紫杉醇與其脂質(zhì)體研究

1、 Taxol,泰素，紫素，Anzatax,安泰素，簡稱PTX。 從紫杉樹皮中分離提取 具有抗腫瘤活性的二萜類天然化合物。 除了帶含氧四環(huán)的紫杉烷環(huán)以外, 在C13 位置上 尚有一必需酯側(cè)鏈。 化學(xué)名為 5,20- 環(huán)氧 -1 .2. -,4,7,13-六羥基 紫杉烷-11-烯-酮-4，10-二乙酸酯-2 苯甲酸酯- 13-(2R,3,R)-N 苯基異絲氨酸酯 分子式為 C47 H51N014, 分子量 853.92 性狀：具有高度親脂性, 不溶于水, 熔點(diǎn)大約 216-217 1963 年, 從太平洋西北岸的短葉紫杉樹皮中發(fā)現(xiàn) 對(duì)許多腫瘤有細(xì)胞毒性作用的天然物質(zhì)。 1971 年提取了其中的活性

2、成分紫杉醇, 初篩有抗 腫瘤作用。 1979 年美國國立癌癥研究所對(duì)數(shù)千種植物的天然 提取物的抗腫瘤活性進(jìn)行了篩選, 發(fā)現(xiàn)紫杉醇是其 中最具抗腫瘤活性的物質(zhì), 且具有獨(dú)特的作用機(jī)制。 特異地結(jié)合到小管的位上, 導(dǎo)致微管聚合成團(tuán)塊和束狀并使其穩(wěn)定, 這些作用能抑制微管網(wǎng)的正常重組。 紫杉醇能與98%血漿蛋白廣泛結(jié)合。 基礎(chǔ)研究表明, 24 小時(shí)給藥方案抑制白細(xì)胞 遠(yuǎn)較3 小時(shí)給藥為重。 紫杉醇主要在肝臟代謝, 隨膽汁進(jìn)入腸道, 經(jīng) 糞便排出體外。 經(jīng)腎清除只占總清除的 1%-8%, 腎功能不全 者一般不影響紫杉醇的使用。 對(duì)藥物相互作用的研究表明, 先用 DDP 會(huì)加 重紫杉醇的主要毒性反應(yīng) 可

3、能由于 DDP 對(duì)細(xì)胞色素 P450 酶的調(diào)節(jié)作 用, 導(dǎo)致紫杉醇的血漿清除率下降 體外實(shí)驗(yàn)證實(shí), 先用紫杉醇后用DDP, 毒性作 用較小, 對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷作用較大 卵巢癌和乳腺癌的一線或二線化療。 肺癌。 頭頸部癌。 其他腫瘤: 對(duì)晚期食管癌、胃癌、膀胱癌、 精原細(xì)胞瘤、黑色素瘤、復(fù)發(fā)性非霍奇金 淋巴瘤等有效。 防止病人發(fā)生過敏反應(yīng), 應(yīng)在紫杉醇治療前 12 小時(shí)口服地塞米松 10mg, 治療前 3 小時(shí) 再用地塞米松 10mg 口服 治療前 30-60 分鐘給予苯海拉明( 或其他類 似物 ) 肌注 40mg 靜注西咪替丁 300mg 或雷尼替丁 50mg 單藥劑量一般為 175mg/m2

4、, 配合用 G-CSF 時(shí), 劑 量可達(dá) 250mg/m2, 聯(lián)合用藥時(shí)劑量酌減。 一般將紫杉醇用生理鹽水或 5% 葡萄糖液或 5% 葡萄糖鹽水稀釋至終濃度為 0.3-1.2mg/ml 后 , 靜 滴 3 小時(shí)。 聯(lián)合用藥劑量為 135-175mg/m2,3-4 周重復(fù)。 在國外,聯(lián)合用藥時(shí), 一般用 175mg/m2, 靜滴 3 小 時(shí); 或 135-150mg/m2, 靜滴24小時(shí)。 紫杉醇每周給藥方案: 一般用量為 60-100mg/m2, 靜脈滴注 3 小時(shí), 每周 1 次, 連用 3 周 , 停 1 周為 1 周期;或每周 1 次, 連用 6 周, 停 2 周為 1 周期。 過敏反應(yīng)

