實驗四--斐林試劑法法測定還原糖含量_第1頁
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文檔簡介

1、實驗四斐林試劑法測定果品蔬菜中還原糖含量一、實驗目的：掌握園藝產(chǎn)品中糖的測定方法。二、實驗原理利用糖的還原性，與斐林試劑（氧化劑）中的二價銅離子還原為一價銅，進行氧化還原 反應，而進行測定。非還原糖必須轉(zhuǎn)化為還原糖，再進行測定。斐林試劑中酒石酸鉀鈉銅是一種氧化劑，反應的終點可用次甲基藍作指示劑，在堿性、沸 騰環(huán)境下還原呈無色。根據(jù)斐林試劑完全還原所需的還原糖量，計算出樣品還原糖量。三' 試劑與材料1、斐林試劑甲:69.3g CuSO 4.5H2O加水溶解并定容至1000ml ；乙：346g酒石酸鉀鈉+100gNaOH加水溶解并定容至1000ml ；2、1%次甲基藍，1g次甲基藍加水溶解

2、并定容至100ml,棕色瓶保存；3、0.2%標準葡萄糖，2g 105 C烘干到恒重的葡萄糖加水定容到1000ml ;4、堿式滴定管；5、電爐，各種玻璃器皿。四' 操作方法1、斐林試劑標定取甲液5ml加入5ml乙液中，置于250ml三角瓶中，加入水10ml ,從滴定管中加入0.2%的標準葡萄糖若干毫升（約23ml ） o （量控制在后滴定時消耗葡萄糖在電爐上加熱至沸，并保持微沸2分鐘，加2滴1%次甲基藍溶液，趁沸以每兩秒1滴的速度繼續(xù)滴加葡萄糖標準溶液，用0.2%標準葡萄糖滴定至藍色消失，有紅棕色沉淀，溶液清 亮為終點止。記錄耗用的葡萄糖量為Vo,必須在內(nèi)完成。（注意：還原的次甲基藍易被

3、空氣中的氧氧化，恢復成原來的藍色，所以滴定過程中必 須保持溶液成沸騰狀態(tài)，并且避免滴定時間過長。）2、樣品滴定預備試驗同上法取斐林試劑，加10ml樣品液，搖勻于電爐上加熱至沸，保持微沸2分鐘，加2滴 1%次甲基藍，用0.2%葡萄糖滴定至藍色消失。記錄耗用的葡萄糖量為W。3、樣品滴定同上法吸取斐林試劑加10ml樣品液（預先稀釋）,補加（Vo-V 1） ml水，并從滴定管 中預先加入（Vi-1） ml 0.2%葡萄糖，搖勻至電爐上加熱至沸，保持2min微沸，加入2滴 1%次甲基藍，繼續(xù)用葡萄糖滴定至藍色消失。記錄消耗的標準葡萄糖體積為V毫升。五' 結(jié)果計算還原糖含量（以葡萄糖計）（g/ml） Gvov） xQ.002 xi/io >n式中：Vo斐林試劑標定值，mlV樣品糖液測定值，ml0.002標準葡萄糖溶液濃度，g/mli0樣品糖液體積，mln樣品稀釋倍數(shù)六、思考題:1、還原糖測定方法有哪些？2、總結(jié)本實驗方法測定還原糖應注意哪些事項?學習課件

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