非小細胞肺癌基因檢測PPT參考幻燈片

1、腫瘤個體化用藥基因檢測的臨床應用腫瘤個體化用藥基因檢測的臨床應用江蘇省腫瘤分子診斷工程技術研究中心江蘇省惡性腫瘤多學科聯(lián)合診治技術服務中心非小細胞肺癌1 人類基因組計劃和國際癌癥基因組計劃個體化醫(yī)療的奠基石于1990年在美國正式啟動的人類基因組計劃，要把人體內(nèi)約10萬個基因的密碼全部解開，同時繪制出人類基因的譜圖。2006年多國聯(lián)合啟動的國際癌癥基因組計劃，是人類基因組計劃后的又一重大科學研究。揭示更多地與癌癥相關的突變類型，獲得50種腫瘤的特定分子異常譜型，探尋DNA變異與腫瘤發(fā)生發(fā)展的機理。2 腫瘤治療存在的核心問題腫瘤治療存在的核心問題l盲目治療盲目治療l過度治療過度治療l個體化治療個體

2、化治療3 肺癌的傳統(tǒng)分類觀點肺癌的傳統(tǒng)分類觀點小細胞肺癌小細胞肺癌 (SCLC)非小細胞肺癌非小細胞肺癌 (NSCLC)腺癌腺癌鱗癌鱗癌大細胞癌大細胞癌腺癌腺癌鱗癌鱗癌大細胞大細胞小細胞小細胞4 肺腺癌的分子亞型肺腺癌的分子亞型KRASEGFRHER2BRAFALK fusionPIK3CAMEK1ROS fusionPDGFR amp肺腺癌的分子分類腺癌腺癌鱗癌鱗癌大細胞大細胞小細胞小細胞肺癌的傳統(tǒng)分類5 EGFR基因突變檢測在臨床應用的意義基因突變檢測在臨床應用的意義IPASS: 根據(jù)突變狀態(tài)的療效分根據(jù)突變狀態(tài)的療效分析析048121620Time from randomisation

3、(months)0.00.20.40.60.81.0Gefitinib EGFR M+ (n=132)Gefitinib EGFR M- (n=91)Carboplatin / paclitaxel EGFR M+ (n=129)Carboplatin / paclitaxel EGFR M- (n=85)Gefitinib EGFR M+ (n=132)Gefitinib EGFR M- (n=91)Carboplatin / paclitaxel EGFR M+ (n=129)Carboplatin / paclitaxel EGFR M- (n=85)無進展生存率 對象對象有效率有效率不

4、加選擇的中國患者不加選擇的中國患者30根據(jù)臨床特征選擇優(yōu)勢人群根據(jù)臨床特征選擇優(yōu)勢人群50根據(jù)根據(jù)EGFR敏感基因選擇敏感基因選擇+耐藥基因選擇耐藥基因選擇70-80%80-95% Mok, Wu,Thomprast et al. NEJM, 20090.46 檢測檢測EGFR突變的重要性突變的重要性醫(yī)學指南醫(yī)學指南全球三大腫瘤突變會指南均強調(diào)檢測EGFR突變的重要性7 EGFR突變檢測的應用突變檢測的應用很好預測TKI藥物對NSCLC患者的療效非小細胞肺癌 外顯子19缺失； 外顯子21點突變； 外顯子18點突變；腫瘤對TKI敏感，患者使用TKI治療外顯子20未發(fā)生突變，繼續(xù)使用TKI治療外顯

5、子20突變，提示TKI治療產(chǎn)生耐藥，轉(zhuǎn)為非TKI治療沒有發(fā)現(xiàn)外顯子18、19、21突變腫瘤對TKI不敏感，患者使用非TKI治療HRM血漿突變檢測血漿突變檢測8 EML4-ALK融合基因ALK 最早是在間變性大細胞淋巴瘤（ ALCL)的一個亞型中被發(fā)現(xiàn)的，因此定名為間變性淋巴瘤激酶（anaplastic lymphoma kinase，ALK）。靶向藥：XALKORI 膠囊（克唑替尼），輝瑞公司。NCCN與ESMO推薦ALK陽性NSCLC的一線治療首選克唑替尼?？傮w突變率：總體突變率：11.4%腺癌突變率：腺癌突變率：16.1%鱗鱗癌突變率：癌突變率：0.7%優(yōu)勢人群：輕微/從未吸煙；與EGFR

6、突變?nèi)巳合啾龋珹LK融合人群年齡更輕；腺癌；EGFR/KRAS野生型；病理學特（含印戒細胞的黏液型或?qū)嵭韵侔┲?，ALK融合基因的發(fā)生率高于其他類型的肺腺癌(462VS. 8.0）9 EML4-ALK融合檢測的意義融合檢測的意義無進展生存期的概率無進展生存期的概率 (%)1008060402000510152025時間時間(月月) 克克唑唑替尼替尼(n=173)化化療療(n=174)事件事件, n (%)100 (58)127 (73)中位數(shù)中位數(shù), 個月個月7.73.0HR (95% CI)0.49 (0.37 - 0.64)P 0.0001Shaw et al., ESMO 2012; Ab