5、: 發(fā)生率為 39%, 其中嚴(yán)重過敏反應(yīng)發(fā)生率 2%， 國內(nèi)報(bào)告過敏反應(yīng)發(fā)生率為 11%-20%, 多數(shù)為 I 型變態(tài)反應(yīng), 表現(xiàn)為支氣管痊攣性呼吸困難、蕁麻疹 和低血壓。幾乎所有的反應(yīng)都發(fā)生在用藥后最初 10 分鐘內(nèi), 嚴(yán)重反應(yīng)常發(fā)生在用紫杉醇后 2-3 分鐘。 骨髓抑制: 為主要?jiǎng)┝肯拗菩远拘? 表現(xiàn)為中性粒細(xì) 胞減少, 血小板減少較少見, 一般在用藥后 8-10 日發(fā) 生,15-21 日恢復(fù)。在用推薦劑量時(shí), 嚴(yán)重的中性粒細(xì) 胞減少（0.5 109/L)見于 47% 的病人, 持續(xù)時(shí)間一 般少于 5 日。整個(gè)療程的發(fā)熱發(fā)生率約為 19%, 只有 5% 的病人血小板計(jì)數(shù)低于 50 109/

6、L, 貧血 (Hb 110g/L）則見于 90% 的病人。值得注意的是 , 應(yīng)用 G - CSF 可降低骨髓抑制發(fā)生率。 神經(jīng)毒性 : 周圍神經(jīng)病變表現(xiàn)為輕度麻木及感覺 異常。此外, 尚可發(fā)生以閃光暗點(diǎn)為特征的視神經(jīng) 障礙。紫杉醇劑量 170mg/m2 時(shí), 治療 2-5 日后會(huì) 發(fā)生瞬間肌痛；劑量250mg/m2, 且與 DDP 配伍時(shí) 多有肌病發(fā)生。 心血管毒性: 可有低血壓和無癥狀的短時(shí)間心動(dòng) 過緩, 后者發(fā)生率約 29%。 ECG 異常見于 30% 病例。 關(guān)節(jié)痛及肌肉痛: 見于 55% 病例, 累計(jì)手臂和腿的 關(guān)節(jié), 其癥狀輕微, 常出現(xiàn)與用藥后的 2-3 日內(nèi), 數(shù)日 內(nèi)恢復(fù)。其發(fā)

7、生率和嚴(yán)重性成明顯劑量依賴性, 且 在接受 G-CSF 的病人中更為常見。 胃腸道反應(yīng): 惡心和嘔吐、腹瀉和粘膜炎的 發(fā)生率分別為 59% 、 43% 和 39%, 一般為輕 至中度。 肝臟毒性: 表現(xiàn)為膽紅素、 AKP 、 AST 和 ALT 升高, 與紫杉醇劑量相關(guān)。 脫發(fā): 可見于80% 以上病例, 且隨著累積治 療, 經(jīng)常有全身體毛的脫落。 輸注藥物的靜脈周圍和藥物外滲局部, 偶爾 有局部炎癥反應(yīng), 既往照射野可能有炎癥性皮 膚反應(yīng)。 國外I期和期臨床試驗(yàn)報(bào)道,中性粒細(xì)胞減少是紫杉 醇主要的劑量限制性毒性。 當(dāng)紫杉醇劑量達(dá)到 200- 250mg/m2 時(shí) , 中性粒細(xì)胞絕對(duì)數(shù)(ANC

