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1、醫(yī)院檢驗(yàn)科檢驗(yàn)技術(shù)操作規(guī)程第一節(jié) 全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀操作規(guī)程第二節(jié) 尿液分析儀使用規(guī)程 第三節(jié) 自動(dòng)凝血儀操作規(guī)程第四節(jié) 半自動(dòng)生化分析儀操作規(guī)程凝血四項(xiàng)檢驗(yàn)操作第五節(jié) 血常規(guī)檢驗(yàn)操作規(guī)程 第六節(jié) 尿常規(guī)檢驗(yàn)操作規(guī)程 第七節(jié) 肝功能檢驗(yàn)操作規(guī)程 第八節(jié) 腎功能檢驗(yàn)操作規(guī)程 第九節(jié) 血脂檢驗(yàn)操作規(guī)程 第十節(jié) 血液葡萄糖測(cè)定技術(shù)操作規(guī)程 第十一節(jié) 規(guī)程第十二節(jié) AB0 血型正、反血型鑒定技術(shù)操作規(guī)程第一節(jié)全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀操作規(guī)程1、樣品分析前準(zhǔn)備1.1 開(kāi)機(jī)前的檢查、準(zhǔn)備 在開(kāi)啟分析儀電源之前,操作者須按以下要求進(jìn)行檢查 :1.1.1 檢查稀釋液、清洗液、溶血素是否充足,有無(wú)過(guò)期 ; 試劑管

2、路是否彎折,連接 是否可靠。1.1.2 電源線(xiàn)是否正確連接。1.1.3 廢液桶是否清空。1.1.4 UPS 電是否足夠,打印紙安裝是否正確,是否足夠。1.1.5 確保鍵盤(pán)正確連接到鍵盤(pán)接口上。1.2.開(kāi)機(jī)1.2.1 翻開(kāi)分析儀后面的電源開(kāi) 關(guān),電源指示燈亮,屏幕上顯示Initializing 122 分析儀進(jìn)行初始化,整個(gè)初始化過(guò)程持續(xù)約4? 7 分鐘1.2.3 初始化過(guò)程結(jié)束后,系統(tǒng)自動(dòng)進(jìn)入“計(jì)數(shù)界面1.3 動(dòng)物類(lèi)型選擇1.3.1 按菜單鍵,移動(dòng)光標(biāo),選擇“動(dòng)物,按確認(rèn)進(jìn)入“動(dòng)物界面1.3.2 操作者根據(jù)測(cè)量的動(dòng)物類(lèi)型,選擇需要分析的動(dòng)物類(lèi)型。2.1.1 按菜單鍵,選擇“計(jì)數(shù) ,進(jìn)入“計(jì)數(shù)界

3、面。再按模式鍵,將當(dāng) 前模式設(shè)置為“全血模式2.1.2 確認(rèn)狀態(tài)指示區(qū)的計(jì)數(shù)狀態(tài)為“就緒,工作模式為“全血2.1.3 將準(zhǔn)備好的全血樣本放到采樣針下,使采樣針可以吸到樣本且針 頭與容器底保 持一定距離。2.1.4 按計(jì)數(shù)鍵,啟動(dòng)樣本分析過(guò)程。此時(shí),狀態(tài)指示區(qū)的計(jì)數(shù)狀態(tài)為 “運(yùn)行。2.1.5 采樣針自動(dòng)吸取 13ul 的樣本后蜂鳴器響,在采樣針抬起后,移開(kāi) 樣本。分析完成后,按F4 :鍵進(jìn)入“樣本信息編輯界面。按 F9:鍵進(jìn)入 漢字 狀態(tài)。在漢字狀態(tài)下,按F8 鍵在全拼和五筆輸入法之間進(jìn)行切換, 輸入樣本信息, 輸入完成后,點(diǎn)擊“確認(rèn) ,保存輸入的內(nèi)容并返回到 “計(jì)數(shù)界面2.1.7 按打印鍵打印

4、樣本分析報(bào)告。2.1.8 按照此操作過(guò)程進(jìn)行其余樣本的分析2.2 預(yù)稀釋樣本分析2.2.1 按菜單 鍵,選擇“計(jì)數(shù),進(jìn)入“計(jì)數(shù)界面。再按 模式 鍵, 將當(dāng)前模式設(shè)置為“預(yù)稀釋模式。按 稀釋 鍵,屏幕彈出“加稀釋液對(duì)話(huà)框,取一個(gè)干凈的樣本杯放在采樣針下,按計(jì)數(shù)鍵,微傾斜樣本杯 一定角度讓分析儀自動(dòng) 排出的 1.6ml 稀釋液沿管壁流入樣本杯中,防止 產(chǎn)生氣泡或?yàn)R出。2.2.2 加完稀釋液后,按 確認(rèn)鍵, “加稀釋液對(duì)話(huà)框關(guān)閉,分析儀自 動(dòng)清洗 采樣針。2.2.3 采集 20ul 血液迅速注入盛有稀釋液的樣本杯中混勻。2.2.4 確認(rèn)狀態(tài)指示區(qū)的計(jì)數(shù)狀態(tài)為“就緒,工作模式為“預(yù)稀釋 。2.2.5

