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文檔簡介
1、“觀察DNA和RNA在細胞中的分布”實驗分析(必修1P26)吡羅紅甲基綠實驗原理甲基綠和吡羅紅對DNA、RNA的親和力不同:DNA綠色;RNA紅色。利用甲基綠、吡羅紅混合染色劑將細胞染色,可以顯示DNA和RNA在細胞中的分布。程序操作步驟注意事項及原因取口腔上皮細胞制片在潔凈的載玻片上,滴一滴質量分數(shù)為0.9%的NaCl溶液載玻片要潔凈,防止污跡干擾觀察效果;保持細胞原有形態(tài)用消毒牙簽在自己漱凈的口腔內側壁上輕刮幾下,把牙簽上附有碎屑的一端,放在載玻片上的液滴中涂抹幾下消毒是為防止感染及其他微生物的影響;漱口避免取材失敗用酒精燈將載玻片烘干玻片烘干:要在酒精燈火焰上來回移動,防止載玻片受熱不均
2、破裂;烘干至細胞吸附即可水解將烘干的載玻片放入質量分數(shù)為8%的鹽酸溶液中,用30水浴保溫5 min改變細胞膜的通透性,加速染色劑進入細胞,促進染色體的DNA與蛋白質分離,利于DNA與染色劑結合沖洗涂片用蒸餾水的緩水流沖洗載玻片10 s蒸餾水:洗去殘留在外的鹽酸緩水流:防止細胞被水流沖走染色將吡羅紅甲基綠染色劑滴2滴于載玻片上,染色5 min吡羅紅甲基綠染色劑的配制需要蒸餾水且要現(xiàn)配現(xiàn)用觀察先低倍鏡觀察,選擇染色均勻、色澤淺的區(qū)域,移至視野中央,將物像調節(jié)清晰。然后換用高倍物鏡觀察先用低倍鏡找到要觀察的區(qū)域,再換用高倍鏡調節(jié)清晰觀察實驗現(xiàn)象及相關結論現(xiàn)象結論綠色明顯集中且接近細胞中央DNA主要分
3、布于細胞核中綠色周圍的紅色范圍較廣RNA廣泛分布于細胞質中幾種液體在實驗中的作用0.9%NaCl溶液:保持口腔上皮細胞正常形態(tài)。8%鹽酸:改變細胞膜等的通透性;使染色體中的DNA與蛋白質分開。蒸餾水:配制染色劑;沖洗載玻片。示例制作蛙血涂片,將血涂片浸在1 mol·L1的鹽酸水解液中30水解10 min,用清水將血涂片沖洗后,再用吡羅紅甲基綠染色劑在20下染色10 min,鏡檢觀察。在顯微鏡下會看到紅細胞中的_被染成綠色,原因是_;_被染成紅色,原因是_。通過該實驗能得出什么結論?_。用人的血液制作血涂片觀察紅細胞,能看到上述現(xiàn)象嗎?為什么?_。解析本題考查對觀察核酸分布的實驗原理的
4、理解。甲基綠可使DNA呈綠色,吡羅紅可使RNA呈紅色,因此有DNA和RNA分布的結構被吡羅紅甲基綠染色后會呈現(xiàn)相應的顏色。通過顏色反應可推知DNA主要分布于細胞核,RNA主要存在于細胞質。由于人成熟紅細胞沒有細胞核,也無RNA的合成,所以不能看到相應的顏色反應。答案細胞核甲基綠使細胞核中的DNA呈現(xiàn)綠色細胞質吡羅紅使細胞中的RNA呈現(xiàn)紅色真核細胞的DNA主要分布在細胞核中,RNA主要分布在細胞質中不能。因為人的成熟紅細胞中無細胞核使用高倍顯微鏡觀察幾種細胞(必修1P7)顯微鏡的成像原理光源反光鏡光圈物體物鏡鏡筒目鏡眼睛。視野光線的明暗可通過反光鏡、光圈來調節(jié),反光鏡又分為平面鏡和凹面鏡兩種,當
5、光線不足時可選用凹面鏡、較大的光圈,這樣反射光線較多,視野較為明亮。放大倍數(shù)=物鏡放大倍數(shù)×目鏡放大倍數(shù)。物鏡越長,放大倍數(shù)越大,距裝片距離越近;目鏡越長,放大倍數(shù)越小。顯微鏡的放大倍數(shù)是指物像長度或寬度的放大倍數(shù),而不是面積或體積的放大倍數(shù)。顯微鏡的成像特點顯微鏡下所成的像是倒立的放大的虛像,倒立是指上下、左右均是顛倒的,相當于將觀察物水平旋轉180度。要移動物像時,物像偏向哪個方向,應向哪個方向移動裝片。1. 顯微鏡的使用原則先降后升:先調節(jié)粗準焦螺旋使鏡筒下降,兩眼要注視物鏡與玻片之間的距離,到快接近時(距離約為0.5 cm)停止下降,再緩慢上升鏡筒觀察尋找目標。先低后高:首先
