘤骨髓增生性腫瘤 （MDS/MPN） 是一種克隆性造血干細胞疾病，特點表現(xiàn)為是一種克隆性造血干細胞疾病，特點表現(xiàn)為MDSMDS與與MPDMPD交疊，有多種交疊，有多種“有效有效”造血及病態(tài)造血存造血及病態(tài)造血存在。在。 慢性粒慢性粒- -單核細胞白血病單核細胞白血?。–MMLCMML） 不典型慢性髓系白血病不典型慢性髓系白血?。╝CMLaCML） 幼年型粒幼年型粒- -單核細胞白血病單核細胞白血?。↗MMLJMML） 不能分類的不能分類的MDS/MPDMDS/MPD 四四 類類骨髓增生異常綜合征（骨髓增生異常綜合征（MDSMDS） MDS也是克隆性疾病，以

4、無效造也是克隆性疾病，以無效造血為其特征引起血細胞減少，骨髓血為其特征引起血細胞減少，骨髓及血象一至多系細胞病態(tài)造血。及血象一至多系細胞病態(tài)造血。MDS亞型分類亞型分類 亞型亞型 外周血象外周血象 骨髓象骨髓象 1.難治性貧血難治性貧血 貧血；未見或罕見貧血；未見或罕見 僅紅系增生異常，僅紅系增生異常， （ RA） 原始細胞原始細胞 原始細胞原始細胞 5%， 環(huán)形鐵粒幼細胞環(huán)形鐵粒幼細胞15% 2. 難治性貧血伴貧血；未見或罕見難治性貧血伴貧血；未見或罕見 僅紅系增生異常，僅紅系增生異常， 環(huán)形鐵粒幼細胞原始細胞環(huán)形鐵粒幼細胞原始細胞 原始細胞原始細胞 5%， （）（） 環(huán)形鐵粒幼細胞環(huán)形鐵粒

5、幼細胞15% 3.難治性血細胞減少難治性血細胞減少 血細胞減少（二系或血細胞減少（二系或 二系或多系細胞增生異常二系或多系細胞增生異常 伴多系增生異常伴多系增生異常 全系）；未見全系）；未見Auer小體；小體； 10%；原始細胞；原始細胞 5%， （RCMD） 未見或罕見未見或罕見 原始細胞原始細胞 ； 未見未見Auer小體；小體； 單核細胞單核細胞1109/L 環(huán)形鐵粒幼細胞環(huán)形鐵粒幼細胞15% 4.難治性血細胞減少難治性血細胞減少 血細胞減少（二系或血細胞減少（二系或 二系或多系細胞增生異二系或多系細胞增生異常伴多系增生異常和常伴多系增生異常和 全系）；未見全系）；未見Auer小體；小體；

6、 10%；原始細胞；原始細胞 5%，環(huán)形鐵粒幼細胞環(huán)形鐵粒幼細胞 單核細胞單核細胞1109/L 未見未見Auer小體；小體； （RCMD-RS） 環(huán)形鐵粒幼細胞環(huán)形鐵粒幼細胞15% 亞型亞型 外周血象外周血象 骨髓象骨髓象5.難治性貧血伴難治性貧血伴 血細胞減少，血細胞減少， 一系或多系細胞增生異常；一系或多系細胞增生異常；原始細胞增多原始細胞增多1型型 原始細胞原始細胞5% 原始細胞原始細胞5%9%；（RAEB-1） 未見未見Auer小體；小體； 未見未見Auer小體；小體；單核細胞單核細胞1109/L6.難治性貧血伴難治性貧血伴 血細胞減少，血細胞減少， 一系或多系細胞增生異常；一系或多系

7、細胞增生異常；原始細胞增多原始細胞增多2型型 原始細胞原始細胞5%19% 原始細胞原始細胞10%19%；（RAEB-2） Auer小體（小體（）；）； Auer小體（小體（）；）；單核細胞單核細胞1109/L7.未歸類的未歸類的MDS 血細胞減少，血細胞減少， 單一髓系細胞增生異常；單一髓系細胞增生異常；（MDS-U） 未見或罕見原始細胞；未見或罕見原始細胞； 原始細胞原始細胞5% ； 未見未見Auer小體；小體； 未見未見Auer小體；小體；8.5q-綜合征綜合征 貧血；貧血； 少葉核巨核細胞正常或增多；少葉核巨核細胞正?；蛟龆?；del（5q） 血小板計數(shù)正常或增高；血小板計數(shù)正?；蛟龈撸?