5、將準(zhǔn)備好的預(yù)稀釋樣本放到采樣針下, 使采樣針可以吸到樣本且針 頭與容器底 保持一定距離。2.2.6 按計(jì)數(shù)鍵,啟動(dòng)樣本分析過(guò)程。此時(shí),狀態(tài)指示區(qū)的計(jì)數(shù)狀態(tài)為“運(yùn)行。2.2.7 采樣針自動(dòng)吸取 0.7ml 的樣本后蜂鳴器響,在采樣針抬起后,移開(kāi)樣本。2.2.8 分析完成后,按 F4 鍵進(jìn)入“樣本信息編輯界面。按 F9 鍵進(jìn)入 漢 字狀態(tài)。在漢字狀態(tài)下,按 F8 鍵在全拼和五筆輸入法之間進(jìn)行切換, 輸入樣本信 息 ,輸入完成后,點(diǎn)擊“確認(rèn) ,保存輸入的內(nèi)容并返回到 “計(jì)數(shù)界面。2.2.9 按 打印鍵打印樣本分析報(bào)告。2.2.10 按照此操作過(guò)程進(jìn)行其余樣本的分析。3、樣品分析結(jié)束后3.1 按菜單

6、鍵,彈出系統(tǒng)菜單,選擇“關(guān)機(jī)。3.2 界面彈出“關(guān)機(jī)對(duì)話(huà)框,點(diǎn)擊“確認(rèn)進(jìn)入關(guān)機(jī)界面。3.3 將 E-Z 清洗液放到采樣針下,按計(jì)數(shù)鍵,采樣針將自動(dòng)吸取 E-Z 清 洗液,執(zhí)行液路和計(jì)數(shù)池的清洗。3.4 按照界面提示信息,將 E-Z 清洗液放到采樣針下,按計(jì)數(shù)鍵,采樣 針將再次自 動(dòng)吸取 E-Z 清洗液,執(zhí)行液路和計(jì)數(shù)池的清洗。3.5 執(zhí)行完成后,界面提示“請(qǐng)關(guān)閉電源是,關(guān)閉分析儀的電源開(kāi)關(guān)。3.6 關(guān)閉電源后檢查分析儀是否有滲漏,并將血液分析儀的周邊環(huán)境打 掃干凈。 第二節(jié) 尿液分析儀使用規(guī)程本測(cè)試儀是一項(xiàng)精密儀器, 為了更好的維護(hù)和使用本儀器必須遵照以下 操作規(guī)程。一、操作步驟1. 尿液分析

7、儀的通訊電纜與電腦反面的通訊端口相連, 接通電源, 先打 開(kāi)電腦,再 翻開(kāi)分析儀;儀器啟動(dòng),風(fēng)扇轉(zhuǎn)動(dòng),推進(jìn)器移動(dòng),屏幕顯示“系統(tǒng)正在測(cè)試,此時(shí)系統(tǒng)正在自檢,顯示屏顯示主菜單,工作臺(tái)檢條區(qū)有紅色光交替閃爍,用戶(hù)可以開(kāi)始測(cè)試2. 點(diǎn)擊電腦桌面尿液分析軟件;觸;儀器;工作臺(tái);應(yīng)商聯(lián)系;進(jìn)器、工作不正確而導(dǎo)3. 將試紙條的試劑區(qū)完全浸入新鮮的、 充分混合的、 未離心的樣本中立 即取出,將 試紙條的側(cè)邊沿尿樣容器的管壁刮去多余尿液;4. 將蘸有尿液的試紙平放在工作臺(tái)的檢條區(qū), 確保試紙同工作臺(tái)前壁接5. 儀器檢測(cè)到試紙存在后,推進(jìn)器將試紙推到測(cè)試區(qū)進(jìn)行測(cè)試;6. 當(dāng)推進(jìn)器退回原位,放下一條試紙,這樣實(shí)現(xiàn)

8、連續(xù)測(cè)試;7. 當(dāng)工作臺(tái)上所有的試紙條測(cè)試完畢, 打印結(jié)果輸出結(jié)束后, 按菜單鍵進(jìn)入儀器設(shè)置,將電源開(kāi)關(guān)撥到斷0 位置,關(guān)閉儀器電源。二、儀器維護(hù)1. 不要在儀器通電狀態(tài)下清潔儀器;2. 不要用汽油、 油漆稀釋劑、 苯化合物等可能腐蝕儀器的有機(jī)溶劑擦拭3. 不要用水清洗液晶屏, 不要用任何會(huì)擦傷工作臺(tái)和白基準(zhǔn)的物質(zhì)擦拭4. 不要用任何溶劑清潔白基準(zhǔn), 如果白基準(zhǔn)有明顯劃痕或損壞, 請(qǐng)與供5. 用柔軟干布或沾有溫和去污劑的軟布擦拭儀器,保持儀器清潔;6. 用柔軟、無(wú)磨損的布擦拭液晶屏;7. 為使儀器正常運(yùn)行并提供準(zhǔn)確的測(cè)試結(jié)果, 必須定期從儀器中取下推 臺(tái)、步進(jìn)板、用清水沖洗,用軟布依次擦干保持