6、用低倍鏡觀察,找到要放大觀察的物像,移到視野中央,然后換上高倍物鏡觀察。先粗后細:在低倍鏡下先調節(jié)粗準焦螺旋,換上高倍物鏡后,不能再轉動粗準焦螺旋,而只能用細準焦螺旋來調節(jié)。2. 高倍鏡與低倍鏡的比較物像大小看到細胞數(shù)目視野亮度物鏡與載玻片的距離視野范圍高倍鏡大少暗近小低倍鏡小多亮遠大3. 判斷污物存在的位置移動裝片污物移動在裝片上污物移動污物不動在目鏡上在物鏡上污物不動轉動目鏡污物可能存在的位置:物鏡、目鏡或裝片判斷方法如下:示例某學生用顯微鏡觀察人的口腔上皮細胞裝片,據(jù)表回答問題:項目目鏡物鏡A組5×10×B組15×10×C組8×40
7、15;視野中細胞數(shù)目最多的是_組;同樣光源下,光線最暗的是_組,細胞圖像最大的是_組。高倍鏡下,如果視野較暗,物像又模糊不清,這時應轉動或調節(jié)的結構是_、_和_。用A組顯微鏡觀察,在視野內的直徑上看到一行相連的9個細胞,若用B組顯微鏡觀察,則大約可以看到這行細胞中的_個。某同學在實驗時,先用一塊潔凈紗布擦拭鏡頭,然后把裝片放在顯微鏡載物臺正中央,并用壓片夾壓住。然后在雙眼側視下,將物鏡降至接近玻片標本12 cm時停止。用左眼朝目鏡里觀察,同時轉動粗準焦螺旋,緩緩上升鏡筒。請指出該同學操作中不正確的地方并改正。_。解析顯微鏡的放大倍數(shù)=物鏡放大倍數(shù)×目鏡放大倍數(shù)。由此可知,A組放大倍數(shù)
8、最小,C組放大倍數(shù)最大。放大倍數(shù)越大,視野中的細胞數(shù)目越少,每個細胞的圖像越大;反之,放大倍數(shù)越小,視野中的細胞數(shù)目越多,每個細胞的圖像越小。調視野亮度可調節(jié)反光鏡(凹面鏡亮,平面鏡暗)、光圈(大光圈亮,小光圈暗),調亮可選擇凹面鏡或大光圈,高倍鏡下將物像調清晰可調節(jié)細準焦螺旋。顯微鏡的放大倍數(shù)與看到的細胞數(shù)目成反比。假設用B組顯微鏡觀察可看到的細胞數(shù)為X,則根據(jù)題意可知,(5×10):(15×10)=X:9,解得X=3。用一塊潔凈紗布擦拭鏡頭是錯誤的,顯微鏡要用專門的擦鏡紙擦拭鏡頭,在調節(jié)顯微鏡時要將物鏡降至接近玻片標本時(距離約為0.5 cm)停止,而不是接近玻片標本1
9、2 cm時停止。答案ACC反光鏡光圈細準焦螺旋3“潔凈紗布擦拭鏡頭”改為用“專門的擦鏡紙擦拭鏡頭”;“將物鏡降至接近玻片標本12 cm時停止”改為“將物鏡降至接近玻片標本時(距離約為0.5 cm)停止”用高倍鏡觀察葉綠體和線粒體(必修1P47)1. 實驗材料觀察葉綠體時常選用新鮮的蘚類的葉(或菠菜葉、黑藻葉等)。取這些材料的原因是:葉子薄而小,葉綠體含量較多,可取整個小葉直接制片。若用菠菜葉作實驗材料,要取菠菜葉稍帶些葉肉的下表皮,因為表皮細胞不含葉綠體。觀察線粒體,一般選用人的口腔上皮細胞作實驗材料。2. 染色劑觀察葉綠體時,由于葉綠體本身含有色素,呈綠色,所以不需要染色。觀察線粒體時,用健
10、那綠染液染色,健那綠是專一性用于線粒體染色的活細胞染料,能將線粒體染成藍綠色。3. 實驗過程實驗材料要保證鮮活:觀察線粒體和葉綠體,主要是觀察它們在生活狀態(tài)下的形態(tài)和分布,因而必須保證觀察材料的活性臨時裝片應隨時保持有水狀態(tài),就是為了避免細胞活性受影響。要漱凈口腔,防止口腔食物殘渣對觀察物像的干攏;牙簽要消毒,防止感染及牙簽上其他微生物對本實驗的影響。示例下列關于用高倍顯微鏡觀察生活狀態(tài)下的線粒體和葉綠體實驗的敘述,錯誤的是()A. 用健那綠染液染線粒體,葉綠體則不用染色B. 高倍鏡下看到的葉綠體呈綠色扁平的橢球形或球形C. 觀察生活狀態(tài)下的線粒體和葉綠體的材料都是菠菜葉D. 觀察臨時裝片時,
11、都要先用低倍鏡后用高倍鏡解析健那綠染液是專一性染線粒體的活細胞染料,可以使活細胞中的線粒體呈現(xiàn)藍綠色,而細胞質接近無色;葉綠體中有葉綠素等色素,呈現(xiàn)綠色,所以不用染色。在高倍鏡下看到的葉綠體呈綠色扁平的橢球形或球形。菠菜葉可用于觀察葉綠體而不能用于觀察線粒體,因為葉綠體的綠色會掩蓋健那綠的染色效果,影響實驗觀察。觀察線粒體,一般用人的口腔上皮細胞作材料。顯微觀察的順序是先用低倍鏡后用高倍鏡。答案C驗證植物細胞的吸水和失水(必修1P61)原理發(fā)生條件具有半透膜膜兩側溶液具有濃度差動物細胞細胞膜相當于半透膜細胞內溶液與細胞外溶液構成濃度差植物細胞原生質層相當于半透膜細胞液與外界溶液構成濃度差驗證項