8、原始細胞原始細胞5% ； 原始細胞原始細胞5%； 細胞遺傳學(xué)檢測僅見細胞遺傳學(xué)檢測僅見 del（5q）異常；）異常； 未見未見Auer小體；小體； AMLAML是髓系原始細胞克隆性增生是髓系原始細胞克隆性增生疾病，疾病，WHOWHO分型將分型將AMLAML分為：分為： 1.1. 伴有特殊染色體的伴有特殊染色體的AMLAML 2.2.伴有病態(tài)造血的伴有病態(tài)造血的AMLAML 3.3.治療相關(guān)的治療相關(guān)的AMLAML和和MDSMDS 4.4.不伴特殊細胞遺傳易位的不伴特殊細胞遺傳易位的AMLAML 四亞型。四亞型。 急性髓細胞白血病（急性髓細胞白血?。ˋML）1 1伴有特殊細胞遺傳易位的伴有特殊細

9、胞遺傳易位的AMLAML （1 1）伴有）伴有t(8;21)(q22;q22)AML,t(8;21)(q22;q22)AML, AML1AML1（CBFCBF）/ETO/ETO的的AMLAML （2 2）伴有）伴有inv(16)(p13;q22)inv(16)(p13;q22)或或 t(16;16)(p13;q22),t(16;16)(p13;q22), CBF/MYH11CBF/MYH11的骨髓嗜酸粒細胞增多的的骨髓嗜酸粒細胞增多的AMLAML （3 3）伴有）伴有t(15;17)(q22;q11-12),PML/RARt(15;17)(q22;q11-12),PML/RAR 及變異的急性早

10、幼粒細胞白血?。白儺惖募毙栽缬琢＜毎籽。ˋPLAPL） （4 4）伴有）伴有11q23(MLL)11q23(MLL)異常增生的異常增生的AMLAML 2 2伴有多系血細胞增生異常的伴有多系血細胞增生異常的 急性髓細胞白血病急性髓細胞白血病 （1 1）由）由MDSMDS或或MDS/MPDMDS/MPD轉(zhuǎn)化而成轉(zhuǎn)化而成 （2 2）發(fā)病前無）發(fā)病前無MDSMDS病史病史 3 3治療相關(guān)的治療相關(guān)的AMLAML和和MDSMDS（1 1）與烷化劑相關(guān)）與烷化劑相關(guān)（2 2）與拓撲異構(gòu)酶）與拓撲異構(gòu)酶抑制劑相關(guān)抑制劑相關(guān) （一些可以是淋巴系）（一些可以是淋巴系） （3 3）其他）其他 4 4不伴特殊

11、細胞遺傳易位的不伴特殊細胞遺傳易位的AMLAML （1 1）未分化）未分化AMLAML （2 2）未成熟）未成熟AMLAML （3 3）成熟）成熟AMLAML （4 4）急性粒）急性粒- -單核細胞白血病單核細胞白血病 （5 5）急性單核細胞白血?。┘毙詥魏思毎籽?（6 6）急性紅白血病）急性紅白血病 （7 7）急性巨核細胞白血?。┘毙跃藓思毎籽?（8 8）急性嗜堿細胞白血?。┘毙允葔A細胞白血病 （9 9）伴骨髓纖維化的急性全髓增生）伴骨髓纖維化的急性全髓增生 （1010）髓細胞肉瘤）髓細胞肉瘤白白血血病病 FAB 分分型型和和 WHO 分分型型對對比比 FAB 分分型型 WHO 分分

12、型型ALLL1 L2急急性性前前體體淋淋巴巴母母細細胞胞白白血血病病/淋淋巴巴瘤瘤Precursor B and T lymphoblastic leukemia/lymphoma（ALL） L3Burkitt 白白血血病病/淋淋巴巴瘤瘤 （Burkitt leukemia /lymphoma）AMLM0極極微微分分化化 AML （AML，minimally differentiated） M1未未成成熟熟 AML （AML without maturation） M2a成成熟熟 AML （AML with maturation） M2bAML with t（8；21） （q22；q22） ，

13、 （AML1/ETO） M3APLAML with t（15；17） （q22；q12） ， （PML/RAR）and variants M4急急性性粒粒-單單核核細細胞胞白白血血病病 （Acute myelomonocytic leukemia） M4EOAML with inv（16） （p13q22） or t（16；16） （p13；q22） ，（CBF/MYH11） M5（M5a、M5b）急急性性單單核核細細胞胞白白血血病病 （Acute monoblastic and monocyticleukemia） M6急急性性紅紅白白血血病病 （Acute erythroid leukem