9、工作臺(tái)的清 潔。三、考前須知1. 測(cè)試時(shí)不要將儀器放置在陽(yáng)光直射的地方,以免影響測(cè)試精度;2. 請(qǐng)?jiān)跍y(cè)試前核對(duì)尿液分析試紙型號(hào), 防止因使用的尿液分析試紙型號(hào) 致測(cè)試結(jié)果錯(cuò)誤;3. 請(qǐng)勿使用過(guò)有效期或變質(zhì)的尿液分析試紙;4. 尿樣本中血的濃度高時(shí), 可影響測(cè)試的準(zhǔn)確性, 儀器能夠識(shí)別出高濃 度血尿并打 印出 “結(jié)果無(wú)效的提示;5. 必須在推進(jìn)器動(dòng)作前,將待測(cè)試紙條放好;6. 在放置試紙條時(shí)應(yīng)確保試紙條前端接觸工作臺(tái)前壁;7. 如果儀器測(cè)試頭下發(fā)生故障導(dǎo)致紙條運(yùn)行受阻。 關(guān)掉儀器, 拉出工作 臺(tái),取出受 阻試紙條后,重新安裝工作臺(tái)。開(kāi)機(jī)自檢后,對(duì)未得出結(jié)果的樣本重測(cè)。第三節(jié) 自動(dòng)凝血儀操作規(guī)程1

10、、儀器的常規(guī)操作1.1 翻開(kāi)電源開(kāi)關(guān)前的檢查。 檢查廢液瓶及洗液瓶。如果洗液瓶中洗液的液面過(guò)低, 請(qǐng)用蒸餾水或去 離子水將罐充滿(mǎn)。清空廢液瓶。管道連接 檢查各種管線(xiàn)的連接。確保沒(méi)有管子脫落或扭結(jié),電源線(xiàn)被 平安的插入交流 插座。 確保打印機(jī)中有足夠的紙張以供打印當(dāng)天所需處 理的所有樣本結(jié)果。 補(bǔ)充反響杯 丟棄用過(guò)的反響杯,參加適量的干凈的反響杯。1.2 翻開(kāi)電源開(kāi)機(jī)順序:打印機(jī) f 壓力單元 f 電源單元和主單元右側(cè)。 翻開(kāi)電源后,儀器自動(dòng) 進(jìn)入自檢。將病人樣本,質(zhì)控與試劑分別按要求準(zhǔn)備就緒,進(jìn)入分析過(guò)程:試劑準(zhǔn)備 f Set Reagent f 輸入確認(rèn)試劑體積 f 補(bǔ)充反響杯 f 安 放樣

11、本架1.3 樣本分析 :Work List f ID No.Entry f 輸入樣本號(hào) f ENTER f 選擇所需檢 測(cè)的工程 變?yōu)镺 ),確認(rèn)所有的設(shè)置結(jié)束后 f ENTER f 按屏幕右上方“ Start 鍵,執(zhí)行分析 分析完畢 ,儀器進(jìn)入準(zhǔn)備狀態(tài)。1.4 關(guān)機(jī)前的工作每日清潔所有樣本針和試劑針:在主菜單屏上按下【 Rinse probe 鍵。將出現(xiàn)清洗針屏。按下【 Excute 】鍵。1.5 關(guān)機(jī)關(guān)閉電源。2. 儀器保養(yǎng)2.1 每日保養(yǎng)清洗樣品針每次做完試驗(yàn)都必須清洗樣品針,主要是預(yù)防堵針,執(zhí)行Rinse Probef Excute清空垃圾箱2.2 清空廢液查看儀器后面防逆流瓶 Tra

12、p Chamber 有無(wú)水,防止因?yàn)橛兴鴮?dǎo)致真空 泵不能抽 真空在洗液瓶中注蒸餾水,最高不要超過(guò)上面的凹槽,防止因水過(guò)滿(mǎn),工作 時(shí)水回流到壓 力泵和壓力傳感器上導(dǎo)致人為破壞。2.3 每周保養(yǎng)做一次管路清潔,執(zhí)行 Special Operate fRinse&Prepare清潔儀器2.4 每半年保養(yǎng)清洗洗液瓶?jī)?nèi)部,清洗洗液瓶出水管上的過(guò)濾網(wǎng)一次2.5 每三或六個(gè)月保養(yǎng)清潔傳動(dòng)滑軌 X 軸、 Y 軸并上潤(rùn)滑油。防止因積塵而使樣品針運(yùn)行不 到位,向下扎錯(cuò)位置造成樣品針彎曲或斷裂 第四節(jié) 半自動(dòng)生化分析儀操作規(guī)程【操作規(guī)程】1. 開(kāi)機(jī)之前檢查電源線(xiàn)是否連接無(wú)誤, 電源要求接地良好 ;連接打印機(jī)電 源

13、線(xiàn),接 通打印機(jī)電源開(kāi)關(guān) ;將廢液管插入廢液容器內(nèi) ;接通顯示器開(kāi)關(guān) 及主機(jī)背部電源開(kāi)關(guān)。2?開(kāi)機(jī) f 自檢后 f 鍵入 Enter ,確定已設(shè)定測(cè)試參數(shù) f 鍵入 Enter ,進(jìn)入 編制工作表 -在設(shè)置欄,開(kāi)啟聯(lián)機(jī)打印一儀器預(yù)熱20分鐘后,調(diào)用已 設(shè)定測(cè)試工程進(jìn)行樣品測(cè)定f 打印結(jié)果 f 清洗儀器 f 關(guān)機(jī)。3. 吸液口由不銹鋼 保護(hù)管和鋼管內(nèi)聚四氟乙烯吸液管組成 , 應(yīng)注意保護(hù) , 不要碰彎。4. 切忌在帶電狀態(tài)下連接任何連接口。 【儀器的保養(yǎng)與維護(hù)】1. 日常保養(yǎng)工作主要是清洗流動(dòng)比色皿 , 每天工作結(jié)束后 ,要用蒸餾水 清洗。具體方法 如下:將吸液管插入蒸餾水中 ,向上扳動(dòng)吸液開(kāi)關(guān)

