檢驗(yàn)師考試免疫

1、第四篇臨床免疫學(xué)和免疫學(xué)檢驗(yàn)第 1 單元 免疫學(xué)概論高頻考點(diǎn) 1 免疫概念免疫是機(jī)體免疫系統(tǒng)識(shí)別“自身”與“非己” 、排除抗原性異物、維持自身生理平衡和穩(wěn)定的生物學(xué)應(yīng)答過程。其生理性應(yīng)答過程對(duì)機(jī)體有利，其病理性應(yīng)答過程對(duì)機(jī)體有害。高頻考點(diǎn)2免疫功能1免疫防御：抵御體外病原或抗原入侵的免疫保護(hù)功能稱為免疫防御。此功能若過強(qiáng)可能導(dǎo)致組織損傷和功能異常，發(fā)生超敏反應(yīng)；若過低或缺如，可發(fā)生免疫缺陷病。2免疫穩(wěn)定：維持自身生理內(nèi)環(huán)境相對(duì)穩(wěn)定的功能免疫穩(wěn)定 。此功能可清除自身衰老細(xì)胞及殘損組織， 將免疫應(yīng)答調(diào)控在適度范圍 （免疫調(diào)節(jié)），且對(duì)自身正常組織和細(xì)胞不應(yīng)答 （自身耐受）；此功能異?？赡軐?dǎo)致自身免疫

2、病發(fā)生。3免疫監(jiān)視：識(shí)別和清除異常突變細(xì)胞和病毒感染細(xì)胞的功能免疫監(jiān)視。此功能異?？赡軐?dǎo)致腫瘤發(fā)生或病毒持續(xù)性感染。典型試題 1（ A1 型題）現(xiàn)代免疫的概念是（D）A機(jī)體排斥抗原性微生物的功能B機(jī)體識(shí)別和清除衰老細(xì)胞的功能C機(jī)體排斥異物侵襲的能力D機(jī)體識(shí)別和排斥抗原性異物的功能E機(jī)體殺傷和清除異常突變細(xì)胞的能力高頻考點(diǎn) 3 免疫應(yīng)答概念免疫應(yīng)答包括固有免疫應(yīng)答和適應(yīng)性免疫應(yīng)答。固有免疫應(yīng)答：在正常機(jī)體內(nèi)任何時(shí)段均以抗原非特異性方式識(shí)別和清除各種抗原異物和病原體，也稱為非特異性免疫應(yīng)答。適應(yīng)性免疫應(yīng)答：免疫細(xì)胞在機(jī)體內(nèi)選擇識(shí)別某種抗原后，自身活化、增殖、分化為免疫效應(yīng)細(xì)胞，產(chǎn)生免疫效應(yīng)分子，排

3、除該抗原的全過程，也稱為特異性免疫應(yīng)答。高頻考點(diǎn) 4 適應(yīng)性免疫應(yīng)答的基本過程與類型免疫應(yīng)答發(fā)生在外周免疫器官，適應(yīng)性免疫應(yīng)答基本過程通常分為以下三個(gè)階段：抗原提呈細(xì)胞（包括巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞和活化B 細(xì)胞）攝取和加工處理抗原，提呈抗原肽給T細(xì)胞，此過程稱為抗原識(shí)別階段（感應(yīng)階段）； T 細(xì)胞接受抗原提呈細(xì)胞提供的抗原肽信息及協(xié)同刺激信號(hào)后，自身活化、增殖和分化為效應(yīng)T 細(xì)胞，并合成分泌細(xì)胞因子；同時(shí)，B細(xì)胞特異性識(shí)別抗原并接受活化T 細(xì)胞的協(xié)同刺激信號(hào)后，活化、增殖和分化為漿細(xì)胞產(chǎn)生抗體，此過程稱為免疫細(xì)胞增殖分化階段；抗體、Tc、TD 或細(xì)胞因子等對(duì)抗原發(fā)揮免疫效應(yīng)，此過程稱為免疫效應(yīng)階

4、段。適應(yīng)性免疫應(yīng)答根據(jù)淋巴細(xì)胞發(fā)揮的效應(yīng)可分為： B 細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答即體液免疫應(yīng)答，根據(jù)抗原性質(zhì)不同分為兩類：即對(duì)胸腺依賴性抗原（TD 抗原）的 B 細(xì)胞應(yīng)答（必需有Th 細(xì)胞輔助）和對(duì)胸腺非依賴性抗原（TI 抗原）的 B 細(xì)胞應(yīng)答（不需要 Th 細(xì)胞輔助）。經(jīng)抗原刺激后， B 淋巴細(xì)胞活化、增殖并分化為漿細(xì)胞，由漿細(xì)胞合成分泌抗體發(fā)揮免疫效應(yīng)。T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答即細(xì)胞免疫，是由抗原提呈細(xì)胞攝取加工TD抗原，并選擇相應(yīng)抗原肽提呈給 T 細(xì)胞； T 細(xì)胞接受抗原信號(hào)和協(xié)同刺激信號(hào)后，活化、增殖和分化為效應(yīng)T 細(xì)胞。其中 Th1 細(xì)胞合成分泌多種細(xì)胞因子， 可引起遲發(fā)型超敏反應(yīng)； Tc 細(xì)胞

5、則直接殺傷表達(dá)相應(yīng)抗原的靶細(xì)胞及誘導(dǎo)靶細(xì)胞凋亡。細(xì)胞免疫主要發(fā)揮抗細(xì)胞內(nèi)寄生菌感染、抗病毒感染、抗寄生蟲感染與抗腫瘤免疫效應(yīng)。高頻考點(diǎn)5免疫器官的類型和主要功能免疫系統(tǒng)是由免疫器官 （中樞免疫器官和外周免疫器官） 、免疫細(xì)胞和免疫分子組成的執(zhí)行免疫功能的體系，也是機(jī)體對(duì)抗原性異物進(jìn)行免疫應(yīng)答的場所。免疫器官分為中樞免疫器官和外周免疫器官。1中樞免疫器官是免疫細(xì)胞發(fā)生、 分化和發(fā)育成熟的場所， 人類和哺乳動(dòng)物的中樞免疫器官包括胸腺和骨髓，而鳥類還有法氏囊。骨髓是各種免疫細(xì)胞的發(fā)源地，骨髓多能造血干細(xì)胞增殖、分化為髓樣祖細(xì)胞和淋巴樣祖細(xì)胞。淋巴樣祖細(xì)胞一部分在骨髓內(nèi)繼續(xù)發(fā)育為成熟B 淋巴細(xì)胞，一部

6、分則進(jìn)入胸腺發(fā)育為成熟 T 淋巴細(xì)胞。2外周免疫器官包括淋巴結(jié)、脾和粘膜相關(guān)淋巴組織等，是成熟T 淋巴細(xì)胞、 B 淋巴細(xì)胞等免疫細(xì)胞定居增殖的組織，也是對(duì)抗原性異物進(jìn)行免疫應(yīng)答的場所。（ 2）外周免疫器官的主要功能是成熟T、 B淋巴細(xì)胞定居、休整、增殖、與其他細(xì)胞相互作用及信號(hào)傳導(dǎo)的場所; 是免疫應(yīng)答發(fā)生的場所; 具有抗原過濾作用; 外周免疫器官參與淋巴細(xì)胞再循環(huán)與歸巢，所有外周免疫器官均可視為是淋巴細(xì)胞再循環(huán)的起點(diǎn)、中途站與歸巢終點(diǎn)。高頻考點(diǎn)6 T 細(xì)胞表面標(biāo)志及功能凡參與免疫應(yīng)答以及與免疫應(yīng)答有關(guān)的細(xì)胞統(tǒng)稱為免疫細(xì)胞，依其參與免疫應(yīng)答類型不同可分為非特異性的固有免疫細(xì)胞和特異性的適應(yīng)性免疫