14、ia） M7急急性性巨巨核核細細胞胞白白血血病病 （Acute megakaryoblastic leukemia）淋系腫瘤： B系腫瘤和系腫瘤和T/NK細胞系腫瘤細胞系腫瘤 又可分為兩大類型：又可分為兩大類型： 前體淋巴細胞腫瘤（淋系白血?。┣绑w淋巴細胞腫瘤（淋系白血?。?外周或成熟淋巴細胞腫瘤（淋巴瘤）外周或成熟淋巴細胞腫瘤（淋巴瘤） 前者指淋巴細胞分化的早期階段起源的腫瘤前者指淋巴細胞分化的早期階段起源的腫瘤 后者是分化成熟階段來源的腫瘤后者是分化成熟階段來源的腫瘤B細胞系腫瘤細胞系腫瘤 前體前體B細胞腫瘤細胞腫瘤 前體前體B淋巴母細胞白血病淋巴母細胞白血病/淋巴瘤（淋巴瘤（B-ALL/

15、LBL） 成熟（周圍）成熟（周圍）B細胞腫瘤細胞腫瘤 B-慢性淋巴細胞性白血病慢性淋巴細胞性白血病/小淋巴細胞淋巴瘤（小淋巴細胞淋巴瘤（B-CLL/SLL） B-細胞幼淋巴性細胞白血病（細胞幼淋巴性細胞白血?。˙-PLL） 淋巴漿細胞淋巴瘤（淋巴漿細胞淋巴瘤（LPL） Burkitt淋巴瘤（淋巴瘤（BL） 多毛細胞白血?。ǘ嗝毎籽。℉CL） 漿細胞骨髓瘤漿細胞骨髓瘤/漿細胞瘤（漿細胞瘤（PCM/PCL） 脾邊緣區(qū)脾邊緣區(qū)B細胞淋巴瘤，細胞淋巴瘤，絨毛狀淋巴細胞（絨毛狀淋巴細胞（SMZL） 結(jié)外邊緣區(qū)結(jié)外邊緣區(qū)B細胞淋巴瘤，細胞淋巴瘤，MALT型（型（MALT-MZL） 結(jié)型邊緣區(qū)結(jié)型邊緣

16、區(qū)B細胞淋巴瘤，細胞淋巴瘤，單核細胞樣單核細胞樣B細胞（細胞（MZL） 濾泡性淋巴瘤（濾泡性淋巴瘤（FL） 套細胞淋巴瘤（套細胞淋巴瘤（MCL） 彌漫性大彌漫性大B細胞淋巴瘤（細胞淋巴瘤（DLBCL）T細胞和細胞和NK細胞系腫瘤細胞系腫瘤前體前體T細胞腫瘤細胞腫瘤 前體前體T淋巴母細胞淋巴瘤淋巴母細胞淋巴瘤/白血?。ò籽。═-LBL/ALL）成熟（周圍）成熟（周圍）T細胞腫瘤細胞腫瘤 T-細胞幼淋巴細胞白血?。毎琢馨图毎籽。═-PLL） T-大顆粒淋巴細胞白血?。ù箢w粒淋巴細胞白血?。═-LGL） 侵襲性侵襲性NK細胞白血?。毎籽。ˋNKCL） 成人成人T細胞淋巴瘤細胞淋巴瘤/

17、白血病（白血?。ˋTCL/L） 結(jié)外結(jié)外NK/T細胞淋巴瘤，鼻型（細胞淋巴瘤，鼻型（NK/TCL） 腸病型腸病型T細胞細胞/淋巴瘤（淋巴瘤（ITCL） 肝脾肝脾T細胞淋巴瘤細胞淋巴瘤 皮下脂膜炎樣皮下脂膜炎樣T細胞淋巴瘤細胞淋巴瘤 蕈樣真菌病蕈樣真菌病/Sezary綜合征（綜合征（MF/SS） 間變性大細胞淋巴瘤（間變性大細胞淋巴瘤（ALCL）霍奇金淋巴瘤（霍奇金病）霍奇金淋巴瘤（霍奇金?。┙Y(jié)節(jié)性淋巴細胞為主型霍奇金淋巴瘤（結(jié)節(jié)性淋巴細胞為主型霍奇金淋巴瘤（NLPHL） 經(jīng)典型霍奇金淋巴瘤經(jīng)典型霍奇金淋巴瘤 結(jié)節(jié)硬化型霍奇金淋巴瘤，結(jié)節(jié)硬化型霍奇金淋巴瘤，1和和2級（級（NSHL） 富于淋巴細