14、,反 復(fù)沖洗流動(dòng)比色皿 ,直到蒸餾水的吸光度值正常為止2. 每周要用專(zhuān)門(mén)的清洗劑清洗一次流動(dòng)比色皿 , 清洗時(shí), 讓清洗劑停留 在比色皿中約 半小時(shí),然后排掉 ,再用蒸餾水沖洗干凈 ,最后注入蒸餾 水。3. 不使用儀器時(shí) , 流動(dòng)比色皿內(nèi)一定要保證充滿(mǎn)蒸餾水。4. 更換打印機(jī)色帶時(shí) , 嚴(yán)格遵照打印機(jī)操作手冊(cè) , 防止不標(biāo)準(zhǔn)操作。5. 光源燈更換時(shí)一定要先切斷儀器的電源,手不可觸摸光源燈的玻璃部 分,萬(wàn)一光源燈的玻璃局部弄臟了,可用無(wú)水乙醇將污物除去。6. 更換的蠕動(dòng)泵管尺寸材料應(yīng)與原泵管一致,如不一致那么要重新調(diào)整吸 液量。 第五節(jié) 血常規(guī)檢驗(yàn)操作規(guī)程 【標(biāo)本】抗凝靜脈血有些儀器也可用末梢血

15、 。【方法】 血液細(xì)胞自動(dòng)分析儀測(cè)定法?!驹噭?血液細(xì)胞自動(dòng)分析儀配套試劑?!静僮鳌?詳見(jiàn)血液細(xì)胞自動(dòng)分析儀使用手冊(cè)?!靖阶ⅰ?. 血常規(guī)包括白細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類(lèi)、 紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、 血紅蛋白濃度、 細(xì)胞比積、 血小板計(jì)數(shù)等工程。這些工程亦有相應(yīng)的手工方法,詳見(jiàn)有 關(guān)資料。2. 半自動(dòng)及全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀從設(shè)計(jì)上均要求用抗凝靜脈血。 其優(yōu)點(diǎn)為:1靜脈血能正確地反映病人實(shí)際情況,重復(fù)性好;2利于延長(zhǎng)儀器的使用壽命;3解決了采血盤(pán)的交叉感染問(wèn)題等。3. 血細(xì)胞計(jì)數(shù)應(yīng)用 EDTA?K2 :為抗凝齊 EDTA?K2?2 H20 1.5 ? 2.2mg 可 抗凝 1ml 血。4. 貯血容器應(yīng)選用有蓋塑料管。

16、 抗凝血采集后在室溫中貯存應(yīng)不超過(guò) 6h ;如需制作血涂片應(yīng)在 2h 內(nèi)完成5. 測(cè)定前必須將 EDTA?K2 抗凝血充分混勻。6. 血細(xì)胞分析儀測(cè)定最適溫度為18? 22C,氐于15C或高于30C,均可使細(xì)胞體積發(fā)生改變,影響各參數(shù)的結(jié)果。7. 血細(xì)胞分析儀用于白細(xì)胞分類(lèi)只能當(dāng)作一種過(guò)篩手段, 當(dāng)白細(xì)胞、 紅 細(xì)胞、血紅 蛋白和血小板的任何一項(xiàng)有明顯升高或降低;白細(xì)胞分類(lèi)出現(xiàn)異常結(jié)果中間細(xì)胞群百分率?8.0% ;紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板的任何一個(gè)直方圖出現(xiàn)異常圖形等情況,須用 顯微鏡檢查及 分類(lèi)。第六節(jié) 尿常規(guī)檢驗(yàn)操作規(guī)程 【標(biāo)本】新鮮尿液?!痉椒ā?化學(xué)試帶法?!?試 齊 】 各型號(hào)尿液化學(xué)

17、分析儀配套試帶?!静僮鳌?詳見(jiàn)尿液化學(xué)分析儀使用手冊(cè)?!靖阶ⅰ?. 尿常規(guī)檢查使用尿液化學(xué)分析儀,目前能進(jìn)行8? 10項(xiàng)檢測(cè)PH、蛋白、葡萄糖、酮體、隱血、尿膽紅素、尿膽素原、亞硝酸鹽、比重、 白細(xì)胞。這 些工程亦有相應(yīng)的手工方法,詳見(jiàn)有關(guān)資料。2. 必須了解所用試帶各膜塊考前須知、藥物干擾。3. 要注意尿液化學(xué)分析儀測(cè)定結(jié)果與手工法的差異, 必要時(shí)用手工 法復(fù)查。4. 尿液化學(xué)分析儀檢測(cè)僅是一個(gè)過(guò)篩手段, 當(dāng)?shù)鞍住?隱血、白細(xì)胞 等出現(xiàn)異 常結(jié)果如尿蛋白“或以上時(shí),應(yīng)進(jìn)行鏡檢。5. 尿液顏色、透明度等一般性狀異常時(shí)也應(yīng)報(bào)告。第七節(jié)肝功能檢驗(yàn)操作規(guī)程血清總膽紅素 TBIL 和結(jié)合膽紅素 DBI