12、目細胞失水細胞吸水植物細胞動物細胞植物細胞動物細胞條件外界溶液濃度高于細胞液濃度外界溶液濃度高于細胞質濃度外界溶液濃度低于細胞液濃度外界溶液濃度低于細胞質濃度現(xiàn)象質壁分離皺縮質壁分離后復原膨脹甚至漲破結論細胞的吸水和失水是水分子順相對含量梯度跨膜運輸?shù)倪^程實驗步驟制作洋蔥鱗片葉表皮臨時裝片有一個紫色的中央大液泡原生質層緊貼細胞壁中央液泡逐漸變?。ㄗ仙由睿┰|層與細胞壁逐漸分離中央液泡逐漸脹大原生質層逐漸貼近細胞壁高倍顯微鏡觀察0.3 g/mL蔗糖溶液吸水紙吸引高倍顯微鏡觀察吸水紙吸引清水高倍顯微鏡觀察成熟植物細胞能與外界溶液發(fā)生滲透作用結論當外界溶液濃度大于細胞液濃度時,細胞失水當外界溶液
13、濃度小于細胞液濃度時,細胞吸水選材材料必須是植物成熟的活細胞,因為只有活細胞的原生質層才具有選擇透過性,否則,不會出現(xiàn)質壁分離現(xiàn)象,其次,最好液泡具有顏色,如紫色洋蔥外表皮細胞。試劑的選擇一般選用質量濃度為0.3 g/mL的蔗糖溶液,因為試劑濃度影響細胞發(fā)生質壁分離的速度,試劑濃度越高發(fā)生質壁分離的速度越快,過高時細胞因過度失水而死亡。在該溶液中細胞發(fā)生質壁分離和復原的速度較慢,便于觀察變化過程。常用的試劑還有質量分數(shù)為5%的食鹽溶液,但該溶液使細胞質壁分離速度較快。如果選用質量分數(shù)為7%的尿素、0.1 g/mL的硝酸鉀或甘油,細胞發(fā)生質壁分離后,會自動復原,原因是這些物質中的溶質也能透過細胞
14、膜被細胞選擇吸收,使細胞液濃度再增大,一段時間后,細胞又吸水,質壁分離自動復原。觀察時間在實驗中,當質壁分離出現(xiàn)后,觀察時間不宜過長,因為細胞長時間處于失水狀態(tài)會因過度失水而死亡,影響質壁分離復原現(xiàn)象的觀察。細胞是否發(fā)生質壁分離及其復原的判斷從細胞角度分析死細胞、動物細胞及未成熟的植物細胞不發(fā)生質壁分離現(xiàn)象。具有中央大液泡的成熟植物細胞可發(fā)生質壁分離現(xiàn)象。鹽酸、酒精、醋酸等溶液能殺死細胞,不適于用做質壁分離的外界溶液。從溶液角度分析在一定濃度(溶質不能透膜)的溶液中可發(fā)生質壁分離現(xiàn)象。在一定濃度(溶質可透膜)的溶液中可發(fā)生質壁分離后自動復原。如甘油、尿素、乙二醇、KNO3等。在高濃度溶液中可發(fā)
15、生質壁分離現(xiàn)象,但不會發(fā)生質壁分離復原現(xiàn)象。質壁分離實驗的拓展應用發(fā)生質壁分離和復原活細胞不發(fā)生質壁分離死細胞判斷細胞的死活待測細胞+蔗糖溶液測定細胞液濃度范圍待測細胞+一系列濃度梯度的蔗糖溶液細胞液濃度范圍等于未發(fā)生質壁分離和剛剛發(fā)生質壁分離的外界溶液的濃度范圍。比較不同植物細胞的細胞液濃度不同植物細胞+同一濃度的蔗糖溶液剛發(fā)生質壁分離時所需時間比較判斷質壁分離速度(或細胞液濃度)。比較未知溶液的濃度大小同一植物的成熟細胞+未知濃度的溶液剛剛發(fā)生質壁分離所需時間比較所用時間長短判斷溶液濃度的大?。〞r間越短,未知溶液的濃度越大)。驗證原生質層和細胞壁伸縮性大小成熟植物細胞+蔗糖溶液發(fā)生質壁分離
16、現(xiàn)象細胞壁伸縮性小于原生質層伸縮性。鑒別不同種類的溶液(如KNO3和蔗糖溶液)只發(fā)生質壁分離溶質不能通過半透膜的溶液(如蔗糖)質壁分離后又自動復原溶質能通過半透膜的溶液(如KNO3)成熟植物細胞+不同種類溶液示例用質壁分離方法測定洋蔥鱗片葉外表皮細胞細胞液濃度的實驗中,把剪成小塊的紫色洋蔥鱗片葉外表皮分別(等量)依次放入下面各組溶液中,并記錄結果如下表:培養(yǎng)皿123456蔗糖溶液(mol/L)0.20.3.40.50.60.7開始發(fā)生質壁分離細胞的百分比0015408099請回答:實驗時為什么選紫色的洋蔥鱗片葉外表皮作實驗材料?_。植物細胞發(fā)生質壁分離時,細胞壁不能與原生質層一起收縮的原因是_