18、胞經(jīng)典霍奇金淋巴瘤富于淋巴細胞經(jīng)典霍奇金淋巴瘤 混合細胞型霍奇金淋巴瘤（混合細胞型霍奇金淋巴瘤（MCHL） 淋巴細胞消減型霍奇金淋巴瘤（淋巴細胞消減型霍奇金淋巴瘤（LDHL）白白 血血 病病 基基 因因 檢檢 測測 基因突變基因突變是指由于是指由于DNADNA分子中發(fā)生堿基對的分子中發(fā)生堿基對的_而引起的而引起的_的改變。的改變。增添增添替換替換缺失缺失（D）（d1）（d2）（d3）增添、缺失或替換增添、缺失或替換基因結(jié)構(gòu)基因結(jié)構(gòu)基因突變基因突變一定一定會導(dǎo)致生物性狀的改變嗎會導(dǎo)致生物性狀的改變嗎?mRNA:G A A甲甲 乙乙 丙丙 丁丁DNADNA堿基對替換，堿基對替換，不一定不一定引起蛋

19、白質(zhì)結(jié)構(gòu)的改變。引起蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的改變。結(jié)論結(jié)論:堿基對替換堿基對替換一定一定會導(dǎo)致蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的改變嗎會導(dǎo)致蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的改變嗎?氨基酸氨基酸: 天冬氨酸天冬氨酸天冬氨酸天冬氨酸谷氨酸谷氨酸纈氨酸纈氨酸G A UG A CG U A 2 2、蘇丹紅蘇丹紅進入人體可產(chǎn)生致癌作用。進入人體可產(chǎn)生致癌作用。3 3、乙肝病毒使肝細胞進一步變異，肝細胞、乙肝病毒使肝細胞進一步變異，肝細胞不凋亡，而且不斷地再生，就形成了肝癌。不凋亡，而且不斷地再生，就形成了肝癌。 內(nèi)因內(nèi)因：DNA復(fù)制時自身也偶爾發(fā)生錯誤復(fù)制時自身也偶爾發(fā)生錯誤物理因素物理因素化學(xué)因素化學(xué)因素生物因素生物因素基因突變原因：基因突變原因：基因突

20、變的特點基因突變的特點 大多數(shù)基因突變對生物體大多數(shù)基因突變對生物體是有害的，只有少數(shù)是有利的，是有害的，只有少數(shù)是有利的，有些既無害也無益。有些既無害也無益。多數(shù)有害多數(shù)有害結(jié)果：增殖過度，分化阻斷，凋亡受抑結(jié)果：增殖過度，分化阻斷，凋亡受抑白血病的分子檢測白血病的分子檢測vSouthern blotvNorthern blotvWestern blotvFISHvPCRv測序測序v芯片芯片白血病的分子檢測白血病的分子檢測vPCR方法優(yōu)點方法優(yōu)點 快速快速 靈敏靈敏 特異特異vPCR方法缺點方法缺點 假陽性假陽性 假陰性假陰性！白血病的分子檢測白血病的分子檢測vPCR：僅適用于染色體斷裂點叢

21、集于相對小的范僅適用于染色體斷裂點叢集于相對小的范圍內(nèi)（圍內(nèi)（2kb2kb），如），如T-ALL中中SIL-TAL1。 vRT-PCR：可用于染色體可用于染色體斷裂點跨越很大的區(qū)域斷裂點跨越很大的區(qū)域的融合基因。的融合基因。 v巢式巢式RT-PCR：可顯著提高反應(yīng)的特異性，增加可顯著提高反應(yīng)的特異性，增加擴增效率。擴增效率。vRQ-PCR：可定量擴增產(chǎn)物?？啥繑U增產(chǎn)物。白血病分子檢測的臨床應(yīng)用白血病分子檢測的臨床應(yīng)用白血病的分子生物學(xué)檢查對白血病診斷分型及白血病的分子生物學(xué)檢查對白血病診斷分型及預(yù)后判斷有以下幾方面意義：預(yù)后判斷有以下幾方面意義： v補充補充MIC檢查的不足檢查的不足 v發(fā)現(xiàn)

22、新的亞型發(fā)現(xiàn)新的亞型 v監(jiān)測白血病的微小殘留病灶（監(jiān)測白血病的微小殘留病灶（MRD） v為研究白血病的發(fā)病機制打下基礎(chǔ)為研究白血病的發(fā)病機制打下基礎(chǔ) 白血病分子檢測的臨床應(yīng)用白血病分子檢測的臨床應(yīng)用 PCR方法檢測方法檢測MRD常用的分子標志常用的分子標志 AML1-ETOvt(8;21)(q22;q22) v68%原發(fā)性原發(fā)性AML，在，在M2中的陽性率為中的陽性率為2040%，在在M2b中陽性率為中陽性率為90% v少見于少見于M4和和M1，極少見于，極少見于MDS和骨髓增生綜合癥和骨髓增生綜合癥 vAML1-ETO+白血病細胞有一定程度的分化能力，白血病細胞有一定程度的分化能力，能分化至

