食品成著色劑的測(cè)定色素提取

1、食品中合成著色劑的測(cè)定食品中合成著色劑的測(cè)定 色素提取色素提取2012.4.18課程目的：課程目的：1. 掌握食品中合成著色劑的測(cè)定原理；2. 了解高效液相色譜的工作原理及操作方法。著色劑：著色劑：通過(guò)使食品著色后改善其感官性狀，增進(jìn)食欲的一類(lèi)物質(zhì)。天然著色劑：天然著色劑：辣椒紅、甜菜紅、紅曲米、胭脂蟲(chóng)紅、高粱紅、葉綠素銅鈉、姜黃、梔子黃、胡蘿卜素、藻藍(lán)素、可可色素、焦糖色素等等。 合成色素：合成色素：用人工合成的方法從煤焦油中制取，或以苯、甲苯、萘等芳香烴化合物為原料合成的有機(jī)色素。包括莧菜紅、檸檬黃、亮藍(lán)、日落黃、誘惑紅、赤鮮紅等等。合成著色劑的潛在危害致瀉性、致癌性致瀉性、致癌性國(guó)際：j

2、ecfa制定各種合成著色劑的adi我國(guó)：食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)（gb2760-2011）現(xiàn)狀：超量使用，使用工業(yè)色素、染料色素 方便、快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)食品中合成著色劑，是對(duì)其進(jìn)行有效管理的必要手段。測(cè)定手段（gb/t 5009.35-2003）：1. 高效液相色譜法2. 薄層色譜法3. 示波極譜法4. 其他：紙上層析、分光光度法莧菜紅、亮藍(lán)、檸檬黃、日落黃莧菜紅、亮藍(lán)、檸檬黃、日落黃著色劑最大使用量（g/kg）檸檬黃0.1日落黃0.1莧菜紅 0.05亮藍(lán) 0.025合成著色劑在合成著色劑在飲料飲料中的最大使用量中的最大使用量（gb2760-2011）一、實(shí)驗(yàn)原理一、實(shí)驗(yàn)原理1.聚

3、酰胺吸附法提取合成著色劑聚酰胺吸附法提取合成著色劑 聚酰胺（尼龍）通過(guò)氫鍵吸附著色劑，天然著色劑（影響測(cè)定）在酸性條件下被洗脫去除，合成著色劑在堿性條件下被洗脫收集，濃縮后上機(jī)測(cè)定。吸附吸附洗滌洗滌解吸附解吸附濃縮濃縮上機(jī)上機(jī)理化測(cè)定一般步驟：除雜質(zhì)、收集目標(biāo)物、理化測(cè)定一般步驟：除雜質(zhì)、收集目標(biāo)物、調(diào)整濃度、上機(jī)調(diào)整濃度、上機(jī)2. 高效液相色譜法高效液相色譜法 高效液相色譜法（高效液相色譜法（hplc）：）：是是色譜法色譜法的的一個(gè)重要分支，以液體為一個(gè)重要分支，以液體為流動(dòng)相流動(dòng)相，采用高壓，采用高壓輸液系統(tǒng)，將具有不同極性的單一溶劑或不輸液系統(tǒng)，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶

4、劑、緩沖液等流動(dòng)相泵入裝同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有有固定相固定相的色譜柱，在柱內(nèi)各成分被的色譜柱，在柱內(nèi)各成分被分離分離后，后，進(jìn)入進(jìn)入檢測(cè)器檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)試樣的分進(jìn)行檢測(cè)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)試樣的分析。析。 檢測(cè)器：二極管陣列檢測(cè)器檢測(cè)器：二極管陣列檢測(cè)器 3.結(jié)果分析結(jié)果分析保留時(shí)間保留時(shí)間（定性）：根據(jù)樣品中各物質(zhì)被洗脫至檢測(cè)器的時(shí)間差異來(lái)進(jìn)行定性分析；峰面積峰面積（定量）：根據(jù)樣品峰面積與標(biāo)準(zhǔn)品峰面積的比較來(lái)進(jìn)行定量分析。試劑試劑配方配方作用作用聚酰胺粉吸附檸檬酸溶液20g檸檬酸，100ml水溶解調(diào)phph 4的水（70） 水+檸檬酸溶液，調(diào)至ph=4，加熱洗滌甲醇-

5、甲酸溶液60ml甲醇+40ml甲酸洗滌無(wú)水乙醇-氨水-水70ml乙醇+20ml氨水+10ml水 解吸附乙酸銨溶液1.54g乙酸銨，純水定容至1000ml，乙酸調(diào)ph至4流動(dòng)相合成著色劑標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度0.05mg/ml定量分析50%乙醇定容樣品其他乙酸、甲醇、氨水、蒸餾水水二、試劑與器材二、試劑與器材二、試劑與器材二、試劑與器材器材：器材：燒杯、玻棒、吸管、移液管、g3漏斗、抽濾瓶*2、針筒、溫度計(jì)、5ml玻璃離心管電子天平、水浴鍋三、實(shí)驗(yàn)步驟三、實(shí)驗(yàn)步驟1. 取樣、脫氣取樣、脫氣 稱(chēng)取飲料20g，倒入50ml燒杯，碳酸飲料用電爐加熱除去二氧化碳。（已脫氣）。2. 色素吸附色素吸附 稱(chēng)取聚酰胺3g

6、，用少許ph4的水（70）調(diào)成糊狀，加入待測(cè)樣品，攪拌5min。3. 除雜質(zhì)除雜質(zhì) 組裝好g3漏斗，將樣品倒入漏斗，抽濾； ph4的水（70）洗滌3次，每次20ml（洗滌沉淀物）； 甲醇-甲酸洗滌3次，每次20ml（洗滌天然色素）； 400ml ph4的水洗滌。4. 解吸附解吸附 更換抽濾瓶更換抽濾瓶。用乙醇-氨水-水溶液洗滌三次（5ml、10ml、5ml），收集解吸液。5. 樣品濃縮樣品濃縮 解吸液倒入蒸發(fā)皿中，80水浴蒸發(fā)至約2ml，以乙酸（一小滴）調(diào)節(jié)ph至6。收集樣品至玻璃離心管，加水定容至5ml。3g聚酰胺聚酰胺20g飲料飲料70 ph4水，糊狀加熱脫氣混合攪拌混合攪拌5ming3漏斗抽濾漏斗抽濾70 ph4水，水，20ml，洗，洗3次次甲醇甲醇-甲酸，甲酸，20ml，洗，洗3次次70 ph4水，水，400ml洗滌洗滌乙醇乙醇-氨水氨水-水，洗三次，水，洗三次，5ml、10ml、5ml更換抽濾瓶更換抽濾瓶收集濾液，收集濾液，80水浴至水浴至2ml乙酸調(diào)乙酸調(diào)ph至至6，離心管定容至，離心管定容至5ml，冰箱保存，冰箱保存抽濾過(guò)程注意抽濾過(guò)程注意攪拌、倒廢液攪拌、倒廢液清洗漏斗：自來(lái)水清洗漏斗：自來(lái)水-鹽酸鹽酸-蒸餾水蒸餾水目標(biāo)物目標(biāo)物6. 上機(jī)測(cè)定上機(jī)測(cè)定 3000rpm離心離心5min，取上層，取上層10l進(jìn)高效液相色譜。進(jìn)高效液相色