17、。由表中數(shù)值可確定該洋蔥表皮細胞液的濃度大約是_。在此實驗的基礎上,怎樣設計一個更精確的測定方法?_。如果不用蔗糖溶液,而改用KNO3溶液進行測定,結果會相同嗎?為什么?_。解析洋蔥鱗片葉外表皮細胞液為紫色,便于觀察實驗現(xiàn)象。由于細胞壁的伸縮性小于原生質層,因此細胞壁與原生質層不一起收縮。細胞液濃度介于未發(fā)生質壁分離和剛發(fā)生質壁分離的外界溶液濃度之間。欲進一步確定細胞液濃度,應在0.3 mol/L0.4 mol/L之間配制一系列濃度梯度更小的蔗糖溶液。KNO3中K+和NO可進入細胞,因此植物細胞會發(fā)生先質壁分離后自動復原現(xiàn)象。答案細胞液為紫色,易于觀察細胞壁的伸縮性小于原生質層0.3 mol/
18、L0.4 mol/L在0.3 mol/L0.4 mol/L之間配制濃度梯度更小的蔗糖溶液不會,因為KNO3溶液中的K+和NO能通過半透膜,會發(fā)生質壁分離后的自動復原現(xiàn)象觀察根尖分生組織細胞的有絲分裂(必修1P115)1. 細胞有絲分裂的觀察原理與依據(jù)龍膽紫溶液或醋酸洋紅液可將染色體染成深色。鹽酸和酒精混合液使組織中的細胞相互分離。顯微鏡可觀察細胞有絲分裂過程中各時期圖像。2. 實驗材料的選擇細胞種類不同,一個細胞周期持續(xù)的時間也不同,在觀察有絲分裂時,應選取分裂期相對較長的材料,這樣比較容易觀察到處于不同分裂期的細胞圖像。實驗步驟觀察裝片制作洋蔥根尖培養(yǎng):課前34 d,將洋蔥放在盛滿清水的廣口
19、瓶中,讓底部接觸水,放置溫暖處,待根長至5 cm時取用取材:剪取根尖23 mm(注意取材時間)解離液:質量分數(shù)為15%的HCl溶液和體積分數(shù)為95%的酒精按1:1的體積比混合解離解離時間:35 min解離目的:使組織中的細胞相互分離開解離程序:根尖酥軟漂洗液:清水漂洗漂洗時間:10 min漂洗目的:洗去組織中的解離液,有利于染色染液:0.01 g/mL或0.02 g/mL的龍膽紫(或醋酸洋紅染液)染色染色時間:35 min染色目的:使染色體(質)著色制片:用鑷子將(以上處理過的)根尖放在載玻片中央水滴中,用鑷子弄碎,蓋上蓋玻片,再在其上面加一載玻片用拇指輕壓,使細胞分散開低倍鏡觀察:找到根尖分
20、生區(qū)高倍鏡觀察:首先觀察并辨別出分裂中期的細胞,再移動裝片尋找各分裂期的細胞,觀察其特點繪圖:繪出植物細胞有絲分裂中期圖注意事項1. 取材和解離取材應剪取生長旺盛、帶有分生區(qū)的根尖,同時注意取材時間,一般在上午10時至下午2時剪取,此時洋蔥根尖細胞分裂最活躍。解離一定要充分,至根尖酥軟為止。但解離時間不宜過長,否則會使根尖過分酬謝軟,無法漂洗和染色,且染色體成分被破壞。2. 漂洗與染色漂洗的目的是洗去根尖組織中的鹽酸,有利于染色時堿性染料著色。染色用的龍膽紫溶液濃度不宜過大,染色時間不宜過長,否則會使染色體和周圍結構均被著色。3. 壓片壓片時用力必須適當,過重過猛可能將組織壓爛、壓碎玻片等;過
21、輕時,細胞未充分分散而相互重疊,二者都影響觀察。壓片時最好在蓋玻片上放一張吸水紙,然后再在上面加一塊載玻片,再用拇指垂直向下壓,這樣可以防止上面的載玻片和蓋玻片粘在一起,避免根尖細胞各區(qū)位置錯動。示例在“觀察根尖分生組織細胞的有絲分裂”實驗中,以下操作和結論正確的是()A. 剪取5 cm根尖,用酒精和吡羅紅混合液解離染色B. 右圖是高倍顯微鏡下調節(jié)細準焦螺旋看到的視野C. 持續(xù)觀察,視野中的K細胞將分裂成兩個子細胞D. 視野中,N細胞的染色體數(shù)目是M細胞的一半解析本題考查教材基礎實驗的操作和注意事項,意在考查識圖分析能力。在“觀察根尖分生組織細胞的有絲分裂”實驗中,應剪取根尖23 mm,然后用
22、鹽酸和酒精混合液解離,漂洗后再用龍膽紫溶液或醋酸洋紅溶液染色;從圖中可清晰觀察到染色體的形態(tài)特點,故是高倍顯微鏡下調節(jié)細準焦螺旋看到的視野;因解離時解離液中的鹽酸已經把細胞殺死了,細胞不能再分裂,故持續(xù)觀察K細胞,其形態(tài)不再變化;M細胞的染色體排列在赤道板上,為中期細胞,N細胞為有絲分裂后期細胞,N細胞的染色體數(shù)目是M細胞的2倍。答案B觀察細胞的減數(shù)分裂(必修1P21)1. 實驗材料的選擇一般來說,雌性個體產生的精子數(shù)量遠遠多于雌性個體產生的卵子數(shù)量,因此在選擇觀察減數(shù)分裂的材料時,最好選擇雄性個體的生殖器官,如動物精巢、植物花藥。在動物卵巢內的減數(shù)分裂沒有進行徹底,排卵時僅僅是次級卵母細胞,