23、較成熟的嗜中性粒細胞和嗜酸性粒細胞，能分化至較成熟的嗜中性粒細胞和嗜酸性粒細胞，且對且對化療反應(yīng)較敏感化療反應(yīng)較敏感 vAML1-ETO+患者對大劑量阿糖胞苷治療效果好患者對大劑量阿糖胞苷治療效果好，具有較高的緩解率，無病生存期長，預(yù)后較其他具有較高的緩解率，無病生存期長，預(yù)后較其他AML亞型（亞型（M3除外）好除外）好 AML1-ETOv對初發(fā)患者進行對初發(fā)患者進行t(8;21)和和AML1-ETO融合基融合基因的檢測對其預(yù)后判斷及治療方案的制定相因的檢測對其預(yù)后判斷及治療方案的制定相當重要當重要 vAML1-ETO定性結(jié)果不能用于評價患者定性結(jié)果不能用于評價患者MRD情況情況 vRQ-PC

24、R能實時反映體內(nèi)能實時反映體內(nèi)AML1-ETO水平水平。連續(xù)定量連續(xù)定量AML1-ETO轉(zhuǎn)錄本水平可判定有高轉(zhuǎn)錄本水平可判定有高復(fù)發(fā)風(fēng)險的患者，以便及早治療干預(yù)以防血復(fù)發(fā)風(fēng)險的患者，以便及早治療干預(yù)以防血液學(xué)復(fù)發(fā)液學(xué)復(fù)發(fā) PML-RARvt(15;17)(q22;q21) ，98%M3患者陽性患者陽性v繼繼t(15;17)之后，又先后發(fā)現(xiàn)之后，又先后發(fā)現(xiàn)4種種M3特異的累及特異的累及RAR的變異性染色體易位：的變異性染色體易位：vt(5;17)(q35;q21)，t(11;17)(q13;q21)，dup(17)(q21.3;q23)， t(11;17)(q23;q21) 分別產(chǎn)生分別產(chǎn)生NP

25、M-RAR，NuMA-RAR和和PLZF-RAR， STAT5b-RAR融合基因融合基因v臨床上，具有臨床上，具有PLZF-RAR或或STAT5b-RAR融合融合基因患者對基因患者對ATRA治療不敏感，其余三種染色體易治療不敏感，其余三種染色體易位患者經(jīng)位患者經(jīng)ATRA治療可獲完全緩解治療可獲完全緩解 PML-RARAPL累及的累及的RAR基因及其伙伴基因結(jié)構(gòu)示意圖基因及其伙伴基因結(jié)構(gòu)示意圖 PML-RARv由于由于PML基因斷裂點基因斷裂點不同，產(chǎn)生不同，產(chǎn)生3種不同的種不同的PML-RAR異構(gòu)體異構(gòu)體 v約約55%的的M3患者為患者為L型，型，40%為為S型，型，5%為為V型，且每位患者只

26、表達一種型，且每位患者只表達一種PML-RAR融融合蛋白合蛋白v形態(tài)學(xué)上形態(tài)學(xué)上S型白血病細胞常為低分化的并且型白血病細胞常為低分化的并且這些患者可見繼發(fā)細胞遺傳學(xué)異常，這些患者可見繼發(fā)細胞遺傳學(xué)異常，V型型APL患者的白血病細胞體外對患者的白血病細胞體外對ATRA的敏感的敏感度低度低 PML-RARvRT-PCR檢測檢測PML-RAR是敏感且特異的是敏感且特異的APL診斷方法，還能用于診斷方法，還能用于治療后治療后MRD監(jiān)測監(jiān)測。PML-RAR陽性提示的分子復(fù)發(fā)常早于臨床陽性提示的分子復(fù)發(fā)常早于臨床復(fù)發(fā)復(fù)發(fā)3-63-6個月，為臨床采取進一步治療措施提個月，為臨床采取進一步治療措施提供了保障供

27、了保障 vRQ-PCR能有效反映患者在發(fā)病、治療、緩能有效反映患者在發(fā)病、治療、緩解、復(fù)發(fā)整個過程的白血病細胞負荷，在解、復(fù)發(fā)整個過程的白血病細胞負荷，在MRD監(jiān)測中比監(jiān)測中比RT-PCR具有更高價值具有更高價值 FLT3基因突變基因突變vFms-related tyrosine kinase 3vFLT3為為III型受體酪氨酸激酶家族（還包括型受體酪氨酸激酶家族（還包括c-FMS，PDGFR和和c-KIT）成員之一，該類受體因在造血）成員之一，該類受體因在造血過程中造血細胞的增殖和存活中發(fā)揮重要調(diào)控作用過程中造血細胞的增殖和存活中發(fā)揮重要調(diào)控作用v據(jù)報道，據(jù)報道， FLT3-ITD和和D83