8、) 通常低于 500/mm3, 需要G-CSF支持治療。在沒有血細(xì)胞生長因 子支持的情況下, 紫杉醇的最大耐受劑量為175-200 mg/m2。 早期應(yīng)用紫杉醇所遇的最嚴(yán)重問題是急性過敏反應(yīng) (HSRs), 有研究報(bào)道其發(fā)生率高達(dá) 25%-30%。主要表現(xiàn) 為低血壓、支氣管痙攣和全身性蕁麻疹, 這可能與組 織胺的釋放有關(guān)。 治療前應(yīng)先采用腎上腺皮質(zhì)激素 ( 如 DXM) 、苯海 拉明和 H2 受體拮抗劑 ( 如西咪替丁或雷尼替丁) 治 療。 未稀釋的濃縮藥液不應(yīng)接觸聚氯乙烯塑料 (PVC) 器械或設(shè)備 , 且不能用于藥物的滴注。稀釋的藥液 應(yīng)貯存于瓶內(nèi) ( 玻璃、聚丙烯 ) 或塑料袋 ( 聚丙

9、烯、 聚烯烴類 ), 并采用聚乙烯類給藥設(shè)備滴注。 給藥期間應(yīng)注意有無過敏癥狀及生命體征的變化。 英國 AD Banghman1965 年首先提出脂質(zhì)體概 念，并闡述磷脂分散在水中能形成多層封閉 小囊泡 (Vesicals),且每一層均由脂質(zhì)雙分子層 構(gòu)成。 1971 年 Ryman 又首先提出利用小泡囊作為 藥物載體,以提高藥物靶向性降低藥物副作用。 近 30 年來世界各國科學(xué)工作者在這一領(lǐng)域 進(jìn)行了大量的基礎(chǔ)研究, 引人注目的是在醫(yī) 藥領(lǐng)域的研究與開發(fā)(R 美國脂質(zhì)體公司: 正在進(jìn)行紫杉醇及其衍生物脂質(zhì) 體研究; 抗愛滋病AZT脂質(zhì)體可以降低 AZT 骨髓毒 性, 提高抗病毒活性; TNF

10、脂質(zhì)體可以降低TNF 的毒 性, 提高療效;IL-2 脂質(zhì)體可以延長 Tl/2, 與DC合用， 療效提高。降低嚴(yán)重的毛細(xì)血管自漏綜合癥，并 用 DSC 技術(shù)證明 IL2 與脂膜能相互作用。 80 年代美國相繼成立了不少專營脂質(zhì)體的公司 , 如脂質(zhì)體公司 1988年美國 Squibb 公司與 TLC 公司聯(lián)合開 發(fā)抗深部真菌藥兩性霉素 B 脂質(zhì)體， 我國亦進(jìn)行了兩性霉素 B 脂質(zhì)體的研究 脂質(zhì)體主要降低兩性霉素B的嚴(yán)重腎毒性。 美國 TLC 公司的阿霉素脂質(zhì)體于 1995 年批準(zhǔn)上 市。 Nexetar 公司的丁胺卡那脂質(zhì)體。 日本 1994 年熊本等研究的亞硝脲(BCNU) 脂質(zhì) 體能選擇性地

11、殺傷腦腫瘤細(xì)胞。 三菱化學(xué)公司開發(fā)了將胃癌細(xì)胞的人型抗體與 脂質(zhì)體結(jié)合, 通過利用脂質(zhì)體與細(xì)胞融合的特 點(diǎn), 使組裝有抗體的脂質(zhì)體識(shí)別胃癌細(xì)胞, 從而 通過細(xì)胞融合達(dá)到選擇性釋放藥物。 美國 Sequus 公司開發(fā)的 DOXILR 等由阿霉素與合成 磷脂組成的脂質(zhì)體于 1995 年上市 , 它系用 MPEG-DSPE 修飾脂質(zhì)體表面而形成的一種 長循環(huán)脂質(zhì)體（20mg/支）。 在臨床治療艾滋病病人卡波氏肉瘤, 提高療效降低 毒性, 延長半衰期達(dá) 50hr，而常規(guī)阿霉素僅數(shù)十分 鐘。 國內(nèi)不少高校與研究機(jī)構(gòu)早在 90 年代初就進(jìn)行大 量實(shí)驗(yàn)研究 , 均未見產(chǎn)品上市。 范健等，研究阿霉素(F-AD