7、細(xì)胞兩大類，其中適應(yīng)性免疫細(xì)胞主要包括專職抗原提呈細(xì)胞、T 淋巴細(xì)胞與B 淋巴細(xì)胞。1 T 細(xì)胞重要的細(xì)胞膜表面標(biāo)志有：（ 1）T 細(xì)胞（抗原） 受體（ TCR）：T 細(xì)胞（抗原） 受體是由膜分子TCR和 CD3構(gòu)成的復(fù)合體，是 T 細(xì)胞的獨(dú)特標(biāo)志性膜蛋白分子，表達(dá)于所有成熟T 細(xì)胞膜表面，接受并轉(zhuǎn)導(dǎo)T 細(xì)胞活化的抗原信號(hào)（第一信號(hào)）。（ 2）CD4和 CD8 MHC分子受體： T 細(xì)胞必須先經(jīng) CD4或 CD8分子識(shí)別結(jié)合抗原提呈細(xì)胞膜表面的 MHC分子才能接受抗原信息。成熟TCR -T 細(xì)胞依據(jù)細(xì)胞膜的 CD4/CD8 分子分為CD4+T細(xì)胞和 CD8+T細(xì)胞兩個(gè)亞群。 CD4+T細(xì)胞輔助

8、性T 細(xì)胞（ Th）：Th 細(xì)胞膜表達(dá) CD4分子，可特異識(shí)別結(jié)合 MHC-類分子提呈的相應(yīng)外源性抗原肽，活化并分化為Th1 和 Th2 細(xì)胞。此外，CD4還是人類免疫缺陷病毒（ HIV）的受體。 CD8+T細(xì)胞細(xì)胞毒性 T 細(xì)胞（CTL或 Tc）： Tc 細(xì)胞膜表達(dá) CD8分子，可特異識(shí)別結(jié)合MHC-I 類分子提呈的相應(yīng)內(nèi)源性抗原肽而被活化。（ 3）協(xié)同刺激分子及受體接受或提供細(xì)胞活化第二信號(hào)：CD28：與抗原提呈細(xì)胞膜表面配體 CD80 CD86分子結(jié)合后，接受T 細(xì)胞活化的第二信號(hào)。 CDl54（ CD40L）：與 B 細(xì)胞膜表面的 CD40 結(jié)合后，提供B 細(xì)胞活化第二信號(hào)。（ 4）

9、CD2： CD2是成熟 T 細(xì)胞膜表面的特有標(biāo)志，主要配體是CD58。 CD2還是綿羊紅細(xì)胞受體（ E 受體），可利用綿羊紅細(xì)胞與T 細(xì)胞結(jié)合的 E 花環(huán)試驗(yàn)，測定外周血中T 細(xì)胞總數(shù)。（ 5）絲裂原受體： T 細(xì)胞膜上特有植物血凝素（PHA）受體和刀豆蛋白 A（ConA）受體，此外T 細(xì)胞與 B 細(xì)胞膜上都表達(dá)有美洲商陸（PWM）受體，靜息 T 細(xì)胞與 PHA/ConA/PWM結(jié)合后可活化、增殖和分化。2 T 細(xì)胞功能（ 1） Th 細(xì)胞：主要功能是免疫調(diào)節(jié)。Th l細(xì)胞：主要通過分泌多種細(xì)胞因子參與細(xì)胞免疫；Th2 細(xì)胞：主要功能是調(diào)節(jié)體液免疫應(yīng)答，通過提供 B 細(xì)胞活化第二信號(hào) （協(xié)同信

10、號(hào)）和細(xì)胞因子，輔助B 細(xì)胞活化及轉(zhuǎn)化為漿細(xì)胞合成抗體。（ 2） Tc 細(xì)胞：主要效應(yīng)是直接殺傷帶有相應(yīng)Ag 的靶細(xì)胞（如病毒感染細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞等）或誘導(dǎo)靶細(xì)胞凋亡。典型試題 2（ A1 型題） T 細(xì)胞不具備的功能是（E）A抗原識(shí)別 B細(xì)胞毒效應(yīng)C 分泌細(xì)胞因子D參與免疫調(diào)節(jié)E 合成分泌 Ig典型試題 3（ A型題）細(xì)胞毒性T 細(xì)胞不具有下列哪種功能（A）A輔助 B 細(xì)胞分化成抗體產(chǎn)生細(xì)胞C特異性殺傷病毒感染細(xì)胞B抗胞內(nèi)寄生細(xì)菌的感染作用D殺傷腫瘤細(xì)胞等E誘導(dǎo)靶細(xì)胞凋亡高頻考點(diǎn)7 B 細(xì)胞表面及標(biāo)志功能B 細(xì)胞是骨髓依賴性淋巴細(xì)胞，受抗原刺激后可分化為漿細(xì)胞產(chǎn)生抗體。1 B 細(xì)胞的重要膜表面

11、標(biāo)志（ 1）B 細(xì)胞抗原受體（ BCR）： BCR由膜免疫球蛋白（ mIg）與 CD79聚合構(gòu)成，是 B細(xì)胞的獨(dú)特標(biāo)志性膜蛋白分子， 表達(dá)于所有成熟 B 細(xì)胞膜表面， 接受并轉(zhuǎn)導(dǎo) B 細(xì)胞活化的抗原信號(hào) （第一信號(hào)）。未成熟 B 細(xì)胞膜一般只表達(dá) mIgM，成熟 B 細(xì)胞膜可同時(shí)表達(dá) mIgM和 mIgD。（ 2） CD19 CD21復(fù)合物 B 細(xì)胞活化輔助受體。（ 3） CD32 B 細(xì)胞抑制性輔助受體。（ 4）協(xié)同刺激分子及受體接受或提供細(xì)胞活化第二信號(hào)： CD40：表達(dá)于成熟 B 細(xì)胞膜表面。 CD40與活化 T 細(xì)胞膜上的 CDl54（CD40L）結(jié)合后，接受B 細(xì)胞活化必需的第二信號(hào)

12、。 CD80 CD86（也分別命名為 B7-1 B7-2 ）：主要表達(dá)于活化B 細(xì)胞。 CD80 CD86與 T 細(xì)胞膜 CD28結(jié)合后， T 細(xì)胞獲得活化第二信號(hào)。（ 5） CD5：根據(jù)細(xì)胞膜有無 CD5表達(dá)，可將 B 細(xì)胞區(qū)分為 B1（CD5+）和 B2（ CD5- ）細(xì)胞兩個(gè)亞群。（ 6）絲裂原受體： B 細(xì)胞膜特有的絲裂原受體是脂多糖 （ LPS）受體和葡萄球菌 A 蛋白（ SPA）受體，此外與 T 細(xì)胞一樣也表達(dá)有美洲商陸（PWM）受體。 靜息 B 細(xì)胞與 LPS/SPA/PWM結(jié)合后可活化、增殖和分化。 2B 細(xì)胞功能 分化為漿細(xì)胞合成抗體；攝取、 加工與提呈抗原；分泌細(xì)胞因子參與