18、L 測(cè)定改進(jìn) JG 法 【試劑】參照書(shū)刊文獻(xiàn)如?全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程?第二版自配,配制標(biāo)準(zhǔn)液的膽紅素應(yīng)符合如下標(biāo)準(zhǔn),純膽紅素的氯仿溶液在25C當(dāng)光徑1.000 O.OOICm, 波長(zhǎng) 453nm 條件下其摩爾吸光系數(shù)應(yīng)在 60700 1600 范圍內(nèi),偶氮膽紅素的摩爾吸光系數(shù)應(yīng)在 74380 866 范圍內(nèi),配制標(biāo) 準(zhǔn)液的稀釋 劑須含白蛋白,可用牛血清白蛋白或人血清代替人血清白蛋 白。標(biāo)準(zhǔn)液應(yīng)貯於棕色瓶 中避光保存,在市售試劑中以含堿性酒石酸的 靈敏度特異性高?!静僮鳌堪丛噭┖姓f(shuō)明書(shū)或相應(yīng)書(shū)刊文獻(xiàn)規(guī)程手工操作,比色測(cè)定,波長(zhǎng)600nm ?制作準(zhǔn)曲線(xiàn)。血樣測(cè)定,從標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上求TBIL 及 DBI

19、L 的含量以 umo1/L 報(bào)告。也可按廠(chǎng)家提供的試劑及儀器使用的說(shuō)明書(shū)的要求將相應(yīng)的程序 及參數(shù)設(shè)入,用 自動(dòng)生化分析儀測(cè)定?!緲?biāo)本】血清,空腹血為宜,脂血、脂溶性色素及嚴(yán)重溶血干擾此測(cè)定,暫 不能測(cè)定的標(biāo)本應(yīng)避光保存,室溫可穩(wěn)定8h, 2? 8 C可保存48h。含疊氮鈉作防腐劑的質(zhì)控血清不宜用此法測(cè)定膽紅素。膽紅素氧化酶 BOD 法【試劑】市售成套試劑。BOD試劑復(fù)溶后28C可保存一周。【操作】 按廠(chǎng)家提供的試劑及儀器說(shuō)明書(shū)要求設(shè)置程序輸入?yún)?shù)用自動(dòng)生 化分 析儀測(cè)定。波長(zhǎng) 450 或 460nm ?!緲?biāo)本】 血清要求與改進(jìn) J 一 G 法相似。二甲亞楓 DMSO 法【試劑】 市售現(xiàn)成試劑

20、?!静僮鳌?按試劑盒說(shuō)明書(shū)手工操作比色測(cè)定或用自動(dòng)生化儀測(cè)定。波長(zhǎng) 560nm ?!緲?biāo)本】 血清、輕度脂血,溶血標(biāo)本對(duì)結(jié)果無(wú)明顯影響、重度脂血、溶血標(biāo) 本 須作標(biāo)本空白進(jìn)行較正。血氨測(cè)定【方法】 酶兩點(diǎn)法?!驹噭?市售成套試劑?!静僮鳌?按試劑及儀器使用說(shuō)明書(shū)要求,設(shè)入相應(yīng)的程序及各項(xiàng)參數(shù)、用自 動(dòng) 生化分析儀測(cè)定。波長(zhǎng) 340nm ?!緲?biāo)本】EDTA.Na2 抗凝血漿。靜脈采血后與 EDTA.Na2 混勻,立即置冰水 中盡快分 離出血漿,加塞置 2? 4C 保存,在 2? 3h 內(nèi)分析, -20C 可穩(wěn)定 24h 。溶血標(biāo)本忌 用。第八節(jié) 腎功能檢驗(yàn)操作規(guī)程尿素氮1. 檢測(cè)目的: 檢測(cè)血清

21、、血漿或尿液中尿素的含量,為臨床對(duì)相關(guān)疾病的診斷、觀(guān)察 疾病的變化及治療效果, 以及對(duì)健康人群正常生理指標(biāo)的監(jiān)測(cè)提供重要 的參考價(jià) 值。2. 標(biāo)本要求:2.1 病人準(zhǔn)備:空腹 12 小時(shí)。2.2 標(biāo)本類(lèi)型:血清、肝素化的血漿或 24 小時(shí)尿。3. 設(shè)備和試劑:3.1 儀器設(shè)備:邁瑞半自動(dòng)生化分析儀3.2 試劑材料:試劑3.3 試劑的貯存:3.3.1 2 ? 8 C 密閉避光貯存至標(biāo)簽所注失效期。3.3.2 開(kāi)蓋上機(jī) 2? 8C 避光穩(wěn)定 30 天。3.3.3 變質(zhì)指示:試劑混濁變色或空白吸光度值 0.050 時(shí),不能繼續(xù)使 用。4.4 注意:此試劑為體外診斷用, 禁止入口,吞下有害。 試劑含有