12、M) 和脂質(zhì)體阿霉素 (L-ADM)對(duì)正常 NIH 小鼠和肝癌腹水型(HcAC) 小鼠的毒性。 結(jié)果： 脂質(zhì)體組動(dòng)物體重和器官失重明顯減輕； 血生化變化相對(duì)減小，外周血白細(xì)胞下降 幅度減小,恢復(fù)加快； 心、腎、胃腸道病理損害減輕； 脂質(zhì)體組有較好療效,生存期有所延長。 脂質(zhì)體載藥后可降低阿霉素的毒性并保留藥物 的抗腫瘤活性。 ADM可與細(xì)胞膜或線粒體膜的磷脂分子及Fe3+形 成三元絡(luò)合物。使細(xì)胞膜“鈍化”，功能及能量 代謝受損。而脂質(zhì)體載藥后明顯減少藥物與膜結(jié) 合，減輕膜功能損害。 脂質(zhì)體在體內(nèi)主要由吞噬細(xì)胞攝取,大大減輕了功 能細(xì)胞的直接損害。由于心肌細(xì)胞的吞噬能力很 弱，載藥后較少進(jìn)入心肌

13、，減少心肌病發(fā)生。 脂質(zhì)體載藥后藥物在體內(nèi)重新分布,主要分布在網(wǎng) 狀巨噬系統(tǒng)器官內(nèi),使心、腎、胃腸內(nèi)藥物濃度明 顯減少, 降低了藥物毒性。 水中溶解度僅為0.006 mg/ml,所以國內(nèi)外上市的紫杉 醇是聚氧乙基代蓖麻油及無水乙醇(50/50)的復(fù)合溶媒 制成的粘稠性針劑。但 (1) 聚氧乙基代蓖麻油進(jìn)入人體內(nèi)降解,導(dǎo)致大量組織 胺釋放，會(huì)發(fā)生嚴(yán)重過敏反應(yīng)。盡管采取了預(yù)防措施, 仍有41%的病人發(fā)生程度不等的過敏反應(yīng)。 (2) 紫杉醇本事亦有與其它化療藥物一樣的毒性，如血 液學(xué)毒性。 (3) 紫杉醇注射液在注射前用生理鹽水或 5% 葡萄糖稀 釋后會(huì)析出沉淀（結(jié)晶）, 故還需接 0.22m微孔過

14、濾 器,以保用藥安全,臨床應(yīng)用較為不便。 國外有關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道曾有人將紫杉醇做成乳 劑、微球劑、混合膠束、環(huán)糊精包合物等 , 以期能減小紫杉醇注射劑的過敏反應(yīng)及毒 副作用, 但都不甚理想。 紫杉醇脂質(zhì)體從 90 年代初進(jìn)行的基礎(chǔ)研究 至目前臨床前研究取得了有意義及實(shí)用價(jià) 值的結(jié)果。 Robert 等 (1993)報(bào)道 紫杉醇脂質(zhì)體的動(dòng)物體內(nèi)毒性明顯小于紫杉 醇注射液 前者 i.v 給藥最大耐受量達(dá) 200mg/kg, 而后 者最大耐受量 30mg/kg 同時(shí)報(bào)道紫杉醇脂質(zhì)體對(duì)耐藥細(xì)胞株亦有效。 Sharma等 (1996) 報(bào)道 小鼠靜脈給紫杉醇注射劑 ( 即市售 Paclitaxel ), 其

15、LD5035mg/kg, 而注射紫杉醇脂質(zhì)體的 LD5070mg/kg, 靜注毒性降低一倍。 Cabanes 等 比較了紫杉醇注射液與紫杉醇脂質(zhì)體在正常小鼠 體內(nèi)毒性及荷 L1210 小鼠的抗癌性。 結(jié)果表明以相同劑量 32.5mg/kg 靜脈連續(xù)三天給 紫杉醇注射液,結(jié)果注射液組小鼠 100% 死亡, 而紫 杉醇脂質(zhì)體組無死亡, 而相等劑量賦形劑聚氧乙基 代離麻油與乙醇( 1:1 V:V) 組死亡率為 30%。 紫杉醇注射劑及脂質(zhì)體兩種劑型對(duì) L1210 荷瘤小 鼠具有近似的抗腫瘤活性。 紫杉醇注射液在一期臨床試驗(yàn)腹腔給藥治療 腔內(nèi)惡性腫瘤可以保持較長時(shí)間 (24-48 小時(shí)) 藥物濃度,

