熒光定量PCR檢測乙肝病毒-DNA的臨床意義

定量PCR檢測乙肝病毒 DNA的臨床意義 金域醫(yī)學檢驗中心 一 流行病學 HBV感染呈世界性流行 但不同地區(qū)HBV感染的流行強度差異很大 據(jù)世界衛(wèi)生組織報道 全球約20億人曾感染過HBV 其中3 5億人為慢性HBV感染者 每年約有100萬人死于HBV感染所致的肝衰竭 肝硬化和原發(fā)性肝細胞癌 HCC 二 病原學 乙型肝炎病毒 HBV 屬嗜肝DNA病毒科 hepadnaviridae 基因組長約3 2kb 為部分雙鏈環(huán)狀DNA HBV含 個部分重疊的開放讀碼框 ORF 即前S S區(qū) 前C C區(qū) P區(qū)和X區(qū) 前S S區(qū)編碼大 前S1 前S2及S 中 前S2及S 小 S 3種包膜蛋白 前C C區(qū)編碼HBeAg及HBcAg P區(qū)編碼聚合酶 X區(qū)編碼X蛋白 HBV由于基因序列的不同又可以分為A H八種基因型 三乙型肝炎的發(fā)病機制 HBV是通過刺激宿主的免疫系統(tǒng)攻擊受感染肝細胞來間接地引起肝損傷 受HBV感染的肝細胞在其表面表達病毒蛋白質 成為CTL攻擊的目標 針對受染細胞的免疫反應引起炎癥和壞死 壞死 炎癥活動持續(xù)存在導致肝纖維化 四實驗室檢測方法 一傳統(tǒng)實驗室檢測方法1 血清學檢測 兩對半檢測 HBsAg 抗 HBs HBeAg 抗 HBe 抗 HBc2 肝功能檢測 ALT AST 二新型實驗室檢測方法1 乙肝病毒定量2 賴藥性基因檢測3 乙肝病毒基因分型 五為什么要做乙肝病毒DNA定量 1 傳統(tǒng)檢測乙肝的方法為 乙肝兩對半 和 肝功能 檢測范圍有限 不能測定乙肝病毒復制情況 傳染程度 2 乙肝病毒定量是直接檢測乙肝病毒的核心成分 乙肝病毒DNA 能夠直接了解病毒的載量 了解乙肝病毒復制情況 傳染程度 例如 1 小三陽的病情判斷2 HBsAg陽性或單一的抗 HBc陽性病情判斷3 二對半5項全部陰性病情判斷4 抗一HBs陽性病情判斷 六乙肝定量測定意義 1 定量方法使全程動態(tài)觀察病毒含量成為可能2 選擇治療時機3 估計治療反應5 治療后隨訪和檢測復發(fā)6 確定耐藥株及選擇合適的治療方案7 抗病毒藥物療效的評價和監(jiān)測8 抗病毒新藥的研制9 研究基因的表達情況 探討某些疾病的致病機理10 圍產期保健 七HBV DNA在什么水平需要治療 1 HBVDNA定量 乙肝病毒DNA定量 105拷貝 ml HBeAg陰性者為HBVDNA定量 104拷貝 ml 2 ALT 谷氨酸氨基轉移酶 2 ULN ULN正常值上限 如用干擾素治療 ALT應 10 ULN 血總膽紅素水平應 2 ULN 3 如ALT 2 ULN 但肝組織學顯示KnodellHAI 4 或 G2炎癥壞死 具有 1 并有 2 或 3 的患者應進行抗病毒治療 對達不到上述治療標準者 應監(jiān)測病情變化 如持續(xù)HBVDNA定量陽性 且ALT異常 也應考慮抗病毒治療 八治療方案 治療的總體目標慢性乙型肝炎治療的總體目標是 最大限度地長期抑制或消除HBV 減輕肝細胞炎癥壞死及肝纖維化 延緩和阻止疾病進展 減少和防止肝臟失代償 肝硬化 HCC及其并發(fā)癥的發(fā)生 從而改善生活質量和延長存活時間 慢性乙型肝炎治療主要包括抗病毒 免疫調節(jié) 抗炎保肝 抗纖維化和對癥治療 其中抗病毒治療是關鍵 只要有適應證 且條件允許 就應進行規(guī)范的抗病毒治療 九具體治療 1 抗病毒治療干擾素治療核苷 酸 類似物治療 拉米夫定等 免疫調節(jié)治療其他抗病毒藥物及中藥