23、只有和精子相遇后,在精子的刺激下,才繼續(xù)完成減分裂,所以要完整觀察減數(shù)分裂各時期的圖像,特別是減分裂圖像,一般不選擇雌性動物的生殖器官。2. 細胞減數(shù)分裂的觀察步驟在低倍鏡下觀察蝗蟲精母細胞減數(shù)分裂固定裝片,識別初級精母細胞、次級精母細胞和精細胞先在低倍鏡下依次找到減數(shù)第一次分裂中期、后期和減數(shù)第二次分裂中期、后期的細胞,再在高倍鏡下仔細觀察染色體的形態(tài)、位置和數(shù)目根據(jù)觀察結果,盡可能多地繪制減數(shù)分裂不同時期的細胞簡圖低倍鏡高倍鏡觀察繪圖示例小鼠常被用作研究人類遺傳病的模式動物。請?zhí)畛溆^察小鼠細胞減數(shù)分裂的實驗步驟。供選材料及試劑:小鼠的腎臟、睪丸、肝臟,蘇丹染液,醋酸洋紅染液、詹納斯綠B(健
24、那綠)染液,解離固定液。取材:用_作實驗材料。制片:取少量組織低滲處理后,放在_溶液中,一定時間后輕輕漂洗。將漂洗后的組織放在載玻片上,滴加適量_。一定時間后加蓋玻片,_。觀察:用顯微鏡觀察時,發(fā)現(xiàn)幾種不同特征的分裂中期細胞。若它們正常分裂,產生的子細胞是_。上圖是觀察到的同源染色體(A1和A2)的配對情況。若A1正常,A2發(fā)生的改變可能是_。解析解答此題要首先對課本上關于有絲分裂實驗中的系列步驟要熟知,取材解離漂洗染色制片觀察。然后將知識遷移到減數(shù)分裂實驗觀察中。A1和A2是配對的同源染色體,由于A1正常,A2比A1少同一源區(qū)段,因此是發(fā)生染色體結構變異的缺失所致。答案(小鼠)睪丸解離固定液
25、醋酸洋紅染液壓片(只要有壓片的操作即可)次級精母細胞、精細胞、精原細胞缺失葉綠體中色素的提取和分離(必修1P97)原理各種色素能溶解在有機溶劑(丙酮等)中形成溶液,使色素從生物組織中脫離出來。各種色素都能溶解在層析液中,但在層析液中的溶解度不同:溶解度大的色素分子隨層析液在濾紙上擴散得快,反之則慢,所以不同色素可以在濾紙上因擴散而分開,各種色素分子在濾紙上可形成不同的色素帶。剪碎,加少許SiO2和CaCO3加5 mL丙酮實驗流程圖示提取綠葉中稱取5 g綠色葉片迅速、充分研磨的色素:色素濾液(小試管收集)棉塞封口制備濾紙條:取干燥處理過的定性濾紙,將濾紙剪成長6 cm、寬1 cm的濾紙條,并在一
26、端剪去兩角,在距這一端1 cm處用鉛筆畫一條細的橫線用毛細吸管吸取濾液畫線畫濾液細線干燥后,重復畫23次胡蘿卡素:橙黃色葉黃素:黃色葉綠素a:藍綠色葉綠素b:黃綠色分離色素:將適量的層析液倒入燒杯中,將濾紙條(有濾液細線的一端朝下)略微斜靠著燒杯內壁,輕輕地插入到層析液中,用培養(yǎng)皿蓋蓋上。注意:不能讓濾紙條上的濾液細線觸到層析液觀察結果:濾紙條上色素帶有四條,分別是(由上到下)橙黃色的胡蘿卜素、黃色的葉黃素、藍綠色的葉綠素a、黃綠色的葉綠素b。如圖所示。注意事項1. 操作要點提取:葉片要新鮮,顏色要深綠。研磨要迅速、充分。濾液收集后,要及時用棉塞將試管口塞緊,以免濾液揮發(fā)。分離:濾液細線不僅細
27、、直,而且含有比較多的色素(可以畫二三次且要待干過以后再畫下一次)。濾紙上的濾液細線不能浸入層析液。2. 其他注意事項制備定性濾紙條時,盡量注意雙手不要接觸紙面,以免手上的油脂或其他臟物污染濾紙。根據(jù)燒杯的高度制備濾紙條,讓濾紙條長度高出燒杯1 cm,高出的部分做直角彎折。畫濾液細線時,用力要均勻,速度要適中,色素線以3 mm寬效果最佳。剪葉片時要剪得細碎些。制得的色素提取液,應加蓋避光,以免葉綠體中的色素在接觸空氣或光照下遭到破壞。示例請回答下列有關“綠葉中色素的提取和分離”實驗的問題:甲同學利用新鮮的玉米綠色葉片進行實驗,在濾紙上出現(xiàn)了四條清晰的色素帶,其中呈黃綠色的色素帶為_。該同學改變