22、疊氮 化鈉,誤入眼、 口中或沾染到皮膚上請(qǐng)立即用清水徹底沖洗, 必要時(shí)到 醫(yī)院就診。疊氮化鈉可以和銅、 鉛等金屬反響形成爆炸性化合物,故廢 棄時(shí)請(qǐng)充分稀釋廢液和沖洗排水管。4.5 試劑準(zhǔn)備:即開(kāi)即用的,無(wú)需特殊準(zhǔn)備。5. 操作步驟: 見(jiàn)半自動(dòng)生化分析儀操作流程。6. 質(zhì)量控制:6.1 質(zhì)控物: RANDOX 多項(xiàng)人基質(zhì)血清6.2 質(zhì)控措施:6.2.1 室內(nèi)質(zhì)控:每日日常工作前進(jìn)行。6.2.2 室間質(zhì)控:參加臨床化學(xué)室間質(zhì)評(píng)。7. 干擾因素:直接膽紅素 w 257 卩 mol/L ,血紅蛋白 w 0.5g/L ,抗壞血酸 w 3mmol/L, 甘 油三酯w 15.0mmol/L, 肝素 w 50

23、KU/L ,枸櫞酸鈉 w 10g/L 對(duì)本法無(wú)干擾。8. 參考區(qū)間及可報(bào)區(qū)間:8.1 參考范圍:血清 /血漿 53.0 ? 123.0 卩 mol/L 男性44.0? 106.0 卩 mol/L 女性首次晨尿 1530? 15320 卩 mol/L24 小時(shí)尿 6.6? 15.0mmol/24h8.2 可報(bào)范圍: 0.0 ? 8840.0 卩 mol/L 。樣品 Crea 含量超過(guò)線(xiàn)性范圍應(yīng)用 生理鹽水稀釋重做,結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。9. 異常結(jié)果處理:結(jié)果異常、與臨床診斷不符,應(yīng)復(fù)查或與臨床聯(lián)絡(luò)。9. 危急值及處理方法:177 卩 mol/L 。及時(shí)與臨床聯(lián)絡(luò)。10. 實(shí)驗(yàn)室解釋?zhuān)涸龈撸簢?yán)重腎功

24、能不全、各種腎障礙、肢端肥大癥等。 降低:營(yíng)養(yǎng)不良、多尿等第九節(jié) 血脂檢驗(yàn)操作規(guī)程標(biāo)本采集與處理1 受檢者抽血前二周應(yīng)保持平衡的飲食習(xí)慣,近期體重穩(wěn)定無(wú)外 傷,手術(shù)等意外情況。并注意如有使用降糖、降脂、降壓、避孕藥, B -受體阻滯劑,免疫抑制劑,激素藥物等,那么應(yīng)根據(jù)所用藥物特性停藥數(shù)天或數(shù)周后再作血液脂類(lèi)檢測(cè)。2.空腹抽血, TG ,12 小時(shí)僅脂蛋白,載脂蛋白測(cè)定應(yīng)至少禁食 作膽固醇測(cè)定不必強(qiáng)求空腹 24 小時(shí)內(nèi)不作劇烈運(yùn)動(dòng)。 抽血前不要久站 立。至少應(yīng) 靜坐 5 分鐘。抽血時(shí)止血帶使用不可超過(guò) 1 分鐘。3標(biāo)本用血清,也可用肝素或 EDTA.Na2 抗凝之血漿。 EDTA.Na2 濃度

25、不宜太高4.血標(biāo)本室溫放置不得超過(guò) 3h,放置3045分鐘后應(yīng)即時(shí)別離出 血清漿蓋 封於4 C冰箱中可穩(wěn)定至少4天,如需長(zhǎng)期保存,應(yīng)於-70 C中冰凍存放,不可反復(fù) 凍融。血清總膽固醇 TC 測(cè)定酶法 CHODPAP 法【試劑】市售現(xiàn)成試劑?!静僮鳌堪丛噭┘皟x器使用說(shuō)明書(shū)要求設(shè)定程序, 輸入?yún)?shù)用自動(dòng)或半自動(dòng) 生化分析儀 測(cè)定速率法終點(diǎn)法可手工操作,用普通分光光度計(jì)比色 測(cè)定。波長(zhǎng) 500nm 或 520nm ?!緲?biāo)本】血清漿參看本節(jié)的標(biāo)本采集與處理?!靖阶ⅰ勘痉橹腥A醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)學(xué)會(huì)推薦的 TC 測(cè)定常規(guī)方法中華醫(yī)學(xué)檢 驗(yàn)雜志,1995 、 18 : 185 。膽固醇標(biāo)準(zhǔn)液以定值參考血清為宜,

26、而不宜用 Chol 的水溶液作標(biāo) 準(zhǔn)。 Chol 定 值質(zhì)控血清亦不應(yīng)用作標(biāo)準(zhǔn)液。主要技術(shù)指標(biāo):終點(diǎn)法批內(nèi) CV 1.5% 、批間 CV W 2.5% 。靈敏度: 顯色劑 用酚時(shí), TC5.2mmo1/L 200mg/dl 時(shí)的吸光度 A 500nm 約 0.300.35 , 故 A 500nm=0.005 時(shí) TC 濃度約為 0.08mmo1/L 3mg/dL 。測(cè) 定 范圍: 當(dāng) 血 清 與試劑 用 量之比為 1:100 時(shí) 其測(cè) 定 的 上界為 13mmo1/L 500ng/dL 。 血清甘油三酯 TG 測(cè)定酶法 GPOPAP 法試劑】市售現(xiàn)成試劑。有兩種一步酶法單一試劑,二步酶法雙試劑