28、5突變在突變在AML中陽性率分中陽性率分別為別為24%(385/1585)和和7%(30/429)，總陽性率超過，總陽性率超過30%，使其成為，使其成為AML中最普遍發(fā)生突變的靶基因中最普遍發(fā)生突變的靶基因v許多臨床研究發(fā)現(xiàn)，許多臨床研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)LT3突變還與臨床預(yù)后密切相突變還與臨床預(yù)后密切相關(guān)，尤對關(guān)，尤對60歲以下的歲以下的AML患者，患者，F(xiàn)LT3突變患者預(yù)突變患者預(yù)后較差，后較差，且可獨立于核型之外且可獨立于核型之外CBF-MYH11vinv(16)(p13;q22)及及t(16;16)(p13;q22) v主要見于主要見于M4Eo，10%不伴異常嗜酸細胞不伴異常嗜酸細胞M4，少見于

29、少見于M2vCBF-MYH11融合蛋白通過干擾核心結(jié)合因融合蛋白通過干擾核心結(jié)合因子（子（core binding factor,CBFcore binding factor,CBF）的轉(zhuǎn)錄激活）的轉(zhuǎn)錄激活作用而致病作用而致病 v具有具有CBF-MYH11的患者對化療敏感，預(yù)后的患者對化療敏感，預(yù)后較好，較好，故提高檢測率尤具臨床意義故提高檢測率尤具臨床意義 CBF-MYH11vCBF-MYH11具有多種變異型，其中最常見具有多種變異型，其中最常見的為的為A型，占型，占80%vRT-PCR檢測檢測CBF-MYH11進行進行MRD監(jiān)測顯監(jiān)測顯示，大部分患者在完全緩解時示，大部分患者在完全緩解時P

30、CR轉(zhuǎn)陰，但轉(zhuǎn)陰，但仍有小部分長期存活者仍有小部分長期存活者PCR仍為陽性仍為陽性v最新研究采用最新研究采用RQ-PCR檢測檢測CBF-MYH11轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)錄本水平來評價錄本水平來評價M4Eo患者患者MRD情況，預(yù)示情況，預(yù)示復(fù)發(fā)復(fù)發(fā) DEK-CANvt(6;9)(p23;q34) v主要見于主要見于M2或或M4，也見于，也見于M1，MDS- -RAEBv伴伴DEK-CAN的患者年齡一般較輕，且的患者年齡一般較輕，且預(yù)后較差預(yù)后較差v此類患者進行分子監(jiān)測有助于判斷患者預(yù)后，調(diào)整此類患者進行分子監(jiān)測有助于判斷患者預(yù)后，調(diào)整治療方案治療方案 WT-1基因高表達基因高表達vWilms tumor 1v是無

31、特異分子異常的急性白血病患者理想的是無特異分子異常的急性白血病患者理想的MRD檢測指標檢測指標v伴此基因伴此基因高表達者預(yù)后差高表達者預(yù)后差，且表達程度與預(yù)，且表達程度與預(yù)后相關(guān)后相關(guān)BCR-ABLvt(9;22)(q34;q11) v1530%成人成人ALL及及35%兒童兒童ALLv 9號染色體的斷裂點與號染色體的斷裂點與CML相同，但相同，但22號染色體斷號染色體斷裂點具有異質(zhì)性裂點具有異質(zhì)性 v此融合蛋白此融合蛋白p190刺激細胞增殖的能力比刺激細胞增殖的能力比p210要強。要強。在轉(zhuǎn)基因試驗中觀察到在轉(zhuǎn)基因試驗中觀察到p190誘發(fā)的白血病具有起病誘發(fā)的白血病具有起病早、發(fā)展快和惡性程度

32、高的特點早、發(fā)展快和惡性程度高的特點vBCR-ABL+ALL患者預(yù)后差患者預(yù)后差，5年存活率年存活率20%，因，因此這些患者在緩解后需進行骨髓移植治療此這些患者在緩解后需進行骨髓移植治療 BCR-ABLv對于自體或異體移植對于自體或異體移植ALL患者，移植前后患者，移植前后BCR-ABL的有無以及的有無以及BCR-ABL的轉(zhuǎn)錄本類的轉(zhuǎn)錄本類型與預(yù)后有關(guān)型與預(yù)后有關(guān) E2A-PBX1vt(1;19)(q23;p13) v56%兒童兒童ALL和和3%成人成人ALL v此類患者具有此類患者具有高的白細胞計數(shù)，高的血清乳酸脫氫高的白細胞計數(shù)，高的血清乳酸脫氫酶及中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀，預(yù)后差酶及中樞神經(jīng)系統(tǒng)