28、層析液組成后繼續(xù)進行實驗,濾紙條上只出現(xiàn)了黃、綠兩條色素帶。他用刀片裁出帶有色素帶的濾紙條,用乙醚分別溶解條帶上的色素,濃縮后用一分析儀器檢測,通過分析色素溶液的_來判斷條帶的色素種類。乙同學在實驗過程中將畫有濾液細線的濾紙條(已重復幾次畫線)插入層析液,幾分鐘后取出觀察,發(fā)現(xiàn)濾紙條上無色素分帶現(xiàn)象,而用同一濾液做實驗的丙同學的濾紙條上卻色素分帶明顯。乙同學實驗失敗的原因可能是_。若選用在缺Mg的營養(yǎng)液中長期培養(yǎng)的玉米葉片作實驗材料,層析后濾紙條上只出現(xiàn)了兩條色素帶,其原因是_。實驗結束幾天后,乙、丙兩同學發(fā)現(xiàn)部分預留葉片已變黃。乙同學認為這是由于葉片中某些色素降解所造成的,丙同學則認為是某些
29、色素含量增加所致。根據(jù)所學知識,你將如何設計實驗來判斷兩個同學的觀點是否正確?解析在“綠葉中色素的提取和分離”實驗中,最后濾紙條上出現(xiàn)的四條色素帶從上到下分別是:胡蘿卜素、葉黃素、葉綠素a、葉綠素b,顏色分別是橙黃色、黃色、藍綠色、黃綠色,因此呈黃綠色的色素帶為葉綠素b。由于不同色素對不同波長的光吸收情況是不同的,因此,分析不同色素種類時可以根據(jù)色素的吸收光譜來分析。乙同學濾紙條上無色素帶,說明濾液細線中的色素溶解到層析液中,即層析液沒及濾液細線。Mg是合成葉綠素的必需元素,缺Mg不能合成葉綠素a和葉綠素b。通過設計對照實驗來探究發(fā)黃的葉片中某些色素是否因降解而減少,某些色素是否含量增加。對照
30、組選取正常未發(fā)黃的葉片,實驗組選取已變黃的葉片,通過提取分離這兩種葉片中的色素,比較各種色素的含量,得出結論。答案葉綠素b吸收光譜層析液觸及濾液細線,色素溶解于層析液中缺Mg植物不能合成葉綠素從預留的葉片中挑選出足量的、份量相等、大小相近的已變黃的葉片和綠色鮮嫩的葉片為實驗材料,在相同條件下,再次進行綠葉中色素的提取和分離實驗,預測和記錄實驗結果,比較這兩種葉片中各種色素的組成及含量后,得出結論。溫度對酶活性影響的實驗(必修1P83)實驗原理淀粉具有遇碘變藍的特性,這是由淀粉本身的結構特點決定的。淀粉是白色無定形的粉末,由10%30%的直鏈淀粉和70%90%的支鏈淀粉組成。溶于水的直鏈淀粉借助
31、分子內的氫鍵卷曲成螺旋狀。如果加入碘酒,碘酒中的碘分子便嵌入到螺旋結構的空隙處,并且借助范德華力與直鏈淀粉聯(lián)系在一起,形成了一種絡合物。這種絡合物能夠比較均勻地吸收除了藍光以外的其他可見光(波長范圍為400750 nm),從而使淀粉溶液呈現(xiàn)出藍色來。淀粉酶可使淀粉水解成麥芽糖,麥芽糖遇碘不變藍。方法步驟及現(xiàn)象分析取試管,分組編號:取6支試管平均分為兩組,并且分別編號為A、B、C和A、B、C,如圖所示:加入淀粉和淀粉酶:在A、B、C三支試管中各注入2 mL淀粉溶液,在A、B、C三支試管中各注入1 mL新鮮淀粉酶,如上圖所示控制溫度:分別將A和A,B和B,C和C放入熱水(約60)、沸水和冰水中,維
32、持各自溫度5 min混合:將A中溶液注入A中,B中溶液注入B中,C中溶液注入C中,搖勻再維持各自溫度5 min加碘液:分別向A、B、C三支試管中加入12滴碘液A. 不出現(xiàn)藍色觀察現(xiàn)象B. 溶液變藍色C. 溶液變藍色結論:溫度過高或過低都會影響酶的活性注意事項明確實驗目的:即搞清楚實驗要探究什么問題,本實驗的目的是探究溫度對酶活性的影響。把握實驗原則:根據(jù)目的,分析變量,控制好變量之外的無關變量,遵循單一變量原則和對照原則。本實驗的變量是溫度,在設置沸水、冰水和熱水(約60)三個不同溫度的變量條件時,其他量,如時間、各試劑的等量都應該是相同的。實驗時間的控制:在不同的溫度條件下的實驗過程控制的時
33、間都應該為5 min,以保證新鮮淀粉酶對淀粉發(fā)揮催化作用必需的時間。用碘液不用斐林試劑是因為斐林試劑檢測還原糖出現(xiàn)時,需進行水浴加熱,這樣在低溫條件下的實驗組酶會表現(xiàn)出活性,將淀粉分解,影響實驗結果的準確性。變量的種類變量是實驗設計中可以變化的因素或條件,依據(jù)變量間的相互關系,可分為以下兩類:自變量與因變量:自變量是實驗中由實驗者所操縱的因素,該因素的改變將引起實驗結果的相應改變,是實驗要研究的因素。它們之間是因果關系,自變量是原因,因變量是結果。無關變量與額外變量:無關變量是指實驗中除自變量外也能影響實驗現(xiàn)象或結果的其他因素。由無關變量引起的實驗結果就是額外變量。它們之間也是因果關系。自變量
