（優(yōu)質(zhì)課件）影響血細胞分析儀準確性的因素

影響血細胞分析儀準確性的因素探討 1 主要內(nèi)容 一 標本處理方法對結(jié)果的影響二 生理狀態(tài)及其它因素對實驗結(jié)果的影響 2 標本處理方法對結(jié)果的影響 1 采血部分血液分析一般要求用抗凝的靜脈血 盡可能不用末梢皮膚穿刺采血和動脈血 3 不同部位皮膚穿刺血的細胞成分及細胞與血漿的比例常不一致 與靜脈血的差別更大 從技術(shù)角度講 毛細血管采血量較少 全自動的血液分析儀需血量較大 不易采到足夠量 更不能在需要的時候進行重復(fù)檢查 因此除了少數(shù)不易取靜脈血如嬰兒 大面積燒傷的病人及某些需要經(jīng)常采血檢查的病例 如白血病 腫瘤放療或化療病人外 均應(yīng)采用靜脈血檢測 4 2 容器的選擇存放抗凝血的容器應(yīng)盡量采用密閉式的 以防止水分蒸發(fā)或環(huán)境污染等方面的影響 為了減少對血小板分析的影響 應(yīng)使用塑料試管 采血后應(yīng)立即混勻 如果采用玻璃制品應(yīng)首先對容器進行硅化處理 以防止血小板黏附 造成血小板計數(shù)的減少 5 目前在我們已經(jīng)普遍使用真空采血系統(tǒng) 這一系統(tǒng)使標本在采血和測試期間完全與外界隔離 避免空氣或異物污染血液 也防止發(fā)生溶血 提高檢測準確性 同時也防止采血及檢驗人員因直接接觸血液而受到感染的危險 6 3 抗凝劑國際血液標準化委員會 ISCH 推薦使用的抗凝劑是EDTA二鉀 含量規(guī)定為1 5 2 2mg ml血 此抗凝劑不影響白細胞計數(shù)及大小 對紅細胞形態(tài)影響也最小 并且可以抑制血小板的聚集 EDTA二鈉用于血常規(guī)檢查與EDTA二鉀抗凝血的結(jié)果相比無明顯變化 但其溶解度較低 抗凝速度慢 不適合末梢血的抗凝 7 需要注意的是EDTA二鉀可以使紅細胞體積輕度膨脹 采血后短時間內(nèi)MPV非常不穩(wěn)定 半小時后方趨于平穩(wěn) 枸櫞酸鹽類抗凝劑對MPV及其他凝血因子影響極小 可用于血小板的分析 8 4 稀釋標本在使用半自動血液分析儀時 血液需要經(jīng)過預(yù)稀釋以后方能檢驗 應(yīng)特別注意稀釋溶血現(xiàn)象 稀釋溶血是指血液經(jīng)高倍稀釋后 隨著放置時間的延長血細胞自行溶解的現(xiàn)象 所以血液稀釋后應(yīng)盡快測定 以避少數(shù)量的減低 9 5 溶血標本對分析結(jié)果的影響由于標本的處理不當 例如采血不順利 劇烈震蕩等 可以造成標本試管內(nèi)溶血 溶血嚴重的標本可以使紅細胞和血球壓積下降 血紅蛋白相對增加 導(dǎo)致MCH和MCHC增高 而平均紅細胞體積正常 這一結(jié)果可以使臨床醫(yī)生作用錯誤的判斷 造成不良后果 所以對于溶血的標本 應(yīng)重新采集標本后測定 10 6 存放時間對結(jié)果的影響抗凝全血在室溫的條件下進行儀器測定 紅細胞 白細胞和血小板各項指標可以穩(wěn)定24個小時 白細胞分類可穩(wěn)定6 8小時 血紅蛋白可穩(wěn)定數(shù)日 但如果在顯微鏡下進行白細胞分類 兩小時后粒細胞形態(tài)即有變化 所以如果需要做顯微鏡形態(tài)學檢查 應(yīng)及早推制血片 雖然4 條件可延長血液儲存期 但血小板不宜在低溫下儲存 會影響計數(shù)和體積 因此如不能及時檢測血液應(yīng)在室溫下保存 11 很多文獻報道EDTA鹽抗凝的靜脈血 在采血后的一小時內(nèi)檢測MPV不穩(wěn)定 血小板體積逐漸增高 可增大20 左右 一小時后趨向平穩(wěn) 在1 6小時內(nèi)變化小于3 這是由于血液與EDTA鹽抗凝劑混合后 血小板形狀由凹形變?yōu)榍蛐?