抗氧化活性測定方法的比較

1、抗氧化活性測定方法的比擬 人體衰老和多種疾病均與自由基有關， 尋找天然抗氧化劑具有 重要意義。黃酮、多糖、多肽、酚類等生物活性成分均具有抗氧化 活性，抗氧化活性的篩選方法可分為體外和體內 2 種測試體系。 體外：抗氧化活性可以用在特定條件下，樣品對檢測體系中 自由基的去除能力、 抗油脂過氧化能力及樣品的復原能力、 總抗氧 化能力等來衡量和表征。常用的方法有羥基自由基0H去除能力法、1,1-二苯基苦基苯肼DPPH法、2,2-聯(lián)氮基-雙-3-乙基 苯并噻唑啉-6-磺酸二氨鹽ABTS法、超氧陰離子自由基法 02-、鄰苯三酚自氧化法、B -胡蘿卜素漂白法、硫代巴比妥酸 法、鐵離子復原能力測定 FRAP

2、法、總酚測定法、0RAC法等方法。 體內：主要有DNA氧化損傷法、蛋白質氧化損傷法、線粒體氧化損 傷法。其中DPPH法和ABTS法操作較簡單便捷，不需要特殊的檢測 設備，只在需固定時間下記下其紫外分光光度測量值后計算其自由 基去除率，缺點是不同物質具有組成和結構的差異，與DPPH、ABTS+-的反響速率不同，反響到達平衡的時間不同，將反響時間 固定在某一值時，可能對抗氧化劑的抗氧化性評價帶來錯誤的判 斷，且DPPH自由基會和其他自由基發(fā)生反響。鄰苯三酚自氧化法 缺點是檢測波長、緩沖液的組成及pH值、鄰苯三酚濃度等關鍵測 定條件存在著較大差異。B-胡蘿卜素漂白法的缺點是B-胡蘿卜素本身有抗氧化活

3、性，對樣品活性的測定結果有影響。FRAP法主要 用于食品業(yè)，優(yōu)點是簡單易操作、可以重復，缺點是無法測定硫醇 化合物的復原能力。 ORAC法是國際上通用的評價食品氧化的標準 方法，缺點是儀器成分較復雜，檢測本錢較高。目前普遍使用的體外抗氧化活性指標一般都采用分光光度法， 使用分光光度計測量各種顏色成分含量的變化。 分光光度法操作較 簡單、便捷，不需要特殊的檢測設備，只在需固定時間下記下其紫 外- 可見分光光度測量值后計算其活性大小，具有本錢低、 效率高、樣品量少等優(yōu)點。 分光光度法缺點是會受到樣本自身顏色和渾濁度 的影響和限制， 顏色深的樣品測得的數(shù)據(jù)誤差大， 甚至得到錯誤的 結果；不同物質組成和結構存在差異， 與各種自由基的反響速率不 同，反響到達平衡的時間不同，將反響時間固定在某一值時，可能 對抗氧化劑的抗氧化性評價 帶來錯誤的判斷。外界環(huán)境因素對實 驗結果也存在一定程度的影響， 有些抗氧化活性實驗在冬天低溫時 不易成功，測得的數(shù)據(jù)往往沒有規(guī)律。我覺得在測定樣品的抗氧化活性時， 各種方法都有自己的優(yōu)缺 點，要根據(jù)需測物質來決定用什么方法，比方DPPH法的自由基選擇性強，不和只有一個羥基的芳香酸、無羥基的類黃酮反響，這類 物質需用其他方法測定。假設對檢測結果要求高的可用ORAC法，假設是做兩個活性物質的抗氧化活性的比照可用多種方法測