7、stract LBA1_PRN Engl J Med 2013;368:2385-9410 NCCN指南推薦指南推薦11 靶向藥物檢測項目匯總藥物藥物基因基因癌種癌種樣本樣本判斷標準判斷標準重要程度重要程度吉非替尼/厄洛替尼/?？颂婺酔GFR非小細胞肺癌組織標本、血漿、體液標本突變敏感必檢KRAS突變耐藥推薦克唑替尼EML4-ALK組織標本融合敏感必檢ROS1組織標本融合敏感推薦12 鉑類藥物與ERCC1 mRNA 表達Lord RVN et al, Clin Cancer Res, 2002, 8:2286-91背景 ERCC1（Excision Repair Cross Complemen

8、t Group 1）是核酸外切修復家族中重要成員，參與DNA鏈的切割和損傷識別。ERCC1的表達量直接影響DNA修復的生理過程，DNA修復是鉑類化療耐藥性產(chǎn)生的主要機制之一。13 吉西他濱與RRM1 mRNA 表達背景 吉西他濱是脫氧胞嘧啶核苷同系物，屬細胞周期特異性抗代謝類化療藥，主要作用于DNA合成期（S期）的腫瘤細胞，同時也阻斷細胞增殖由G1向S期過渡的進程。臨床研究顯示低RRM1 mRNA水平的肺癌患者對吉西他濱敏感性相對較高，藥物療效較好，中位生存期延長。而且，專家建議RRM1高表達的患者應避免使用吉西他濱。Rafael Rosell1. Oncogene (2003) 22, 35

9、48355314 抗微管類藥物與TUBB3 mRNA 表達背景 抗微管類化療藥是作用于細胞微管，通過影響紡錘體形成，從而抑制細胞有絲分裂的一類廣譜化療藥。在多種臨床研究中，TUBB3 mRNA表達水平與抗微管類化療的療效密切相關。低TUBB3表達水平的腫瘤患者接受紫杉醇類或長春堿類化療的效果較好，中位生存期較長。反之，TUBB3高表達的患者的抗微管類化療療效較差。 Rafael Rosell1. Oncogene (2003) 22, 3548355315 氟類藥物與TYMS mRNA 表達背景 TYMS基因編碼的胸苷酸合成酶（TS）是嘧啶核苷酸合成的限速酶，是腫瘤生長的重要因子。5-FU的代

10、謝物5-FdUMP與TS結(jié)合，阻礙TS的正常功能，從而抑制DNA合成。臨床研究表明，低TYMS mRNA水平的腫瘤患者接受氟類化療的效果較好，中位生存期較長。反之，TYMS高表達的患者對氟類療效較差。研究也發(fā)現(xiàn)培美曲賽的療效與TYMS mRNA表達水平呈負相關。By Yoshinori Shirota, Journal of Clinical Oncology, 2001,19: 4298-430416 化療藥物檢測項目（ mRNA 表達）類型類型藥物藥物基因基因樣本樣本評價評價mRNA 表達卡鉑、順鉑奧沙利鉑 ERCC1 石蠟切片新鮮組織低表達敏感抗微管藥物 TUBB3低表達敏感吉西他濱RR

11、M1 低表達敏感氟尿嘧啶培美曲賽TYMS低表達敏感17 樣本要求樣本要求石蠟包埋腫瘤組織塊 一般組織塊不小于555（mm），組織包于蠟塊正中央，處理完可歸還蠟塊（推薦）。送檢保存：常溫保存、運輸。新鮮腫瘤組織塊 要求提供50mg左右的樣本，取癌組織的中心位置組織塊，55mm（綠豆大）以上，以PBS或生理鹽水清洗干凈，15分鐘內(nèi)放入RNAlater保存液或液氮中保存。送檢保存：常溫保存、運輸，取樣后24小時內(nèi)送檢。全血標本 使用枸櫞酸鈉（1：9）或EDTA-Na2抗凝的采血管，血液樣本2ml以上。禁忌：切勿使用肝素抗凝劑；切勿反復凍融。送檢保存：4冰箱保存，切不可置于-20中（血細胞在融解的時候易發(fā)生溶血）；當天送檢，冰上運輸。18 案例分析姓名姓名：王女士年齡年齡：46診斷診斷：非小細胞肺癌樣品種類樣品種類：穿刺組織檢測項目檢測項目：EGFR突變檢測；EML4-ALK基因融合檢測；ERCC1表達量；TYMS表達量；RRM1表達量；TUBB3表達量檢測項目檢測項目 檢測結(jié)果檢測結(jié)果 臨