大腸桿菌ppt課件

,小組成員分工包升制作PPT馮宇講解PPT李春雷查找并整理第一部分資料劉磊查找并整理第一、五部分資料王鵬查找并整理第二、三部分資料熊志江查找并整理第四部分資料,大腸桿菌（Escherichiacoli）,1,第二部分,遺傳物質,第三部分,基因突變及修復,目錄,第四部分,基因轉移及重組,第五部分,研究應用,第一部分,概述,2,概述,一、形態(tài)特征：大腸桿菌為革蘭氏陰性無芽孢的直桿菌，大小約0.4-0.7m2.0-3.0m，兩端鈍圓，多單獨存在或成雙，但不呈長鏈狀排列。大多數菌株具有周生鞭毛而能運動，有的菌株具有莢膜或微莢膜，不形成芽胞，對普通堿性染料著色良好。,二、培養(yǎng)特性：大腸桿菌為兼性厭氧菌，在普通培養(yǎng)基上生長良好，最適生長溫度37，最適生長pH7.2-7.4,伊紅美藍培養(yǎng)基上產生黑色帶金屬閃光的菌落,電鏡下的大腸桿菌,3,注：產酸產氣；+：陽性；-：陰性；+/-：大多數菌株陽性/少數陰性；V：種間有不同反應。,三、生化特性：,普通營養(yǎng)瓊脂上生長24h后，形成圓形凸起、光滑、濕潤、半透明、灰白色、中等大小菌落。,微生物資源數據庫共享平臺菌株保藏編號NKCCMRNK7.C7037,大腸桿菌在麥康凱培養(yǎng)基上長成紅色菌落,概述,4,四、致病性：,五、微生物診斷：從可疑癥狀著手分析，再采集病變組織或者收集糞便或腸內容物，劃線接種于麥康凱或伊紅美藍瓊脂平板上，挑取可疑菌落同時接種于TSI瓊脂和普通瓊脂斜面，然后革蘭氏染色、鏡檢形態(tài)，淘汰不符合者，最后做生化試驗；也可用多重PCR法檢測細菌的特異性基因。,概述,5,E.coli基因組中還包含有許多插入序列，這些插入的片段都是由基因的水平轉移和基因重組而形成的。利用大腸桿菌基因組的這種特性對其進行改造，使其中的某些基因發(fā)生突變或缺失，從而給大腸桿菌帶來可以觀察到的變化，這種能觀察到的特征叫做大腸桿菌的表現型(Phenotype)，把引起這種變化的基因構成叫做大腸桿菌的基因型(Genotype)。具有不同基因型的菌株表現出不同的特性。,遺傳物質,6,遺傳物質,二、主要基因型：,7,遺傳物質,三、染色體：,8,基因突變及修復,9,大腸桿菌的SOS修復系統(tǒng)細胞損傷時，參與DNA修復的基因，包括切除修復基因（uvrA、uvrB、uvrC）、重組修復基因（recA）及其他基因（umuC、umuD）。OS修復主要通過增加切除修復酶和重組修復酶的含量，來增強對損傷DNA的修復。正常細胞中，LexA阻遏蛋白與lexA、recA、uvrA、uvrB、uvrC基因的操縱區(qū)結合，阻遏它們表達，只合成少量RecA蛋白和修復酶，修復零星的DNA損傷。大腸桿菌受到UV照射后，產生大量二聚體，出現大量單鏈DNA部位，與細胞內少量RecA蛋白結合，激活其蛋白酶功能，使LexA阻遏蛋白自我切割，并且促進DNA同源配對。,基因突變及修復,10,大腸桿菌甲基化介導的錯配修復系統(tǒng)特異性不強，基本能修復DNA雙鏈結構中任何輕微的損傷，包括錯配、移碼、堿基類似物的替代等。,基因突變及修復,大腸桿菌錯配修復機制模式,步驟：,11,基因轉移及重組,12,基因轉移及重組,局限性轉導：被轉導的DNA片段僅僅是靠近染色體溶源化位點的基因。噬菌體：只轉導gal和bio基因。攜帶gal基因的轉導噬菌體稱為dgal或dg，攜帶bio基因的轉導噬菌體稱為dbio或db。（d表示缺陷）80噬菌體：80整合部位靠近色氨酸基因（trp），可用80dt轉導噬菌體對基因trp進行轉導。,13,基因轉移及重組,注：Holliday模型，是第一個被廣泛接受的重組模型，它是通過要發(fā)生重組的2個DNA分子的2條單鏈在同一部位斷裂，斷裂的游離末