27、。標(biāo)準(zhǔn)液參考物 一步酶法之用三油酸甘油酯水溶液, 也可用甘油, 但甘油不 適用於二步酶法?!静僮鳌堪丛噭┘皟x器使用說(shuō)明書(shū)要求設(shè)定程序和參數(shù), 用自動(dòng)或半自動(dòng)生 化分析儀測(cè) 定,終點(diǎn)法可用普通分光光度計(jì)手工操作,比色測(cè)定。波長(zhǎng) 500nm ?!緲?biāo)本】 血清漿參看本節(jié)標(biāo)本采集與處理?!靖阶ⅰ勘痉ㄔ诓僮鞒绦蛏戏譃橐徊矫阜ㄅc二步酶法, 二步酶法為中華醫(yī)學(xué) 檢驗(yàn)學(xué)會(huì)的 推薦方法中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志1995 、18:249?,F(xiàn)階段允許二法并存,要求逐步過(guò)渡到統(tǒng)一采用二步酶法, 在方法尚未統(tǒng)一前, 實(shí) 驗(yàn)室報(bào)告 TG 測(cè) 定結(jié)果時(shí)應(yīng)注明“除 FG 值或“未除 FG 值。主要枝術(shù)指標(biāo):酶試劑用緩沖液配制后,20?

28、 25C應(yīng)穩(wěn)定1天,4C可穩(wěn)定3? 7 天,試劑空白為 A500nm 0.2。 血清高密度脂蛋白膽固醇 HDL-C 測(cè)定磷鎢酸鎂沉淀法【試劑】 市售成套試劑,沉淀劑,酶試劑同 TG 測(cè)定?!静僮鳌堪丛噭┖姓f(shuō)明書(shū)操作。1 沉淀含 apoB 的脂蛋白。2測(cè)定上清液 只含 HDL 的膽固醇含量 方法同酶法 TC 測(cè)定。 【標(biāo)本】血清漿。硫酸葡聚糖一鎂沉淀法【試劑】市售成套試劑:總 HDL 試劑, HDL3 試劑,酶試劑同 TC 試劑?!静僮鳌堪丛噭┱f(shuō)明書(shū)操作:1沉淀含 apoB 的脂蛋白,總 HDL 試劑;2. 沉淀含 apoB 的脂蛋白及 HDL2 HDL3 試劑;3. 測(cè)定總HDL? C及HDL

29、3 ? C 同酶法TC測(cè)定,并計(jì)算出HDL2 ? C量。標(biāo)本】 血清漿血樣在室溫中不宜久放, 應(yīng)即時(shí)測(cè)定, 原那么應(yīng)低溫保存。 直接 HDLC 測(cè)定法【試劑】市售專(zhuān)門(mén)的試劑, 無(wú)沉淀劑。 酶試劑同 TC 測(cè)定。如日本第一化學(xué) 藥品株 式會(huì)社的產(chǎn)品 。【操作】 按試劑盒及儀器使用說(shuō)明書(shū)要求設(shè)置程序, 輸入?yún)?shù)直接用自動(dòng)或 半 自動(dòng)生化分析儀測(cè)定,無(wú)須沉淀離心別離出 HDL 步驟?!緲?biāo)本】血清漿。 血清低密度脂蛋白膽固醇 LDL-C 測(cè)定1 Friedwald 工式計(jì)算法:1LDL-C=TC HDL-C TG/5 以 mg/dl 為單位計(jì);2LDL-C=TC HDL-C TG/2.2 以 mmo1

30、/L 為單位計(jì) ;3只有當(dāng)血 TG v 4.52mmo/L 結(jié)果才較準(zhǔn)確;4只有 TC 、TG 、HDL-C 三項(xiàng)測(cè)定都準(zhǔn)確且符合標(biāo)準(zhǔn)化要求時(shí), 才可 計(jì)算出 LDL-C 的近似值。2聚乙烯硫酸沉淀法【試劑】 沉淀劑市售,酶試劑同 TC 測(cè)定?!静僮鳌? TC 測(cè)定。2 .選擇性沉淀血清中 LDL,測(cè)定上清液之 HDL - C與VLDL - C 之和的量, 同 TC 測(cè)定 。3. 計(jì)算出 LDL - C 的含量?!緲?biāo)本】血清。血清載脂蛋白 A1 apoAl 測(cè)定 免疫透射比濁法。波長(zhǎng) 340nm ,本法批間 CV V5%?!驹噭渴惺墼噭┖?,試劑 2? 8C 保存,不同批號(hào)試劑不能混合使用,抗