33、癥狀，預(yù)后差，平均無病生存期，平均無病生存期（DFS）僅）僅6個月，個月，3年年DFS為為20%，需給予這些患，需給予這些患者強化治療才能獲得較好的預(yù)后者強化治療才能獲得較好的預(yù)后v核型和核型和E2A-PBX1檢測對此類患者的診斷和治療方檢測對此類患者的診斷和治療方案的選擇至關(guān)重要案的選擇至關(guān)重要vE2A-PBX1的預(yù)后價值需更多的臨床研究證實的預(yù)后價值需更多的臨床研究證實 TEL-AML1vt(12;21)(p13;q22) v25%兒童兒童ALL，是兒童，是兒童ALL中最常見的分子異常中最常見的分子異常 v目前為止尚未在目前為止尚未在T-ALL，AML或或NHL中發(fā)現(xiàn)中發(fā)現(xiàn)t(12;21)

34、，在嬰兒白血病中極少報道，在成人白血，在嬰兒白血病中極少報道，在成人白血病患者中頻率很低（病患者中頻率很低（2%）v此類患者發(fā)病年齡?。ù祟惢颊甙l(fā)病年齡?。?歲歲10歲），歲），WBC計數(shù)低計數(shù)低（50 000/L），），免疫表型為前免疫表型為前B-ALLv此類患者對此類患者對治療反應(yīng)佳治療反應(yīng)佳，完全緩解時間長，預(yù)后好，完全緩解時間長，預(yù)后好 TEL-AML1v由于由于12p和和21q末端在常規(guī)顯帶中很相似，因末端在常規(guī)顯帶中很相似，因此常規(guī)細胞遺傳學(xué)方法檢出率僅此常規(guī)細胞遺傳學(xué)方法檢出率僅0.05%，需，需應(yīng)用應(yīng)用FISH或或RT-PCR方法提高檢測陽性率方法提高檢測陽性率vTEL基因重排

35、是獨立預(yù)后因素，基因重排是獨立預(yù)后因素，RT-PCR檢檢測測TEL-AML1融合基因能將低危險度與高危融合基因能將低危險度與高危險度的險度的ALL患者區(qū)分開來。因此早期檢測患者區(qū)分開來。因此早期檢測TEL-AML1融合基因?qū)εR床預(yù)后，確定合適融合基因?qū)εR床預(yù)后，確定合適的治療方案都有重要意義的治療方案都有重要意義 MLL相關(guān)融合基因相關(guān)融合基因 v累及累及MLL基因的分子異常見于基因的分子異常見于5.2%AML，22%ALL和混合性白血病及某些淋巴瘤，還可見于治療相關(guān)和混合性白血病及某些淋巴瘤，還可見于治療相關(guān)白血病，尤接受白血病，尤接受topoisomerase II抑制劑治療的患抑制劑治療

36、的患者者 vMLL基因涉及五十余種染色體易位基因涉及五十余種染色體易位，產(chǎn)生不同的融，產(chǎn)生不同的融合蛋白，且每種融合蛋白都與特定的白血病表型相合蛋白，且每種融合蛋白都與特定的白血病表型相關(guān)。最常見的有：關(guān)。最常見的有： t(4;11)(q21;q23) MLL-AF4融合基因融合基因 ALL t(9;11)(p22;q23) MLL-AF9融合基因融合基因 AML t(11;19)(p13;q23) MLL-ENL融合基因融合基因 AML及及ALLMLL相關(guān)融合基因相關(guān)融合基因vMLL相關(guān)融合蛋白的致病性還不清楚，推測相關(guān)融合蛋白的致病性還不清楚，推測其可能具有雙重作用：其可能具有雙重作用：

