重慶大學(xué)碩士研究生入學(xué)考試《分子生物學(xué)》題庫（精編版）

1、重慶大學(xué)碩士研究生入學(xué)考試分子生物學(xué)題庫1. 試述利用基因工程的技術(shù)調(diào)控基因表達(dá)的主要方法2. 論述原核生物和真核生物基因表達(dá)調(diào)控的異同3. 舉出三種基因文庫的構(gòu)建中對(duì)重組質(zhì)粒的篩選方法并解釋其原理4. 對(duì)天然質(zhì)粒的人工構(gòu)建、改造通常需要對(duì)質(zhì)粒哪些方面進(jìn)行操作、改進(jìn)?5. 假設(shè)你需要將一段cdna克隆到表達(dá)載體中并轉(zhuǎn)化到大腸桿菌中。cdna的兩端和載體上均有bamhi的酶切位點(diǎn)，你需要用bamhi切割 cdna和載體然后將它們連接在一起。下面是實(shí)驗(yàn)方法要求的具體步驟：a. 用bamh處i理載體 dna，然后用堿性磷酸酶去除5 - 端的磷酸基；b. 用bamh處i理cdna, 然后與步驟 a中得

2、到的載體 dna混合，加入 dna聚合酶，在適當(dāng)?shù)臈l件下使 cdna與載體連接；c. 將步驟b的產(chǎn)物轉(zhuǎn)入大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞中，培養(yǎng)后均勻涂在含有抗生素的瓊脂培養(yǎng)皿上。因?yàn)楸磉_(dá)載體中含有抗性基因，能表達(dá)抵制抗生素的酶，所以只有含有載體 的大腸桿菌才可以在含有抗生素的培養(yǎng)皿上生長，而未被轉(zhuǎn)化的細(xì)菌則因受到抗生素的抑制而死掉。你還參照實(shí)驗(yàn)手冊(cè)做了下面四組對(duì)照：對(duì)照一、在含有抗生素的培養(yǎng)皿上面涂布未被轉(zhuǎn)化的（即不含有載體的）大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞（ cells alone）。對(duì)照二、用未被酶切的載體直接轉(zhuǎn)化大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞，將產(chǎn)物涂布在含有抗生素的培養(yǎng)皿上面（vector alone）。對(duì)照三、用 ba

3、mh酶i切載體 dna后，不用堿性磷酸酶處理，不需要cdna，直接加入dna聚合酶，然后轉(zhuǎn)化、涂板(omit phosphatase, omit cdna)。對(duì)照四、除使用堿性磷酸酶外，其它與對(duì)照三相同(omit cdna)。no. of colonies你一共做了三次實(shí)驗(yàn)，在第一次中所有的平板中都長出很多細(xì)菌。在第二次實(shí)驗(yàn)中所有的平板中都沒有長細(xì)菌。在第三次實(shí)驗(yàn)中你得到了較好的結(jié)果，轉(zhuǎn)化成功，具體克隆數(shù)見下表：preparation of sample123control 1cells alonetmtc00control 2uncut vectortmtc0>1000control

4、3omit phosphatase,tmtc0435omit cdnacontrol 4omit cdnatmtc025experimentalsampletmtc034*tmtc = too many to count請(qǐng)回答下列問題：a. 解釋第一次實(shí)驗(yàn)失敗的原因，并說明對(duì)照一的目的是什么；b. 解釋第二次實(shí)驗(yàn)失敗的原因，并說明對(duì)照二的目的是什么；c. 對(duì)照三和對(duì)照四的目的是什么？為什么實(shí)驗(yàn)手冊(cè)上建議用堿性磷酸酶處理載體？6. 某旋轉(zhuǎn)對(duì)稱 dna片段由 8 個(gè)堿基對(duì)組成， 其最先 4 個(gè)核苷酸為 5 -acgg-3，求其完整的堿基序列。7.大腸桿菌乳糖操縱子的主要結(jié)構(gòu)和阻遏蛋白的作用機(jī)制是什

5、么？8. 請(qǐng)列舉出 5種真核生物中存在的 rna并概括它們的功能。9. 簡述原核生物轉(zhuǎn)錄起始與轉(zhuǎn)錄終止過程中涉及到的主要蛋白質(zhì)和核酸結(jié)構(gòu)及其具體作用10. 試說明真核細(xì)胞與原核細(xì)胞在基因轉(zhuǎn)錄，翻譯及dna的空間結(jié)構(gòu)方面存在的主要差異，表現(xiàn)在哪些方面？11. 什么是操縱子（ operon)? 試說明色氨酸操縱子（trp operon)在原核基因表達(dá)調(diào)控中的調(diào)控機(jī)制和重要作用。12. 闡述酵母轉(zhuǎn)錄激活因子gal4的調(diào)控方式及其在酵母雙雜合系統(tǒng)(yeast two hybrid system)中的應(yīng)用13. 乳糖操縱子的作用機(jī)制？14. 真核生物轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控機(jī)制？15. 真核生物轉(zhuǎn)錄后水平的調(diào)控機(jī)

6、制？16. 分子克隆中常用的工具酶及良好載體的條件？17. 3- 脫氧腺苷 -5 三磷酸是 atp的類似物，假設(shè)它相似到不能被rna聚合酶識(shí)別，如果在 rna轉(zhuǎn)錄時(shí)細(xì)胞中存在少量的該物質(zhì)，會(huì)有什么現(xiàn)象？18. sanger雙脫氧鏈終止法的原理？19. 核酸分子雜交的原理？20. 影響雜交的因素？21. pcr的基本原理？22. 為什么真核生物的轉(zhuǎn)錄過程不受衰減作用的調(diào)控？23. pcr的反應(yīng)條件？24.影響大腸桿菌系統(tǒng)外源基因表達(dá)的因素？25. 大腸桿菌系統(tǒng)表達(dá)外源基因必須具備的條件？26. 真核細(xì)胞表達(dá)外源基因的條件？27. 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的概念、原理及應(yīng)用？28. 基因敲除的基本程序？ 29原

7、核生物與真核生物啟動(dòng)子的主要差別？ 30對(duì)天然質(zhì)粒的人工構(gòu)建主要表現(xiàn)在哪些方面？ 31舉例說明差示篩選組織特異cdna的方法？32. 利用雙脫氧末端終止法（sanger法）測定 dna一級(jí)結(jié)構(gòu)的原理與方法？33. 典型的 dna重組實(shí)驗(yàn)通常包括哪些步驟？34. 在組織培養(yǎng)中的一種哺乳動(dòng)物細(xì)胞中，每個(gè)細(xì)胞含有 1.2mm長的復(fù)制型 dna。這些細(xì)胞每 5 h 分裂一次。如果每個(gè)復(fù)制叉中復(fù)制型dna的生長速度是 16 m/min的話，試問在染色體復(fù)制過程中，必須有多少個(gè)復(fù)制叉同時(shí)進(jìn)行復(fù)制？35. 提出一個(gè)將真核細(xì)胞中的mrna與其他類型的 rna分開的方法。36. 寫出一個(gè)你參與課題的研究內(nèi)容、技術(shù)路線以及你從事部分的具體研究方案。37. 在你從事研究和學(xué)習(xí)過程中，你是怎樣利用生物信息學(xué)的？請(qǐng)舉例說明。38. 簡述酵母雙雜交的原理。39. 簡述親子鑒定的原理。40. 簡述蛋白質(zhì)電泳過程及其注意事項(xiàng)。41. 試述硝酸鹽