13、免疫調(diào)節(jié)。典型試題4（ A1型題）對(duì) T 細(xì)胞和 B 細(xì)胞均有刺激作用的有絲分裂原是（C）A PHAB LPSC PWM D ConAE SPA典型試題5（ A1型題） B淋巴細(xì)胞膜上的最具特征性的受體是（D）A C3受體B EB病毒受體C IgGFc 受體D膜免疫球蛋白（ mIg） E 絲裂原受體高頻考點(diǎn)8 NK 細(xì)胞特點(diǎn)自然殺傷細(xì)胞（NK 細(xì)胞）是一類不表達(dá)特異性抗原受體的大顆粒（嗜天青顆粒）淋巴細(xì)胞，顆粒內(nèi)含穿孔素、細(xì)胞毒素、顆粒酶等溶細(xì)胞及誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的活性物質(zhì)。NK細(xì)胞沒有獨(dú)特膜標(biāo)志，目前將CD56+、CDl6+、 CD94+、 TCR?、 BCR?、 CD3?的淋巴樣細(xì)胞鑒定為 N

14、K細(xì)胞。NK細(xì)胞無需抗原刺激，可分泌穿孔素和細(xì)胞因子直接殺傷微生物感染細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞（靶細(xì)胞），可通過“抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用（ADCC）”殺傷靶細(xì)胞，也可誘導(dǎo)靶細(xì)胞凋亡，是執(zhí)行免疫監(jiān)視功能的重要細(xì)胞。NK細(xì)胞是固有免疫應(yīng)答細(xì)胞，其主要功能有：抗腫瘤免疫；抗細(xì)胞內(nèi)感染免疫，如抗病毒感染、胞內(nèi)寄生菌感染、真菌感染和寄生蟲感染；分泌 IFN- 、 TNF-等細(xì)胞因子，參與免疫調(diào)節(jié)作用。典型試題6（ A1 型題） NK細(xì)胞不具備的功能是（E）A抗病毒感染B抗腫瘤C免疫調(diào)節(jié)D抗胞內(nèi)寄生菌感染E合成 Ig高頻考點(diǎn)9單核 - 巨噬細(xì)胞吞噬細(xì)胞包括血液中的單核細(xì)胞和中性粒細(xì)胞、以及組織中的巨噬細(xì)胞。

15、單核 - 巨噬細(xì)胞有如下重要免疫功能：吞噬作用：單核- 巨噬細(xì)胞能直接吞噬和殺傷病原微生物； 攝取、 加工和提呈抗原：M 是一類專職APC，可利用 MHC-分子給CD4+T細(xì)胞提呈外源性抗原肽； 調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答：M 對(duì)免疫應(yīng)答具有正調(diào)節(jié)或負(fù)調(diào)節(jié)的雙向調(diào)節(jié)作用；抗腫瘤作用：充分活化的 M 能直接吞噬腫瘤細(xì)胞、或分泌 TNF-、 NO、及溶酶體酶等殺傷或抑制腫瘤細(xì)胞生長、 或利用 ADCC殺傷腫瘤細(xì)胞、 或遞呈腫瘤抗原激活 T 細(xì)胞協(xié)同殺傷腫瘤細(xì)胞。 參與局部炎癥反應(yīng)： M 合成分泌 TNF- 、IL-1 、IL-6 及 LTB4 等炎性介質(zhì)引起局部炎癥反應(yīng)。高頻考點(diǎn)10免疫球蛋白基本概念、基本結(jié)構(gòu)

16、、功能區(qū)及其功能1基本概念（ 1）抗體（ Ab） 是 B 淋巴細(xì)胞受抗原刺激后、 增殖分化為漿細(xì)胞合成并分泌至血液和體液中的、能與該抗原特異性結(jié)合的球蛋白。（ 2）免疫球蛋白（ Ig ） 是所有具有抗體活性或化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體相似的球蛋白。2 Ig 基本結(jié)構(gòu) 單體 Ig 分子由兩條相同重鏈（ H 鏈）借二硫鍵在中部相連，而兩條相同輕鏈（ L 鏈）又借二硫鍵各與一條重鏈連接，形成一種對(duì)稱性四肽鏈分子。（ 1） L 鏈：按抗原性差異分為 和 兩型，其中 型又分為 4 個(gè)亞型。同一種 Ig 分子的 2 條 L 鏈都是同型的，即都是 型或都是 型，不會(huì)是混型的。（ 2）H 鏈：按抗原性差異分為 、 、 、

17、 、 五類，分別是重鏈為 類型的 IgG（分為IgG1、2、3、4 亞類）、重鏈為 類型的 IgA （分為 IgA1 、2 亞類）、重鏈為 類型的 IgM、重鏈為 類型的 IgD 、重鏈為 類型的 IgE 。每一個(gè) Ig 單體分子的 2 條 H鏈也是同類型的，不會(huì)是混型的。3 Ig 功能區(qū)Ig的 L 鏈和 H 鏈大約每110 個(gè)氨基酸殘基的區(qū)段內(nèi)有一對(duì)鏈內(nèi)二硫鍵，使這一區(qū)段肽鏈折疊構(gòu)成一個(gè)桶狀結(jié)構(gòu)域。每一結(jié)構(gòu)域都有一定的功能，故稱為Ig 功能區(qū)。（ 1）易變區(qū)（ V 區(qū)）：L 鏈和 H 鏈 N端的第一個(gè)結(jié)構(gòu)域因氨基酸順序多變分別稱為L 鏈易變區(qū)（ VL）和 H 鏈易變區(qū)（ VH）。VH和 VL

18、 經(jīng) 折疊形成抗原結(jié)合腔，能與對(duì)應(yīng)抗原決定基在空間構(gòu)像上精確互補(bǔ)而特異結(jié)合。（ 2）恒定區(qū)（ C 區(qū)）：除 V 區(qū)外， Ig 靠 C 端的其余肽段氨基酸順序變化很小，分別稱為 L 鏈恒定區(qū)（ CL）和 H 鏈恒定區(qū)（ CH）。CL 的抗原性是 Ig 分型或亞型的依據(jù)，而 CH的抗原性是 Ig 分類或亞類的依據(jù)。 此外 CL 和 CH還可能分布有個(gè)體遺傳標(biāo)志抗原位點(diǎn)。 C1 區(qū)由 CL 與 CH1區(qū)構(gòu)成； C2 由兩個(gè) CH2構(gòu)成， IgG 的 C2 區(qū)有補(bǔ)體結(jié)合位點(diǎn)；C3 由兩個(gè) CH3構(gòu)成， IgM 的 C3區(qū)有補(bǔ)體結(jié)合位點(diǎn)；IgM 和 IgE 還有一個(gè)C4區(qū)，由兩個(gè)CH4構(gòu)成。（ 3）鉸鏈