37、融合蛋白可能獲得新的功能，促使細胞融合蛋白可能獲得新的功能，促使細胞轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)化 MLL發(fā)生斷裂后，缺失鋅指結(jié)構(gòu)域的發(fā)生斷裂后，缺失鋅指結(jié)構(gòu)域的MLL不能與不能與DNA結(jié)合，失去其轉(zhuǎn)錄活化功能，結(jié)合，失去其轉(zhuǎn)錄活化功能，使受使受MLL調(diào)節(jié)的靶基因（調(diào)節(jié)的靶基因（HOX基因）表達異基因）表達異常，也影響造血細胞的發(fā)育常，也影響造血細胞的發(fā)育 MLL-AF4vt(4;11)(q21;q23)vt(4;11)的發(fā)生率在不同年齡段是不同的，在嬰兒的發(fā)生率在不同年齡段是不同的，在嬰兒ALL中最多見，為中最多見，為5070%，而在兒童和成人中較，而在兒童和成人中較低，分別為低，分別為2%和和36%v此類患者此

38、類患者發(fā)病年齡低（通常發(fā)病年齡低（通常 90% CML患者患者vBCR-ABL融合蛋白（融合蛋白（p210）的酪氨酸蛋白激酶活性較正）的酪氨酸蛋白激酶活性較正常常ABL高，可能是高，可能是BCR對對ABL激酶活性調(diào)節(jié)區(qū)的作用所激酶活性調(diào)節(jié)區(qū)的作用所致致v由于由于5%CML患者為隱匿性患者為隱匿性Ph染色體，因此無染色體，因此無Ph染色體染色體CML患者還需使用更靈敏的分子檢測手段如患者還需使用更靈敏的分子檢測手段如FISH或或RT-PCR檢測檢測BCR-ABL融合基因融合基因vRT-PCR還能區(qū)分還能區(qū)分e1-a2和和b2-a2/b3-a2二種二種BCR-ABL轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)錄本，從而區(qū)分錄本，從而區(qū)分

39、ALL患者與患者與CML急淋變患者，進而分別急淋變患者，進而分別對兩種不同患者采用不同的治療方案對兩種不同患者采用不同的治療方案C M LC M LBCR-ABLv巢式巢式RT-PCR檢測檢測BCR-ABL融合基因用于融合基因用于CML移植患者移植患者移植后移植后MRD監(jiān)測監(jiān)測。可在患者血?？稍诨颊哐簩W(xué)復(fù)發(fā)前的液學(xué)復(fù)發(fā)前的624個月骨髓檢測就呈陽性。個月骨髓檢測就呈陽性。 vRQ-PCR還能動態(tài)觀察患者治療后還能動態(tài)觀察患者治療后BCR-ABL轉(zhuǎn)錄本水平變化情況，反映療效。轉(zhuǎn)錄本水平變化情況，反映療效。 GATA2基因突變基因突變v調(diào)控早期造血干細胞增殖分化的轉(zhuǎn)錄因子，維持造調(diào)控早期造血干細

40、胞增殖分化的轉(zhuǎn)錄因子，維持造血干祖細胞的增殖和自我更新能力血干祖細胞的增殖和自我更新能力vCML急變患者中新發(fā)現(xiàn)急變患者中新發(fā)現(xiàn)GATA2基因突變基因突變， 而而CML慢性期、加速期，慢性期、加速期，AML（M1-M7），），MDS，ALL，CLL，淋巴瘤和骨髓瘤患者，以及正常對照均未發(fā)淋巴瘤和骨髓瘤患者，以及正常對照均未發(fā)現(xiàn)該突變，現(xiàn)該突變，可見可見GATA2基因突變僅與基因突變僅與CML急變相急變相關(guān)，是關(guān)，是CML疾病進展過程中的獲得性突變。疾病進展過程中的獲得性突變。總發(fā)生總發(fā)生率為率為12.5%（5/40），且均造成，且均造成CML急粒單變急粒單變vGATA2基因基因突變與突變與CM

41、L患者疾病進展和預(yù)后的關(guān)患者疾病進展和預(yù)后的關(guān)系有待進一步闡明系有待進一步闡明JAK2基因突變基因突變vJanus kinase 2v此基因突變主要見于此基因突變主要見于MPD和和MDS，另可存在，另可存在于部分于部分AML尤尤M2v突變?yōu)橥蛔優(yōu)閂617Fv突變?nèi)コ送蛔內(nèi)コ薐AK2 JH2負性調(diào)控，導(dǎo)致該基負性調(diào)控，導(dǎo)致該基因的持續(xù)活化，賦予細胞增殖存活優(yōu)勢因的持續(xù)活化，賦予細胞增殖存活優(yōu)勢vJAK2可成為靶向治療的靶點可成為靶向治療的靶點MDS相關(guān)基因異常相關(guān)基因異常vDelta樣樣(Dlk)基因編碼基因編碼Dlk蛋白在蛋白在MDS明顯增明顯增高者高者55%，而，而AML僅僅10%，可能是可能是MDS特異特異性基因性基因，但作為