34、的確定和控制根據(jù)實驗目的,確定實驗變量,進而確定控制的措施。例如:“探究淀粉酶的最適溫度”的實驗。變量的確定自變量是相同的酶處在不同溫度下即溫度梯度,即要“探究什么”,則“什么”就是自變量。自變量的控制在確定了自變量是溫度梯度后,應將淀粉酶置于溫度梯度控制變量的方法,常用的有“施加”“改變”“去除”等。無關變量的確定與控制例如:請指出探究pH對唾液淀粉酶活性的影響實驗中的無關變量是什么。應如何控制?分析:在該實驗中,自變量是“pH的大小”。無關變量有溫度、唾液淀粉酶的量、淀粉溶液的量、反應時間、加入碘液的量及時間等,在做實驗時,對照組和實驗組的以上因素都要相同且適宜。示例以下是有關酶的兩個實驗
35、,根據(jù)表格內容分析回答下列問題:表1操作步驟操作方法試管A試管B試管C1加淀粉溶液2 mL2 mL2 mL2溫度處理6010003加淀粉酶溶液1 mL1 mL1 mL4加碘液2滴2滴2滴表2操作步驟操作方法試管A試管B1加淀粉溶液2 mL2加蔗糖溶液2 mL3加斐林試劑甲2 mL2 mL4加斐林試劑乙數(shù)滴數(shù)滴5加淀粉酶溶液1 mL1 mL表1為探究_的實驗。該實驗把溫度處理改為pH分別為5、7、9能否用于探究pH對酶活性的影響,為什么?_。表2為探究_的實驗。請修正表2操作步驟中的錯誤:_;_;_。解析根據(jù)實驗題目可以確定自變量,根據(jù)自變量也可以確定實驗題目;碘液會與氫氧化鈉液反應,所以在堿性
36、條件下不能用碘液鑒定淀粉;斐林試劑的用法與雙縮脲試劑的用法不同,要將斐林試劑甲和乙等量混合后使用,并且要進行水浴加熱。答案酶的活性受溫度影響不能,因為氫氧化鈉與碘液反應,不能在堿性條件下用碘液對淀粉進行鑒定酶的專一性斐林試劑甲和乙要等量混合后使用應先加酶溶液后加斐林試劑加斐林試劑后要水浴加熱DNA的粗提取與鑒定(必修1P)1. 實驗原理DNA在NaCl溶液中的溶解度,是隨著NaCl的濃度的變化而改變的。DNA在0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最低,據(jù)此可使溶解于NaCl溶液中的DNA析出。DNA不溶于酒精溶液,但細胞中的某些物質可以溶于酒精溶液,據(jù)此可提取含雜質較少的DNA。DNA+
37、二苯胺藍色(用于DNA的鑒定)2. 方法步驟提取雞血細胞的細胞核物質取雞血細胞液510 mL+20 mL蒸餾水,用玻璃棒沿一個方向快速攪拌5 min紗布過濾,濾液中含DNA和其他核物質,如蛋白質原理:血細胞的細胞膜、核膜吸水脹破、玻璃棒快速攪拌加速血細胞破裂溶解核內DNA:濾液+2 mol/L NaCl溶液40 mL,玻璃棒沿一個方向攪拌1 min輕輕攪拌沿一個方向析出含DNA的黏稠物:溶液+蒸餾水析出了絲狀物(直至不再增加為止),此時NaCl溶液相當于被稀釋到0.14 mol/L濾取含DNA的黏稠物:用多層紗布過濾,含DNA的黏稠物留在紗布上50 mL燒杯,緩緩攪拌3 min溶解DNA黏稠物
38、再溶解20 mL 2 mol/L NaCl溶液+上述黏稠物過濾含DNA的2 mol/L NaCl溶液:用2層紗布過濾,濾液中含DNA提取含雜質較少的DNA:上述濾液+冷卻的95%酒精溶液50 mL,緩慢攪拌,出現(xiàn)白色乳狀絲狀物,用玻璃棒將絲狀物卷起DNA的鑒定3. 注意事項實驗材料雞血必須充足,每組至少需15 mL雞血。制備雞血細胞液時,要在新鮮的雞血液中加入抗凝劑檸檬酸鈉,最后要除去上清液。盛放雞血細胞液的容器,最好是塑料容器。獲取較純的DNA的關鍵:充分攪拌雞血細胞液(加入足量的蒸餾水),以便使細胞膜和核膜破裂。沉淀DNA時必須用冷酒精(體積分數(shù)為95%的酒精,至少在5以下存放24 h)。
39、低溫誘導植物染色體數(shù)目的變化(必修1P)1. 原理用低溫處理植物分生組織細胞,能夠抑制紡錘體的形成,染色體不能被拉向兩極,細胞也不能分裂成兩個子細胞,導致細胞染色體數(shù)目發(fā)生變化。2. 流程洋蔥根尖培養(yǎng)取材制片包括解離、漂洗、染色和制片4個步驟。具體操作方法與“觀察植物細胞的有絲分裂”相同。3. 觀察先用低倍鏡尋找染色體形態(tài)較好的分裂相。視野中既有正常的二倍體細胞,也有染色體數(shù)目發(fā)生改變的細胞。確定某個細胞發(fā)生染色體數(shù)目變化后,換上高倍鏡觀察。示例用濃度為2%的秋水仙素處理植物分生組織56小時,能夠誘導細胞內染色體加倍。那么,用一定時間的低溫(如4)處理水培的洋蔥根尖時,是否也能誘導細胞內染色體