31、血 清效價(jià)不應(yīng) 低於 16 ?!静僮鳌堪丛噭┘皟x器使用說(shuō)明書(shū)要求, 設(shè)定程序和參數(shù)用自動(dòng)生化分析儀 測(cè)定,也可用特定蛋白分析儀作速率法散射比濁測(cè)定, 或用含 340nm 的 分光光度計(jì)手工操作 測(cè)定?!緲?biāo)本】血清。血清載脂蛋白 B ( apoB )測(cè)定免疫透射比濁法。波長(zhǎng) 340nm ,本法批間 CV V5%。【試劑】市售試劑, 28 C 保存,不同批號(hào)試劑不能混合使用,抗血清效價(jià) 不應(yīng)低於 1: 128?!静僮鳌繀⒖?apoA1 測(cè)定?!緲?biāo)本】血清。第十節(jié) 血液葡萄糖測(cè)定技術(shù)操作規(guī)程1. 檢測(cè)目的: 檢測(cè)血清或血漿中葡萄糖的含量,為臨床對(duì)相關(guān)疾病的診斷、觀(guān)察疾病 的變化及治療效果, 以及對(duì)健

32、康人群正常生理指標(biāo)的監(jiān)測(cè)提供重要的參 考價(jià)值。 3.標(biāo)本要求:3.1 病人準(zhǔn)備:空腹 12 小時(shí)。3.2 標(biāo)本類(lèi)型:血清或 NaF 抗凝的血漿。采血后及時(shí)別離,以防止血清 或血漿中葡 萄糖被細(xì)胞利用而降低。4. 設(shè)備和試劑:4.1 儀器設(shè)備:奧林巴斯 AU600 生化分析儀4.2 試劑材料:四川邁克公司試劑參與反響成份:只 1: 酚( 12.0mmol/L )R2: GOD ( 35KU/L ) 、POD ( 5KU/L ) 、4-AAP ( 1.20mmol/L )4.3 試劑的貯存 :4.3.1 2? 8 C 密閉避光貯存至標(biāo)簽所注失效期。4.3.2 開(kāi)蓋上機(jī) 2? 8C 避光穩(wěn)定 30

33、天。4.3.3 變質(zhì)指示 : 試劑混濁變色或空白吸光度值 0.150 時(shí),不能繼續(xù)使 4.4 注意:此 試劑為體外診斷用,禁止入口,吞下有害。試劑含有疊氮 化鈉,誤入眼、口中或沾染 到皮膚上請(qǐng)立即用清水徹底沖洗,必要時(shí)到 醫(yī)院就診。疊氮化鈉可以和銅、鉛等金屬 反響形成爆炸性化合物,故廢 棄時(shí)請(qǐng)充分稀釋廢液和沖洗排水管。4.5 試劑準(zhǔn)備:即開(kāi)即用的,無(wú)需特殊準(zhǔn)備。5 質(zhì)量控制:5.1 質(zhì)控物: RANDOX 多項(xiàng)人基質(zhì)血清5.2 質(zhì)控措施:5.2.1 室內(nèi)質(zhì)控:每日日常工作前進(jìn)行。5.2.2 室間質(zhì)控:參加北京臨床檢驗(yàn)中心臨床化學(xué)室間質(zhì)評(píng)。6.參考區(qū)間及可報(bào)區(qū)間:6.1 參考范圍:空腹3.89?

34、 6.11mmol/L餐后 1 小時(shí) 7.78? 8.89mmol/L餐后 2 小時(shí) 3.89? 7.78mmol/L6.2 可報(bào)范圍: 0.00? 22.30mmol/L 。樣品 GLU 含量超過(guò)線(xiàn)性范圍應(yīng)用生 理鹽水稀釋重做,結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)7.危急值及處理方法:10mmol/L 。及時(shí)與臨床聯(lián)絡(luò)。第十一節(jié) 凝血四項(xiàng)檢驗(yàn)操作規(guī)程 全血凝固時(shí)間檢驗(yàn) CT 【標(biāo)本】靜脈取血 3ml ?!?方法與操作 】 試管法、硅管法操作參見(jiàn)?全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程? 【附注】1. 靜脈取血要一針見(jiàn)血,盡量減少組織液和空氣混入。 第二版2. 水浴箱溫度要恒定,過(guò)高或過(guò)低,可影響結(jié)果。 活化局部凝 血活酶時(shí)間測(cè)定

35、 APTT 【標(biāo)本】自靜脈取血,用 109mmol/L 枸椽酸鈉作 1:9 抗凝。 【試劑】 市售成套試劑?!?方法與操作】 按試劑及有關(guān)儀器說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行?!靖阶ⅰ?. 標(biāo)本應(yīng)及時(shí)檢測(cè),最遲不超過(guò) 2h。2. 別離血漿應(yīng)在 3000r/min ,離心 10min 。3. 本試驗(yàn)較試管法全血凝血時(shí)間敏感, 能檢出因子?。?型血友病。 血漿凝血酶原時(shí)間測(cè)定 PT, 一期法【標(biāo)本】靜脈血 1.8ml ,用 109mmol/L 枸椽酸鈉 0.2ml 抗凝。【試劑】Cv 25%輕1. 組織凝血活酶浸出液;2. 0.025mol/L CaCl2 液;【 方法與操作 】 見(jiàn)?全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程? 第二版?!靖阶ⅰ?. 采血后宜在1h內(nèi)完成,置冰箱4C保存,不應(yīng)超過(guò)4h, -20C下 可放置2周,-70 C可放置6個(gè)月2. 水溫箱控制在37C 1 C,過(guò)高過(guò)低均影響結(jié)果。簡(jiǎn)易凝血活酶生成試驗(yàn) STGT 【標(biāo)本】取全血 0.

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