19、區(qū)： 是 Ig 的 CH1和 CH2之間的一結(jié)構(gòu)松散可以伸展改變Ig 構(gòu)型的肽段。 鉸鏈區(qū)內(nèi)有兩個(gè)或多個(gè)半胱氨酸殘基，兩條H鏈在此形成二硫鍵相連接。4 Ig的水解片段IgG的鉸鏈區(qū)二硫鍵兩端有木瓜蛋白酶和胃蛋白酶的水解位點(diǎn)：（ 1）木瓜蛋白酶水解片段： 在 IgG 鉸鏈區(qū)二硫鍵的靠 N 端一邊將 IgG 水解成三個(gè)片段， 其中二個(gè)由 L 鏈和 VH-CH1構(gòu)成，保留了易變區(qū)完整的抗原結(jié)合區(qū)， 稱為抗原結(jié)合片段 （ Fab）；另一個(gè)片段由兩條 H 鏈的 CH2和 CH3區(qū)構(gòu)成，稱為可結(jié)晶片段（ Fc）。 Fc 段可與細(xì)胞膜表面相應(yīng) Fc 受體結(jié)合，介導(dǎo)免疫細(xì)胞發(fā)揮免疫效應(yīng)。（ 2）胃蛋白酶水解片

20、段： 在 IgG 鉸鏈區(qū)二硫鍵的靠 C端一邊將 IgG 分子水解形成一個(gè) （F ab' ） 2 片段，由兩個(gè) Fab 借鉸鏈區(qū)二硫鍵連接而成， 保持完整 IgG 與 Ag 結(jié)合的功能； 而剩余的 CH2 和 CH3水解成的許多無任何生物學(xué)效應(yīng)的小分子多肽。6生物學(xué)活性（ 1）V 區(qū)功能：抗體的抗原結(jié)合腔在空間構(gòu)像上與對(duì)應(yīng)抗原決定基精確互補(bǔ)而結(jié)合，使抗原不能發(fā)揮原有的生物學(xué)效應(yīng)。（ 2）C 區(qū)生物學(xué)效應(yīng)： 激活補(bǔ)體經(jīng)典途徑： IgG 和 IgM 與抗原特異性結(jié)合后， 可與補(bǔ)體 C1q結(jié)合并激活補(bǔ)體經(jīng)典途徑；介導(dǎo)免疫細(xì)胞效應(yīng)：主要有：免疫調(diào)理作用、抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用（ ADCC

21、）、介導(dǎo)型超敏反應(yīng)（ IgE ，IgG4）；通過胎盤（ IgG ）；參與免疫調(diào)節(jié)。典型試題7（ A1 型題）下面關(guān)于免疫球蛋白功能區(qū)的敘述不正確的是（B）A VH和 VL 構(gòu)成抗原結(jié)合部位B只有 CL，CH1是遺傳標(biāo)記所在C IgG 的 CH2有補(bǔ)體結(jié)合位點(diǎn)D鉸鏈區(qū)可以改變Ig 構(gòu)型E CH3或 CH4能與免疫細(xì)胞膜Fc 受體結(jié)合典型試題8（ X型題）免疫球蛋白生物學(xué)活性包括（ABD）A V 區(qū)特異性結(jié)合相應(yīng)抗原B IgG-CH2 激活補(bǔ)體 CIgM 穿過胎盤D Fc 結(jié)合 NK細(xì)胞介導(dǎo) ADCC效應(yīng)E介導(dǎo)型超敏反應(yīng)高頻考點(diǎn)11各類免疫球蛋白特征與功能1IgG IgG是血清和組織液中含量最高的

22、抗體（約占血清 Ig 總量的80），也是半衰期 （約16 24 天）最長的抗體。 其重要作用有： 抗微生物感染： IgG 是再次免疫應(yīng)答的主要抗體，大多數(shù)抗菌抗體、細(xì)菌毒素或病毒的中和抗體都是IgG ，是體內(nèi)主要的抗感染抗體；激活補(bǔ)體經(jīng)典途徑：IgGl 、IgG3 與抗原特異結(jié)合后，可高效激活補(bǔ)體經(jīng)典途徑，導(dǎo)致溶血及溶細(xì)胞效應(yīng)；介導(dǎo)免疫細(xì)胞效應(yīng)：IgGV 區(qū)特異性結(jié)合抗原后，其Fc 段可與 M 、 NK細(xì)胞表面的 Fc 受體結(jié)合，發(fā)揮免疫調(diào)理和ADCC作用等；保護(hù)胎兒和新生兒：IgG1 、IgG3、IgG4 是唯一可穿過胎盤屏障的抗體，是胎兒和新生兒的被動(dòng)抗感染抗體；參與免疫病理損傷： IgG

23、1、2、 3 可參與、型超敏反應(yīng)和自身免疫性疾病，而IgG4 可參與型超敏反應(yīng)。2 IgM IgM主要有兩種存在形式：（ 1）單體 IgM：是表達(dá)于B 細(xì)胞膜表面mIgM，參與構(gòu)成BCR復(fù)合體，選擇識(shí)別與結(jié)合抗原；（ 2）血清型 IgM：五個(gè)單體 IgM 籍 J 鏈連接為五聚體，是分子量最大的抗體（970kD），不能通過血管壁， 主要存在于血清中。 其重要免疫功能有： 血液抗感染抗體：因含 10 個(gè)抗原結(jié)合區(qū)，具有很強(qiáng)的抗原結(jié)合能力，是重要的血液抗感染抗體；激活補(bǔ)體經(jīng)典途徑：IgM 的CH3區(qū)共有10 個(gè)補(bǔ)體結(jié)合位點(diǎn)，是激活補(bǔ)體的能力最強(qiáng)的抗體；宮內(nèi)感染診斷依據(jù)：在胎兒發(fā)育后期（約 20 周）

24、開始有合成IgM 的能力，由于母體IgM 不能通過胎盤進(jìn)入胎兒體內(nèi)，因此如果臍帶血或新生兒血液中特異性IgM 量較高的話，則提示新生兒曾受到宮內(nèi)感染；早期感染診斷依據(jù)：機(jī)體受抗原刺激后最先合成IgM，接著是 IgG 。當(dāng) IgG 大量合成時(shí)， IgM合成量則相應(yīng)減少。因此，檢查血清特異性IgM 含量可用作傳染病的早期診斷。3 IgA IgA有兩種存在形式（ 1）血清型 IgA：為單體分子，主要存在于血清中；（ 2）分泌型 IgA（SIgA）：為二聚體， 由 J 鏈連接兩個(gè)單體分子和附加一個(gè)分泌片構(gòu)成。SIgA是各種粘膜細(xì)胞外分泌液中的主要抗體，存在于呼吸道、消化道、生殖道粘膜表面；也存在于部分

25、腺體分泌液中，如乳汁（初乳中含量最高的抗體是SIgA）、唾液、淚液。嬰兒可從母乳中獲得 SIgA，是一種重要的自然被動(dòng)免疫。SIgA 性能穩(wěn)定， 局部濃度大， 是參與粘膜局部免疫主要抗體。4 IgE IgE主要由粘膜下淋巴組織中的漿細(xì)胞分泌，單體結(jié)構(gòu)，是正常人血清中含量最少的 Ig （約 0.3 g ml）。IgE 具有很強(qiáng)親細(xì)胞性，其 Fc 段可與肥大細(xì)胞和嗜堿粒細(xì)胞表面的 Fc R I 結(jié)合，介異 I 型超敏反應(yīng)。此外， IgE 還參與機(jī)體抗寄生蟲免疫。5IgD IgD為單體分子， 血清 IgD 的生物學(xué)功能尚不清楚，僅占血清Ig 總量的 0.2 。mIgD參與構(gòu)成BCR，成熟 B 細(xì)胞同