40、加倍呢?請對這個問題進行實驗探究。針對以上問題,你作出的假設是:_。你提出此假設的依據(jù)是:_。低溫處理植物材料時,通常需要較長時間才能產生低溫效應,根據(jù)這個提示將你設計的實驗組合以表格形式列出來。按照你的設計思路,以_作為鑒別低溫是否誘導細胞內染色體加倍的依據(jù)。為此,你要進行的具體操作是:第一步:剪取根尖23 mm。第二步:按照_步驟制作_。解析提出的假設應該具有一定的科學根據(jù),提出的假設應該是最有可能的而不是隨意猜測,所以探究的課題在題干中具有一定的指向性。在設計表格的時候要注意題干的要求是測量低溫效應的時間,考慮到一般植物的細胞周期時間的單位應該以小時為單位比較合適。為了保證實驗的嚴謹性,
41、應該做一組常溫下的對照組,以排除環(huán)境因素的干擾。答案用一定時間的低溫處理水培的洋蔥根尖能夠誘導細胞內染色體加倍低溫能夠影響酶的活性(或紡錘絲的形成、著絲點的分裂),使細胞不能正常進行有絲分裂(也可提出其他假設,只要能夠運用所學的生物知識進行合理地解釋即可)只要設計的表格達到以下兩個要求,均可:A. 至少作兩個溫度的對照(常溫和低溫);B. 間隔相等的培養(yǎng)時間進行取樣。以下表格僅作參考。培養(yǎng)時間培養(yǎng)溫度5 hrs10 hrs15 hrs常溫40在顯微鏡下觀察和比較經過不同處理后根尖細胞內染色體數(shù)目(或染色體計數(shù))解離漂洗染色制片細胞有絲分裂裝片調查人群中的遺傳?。ū匦?P)1. 原理人類遺傳病是
42、由遺傳物質改變而引起的疾病。遺傳病可以通過社會調查和家系調查的方式了解發(fā)病情況。2. 調查流程圖確定調查的目的、要求制訂調查的計劃實施調查活動整理、分析調查資料以組為單位,確定組內人員要求確定調查病例設計調查記錄表明確調查方式討論調查時應注意的問題得出調查結論,撰寫調查報告名師點睛:注意區(qū)分遺傳病、先天性疾病、家族性疾病。調查的群體基數(shù)要足夠大。示例1某校研究性學習小組為了了解我市人群中耳垂的遺傳情況,特地設計了調查活動計劃,主要內容如下表所示:泰安市20個家庭耳垂遺傳情況調查統(tǒng)計表組別婚配方式家庭數(shù)兒子女兒父親母親有耳垂無耳垂有耳垂無耳垂1有耳垂有耳垂2有耳垂無耳垂3無耳垂有耳垂4無耳垂無耳
43、垂該調查活動的不足之處是()A. 調查的組別太少B. 調查的家庭數(shù)太少C. 調查的區(qū)域太小D. 調查的世代數(shù)太少解析題中只涉及20個家庭,調查的家庭數(shù)目太少,不能真實反映人群中耳垂的遺傳情況。答案B示例2下面是某校生物科技小組“調查人群中某種性狀的遺傳”課題的研究方案,回答有關問題。.調查步驟確定要調查的遺傳病,掌握其癥狀及表現(xiàn)。設計記錄表格及調查要點如下:雙親性狀調查的家庭個數(shù)子女總數(shù)子女中患病人數(shù)男女總計分多個小組調查,獲得足夠大的群體調查數(shù)據(jù)。匯總總結,統(tǒng)計分析結果。.回答問題:人群中的性狀很多,在下列4項中,不應選擇_項進行遺傳方式調查,其理由是_。A. 能否卷舌B. 身高C. A、B、O血型D. 紅綠色盲請在表格中的相應位置填出可能的雙親性狀。如果要進一步判斷該性狀的遺傳方式,還應注意以下問題:調查單位最好是_。為了方便研究,可繪制_圖。通過_的手段,對遺傳病進行監(jiān)測和預防,在一定程度上能夠有效地預防遺傳病的產生和發(fā)展。答案.B身高是由多個基因決定的雙親性狀調查的家庭個數(shù)子女總數(shù)子女中患病人數(shù)男女雙親正常父正常母患病父患病母正常父母均患病總計患者家系遺傳系譜遺傳咨詢和產前診斷生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質的鑒定(必修1P18)實驗原理1. 還原性糖+斐林試劑磚紅色沉淀2. 脂肪+蘇丹染液橘黃色脂肪+蘇丹
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