體積增大的原因 所以為了結(jié)果的準確性 應(yīng)該在一小時后進行測定 12 用EDTA抗凝的末梢血也應(yīng)至少在15分鐘以后進行測定 因為在這段時間內(nèi)有些標本血小板暫時的聚集現(xiàn)象 使血小板計數(shù)假性減少 這不僅影響血小板其它指標的準確性 也造成白細胞計數(shù)有所增高 取血后立刻檢測 標本的血小板和白細胞體積分布直方圖也是異常的 放置一段時間后再測定就可得到分布正常的直方圖 13 7 溶血劑的用量及溶血時間全自動血液分析儀可以控制溶血劑的加入量及溶血劑作用時間 但在使用半自動血細胞計數(shù)儀進行血細胞計數(shù)時 需要在血液預(yù)稀釋后人工加入溶血劑 溶血以后再進行血細胞計數(shù)和分類計數(shù) 正確掌握溶血劑用量及溶血時間非常重要 如果加入量不足或加入后放置時間過短 可以造成溶血不完全 使未溶解的紅細胞計入白細胞中 造成白細胞假性增加 溶血不完全也可影響血紅蛋白的準確性 如果加入溶血劑量過多或放置時間太久白細胞明顯變形 使白細胞直方圖異常 白細胞分類計數(shù)結(jié)果不準確 甚至不能進行分類計數(shù) 14 生理狀態(tài)及其它因素對實驗結(jié)果的影響 1 生理狀態(tài)除很多病理情況下可引起血細胞計數(shù)的變化外 很多生理狀態(tài)也可以引起各項參數(shù)的變化 如妊娠的婦女和新生兒白細胞總數(shù)明顯增多 炎熱和寒冷常引起一過性白細胞總數(shù)增多 大量吸煙的人因血液一氧化碳增高其血紅蛋白含量可以明顯增加 每天不同時間白細胞總數(shù)也有一定差異 15 2 儀器的影響血液分析儀對環(huán)境要求較高 應(yīng)遠離放射 核磁 放療加速器等大型醫(yī)療設(shè)備科室 以防止電信號的干擾 如果實驗室的電壓不穩(wěn) 應(yīng)安裝穩(wěn)壓裝置 防止儀器產(chǎn)生大量的電噪音 干擾血小板計數(shù)結(jié)果 16 對于吸樣針 液體管道 計數(shù)池等應(yīng)定期用酶清洗劑或5 次氯酸鈉進行徹底清洗 防止蛋白堆積 如果計數(shù)小孔周圍有蛋白堆積 可影響細胞體積測定 造成MCV增高 如果血紅蛋白比色池污濁可影響血紅蛋白定量結(jié)果 17 3 試劑因素的影響目前國內(nèi)有一些廠家能生產(chǎn)具有白細胞分類功能的血液分析儀 國外廠商均要求使用與其配套的稀釋液和溶血劑 甚至對清洗劑也有一定的要求 增加試驗成本 但是如果隨意改用其它廠家的試劑或使用自己配制的試劑 雖然對紅細胞 白細胞和血小板的計數(shù)不會有明顯的影響 但是對白細胞分類計數(shù)和細胞體積的測定的影響會很大 有些還會影響血紅蛋白的測定 使得多項血細胞分析指標不準確 如MCV HCT HGB MCH MCHC RDW MPV PVT PDW血細胞分類及其異常警告的提示等 18 因為絕大多數(shù)血液分析儀采用電阻法進行細胞計數(shù)和體積測定 原理是基于細胞在測試系統(tǒng)中產(chǎn)生的脈沖大小與儀器設(shè)定的閥值比較而得出的數(shù)據(jù) 脈沖大小除與細胞體積有關(guān)外 還與溶血劑的種類 稀釋液