26、時(shí)表達(dá)mIgM和 mIgD。高頻考點(diǎn)12免疫球蛋白血清型Ig 是結(jié)構(gòu)復(fù)雜的大分子蛋白質(zhì)，可作為抗原誘導(dǎo)異體或自體的特異性免疫應(yīng)答。Ig 有同種型、同種異型和獨(dú)特型等三類抗原決定基。高頻考點(diǎn)13補(bǔ)體系統(tǒng)基礎(chǔ)知識(shí)1概念補(bǔ)體系統(tǒng)是存在于人和脊椎動(dòng)物血清、組織液和細(xì)胞膜表面的一組與免疫有關(guān)并具有酶原活性的糖蛋白，當(dāng)被某種物質(zhì)激活后，表現(xiàn)出多種酶活性和其它生物學(xué)效應(yīng)。血清中90的補(bǔ)體是在肝臟中合成的，肝細(xì)胞和枯否細(xì)胞是主要合成細(xì)胞。2理化性質(zhì)（ 1）補(bǔ)體的化學(xué)成分：糖蛋白，在電泳時(shí)，大多數(shù)屬于 球蛋白，少數(shù)屬 （如 C1s 和 D 因子）和 球蛋白（如 C1q）。（ 2）化學(xué)性質(zhì)： 很不穩(wěn)定， 不耐熱，

27、 56 30min 可滅活； 強(qiáng)酸強(qiáng)堿、 強(qiáng)烈振蕩、 乙醚、酒精、蛋白酶等均可使其滅活，甚至離體存放時(shí)間稍長，活性也會(huì)逐漸喪失。3補(bǔ)體的途徑補(bǔ)體激活主要有經(jīng)典途徑、甘露聚糖結(jié)合凝集素（MBL）途徑和旁路途徑等三條途徑。（ 1）經(jīng)典途徑： 激活可人為分成識(shí)別階段、 活化階段和膜攻擊階段， 過程如下： 識(shí)別階段：識(shí)別單位是 C1q，C1r，C1s，激活物質(zhì)是 Ag-2IgG 或 Ag-IgM 復(fù)合物。 從激活 C1q 開始，由 C1q激活 C1r，最后形成蛋白酶 C1s，其底物是 C4 和 C2?；罨A段： 激活單位是 C4、C2 和 C3。 C1s 順序水解 C4和 C2，由 C4 和 C2 的

28、大水解片段組成 C4b2b 復(fù)合物，此即 C3 轉(zhuǎn)化酶； C3 轉(zhuǎn)化酶水解 C3，大片段 C3b與 C4b2b 組成 C4b2b3b，此即 C5 轉(zhuǎn)化酶。 膜攻擊階段： 膜攻擊單位 C5 、C6、C7、C8 和 C9。 C5 轉(zhuǎn)化酶將 C5 水解成 C5a 和 C5b，C5b 結(jié)合于細(xì)胞膜并依次激活C6、7、8、9，形成攻膜復(fù)合體 C5b6789n。多個(gè) C9分子聚合形成一管狀結(jié)構(gòu)插入膜內(nèi)，穿透細(xì)胞膜，導(dǎo)致細(xì)胞溶解。經(jīng)典途徑啟動(dòng)依賴于抗原抗體復(fù)合物，因而參與適應(yīng)性免疫應(yīng)答。（ 2）替代途徑（又稱旁路途徑）：激活物質(zhì)：主要是微生物細(xì)胞壁糖類物質(zhì)（如脂多糖、酵母多糖、葡聚糖等） 、聚合 IgA 和

29、 IgG4 等。激活過程：在生理狀況下，血清中的C3 可被某些蛋白酶緩慢水解，因此血清中存在低水平的C3b。當(dāng)有細(xì)菌脂多糖（LPS）等激活物存在時(shí)，體液中的C3b 可粘附在細(xì)菌細(xì)胞膜表面并與B 因子結(jié)合形成C3bB復(fù)合物。 C3bB中的 B因子易被D 因子水解成Ba 和 Bb，在細(xì)菌細(xì)胞膜上形成C3bBb。 Bb 具有絲氨酸酶活性，可將本復(fù)合物中的C3 水解成 C3a 和 C3b，此復(fù)合物是替代途徑的C3 轉(zhuǎn)化酶。此酶可激活更多的C3，生成更多的 C3bBb，這就是“ C3b依賴性正反饋環(huán)路” 。形成的 C3b 粘附在 C3bBb周圍的細(xì)胞膜上，與 C3bBb結(jié)合形成 C3bnBb復(fù)合物，此即

30、為 C5 轉(zhuǎn)化酶。此后的膜攻擊階段與經(jīng)典途徑相同。（ 3）甘露聚糖結(jié)合凝集素（ MBL）途徑：由急性炎癥期產(chǎn)生的甘露糖結(jié)合凝集素（ MBL）與病原體結(jié)合后啟動(dòng)激活。 MBL首先與細(xì)菌細(xì)胞壁的甘露糖殘基結(jié)合， 然后與絲氨酸蛋白酶結(jié)合，形成 MBL相關(guān)的絲氨酸蛋白酶（ MASP）。 MASP可水解 C4 和 C2 分子，產(chǎn)生 C4b2b 共同構(gòu)成與經(jīng)典途徑相同的 C3 轉(zhuǎn)化酶，其后續(xù)激活階段與經(jīng)典途徑相同。4生物學(xué)功能（ 1）補(bǔ)體的溶細(xì)胞作用：能溶解細(xì)菌（但一般不溶解革蘭陽性菌） 、真菌、包膜病毒、寄生蟲，也可溶解自身組織細(xì)胞。（ 2）溶解免疫復(fù)合物（ IC），防止免疫復(fù)合物在體內(nèi)沉積。（ 3）介

31、導(dǎo)免疫細(xì)胞效應(yīng)：免疫調(diào)理作用：如巨噬細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞等通過其膜表面的CR1與細(xì)菌細(xì)胞膜表面的C3b 結(jié)合，把細(xì)菌固定在吞噬細(xì)胞表面，有利于吞噬。免疫粘附作用：紅細(xì)胞膜上有CR1，當(dāng) C3b 與 Ag-Ab 免疫復(fù)合物（ IC ）結(jié)合后，紅細(xì)胞通過CR1將 C3b-IC粘附在其膜表面，攜帶至肝臟交給巨噬細(xì)胞吞噬清除。炎癥介質(zhì)效應(yīng)：a過敏毒素作用：C3a、C4a 和 C5a 可與嗜堿性粒細(xì)胞和肥大細(xì)胞細(xì)胞膜上的C3aR、C4aR和 C5aR結(jié)合，導(dǎo)致肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞脫顆粒，引起過敏反應(yīng)。 因此 C3a、C4a 和 C5a也稱為過敏毒素；b趨化作用： C3a、 C5a 和 C567 具有吸引