16、但病人有嚴(yán)重腹痛。 分析認(rèn)為可能是賦形劑( 聚氧乙基代蓖麻油 及無水乙醇)的影響。 Bicher 等亦報(bào)道注射部位軟組織損傷及毒性 反應(yīng)。 上述情況限制了臨床進(jìn)一步治療方案的實(shí)施 Sharma 報(bào)道 用荷 P388DBA-2 小鼠腹腔給予紫杉醇脂質(zhì)體 治療, 結(jié)果表明與市售紫杉醇注射液具有相 似療效, 但耐受性前者明顯優(yōu)于后者 提示紫杉醇脂質(zhì)體有可能為臨床提供降低 毒性及改變紫杉醇的給藥途徑以提高治療 效果的新劑型。 急性毒性試驗(yàn)首先比較了注射用紫杉醇脂質(zhì)體與 市售紫杉醇注射劑對(duì)小鼠靜脈注射的急性毒性, 結(jié)果: 本品靜脈注射 LD50 為 69.8mg/kg,而紫杉醇注 射液 LD50 為 3

17、3.0mg/kg 。 且靜脈注射 2 分鐘后動(dòng)物出現(xiàn)不斷抬頭、甩頭、 呼吸困難急促, 抖毛等反應(yīng), 直至死亡。 并隨劑量增大, 死亡動(dòng)物數(shù)增多,反應(yīng)程度增強(qiáng)。 注射用紫杉醇脂質(zhì)體腹腔注射 LD5067.78mg/kg 。 比較了注射用紫杉醇脂質(zhì)體與陽性對(duì)照藥市售紫杉 醇注射液對(duì)荷瘤小鼠的藥效。 荷瘤鼠分別接種艾氏癌實(shí)體型及小鼠肉瘤 -180(S- 180), 本品分別用三個(gè)劑量組 :20mg/kg 、14mg/kg 、 9.8mg/kg, 市售紫杉醇注射液用兩個(gè)劑量組 14mg/kg 、 9.8mg/kg (因大劑量動(dòng)物死亡 , 無法用大劑量), 二劑型均有效, 且療效近似(P 0.05),

18、結(jié)果可見市售紫杉醇注射液抑制骨髓細(xì)胞, 可使粒細(xì) 胞成熟障礙,對(duì)紅細(xì)胞起抑制作用。 注射用紫杉醇脂質(zhì)體組可明顯減輕紫杉醇對(duì)骨髓的 抑制作用, 主要表現(xiàn)在早期粒細(xì)胞增加程度減輕, 成 熟紅細(xì)胞減少程度較輕,與市售紫杉醇注射液比較 P 0.05 或 P 0.01。 注射用紫杉醇脂質(zhì)體對(duì)小鼠艾氏癌實(shí)體型 (EC )和小 鼠肉瘤 (S-180 )均有明顯的治療作用。 與同劑量市售紫杉醇注射液比較,抗腫瘤作用基本一 致( P O.05) , 但注射用紫杉醇脂質(zhì)體與市售紫杉醇注射液相比小 鼠靜脈給藥的急性毒性 LD50 降低一倍, 且前者能明 顯減輕紫杉醇注射液對(duì)外周白細(xì)胞減少的程度 P 0.01; 并明顯減少骨髓抑制, 減輕早幼細(xì)胞增加, 成熟 紅細(xì)胞減少程度分別為 P 0.05 、 P 0.01。 另外, 紫杉醇脂質(zhì)體還減輕了動(dòng)物血清轉(zhuǎn)氨酶和堿 性磷酸酶升高的程度。 1. 刺激性試驗(yàn): 注射用紫杉醇脂質(zhì)體對(duì)兔耳緣靜 脈注射