32、吞噬細(xì)胞到炎癥部位聚集，發(fā)揮吞噬作用，增強(qiáng)炎癥反應(yīng)，所以也稱為趨化因子；c激肽樣作用：C2a 和 C4a 可直接引起血管擴(kuò)張和通透性增加，造成炎癥性充血。典型試題9（ A1 型題）補(bǔ)體不具有下列哪種生物學(xué)活性（E）A溶細(xì)胞作用B吞噬調(diào)理作用C免疫黏附作用D過敏毒素作用E抗原識(shí)別作用典型試題10（ X 型題）下列哪種成分不參與補(bǔ)體替代激活途徑（AC）AC2BC3CC4D C5EC6高頻考點(diǎn)14細(xì)胞因子概念與共同特性1概念細(xì)胞因子（ cytokine，CK）是由多種細(xì)胞、尤其是免疫細(xì)胞合成分泌的一類具有多種生物活性的小分子蛋白質(zhì)或多肽，是細(xì)胞間的信息傳遞分子。2共同特性產(chǎn)生特點(diǎn)： 各種細(xì)胞受抗原等

33、誘導(dǎo)活化后都可產(chǎn)生細(xì)胞因子（多源性），而且一種細(xì)胞可產(chǎn)生多種細(xì)胞因子，不同類的細(xì)胞可產(chǎn)生一種或幾種相同的細(xì)胞因子。細(xì)胞合成的細(xì)胞因子，大多數(shù)以自分泌或旁分泌方式分泌在局部組織發(fā)揮作用，少數(shù)可內(nèi)分泌進(jìn)入血流；化學(xué)性質(zhì)：細(xì)胞因子一般為低分子量的蛋白或糖蛋白；作用方式；大多數(shù)細(xì)胞因子采取瞬時(shí)近距離、抗原非特異性、特異受體限制方式作用于靶細(xì)胞；作用特點(diǎn)：生物效應(yīng)常表現(xiàn)為高效性、多效性、重疊性、雙向性、網(wǎng)絡(luò)性。生物學(xué)作用：刺激造血功能、刺激免疫細(xì)胞活化分化和成熟、參與免疫調(diào)節(jié)和細(xì)胞生理功能調(diào)節(jié)、抗病毒及抗腫瘤、介導(dǎo)炎癥等。高頻考點(diǎn)15細(xì)胞因子及其受體類型1細(xì)胞因子按其生物學(xué)功能可分為：（ 1）白細(xì)胞介素

34、（ IL ） 在多種細(xì)胞間發(fā)揮廣泛作用的細(xì)胞因子。（ 2）干擾素（ IFN） 是細(xì)胞受病毒核酸或某些誘生劑刺激后合成分泌的細(xì)胞因子，人干擾素分為 IFN- 、IFN- 、IFN- 三種類型， 其中 IFN- 具有干擾病毒復(fù)制的能力； IFN- 具有抗腫瘤及免疫調(diào)節(jié)作用。（ 3）腫瘤壞死因子（ TNF） 是一種能使腫瘤發(fā)生出血性壞死的細(xì)胞因子。 TNF-主要由活化的單核 - 巨噬細(xì)胞等產(chǎn)生， 可參與炎癥、 疾病進(jìn)展及惡病質(zhì)形成、 誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、 抗腫瘤作用等。 TNF- 主要由活化的 Th1 細(xì)胞產(chǎn)生，具有細(xì)胞毒作用，又稱淋巴毒素。（ 4）集落刺激因子（ CSF） 是能夠刺激多能造血干細(xì)胞和前體

35、免疫細(xì)胞進(jìn)行增殖分化的細(xì)胞因子。種類主要有粒細(xì)胞集落刺激因子（ G-CSF）、單核 - 巨噬細(xì)胞集落刺激因子（ M-CSF）、粒細(xì)胞 - 巨噬細(xì)胞集落刺激因子 （ GM-CSF）。IL3 也是 CSF，可刺激所有未成熟的免疫前體細(xì)胞發(fā)育分化成熟，稱為多系集落刺激因子。（ 5）趨化因子主要由白細(xì)胞與造血微環(huán)境中的基質(zhì)細(xì)胞分泌，具有對(duì)中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞的趨化和激活活性。（ 6）生長因子（ GF） 指具有刺激或抑制細(xì)胞生長作用的細(xì)胞因子，如表皮細(xì)胞生長因子 （ EGF）、神經(jīng)生長因子（NGF）、轉(zhuǎn)化生長因子- （ TGF- ）等。2細(xì)胞因子受體是識(shí)別CK并與之

36、特異結(jié)合、將 CK信息傳遞至細(xì)胞內(nèi)的跨膜蛋白分子。細(xì)胞因子受體分為免疫球蛋白基因超家族、I型細(xì)胞因子受體家族、型細(xì)胞因子受體、型細(xì)胞因子受體家族、趨化性細(xì)胞因子受體家族五個(gè)家族。（劉琥琥）第 2 單元 抗原抗體反應(yīng)高頻考點(diǎn) 1 體外抗原抗體反應(yīng)概念體外抗原抗體反應(yīng)是指抗體與相應(yīng)抗原在體外特異性結(jié)合后，可因抗原或抗體的物理性狀不同、以及參與反應(yīng)的物質(zhì)不同而出現(xiàn)各種反應(yīng)現(xiàn)象， 如凝集、沉淀、補(bǔ)體結(jié)合及中和反應(yīng)等。由于抗原與抗體結(jié)合具有高度特異性，因此可以利用已知抗體鑒定標(biāo)本中的未知抗原（或反過來）。高頻考點(diǎn)2抗原抗體反應(yīng)原理1抗原抗體結(jié)合力指抗原依賴抗原決定基（表位） 和抗體的抗原結(jié)合部位的空間構(gòu)

37、像精確互補(bǔ)特異結(jié)合，這是一種非共價(jià)鍵的可逆結(jié)合，取決于抗體的親和性和親和力。親和性指抗體分子上一個(gè)抗原結(jié)合部位與對(duì)應(yīng)抗原表位之間的結(jié)合強(qiáng)度，是抗體與抗原間的固有結(jié)合力，抗體的抗原結(jié)合部位與抗原表位空間構(gòu)型互補(bǔ)程度越高親和性越強(qiáng)。親和力指一個(gè)完整抗體分子與整個(gè)抗原分子之間的結(jié)合強(qiáng)度，當(dāng)抗體與大分子抗原結(jié)合時(shí)，親和力取決于抗體的抗原結(jié)合部位（結(jié)合價(jià)）數(shù)目，抗體結(jié)合價(jià)越多，抗體親和力高，與抗原結(jié)合牢固，即所謂多價(jià)優(yōu)勢。結(jié)合后，在抗原與抗體的對(duì)應(yīng)氨基酸殘基之間還有靜電引力、范德華引力、氫鍵結(jié)合力和疏水作用力等四種分子間引力可促進(jìn)結(jié)合，其中范德華引力作用最小，而疏水作用力作用最大。2親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠

38、體Ig與抗原蛋白帶有電荷和強(qiáng)極性基團(tuán)，與水分子有很強(qiáng)的親和力，可在粒子外周構(gòu)成水化膜成為親水膠體。 同種膠體粒子在一定 pH 的水溶液中帶有相同電荷，互相排斥。因此親水膠體能均勻地分布于溶液中不發(fā)生凝集或沉淀。當(dāng)抗體與抗原結(jié)合后，分子間的極性基團(tuán)由于化學(xué)特性相吻合而互相吸引，因此不能再與水分子結(jié)合，失去親水性能， 成為疏水膠體。 此時(shí)如有電解質(zhì)存在 （如氯化鈉），可以中和膠體粒子表面所帶電荷，進(jìn)一步使疏水膠體粒子相互靠攏，形成可見的抗原抗體復(fù)合物，發(fā)生凝集或沉淀。典型試題1（ A1 型題）下列關(guān)于抗原抗體反應(yīng)原理的敘述錯(cuò)誤的是（A）A抗原抗體是共價(jià)結(jié)合，可形成共價(jià)鍵B抗原抗體特異結(jié)合還需要種分

39、子間引力參與C抗體親和力與抗體結(jié)合價(jià)有關(guān)D K 值越大，親和性越高，與抗原結(jié)合越牢固E抗原抗體復(fù)合物由親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體時(shí)可發(fā)生凝集或沉淀高頻考點(diǎn)3抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)1特異性抗原與抗體的結(jié)合具有高度特異性，其中抗原的特異性取決于抗原表位的化學(xué)基團(tuán)性質(zhì)、數(shù)目及其立體構(gòu)型，而抗體的特異性則取決于V 區(qū)的抗原結(jié)合部位空間構(gòu)像，應(yīng)與相應(yīng)抗原表位精確互補(bǔ)吻合。2比例性在進(jìn)行體外抗原抗體反應(yīng)時(shí)，只有當(dāng)抗原和抗體分子比例最合適時(shí)，抗原與抗體結(jié)合充分，形成的抗原抗體復(fù)合物大且多，出現(xiàn)明顯可見反應(yīng)。測定抗原抗體分子比例是否合適，在進(jìn)行沉淀反應(yīng)時(shí)，一般用抗原稀釋法，即抗體恒量而抗原做系列稀釋；在進(jìn)行凝集反應(yīng)時(shí)

40、，一般用抗體稀釋法，即抗原恒量而抗體做系列稀釋；或者用抗原與抗體方陣滴定法3可逆性抗原與抗體的結(jié)合僅是分子表面的非共價(jià)鍵結(jié)合，這種結(jié)合雖具有相對(duì)穩(wěn)定性，但為可逆反應(yīng)，即抗原抗體復(fù)合物可以解離?？乖贵w復(fù)合物解離一是取決于抗體與相應(yīng)抗原的親和力，親和力越高復(fù)合物越不易解離；二是取決于反應(yīng)條件， 如降低或升高 pH 值、或增加溶液離子強(qiáng)度， 均可降低或消除抗原與抗體間的靜電引力，促使抗原抗體復(fù)合物解離；而降低溶液離子強(qiáng)度則不能引起抗原抗體復(fù)合物解離。4階段性 抗原抗體反應(yīng)可分為兩個(gè)階段： 第一階段為特異性結(jié)合階段， 反應(yīng)取決于抗原表位與相應(yīng)抗體的抗原結(jié)合部位的空間構(gòu)像互補(bǔ)吻合，與外界因素?zé)o關(guān)。反應(yīng)

41、進(jìn)行較快，大多在幾秒鐘至數(shù)分鐘內(nèi)即完成，但無肉眼可見反應(yīng)出現(xiàn)；第二階段為可見反應(yīng)階段，在抗原與抗體特異結(jié)合的基礎(chǔ)上，受環(huán)境中電解質(zhì)、溫度、 pH 、補(bǔ)體等因素的參與和影響，表現(xiàn)為凝集、沉淀、補(bǔ)體結(jié)合、細(xì)胞溶解等可見反應(yīng)。此階段較長，歷時(shí)數(shù)分鐘、數(shù)小時(shí)乃至數(shù)天。但若為單價(jià)抗體或半抗原，則仍不出現(xiàn)可見反應(yīng)。兩個(gè)階段并無嚴(yán)格界限，往往第一階段反應(yīng)還未完全完成，即開始第二階段反應(yīng)。典型試題2（ A1 型題）根據(jù)抗原抗體反應(yīng)的可逆性特點(diǎn)，以下哪種說法是正確的（A抗原抗體結(jié)合牢固不易受環(huán)境影響B(tài)解離后抗體不能再與抗原結(jié)合C解離后抗原生物學(xué)活性改變D解離后抗體的特異性不變D）E解離后抗體的特異性改變典型試題

42、3（ X型題）對(duì)于抗原抗體反應(yīng)階段的正確敘述是（ABCD）A可分為特異性結(jié)合階段和可見反應(yīng)階段B特異性結(jié)合階段反應(yīng)快C可見反應(yīng)段反應(yīng)慢D可見反應(yīng)階段受反應(yīng)條件影響E兩階段能嚴(yán)格分開高頻考點(diǎn)4影響抗原抗體反應(yīng)的因素1反應(yīng)物（ 1）抗體 抗體類型、 特異性、 親和力和濃度都影響抗體抗原反應(yīng)，等價(jià)帶的寬窄也影響抗原抗體復(fù)合物的形成?？贵w結(jié)合價(jià)：一個(gè)Ig 的抗原結(jié)合部位的數(shù)目即是抗體的結(jié)合價(jià)。IgG為 2 價(jià)， SIgA 為 4 價(jià)， IgM 理論結(jié)合價(jià)是10 價(jià)。（ 2）抗原 抗原的分子量、 理化性狀、 抗原表位的種類及數(shù)目均可影響反應(yīng)結(jié)果?？扇苄钥乖c相應(yīng)抗體結(jié)合出現(xiàn)沉淀反應(yīng)（半抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合

43、不出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象），顆粒性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合出現(xiàn)凝集反應(yīng)?？乖Y(jié)合價(jià)：一個(gè)抗原分子所攜帶的功能性抗原表位的數(shù)目即是該抗原的結(jié)合價(jià)。半抗原（一個(gè)表位）是1 價(jià)；天然抗原是多價(jià)。由于天然抗原一般是大分子，由多種、多個(gè)抗原表位組成，是多價(jià)抗原，可以和多個(gè)抗體分子交互結(jié)合形成大分子免疫復(fù)合物。2反應(yīng)環(huán)境因素電解質(zhì)：電解質(zhì)（如氯化鈉）可以中和膠體粒子表面所帶電荷，進(jìn)一步使疏水膠體粒子相互靠攏，形成可見的抗原抗體復(fù)合物，發(fā)生凝集或沉淀。酸堿度：蛋白質(zhì)抗原等電點(diǎn) （pI ）約為 pH4 5，IgG 等電點(diǎn)約pH6 7。當(dāng) pH達(dá)到或接近抗原的等電點(diǎn)時(shí)，即使無相應(yīng)抗體存在，也會(huì)發(fā)生非特異性的凝集（自凝）或沉淀。

44、因此抗原抗體反應(yīng)一般在pH69 電介質(zhì)溶液中進(jìn)行，在此溶液中抗原帶有相同電荷，互相排斥，不會(huì)發(fā)生自凝。而有補(bǔ)體參與的反應(yīng)最適pH7.2 7.4 ，否則會(huì)降低補(bǔ)體活性。溫度：在一定范圍內(nèi)，溫度升高抗原與抗體碰撞機(jī)會(huì)增多，使反應(yīng)加速。常規(guī)反應(yīng)溫度為37。典型試題4（ A1 型題）下列影響抗原抗體反應(yīng)因素中，不屬于反應(yīng)物自身的因素是（D）A抗原物理性狀B 抗體特異性C 抗體親和力D電解質(zhì)E抗原抗體的分子比例高頻考點(diǎn)5 抗原抗體反應(yīng)的基本類型根據(jù)抗原與抗體特異結(jié)合后產(chǎn)生的現(xiàn)象和結(jié)果不同，抗原抗體反應(yīng)有凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng)、補(bǔ)體參與的反應(yīng)和中和反應(yīng)等四種基本類型。（劉琥琥）第 3 單元 免疫原及抗血清制備

45、高頻考點(diǎn) 1 抗原的制備1顆粒性抗原各種細(xì)胞、細(xì)菌、寄生蟲等皆為顆粒性抗原。一般情況下細(xì)胞抗原（如綿羊紅細(xì)胞）經(jīng)生理鹽水或其他溶液洗凈，配制一定濃度即可；細(xì)菌細(xì)胞多用固體培養(yǎng)基培養(yǎng)，經(jīng)生理鹽水集菌后處理，如菌體抗原加溫100， 2 2.5h去除鞭毛抗原，而鞭毛抗原需用0.3% 0.5%甲醛處理。2可溶性抗原蛋白質(zhì)如細(xì)菌毒素等皆為良好的可溶性抗原，免疫前常需純化。（ 1）組織和細(xì)胞粗抗原的制備一般將人或動(dòng)物的組織和細(xì)胞破碎，再經(jīng)一定的方法純化獲得所需的粗抗原。破碎方法有物理性的機(jī)械破碎法、超聲破碎法和20反復(fù)凍融法等，也有生物化學(xué)類的酶處理法、自溶法和表面活性劑處理法等。（ 2）Ig 片段的制備

46、 Ig的片段（如 Fab 片段、 Fc 片段、輕鏈片段等）的制備方法有酶裂解法、氧化還原法、離析Ig 亞單位和溴化氰裂解法。（ 3）可溶性抗原的純化方法有超速離心分離法，選擇沉淀法， 凝膠過濾法， 離子交換層析法，親和層析法等。（ 4）純化抗原的鑒定化學(xué)分析法： 如可用酚試劑法測定抗原蛋白質(zhì)含量； 物理分析法：如鑒定抗原分子量和純度可用聚丙烯酰胺凝膠電泳法等；免疫學(xué)方法： 如可用瓊脂擴(kuò)散法、免疫電泳法等鑒定抗原的免疫學(xué)性質(zhì)、含量等。3半抗原只具有抗原性而無免疫原性的物質(zhì)稱為半抗原，一般是分子量小于4000dal 的有機(jī)物質(zhì)，如寡肽、寡糖和多糖、類脂質(zhì)、核苷、甾族激素、某些小分子量的藥物等。半抗

47、原與蛋白質(zhì)載體或高分子聚合物等結(jié)合后才有免疫原性。一般認(rèn)為載體應(yīng)連接超過20 個(gè)半抗原分子才能使動(dòng)物有效產(chǎn)生抗體， 常用聯(lián)接方法有碳二亞胺法、戊二醛法、 氯甲酸異丁酯法等。典型試題 1（ A1 型題）純化抗原不需要鑒定的項(xiàng)目是（E）A免疫學(xué)性質(zhì)B抗原含量C抗原純度D理化性質(zhì)E抗原分子結(jié)構(gòu)典型試題 2（ X型題）半抗原的特性是（ACE）A分子量一般不超過4000 道爾頓B具有免疫原性而無抗原性C只具有抗原性而無免疫原性D既有免疫原性也有抗原性E與大分子蛋白質(zhì)結(jié)合后具有免疫原性高頻考點(diǎn) 2佐劑種類和作用免疫佐劑：與抗原同時(shí)或預(yù)先注射于機(jī)體，起增強(qiáng)機(jī)體對(duì)抗原免疫應(yīng)答或改變免疫應(yīng)答類型的輔助物質(zhì)。1佐

48、劑種類免疫原性佐劑：本身也具備免疫原性，如卡介苗、短小棒狀桿菌、百日咳桿菌、脂多糖、細(xì)胞因子等。非免疫原性佐劑：如氫氧化鋁、磷酸鋁、磷酸鈣、石蠟油、羊毛脂、胞壁肽、多聚核苷酸等。應(yīng)用最多的是福氏佐劑與細(xì)胞因子佐劑。福氏佐劑有：完全福氏佐劑由石蠟油、羊毛脂和卡介苗混合而成，不完全福氏佐劑只由石蠟油和羊毛脂混合，不含免疫原性佐劑。福氏完全佐劑可提高佐劑效能，但注射后易產(chǎn)生局部持久性潰瘍和肉芽腫。2佐劑作用應(yīng)用佐劑的目的主要是為了增強(qiáng)抗原對(duì)機(jī)體的免疫原性，提高體液免疫應(yīng)答 （增加抗體的滴度）和細(xì)胞免疫應(yīng)答（引起并增強(qiáng)遲發(fā)型超敏反應(yīng)）水平。典型試題 3（ A1 型題）免疫佐劑的作用不包括（D）A增強(qiáng)巨

49、噬細(xì)胞提呈抗原的能力B 增強(qiáng)抗原的免疫原性C 增加抗體滴度D增強(qiáng)抗原的抗原性E引起和增強(qiáng)遲發(fā)型超敏反應(yīng)高頻考點(diǎn) 3免疫動(dòng)物的選擇免疫動(dòng)物必須適齡、健壯、體重達(dá)標(biāo)、無病原微生物感染。同時(shí)根據(jù)以下基本原則選擇免疫動(dòng)物的種類：根據(jù)抗原的種屬性選擇：免疫動(dòng)物與所接種抗原種屬差異越遠(yuǎn)越好。根據(jù)抗原的免疫原性選擇：針對(duì)不同性質(zhì)的免疫原，選用相應(yīng)的動(dòng)物。如蛋白質(zhì)抗原大部分動(dòng)物皆適合，甾類激素多用家免，酶類多用豚鼠。根據(jù)抗血清要求：實(shí)驗(yàn)室研究，若抗血清需要量不多，一般選用家兔、豚鼠和雞等小動(dòng)物，R（ rabbit ）型血清是以家兔為代表的小型動(dòng)物抗血清；若需要制備大量免疫血清，應(yīng)選用馬、綿羊等大動(dòng)物，H（ h

50、rose ）型血清是以馬為代表的大型動(dòng)物抗血清。高頻考點(diǎn) 4免疫方法與途徑1免疫方案根據(jù)免疫目的要求、 抗原性質(zhì)、佐劑種類來制定免疫方案。 可采用全量免疫法、微量免疫法或混合免疫法。2免疫接種途徑有皮內(nèi)、皮下、靜脈、腹腔、肌肉及足掌等常規(guī)接種途徑。但若抗原量少且寶貴，可采用淋巴結(jié)內(nèi)微量注射法接種；而半抗原宜采用皮內(nèi)多點(diǎn)注射接種；3免疫接種劑量應(yīng)根據(jù)抗原分子量大小、免疫原性強(qiáng)弱、 動(dòng)物個(gè)體狀態(tài)和免疫時(shí)間決定接種劑量。典型試題4（ A1 型題）某免疫原只有10 g，制備抗血清應(yīng)選擇哪種接種方法（D）A皮內(nèi)注射B皮下注射C肌內(nèi)注射D淋巴結(jié)內(nèi)微量注射E靜脈注射高頻考點(diǎn)5免疫血清的分離、鑒定和保存1血清抗體效價(jià)測定家兔可通過耳緣靜脈采血法、小鼠可通過剪尾法采取少量血，用凝集試驗(yàn)或沉淀試驗(yàn)測定抗體效價(jià)；2動(dòng)物采血